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菌落总数检验原始记录(平板计数法)计算方法.若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内,计算两个平板菌落数的平均值,再将平均值乘以相应稀释倍数,作为每g(mL)样品中菌落总数结果.若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时,按式⑴计算zZCN=(勺+
0.14)式中N——样品中菌落数EC——平板(含适宜范围菌落数的平板)菌落数之和m一—第一稀释度(低稀释倍数)平板个数;n2一一第二稀释度(高稀释倍数)平板个数;d一—稀释因子(第一稀释度).若所有稀释度的平板上菌落数均大于300CFU则对稀释度最高的平板进行计数,其他平板可记录为多不可计结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算.若所有稀释度的平板菌落数均小于30CFU则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算.若所有稀释度(包括液体样品原液)平板均无菌落生长,则以小于1乘以最低稀释倍数计算.若所有稀释度的平板菌落数均不在30CFU-300CFU之间,其中一部分小于30CFU或大于300CFU时,则以最接近30CFU或300CFU的平均菌落数乘以稀释倍数计算计算过程方法报告.菌落总数小于100CFU时,按“四舍五入”原则修约以整数报告.菌落总数大于或等于100CFU时,第三位数字采用“四舍五入”原则修约后,采用两位有效数字,后面用0代替位数;也可用10的指数形式来表示,按“四舍五人”原则修约后,采用两位有效数字.若空白对照上有菌落生长,则此次检验结果无效.称重取样以CFU/g为单位报告,体积取样以CFU/mL为单位报告报告人报告日期复核人复核日期检验单位检验员检验日期至环境条件温度℃相对湿度%检验依据GB
4789.2-2022《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》样品名称产品批号仪器设备及耗材电子天平、洁净工作台、电热恒温培养箱、立式压力蒸汽灭菌器、水浴锅、移液器培养基及试剂平板计数琼脂培养基(PCA)ml配制日期生理盐水ml配制日期实验过程.样品稀释
1.2制备样品稀释液根据样品状态,无菌操作,称取25g/吸取25mL样品,加入到225mL无菌生理盐水中均质(或混匀),制成1:10样品匀液用1mL无菌吸管或微量移液器吸取110样品匀液1mL沿管壁缓慢注于盛有9mL稀释液的无菌试管中(注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面),在振荡器上振荡混匀,制成1100的样品匀液按上面步骤操作,制备10倍系列稀释样品匀液每递增稀释一次,换用1次1ml无菌吸管或吸头.接种PCA选择适宜1〜3稀释度的样品匀液(液体样品可包括原液),吸取1mL于无菌平皿内,每个稀释度接种两个平皿同时分别吸取1mL空白稀释液加入两个无菌平皿内作为空白对照及时用15mL〜20札冷却至46℃-50c的平板计数琼脂培养基倾注平皿,并转动平皿使其混合均匀同时再以只加平板计数琼脂培养基的平皿同步培养,作为PCA的空白对照待琼脂凝固.培养将以上PCA平板倒置于
36.0±1℃培养48±2h(-/_/时〜/_/时)并计数.菌落计数可用肉眼观察,必要时用放大镜或菌落计数器,记录稀释倍数和相应的菌落数量菌落计数以菌落形成单位(colonyformingunitCFU)表示选取菌落数在30CFU-300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数低于30CFU的平板记录具体菌落数,大于300CFU的可记录为多不可计其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无较大片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数;若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,可计算半个平板后乘以2代表一个平板菌落数当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时,则将每条单链作为一个菌落计数结果报告样口口序号各稀释度平板上的菌落数结果CFU/mLDCFU/g口第一稀释度第二稀释度第三稀释度样品1样品2样品3样品4样品5空白稀释液+PCAPCA空白(仅PCA)。
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