第2章 第2节 第1课时

第2节胚胎工程实验技术第1课时人工授精、胚胎体外培养和胚胎移植［目标导读］L结合教材P3-33图文，简述哺乳动物人工授精技术的主要步骤

2.通过教材P33第

3、4段内容，简述哺乳动物胚胎体外培养的方法

3.阅读教材P33〜35内容，说明胚胎移植前的准备

4.结合教材P36图2—16理解胚胎移植的实施和胚胎移植技术的应用［重难点击］L人工授精技术的主要步骤

2.哺乳动物胚胎体外培养的方法

3.胚胎移植的准备、实施及应用“超时空女婴〃1986年白血病患者克里斯在16岁时接受放疗前冷冻了局部自己的精子2019年，克里斯与妻子梅洛迪决定用22年前保存的冷冻精子接受试管受精手术2019年6月，医生从梅洛迪的卵巢中提取出15枚卵细胞最后共有7枚卵细胞受精发育成胚胎，医生将两枚胚胎植入到梅洛迪的子宫中2009年2月25日，梅洛迪在一家医院中顺利生下了

3.37千克重的女婴斯特拉美国医学专家称，冷藏了22年的精子依然能够孕育生命，创下了一项世界医学史纪录，斯特拉也被称作是“来自1986年的超时空女婴〃这个奇迹的诞生离不开体外授精及胚胎的早期培养等胚胎工程的实验技术，让我们一起来学习这些知识吧

一、人工授精和胚胎体外培养.精子的获取1采精方法胚胎工程中通常使用射出精子，有时也使用附睾精子常用人工采集的方式采集精液2精液的保存采集的精液，通常需要参加特殊的稀释液，并在低温下保存，如果需要长时间保存，那么须将精液保存在液氮一196°C环境中.卵细胞的获取1采集部位卵巢、输卵管、子宫内2

①超数排卵注射外源促性邀素垂体产生的促卵泡激素和促黄体生成激素，促使卵巢排出更多的成熟卵细胞向采卵技术a.手术采卵冲洗输卵管采卵，针对一些家兔、绵羊等中小型家畜b.非手术采卵从子宫冲卵，针对于牛这样的大型家畜.人工授精1体外授精

①精子获能取成熟的附睾精子，在Oh培养箱中培养，利用化学药物如咖啡因、肝素等使精子到达获能状态

②采集成熟的卵细胞，放入含有精子的卵细胞培养液中

③检查受精情况如果看到第二极体和雌雄原核形成，那么已经受精2显微授精又称辅助授精，将完整精子或精核用显微操作仪注入卵周隙或卵胞质，激活卵母细胞并完成受精作用优点是不受精子的数量、活力等因素的影响.胚胎的体外培养1概念应用人工创造的环境对获取的早期胚胎进行体外培养2培养液由于胚胎不同发育时期生理代谢的需求不同，进行胚胎体外培养时，必须配制一系列含有不同成分的培养液，培养不同发育时期的胚胎3开展现状由于哺乳动物胚胎发育条件异常复杂，胚胎培养比组织培养和细胞培养困难得多目前，只能对少数物种不同阶段的胚胎进行培养尚无从受精卵到新生儿的全体外胚胎培养技术以下图是某种家畜体外受精的示意图，请分析.要想获得较多的卵细胞，应对雌性动物作何处理？答案注射促性腺激素进行超数排卵处理.为什么采集到的卵母细胞要进行培养？答案采集到的卵母细胞发育时期可能不一样，需要培养到减数分裂n的中期，才能进行体外授精.受精前要对精子进行处理的目的是什么？答案利用化学药物使精子到达获能状态，获得受精的能力.怎样判断体外授精的卵细胞已经受精了？答案在卵细胞膜和透明带间观察到2个极体或者雌雄原核形成.如果要对获得的胚胎进行早期培养，能否只用一种培养液完成？答案不能要用不同成分的培养液培养不同发育阶段的胚胎.以下化学物质中可使精子获能的是A.氯化钙溶液B.肝脏提取液C.肝素溶液D.氨基酸营养液答案C解析一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液可诱导精子获能.以下图是通过体外授精培育小鼠的过程图，请据图答复以下问题⑴

①所用的方法是用处理，从中采集卵细胞2

②是过程，因此小鼠是生殖方式，其常见的可遗传变异类型有3

③过程是o答案1促性腺激素输卵管2受精有性基因突变、染色体变异、基因重组3早期胚胎体外培养【题后归纳】体外培养过程检查筛选一一获得可移植的早期胚胎或受精卵培养——受精卵移入发育培养液[人胚胎到达8〜16个细胞可移植阶段——I牛羊桑棋胚或囊胚早期胚胎移植或冷冻保存

二、胚胎移植技术.胚胎移植的概念从经济价值较高、遗传性状优秀的母畜体内获取经过激素处理超数排卵受精发育的胚胎，移植到同期发情的代孕母的子宫内，经过妊娠产仔的技术.胚胎移植前的准备]月不胎的采集

①来也;超数排卵技术、体外授精技术培育的胚胎「手术采集法I如马、牛等大型动物

③检查胚胎只有完整的胚胎才能移植或保存整个过程必须保持无菌条件，快速移植2供体、受体动物的准备

①供体动物的选择应从那些遗传性能优良而稳定的健康母畜中选择

②受体动物的选择选择那些生产性能较低、数量较多、健康无病、发情周期正常的适龄母畜作为移植受体

③同期发情处理抵方法除了对自然发情家畜进行选择外，还通常采用孕激素黄体酮使受体家畜发情同步b.目的让供应胚胎的母牛和接受胚胎的母牛的生殖器官处于相同的生理状态下，移植的胚胎才能存活c.注意不同的供体和受体动物使用超数排卵的激素和诱导发情的激素不同，处理的方法也不同⑶胚胎的保存

①概念在一定条件下使胚胎停止发直并保持重新恢复发育活性的一种方法

②方法短期保存，放在0/C〜5C的培养液中;长期保存，冷冻在液氮一196七中.胚胎移植的实施.手术法:中小型动物常用方法俳手术法:大家畜采用的方法输卵管:胚胎发育在8个细胞以内子宫角:胚胎发育多于8个细胞.胚胎移植技术的应用⑴充分发挥优良母畜的繁殖潜力，迅速扩大优良种群⑵保存品种资源，建立优良种质资源基因库⑶代替优良种畜的引进如图为胚胎移植过程示意图，请探究以下问题.图中A、B、C分别是哪种处理？其中A、B过程常用的激素是哪种？答案A同期发情处理，一般用孕激素；B超数排卵处理，一般用促性腺激素；C胚胎移植.为什么同种动物之间进行胚胎移植易于成功？答案这里的“同种〃是指“同一物种〃，同一物种的动物才有可能具有相同的生理特征.为什么应对供体和受体母畜进行同期发情处理？答案同期发情处理使供、受体生殖器官的生理变化相同，为胚胎提供相同的生理环境胚胎移植的后代具有供体和受体共同的遗传性状吗？答案不具有，后代的遗传性状是由供体决定的，受体只是提供了胚胎发育的场所，不影响后代的遗传特性.以下对于优良种畜的胚胎移植的说法，不正确的选项是（）A.供体母牛必须是同一物种的良种B.受体母牛必须是同一物种的良种C.供体公牛必须是同一物种的良种D.受体母牛可以是同一物种的一般健康牛答案B解析胚胎移植是胚胎工程的最后一道工序，提供精子和卵细胞的供体必须是同一物种的良种，而受体只要求同种的健康牛即可.进行动物胚胎移植时，必须要考虑的事项是（）A.供体动物与受体动物生理状态的一致性B.受体动物对供体胚胎的免疫排斥反响C.受体动物的子宫与供体胚胎建立组织上和生理上的联系D.早期胚胎能否从供体子宫内完整地别离出来答案A【知识拓展】

（1）胚胎移植的生理学根底⑵胚胎移植成功与否要有两个条件

①胚胎移植一般应在同种的雌性供体和受体之间进行

②进行胚胎移植的供体和受体的生理状态要相同供、受体母畜的发情时间要一致，移入受体子宫胚胎的位置应该与其在供体内的位置相同或相似「概念是指从经济价值较高、遗传性状优秀的母畜体内获取经过激素处理超数接见受精发育的胚胎植到同期发情的代孕母的子宫内经过妊娠产仔的技术「手术法适用于小鼠、兔、羊和猪等动物非手术法适用于牛、马等大型动物胚胎移植整个过程保持无菌操作供体、受体动物准备不同的供体和受体动物使用超数排卵的激素和诱导发情的激素不同处理的方法不同胚胎的保存液氮中长期保存培养液中0℃〜5〜下暂时保存胚胎移植的实施胚胎的移入位置有输卵管膨大局部和子宫角「一是充分发挥优良母畜的繁殖潜力迅速扩大优良种群二是保存品种资源建立优良种质资源基因库一三是代替优良种畜的引进L体外授精常用的采卵方式有（）

①用促性腺激素处理后，从输卵管冲取卵细胞

②化学诱导法

③电刺激法

④从活体动物卵巢中吸取卵母细胞A.

①②B.

②③C.

③④D.

①④答案D解析采用注射激素的方法，使母畜产生更多的卵细胞；利用超声波引导法，从母畜体内采集卵母细胞或直接从屠宰母畜的卵巢内获取卵母细胞

2.杜泊羊以其生长速度快、肉质好等优点，被称为“钻石级〃肉用绵羊科研工作者通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如以下图所示，相关表达不正确的选项是（）A.为了获得更多的卵母细胞，需用雌性激素对雌性杜泊羊进行处理B.卵母细胞除从活体输卵管中采集外，还可以从处死的雌羊卵巢中获取C.从输卵管中采集的卵母细胞可直接与获能的精子进行体外受精D.绝大多数精卵细胞的识别具有物种特异性答案A解析用促性腺激素促进雌性个体超数排卵，而不是雌性激素，故A错误；采集卵母细胞的方法

①用促性腺激素处理母畜，然后从输卵管中冲取卵子；

②从屠宰场已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞；

③直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞，故B正确；从输卵管中采集的卵母细胞，可直接与获能的精子在体外受精，故C正确；同种生物的精子和卵细胞一般可以互相识别，发生融合，故D正确.将雌性动物的早期胚胎或者通过体外授精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，以下说法不正确的选项是（）A.这里说的同“种〃是指同一“物种〃B.加拿大荷斯坦奶牛胚胎移植给我国黄牛，生出荷斯坦奶牛，证明移植成功C.同种动物之间的生理特征相近，进行胚胎移植易于成功D.不管是否妊娠，同种动物生殖器官的生理变化都是一样的答案D解析雌性哺乳动物发情排卵后，不管是否妊娠，在一段时间内，同种动物生殖器官的生理变化是一样的.不同动物胚胎移植的时间不同，但一般不会在以下哪个时期移植（）A.卵裂期B.桑棋胚期C.囊胚期D.原肠胚期答案D解析一般来说胚胎分化程度越低，越有利于移植，按照哺乳动物胚胎发育的顺序受精卵一卵裂一桑棋胚一囊胚一原肠胚在原肠胚期细胞出现了三胚层的分化，故不宜在此时期移植.培育“试管山羊〃的根本过程如下图据图答复以下问题

（1）甲过程为，其过程中可通过给母山羊注射使其超数排卵

（2）乙过程的目的之一是处理

（3）乙过程与丙过程中采用的培养液成分不同，乙过程的培养液为或专用的受精溶液，丙过程的培养液为o丁过费是，是指将早期胚胎移植到同种的、生理状态相同的代孕母羊子宫内答案⑴卵母细曲而采集促性腺激素

（2）对精子进行获能⑶获能溶液发育培养液⑷胚胎移植解析分析图示可知，甲过程为卵母细胞的采集，一般用促性腺激素处理良种母山羊，使其超数排卵乙过程为精子获能以及受精，获能的精子和成熟的卵细胞在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精丙过程为早期胚胎培养，在发育培养液中进行丁过程为胚胎移植，是指将早期胚胎移植到同种的、生理状态相同（而不是性状相同）的其他雌性动物子宫内使之继续发育为新个体［根底过关］.从卵巢中直接采集的卵母细胞都要在体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精以下表达正确的选项是（）A.从卵巢中采集的卵母细胞是动物正常排卵过程收集的卵母细胞B.体外培养至减数第二次分裂中期，才算成熟C.体外培养过程需在含促性腺激素的培养液中进行D.经促性腺激素处理，从输卵管中冲取的卵子也要在体外人工培养才能与获能的精子受精答案B解析从卵巢中采集的卵母细胞是动物的非正常排卵过程的卵母细胞，这些卵母细胞还未从卵泡中排出；体外培养不需加促性腺激素，促性腺激素的靶器官是性腺，不能直接作用于卵母细胞；经促性腺激素处理，从输卵管中冲取的卵子可直接与获能的精子受精.以下关于体外授精技术的说法中，错误的选项是（）A.进行体外授精技术前需对精子进行获能处理B.体外授精是从初级卵母细胞和初级精母细胞开始的C.体外授精技术已成为一项常规的动物繁殖生物技术D.体外授精技术可用于研究动物生殖细胞的发生机制答案B.以下关于胚胎早期培养的说法，不正确的选项是（）A.精子和卵细胞可以在精子获能液中完成体外授精B.受精卵可以在受精溶液中进行早期胚胎发育C.精子和卵细胞在专用受精溶液中受精D.受精后受精卵应移入发育培养液中培养答案B解析精子和卵细胞一般情况下可以在精子获能液或专用受精溶液中完成受精而受精后那么需要将受精卵移入发育培养液中继续培养.以下有关动物胚胎移植的表达中，不正确的选项是（）A.从受孕母畜体内取出的受精卵或胚胎均能移植B.供体母畜的职能是产生具有优良遗传特性的胚胎C.超数排卵技术要使用一定的激素D.受体对移入子宫的外来胚胎根本上不发生免疫排斥反响，是胚胎移植能够成功的原因之一答案A解析胚胎移植的操作对象是早期胚胎而不是受精卵.以下关于胚胎移植优点的表达，错误的选项是（）A.优良种畜群迅速扩大，加速育种工作和品种改进.克服了时间与地域的限制，大量节省购置种畜的费用C.一次给受体移入多个胚胎，可增加双胎和多胎的比例D.建立常温胚胎库，保存品种资源和濒危物种答案D解析胚胎库必须进行冷冻保存，常温下无法长期保存胚胎

6.胚胎移植技术目前主要应用于（）A.培育试管婴儿B.治疗某些遗传病C.提高良种家畜的繁殖力D.提高动物的抗病力答案C解析胚胎移植的意义就是充分发挥了优良母畜的繁殖潜力，另外还有保存品种资源等［能力提升］.以下有关体外授精和早期胚胎培养的说法，错误的选项是（）A.在体外授精前，要对精子进行获能处理.获能精子与减数分裂H期卵母细胞体外授精C.精子和卵细胞一般要放在培养液内共同培养一段时间才能完成受精作用D.超数排卵处理的做法是给供体注射雌激素答案D解析超数排卵处理的做法是给供体注射促性腺激素，使一头母畜一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵细胞，用于体外授精和早期胚胎培养

8.良种试管牛的繁殖过程是:用激素促进甲牛多排卵，然后让卵细胞在体外与人工采集的乙牛的精子进行受精，在特定培养基上培育成胚胎，再把胚胎送入经过激素处理的丙牛的子宫内，孕育成试管牛以下相关表达错误的选项是（）A.精卵结合前都需进行培养B.“促进甲牛多排卵〃的激素是孕激素C.甲牛、乙牛对试管牛核基因的奉献相同D.该技术可应用于加快优良种畜的繁殖答案B解析对于大型动物采集的是卵母细胞，都需经体外人工培养成熟后，才具备受精能力，精子也需要进行培养使其获能；促进动物多排卵的激素是促性腺激素；试管牛的核遗传物质一半来自甲牛的卵细胞，一半来自乙牛的精子；该技术可充分发挥母畜的优良特性，可用于加快优良种畜的繁殖

9.以下图表示通过体外受精培育试管牛的过程，以下表达错误的选项是（）A.获取的精子经获能后才能进行体外授精B.

②过程只与细胞膜的流动性有关C.

③过程的细胞增殖方式一定是有丝分裂D.

④过程属于胚胎移植过程答案B解析获取的精子必须要经过获能后才能进行体外授精A正确；

②表示受精作用，精子释放顶体酶后，穿越放射冠和透明带，精子入卵后，形成雌雄原核，最后雌雄原核融合形成合子核，因此受精过程不仅仅与细胞膜的流动性有关，B错误；

③表示受精卵的卵裂，其方式为有丝分裂，C正确；

④表示将发育成的早期胚胎移植入母体D正确

10.软骨发育不全为常染色体显性遗传病，基因型为HH的个体早期死亡一对夫妻均为该病患者，希望通过胚胎工程技术辅助生育一个健康的孩子以下做法错误的选项是（）A.首先经超数排卵处理后进行体外授精B.从囊胚中别离细胞，培养后检测基因型C.根据检测结果筛选基因型为hh的胚胎D.将胚胎培养至原肠胚期后移植到子宫答案D解析胚胎移植的时期是桑棋胚或囊胚，D错误.以下图为牛胚胎移植示意图，请据图答复以下问题

（1）牛胚胎移植过程中，

①通常是采用进行同期发情处理，然后

②用激素使供体母牛超数排卵

（2）

③质量检查、培养时，胚胎应发育到或阶段⑶

④胚胎移植过程一般有而两祎方/⑷

⑤过程产生的犊牛的遗传物质与

⑥的遗传物质是否相同？，为什么？⑸进行胚胎移植的优势是

（6）冲胚的生理根底是答案

（1）孕激素促性腺

（2）桑棋胚囊胚

（3）手术法非手术法

（4）不相同°因为犊牛的遗传物质来源于供体母牛和公牛，且供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受受体母牛的影响

（5）充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力

（6）早期胚胎形成后，处于游离状态，未与母体子宫建立组织上的联系.牛胚胎移植的根本程序如下图，请据图答复以下问题

（1）图中a、b、c过程分别是指、、o

（2）供体母牛的主要职能是;受体母牛必须具备o

（3）对牛来讲，一酸诿整就的早朝后语更行就超移转答案

（1）超数排卵冲胚胚胎移植

（2）只产生具有优良遗传特性的胚胎健康的体质和正常的繁殖能力

（3）桑棋胚或囊胚解析过灌是良种母畜在相关激素刺激下的超数排卵b是用人工方法冲胚的过程c是将符合移植要求的早期胚胎移植到受体母畜子宫内的过程

（2）供体母牛的主要职能是提供具有优良遗传特性的胚胎，受体母牛那么是提供胚胎发育场所，所以受体母牛应具有健康的体质和正常的繁殖能力

（3）一般选择桑棋胚或囊胚期的早期胚胎进行胚胎移植.“试管婴儿〃技术是将不孕夫妇的精子和卵细胞取出，在试管中完成受精作用，并在试管中培养使其发育到如下图的时期，再将胚胎移入女性子宫内发育成胎儿它不仅使一局部不能生育的男女重新获得了生育的时机，也为人类的优生开辟了新的途径请据此答复以下问题“试管婴儿〃技术在生物学上所依据的原理是（）A.有性生殖B.组织培养C.克隆技术D.基因工程

（2）上图所示时期是胚胎发育的期

（3）“试管婴儿〃的形成用到以下端些技术？o（填序号）

①体外培养

②人工授精

③胚胎移植

④核移植答案

（1）A

（2）囊胚

（3）

①②③［真题体验］

14.（2019•江苏，11）印度沙漠猫是一种珍稀猫科动物，通过胚胎工程技术，可以让家猫代孕而繁育，主要步骤如下图以下相关表达正确的选项是（）A.步骤甲、乙分别是指精子获能、胚胎分割B.诱导超数排卵所注射的激素只能作用于特定细胞C.受精卵发育成早期胚胎所需营养主要来源于培养液D.步骤甲使用的培养液和早期胚胎培养液成分根本相同答案B解析步骤甲、乙分别指体外授精、胚胎移植A错误；诱导超数排卵所注射的激素是促性腺激素，只能作用于性腺，B正确；受精卵发育成早期胚胎所需营养主要来自卵细胞，C错误；受精过程使用的培养液是获能溶液或专用的受精溶液，与早期胚胎培养液不同，D错误胚胎移入的根底哺乳动物发情排卵后，同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的胚胎收集的根底哺乳动物的早期胚胎形成后，在一定时间内不会与母体子宫建立组织上的联系，而是处于游离状态移入胚胎存活的根底受体对移入子宫的外来胚胎根本上不发生免疫排斥反响保存遗传特性的根底供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响。