实验室14种常用消毒、灭菌的方法汇总

实验室14种常用消毒、灭菌的方法汇总目录.热力消毒灭菌

1.干热消毒灭菌

1.湿热消毒灭菌

2.电热培养箱

3.微波消毒

3.煮沸法

3.高压蒸汽灭菌法

4.手提式高压蒸汽灭菌器

4.卧式高压蒸汽灭菌器

5.预真空式高压蒸汽灭菌器

5.紫外线消毒

5.臭氧消毒

5.甲醛消毒

6.乳酸重蒸法消毒

6.热力消毒灭菌高温能使微生物的蛋白质和酶变性或凝固（结构改变导致功能丧失），新陈代谢受到障碍而死亡，从而达到消毒与灭菌的目的在消毒中，热可分为湿热与干热两大类提到高温灭菌，相信大家日常生活中都应该用过祖传的万能100度法，买个新的餐具啦，水杯啦，都会习惯性的拿开水烫一烫，意在消毒，这的确也是有一定科学依据的高温使微生物的蛋白质及酶发生凝固或变性而死亡，是应用最广泛且有效的灭菌方法下面我们说两种方法.干热消毒灭菌干热是指相对湿度在20%以下的高热干热消毒灭菌是由空气导热，传热效果较慢一般繁殖体在干热80〜100℃中经1小时可以杀死，芽胞需160〜170℃经2小时方可杀死第1页共6页干热适用于易被湿热损坏和在干燥条件下使用更方便的物品（如金属、玻璃、陶瓷及凡士林纱布条等）灭菌由于其对烤箱要严格要求（国内产的烘箱质量都有点悬），且大功率、高温下危险系数较大，一般不建议使用！燃烧法是一种简单、迅速、彻底的灭菌方法，因对物品的破坏性大，故应用范围有限烧灼法一些耐高温的器械（金属、搪瓷类），在急用或无条件用其他方法消毒时可采用此法将器械放在火焰上烧灼1〜2分钟若为搪瓷容器，可倒少量95%乙醇，慢慢转动容器，使乙醇分布均匀，点火燃烧至熄灭约1〜2分钟采集作细菌培养的标本时，在留取标本前后（即启盖后，闭盖前）都应将试管（瓶）口和盖子置于火焰上烧灼，来回旋转2〜3次燃烧时要注意安全，须远离易燃易爆物品，如氧气、汽油、乙酸等燃烧过程不得添加乙醇，以免引起火焰上窜而致灼伤或火灾锐利刀剪为保护刀锋，不宜用燃烧灭菌法焚烧某些特殊感染，如破伤风、气性坏疽、绿脓杆菌感染的敷料，以及其它已污染且无保留价值的物品，如污纸、垃圾等，应放入焚烧炉内焚烧，使之炭化.湿热消毒灭菌湿热消毒灭菌是由空气和水蒸气导热，传热快，穿透力强，湿热灭菌法比干热灭菌法所需温度低、时间短

（1）煮沸法将水煮沸至100℃保持5〜10分钟可杀灭繁殖体，保持1—3小时可杀灭芽胞在水中加入碳酸氢钠至1%〜2%浓度时，沸点可达105℃能增强杀菌作用，还可去污防锈在高原地区气压低、沸点低的情况下，要延长消毒时间（海拔每增高300m需延长消毒时间2分钟）此法适用于不怕潮湿耐高温的搪瓷、金属、玻璃、橡胶类物品煮沸前物品涮洗干净，打开轴节或盖子，将其全部浸入水中大小相同的碗、盆等均不能重叠，以确保物品各面与水接触锐利、细小、易损物品用纱第2页共6页布包裹，以免撞击或散落玻璃、搪瓷类放入冷水或温水中煮；金属、橡胶类则待水沸后放入消毒时间均从水沸后开始计时若中途再加入物品，则重新计时，消毒后及时取出物品，保持其无菌状态.电热培养箱利用培养箱的热空气消毒灭菌培养箱通电加热后的空气在一定空间不断对流，产生均一效应的热空气直接穿透物体一般繁殖体在干热80〜100℃中经1小时可以杀死，芽胞、病毒需160〜170c经2小时方可杀死热空气消毒灭菌法适用于玻璃器皿、瓷器以及明胶海棉、液体石腊、各种粉剂等灭菌后待箱内温度降至50〜40℃以下才能开启柜门，以防炸裂.微波消毒微波是一种高频电磁波，其杀菌的作用原理，一为热效应，所及之处产生分子内部剧烈运动，使物体里外湿度迅速升高；一为综合效应，诸如化学效应、电磁共振效应和场致力效应目前已广泛应用于食品、药品的消毒，用微波灭菌手术器械包、微生物实验室用品等亦有报告若物品先经1%过氧乙酸或

0.5%新洁尔灭湿化处理后，可起协同杀菌作用，照射2分钟，可使杀芽胞率由

98.81%增力口至!J

99.98%〜

99.99%微波对人体有一定危害性，其热效应可损伤睾丸、眼睛晶状体等，长时间照射还可致神经功能紊乱使用时可设置不透微波的金属屏障或戴特制防护眼A/r寸o.煮沸法将水煮沸至100℃保持5〜10分钟可杀灭繁殖体，保持1〜3小时可杀灭芽胞在水中加入碳酸氢钠至1%〜2%浓度时，沸点可达105C能增强杀菌作用，还可去污防锈在高原地区气压低、沸点低的情况下，要延长消毒时间（海拔每增高300m需延长消毒时间2分钟）此法适用于不怕潮湿耐高温的搪瓷、金属、玻璃、橡胶类物品煮沸前物品涮洗干净，打开轴节或盖子，将其全部浸入水中大小相同的碗、盆等均不能重叠，以确保物品各面与水接触锐利、细小、易损物品用纱第3页共6页布包裹，以免撞击或散落玻璃、搪瓷类放入冷水或温水中煮；金属、橡胶类则待水沸后放入消毒时间均从水沸后开始计时若中途再加入物品，则重新计时，消毒后及时取出物品，保持其无菌状态.高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌器装置严密，输入蒸汽不外逸，温度随蒸汽压力增高而升高，当压力增至103〜206kPa时，湿度可达

121.3-132C高压蒸汽灭菌法就是利用高压和高热释放的潜热进行灭菌，公众号“实验室ISO17025”提醒，此法为目前可靠而有效的灭菌方法适用于耐高温、高压，不怕潮湿的物品，如敷料、手术器械、药品、细菌培养基等潜热是指当lgl00℃的水蒸汽变成lglOOC水时，释放出

2255.2J的热量高压蒸汽灭菌的关键问题是为热的传导提供良好条件，而其中最重要的是使冷空气从灭菌器中顺利排出因为冷空气导热性差，阻碍蒸汽接触欲灭菌物品，并且还可减低蒸汽分压使之不能达到应有的温度.手提式高压蒸汽灭菌器为金属圆筒，分为二层，隔层内盛水，有盖，可以旋紧，加热后产生蒸汽锅外有压力表，当蒸汽压力升高时，温度也随之相应升高该灭菌器体积小，可自发蒸汽，便于携带操作方法如下在灭菌器中盛水3000ml；将拟灭菌的物品随同盛装的桶放入灭菌器内；将盖子上的排气软管插于铝桶内壁的的方管中；盖好盖子，拧紧元宝螺丝，勿使漏气；锅下加热，打开排气活门，放出冷空气（一般在水沸后排气10〜15分钟左右），关闭放气活门，使压力逐渐上升至103kPa温度达

121.3C维持20分钟后，排气至“0”时，慢慢打开盖子如果突然开盖，冷空气大量进入，蒸汽凝成水滴，使物品潮湿，且玻璃类易发生爆裂后再关闭放气开关，待夹层压力表达到灭菌所需压力时（约10分钟后），将蒸汽控制阀移至“消毒”位置，使蒸汽进入柜室，柜室内的冷空气及冷凝水可由柜室阻气器排出，待柜室的压力升到103〜137kPa温度达

121.3〜

126.2C时，转动压力调节阀，使压力与温度保持恒定维持30分钟后，将蒸汽控制阀移至第4页共6页“排气”位置，排气毕，将蒸汽控制阀移至“干燥”位置；物品干燥后，将蒸气控制阀移至“关闭”位置，待压力指针到“0”位置和热空气排尽后，才能打开柜门，取出物品；关紧进气阀.卧式高压蒸汽灭菌器其结构原理同手提式高压蒸汽灭菌器，因其体积大，一次可灭菌大量物品操作人员须经专业培训，合格后方能上岗.预真空式高压蒸汽灭菌器在通入蒸汽前有一预处理阶段，即柜室内抽负压至

2.6kPa（空气排除约98%）所以，预真空高压蒸汽灭菌器除有下排气式所具备的灭菌系统、蒸汽输送系统、控制系统、安全系统和仪表监测指示系统外，增加抽负压系统和空气过滤系统机器运转由电脑控制H.紫外线消毒在室温20C〜25℃时，220V30W紫外灯下方垂直位置

1.0m处的

253.7nm紫外线辐射强度应70W/cm2低于此值时应更换，提醒，适当数量的紫外灯，确保平均每立方米应不少于

1.5W紫外线消毒时，无菌室内应保持清洁干燥在无人条件下，可采取紫外线消毒，作用时间应30min室内湿度20%或40%、相对湿度大于60%时，应适当延长照射时间用紫外线消毒物品表面时，应使照射表面受到紫外线的直接照射，且应达到足够的照射剂量人员在关闭紫外灯至少30min后方可入内作业.臭氧消毒臭氧以氧原子的氧化作用破坏微生物膜的结构，以实现杀菌作用臭氧对细菌的灭活反应总是进行的很迅速，与其它杀菌剂不同的是臭氧能与细菌细胞壁脂类的双键反应，穿入菌体内部，作用于蛋白和脂多糖，改变细胞的通透性，从而导致细菌死亡臭氧还作用于细胞内的核物质，如核酸中的喋吟和喀咤破坏DNA臭氧首先作用于细胞膜，使膜构成成份受损伤，而导致新陈代第5页共6页谢出现障碍，臭氧继续渗透穿透膜，而破坏膜内脂蛋白和脂多糖，改变细胞的通透性，导致细胞凋亡封闭无菌室内，无人条件下，采用20mg/m3浓度的臭氧，作用时间应30mino消毒后室内臭氧浓度

0.2mg/n时方可入内作业.甲醛消毒按照甲醛（40%）lOmL/m

3.高镒酸钾5g/n计算用量不同情况下，用量有所不同，但比例为2K盛药容器要大、耐热、耐腐蚀一般用陶瓷或玻璃容器，因为高镒酸钾和甲醛都具有腐蚀性，且混合后反应剧烈，释放热量房间要密闭这样熏蒸效果才会好容器应尽量靠近门，以便操作人员迅速撤离；先将温水倒入容器内，后加入高锦酸钾，搅拌均匀；再加入甲醛；加入甲醛后人立即离开，密闭房间注意顺序是将甲醛倒入高镐酸钾溶液内消毒时间一般为20-30分钟消毒后要打开门窗通风换气这里说的甲醛就是40%的甲醛溶液，也就是福尔马林，一般包装上写的是37%O公众号“实验室IS017025”提醒，甲醛对人体危害太大了，一般不推荐这种方法可以考虑用40%乳酸熏蒸，效果很不错的.乳酸重蒸法消毒室内温度22℃湿度75%〜90%按

0.6g/n乳酸量共用

9.6g进行室内熏蒸，使蒸汽弥散全室，密闭门窗lh第6页共6页。