还剩26页未读，继续阅读
本资源只提供10页预览，全部文档请下载后查看！喜欢就下载吧，查找使用更方便
文本内容:
-.实验室常用溶液配制doc丁香通我的实验室采购专家几种溶液的配制方法PBS:取ZLI-9061PBS溶于1000ml的蒸储水中，混匀，测pH值应在
7.2〜
7.4之间，若偏离此范围，请用
0.1N的HCL或者NaOH调整TBS Tris缓冲液配方:
0.5MpH
7.6Tris三羟甲基氨基甲烷
60.57gINHCL约420ml双蒸水加至1000mlTris缓冲液配制方法先以少量双蒸水300〜500ml溶解Tris加入HC1后，用HC11N或者NaOHIN将pH调至
7.6最后双蒸水加至1000mlo此液为储备液，4℃冰箱中储存TBS配方Tris-HCI缓冲液
0.5MpH
7.6100mlNaCI
8.5-9g
0.15mol/L双蒸水加至1000mlTBS配制方法先以少量双蒸水溶解NaCI再加入Tris-HCI缓冲液，最后加双蒸水至1000ml充分摇匀
3、枸椽酸盐缓冲液Citratebuffer1储存液A.
0.1M枸椽酸溶液称取
21.01g枸椽酸C6H8O7F2O溶于1000ml蒸储水中B.
0.1M枸檬酸钠溶液称取
29.41g枸檬酸钠aH5Na3O7-2H2溶于1000ml蒸储水中
3.2工作液取9mlA液与41mlB液加入450ml蒸镭水中，溶液pH值应为
6.0±
0.
14、胰酶Trypsin1ZLI-9011胰蛋白酶消化液:常用浓度为
0.125%即使用前将一滴试剂1胰酶溶液与三滴试剂2胰酶稀释液均匀混合1:3稀释，则可直接滴加使用胰酶的最终浓度能够根据使用者的要求进行调整，浓度范围能够从
0.05%1:10稀释至
0.25%1:1稀释
4.2ZLI-9010胰蛋白酶:取
0.05g或者
0.1g胰蛋白酶加入到100ml
0.05%或者
0.1%pH
7.8的无水氯化钙水溶液中，溶解即可
5、胃酶Pepsin4%胃蛋白酹，用O.lmol/LHCL配制我公司备有ZLI-9013胃蛋白酶消化工作液，不需稀释直接滴加使用，欢迎选购DAB1ZLI-9032/9033DABKit使用前只需将试剂盒提供的A、B、C三种试剂各一滴加至1ml双蒸水中，即可获得1mlDAB工作液，简单易用1ZLI-9030DAB6mgDAB溶于lOmlTBS
0.05MpH
7.6再加入
0.1ml浓度为3%的H2O2，过滤掉沉淀物，即可AEC4mgAEC溶于1ml二甲基甲酰胺中，加入14ml浓度为
0.1M的醋酸缓冲液pH
5.2然后加入
0.15ml3%%2某一特定pH值的O05mol/LTris缓冲液的配制:将50nli
0.Imol/LTris碱溶液与上表所示相应体积单位:ml的
0.Iml/LHC1混合加水将体积调至100ml2温度对50mmol/LTris・HC1液pH值的影响
（6）常用缓冲液的pKa值a三羟甲基氨基甲烷；b N-2-羟乙基哌嗪-N-2-乙磷酸；c3-（2吗咻代）丙磺酸；d NN-双（2-乙磺酸）哌嗪e2-（N-吗咻代）乙磺酸
7.温度对常用缓冲液pH的影响
三、常用酶的配制
1.溶菌酶用水配制成50mg/ml的溶菌酶溶液，分装成小份并储存于-20C每一小份一经使用后便予丢弃
2.蛋白水解酶类a链霉蛋白酶是从链球菌Streptomycesgriseus中分离到的〜种丝氨酸酶与酸性蛋白酶的混合物b自消化可消除DW酶与RNA酶的污染，经自消化的链酶蛋白酚的配制方法如下把该酶的粉末溶解于10mmol./LTris-HClpH
7.510mmol/LNaCl中，配成20mg/ml浓度于37c温育lh经消化的链霉蛋白酶分装成小份放在密封试管中，储存-20℃c蛋白陋K是一种枯草蛋白陋类的高活性蛋白陋，从林伯氏白色念球菌TritirachiumalbumLimber中纯化得至该酶有两个Ca2+结合位点，它们离酶的活性中心有一定距离，与催化机理并无直接关系然而，假如从该酶中除去Ca2+由于出现远程的结构变化，催化活性将丧失80%左右，但其剩余活性通常已足以降解在通常情况下污染酸制品的蛋白质因此，蛋白酶K消化过程中通常加入EDTA以抑制依靠于Mg2+的核酸酶的作用但是，假如要消化对蛋白酶K具有较强耐性的蛋白，如角蛋白一类，则可能需要使用含有lmmol/LCa2+而不含EDTA的缓冲液在消化完毕后、纯化核酸前要加入EGTpH
8.0至终浓度为2mmol/L以鳌合Ca2+
3.无DNA酶的RNA酶将胰RNA酶（RNA酶A）溶于10mniol/LTris•HC1（pH
7.5）、15nimol/LNaCl中，配成lOmg/ml的浓度于100C加热15min缓慢冷却至室温，分装成小份储存于-20℃
四、常用抗生素溶液a以水为溶剂的抗生素贮存液通过
0.22um滤器过滤除菌以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理所有抗生素溶液均应放于不透光的容器储存b镁离子是四环素的拮抗剂，四环素抗性菌的筛选应使用不含镁盐的培养基（如LB培养基）
五、常用贮存液的配制30%丙烯酰胺溶液【配制方法】将29g丙烯酰胺与1gNN-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中加热至37c溶解之，补加水至终体积为100mL用Nalgene滤器（
0.45um孔径）过滤除菌，查证该溶液的pH值应不大于
7.0置棕色瓶中储存于室温【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并能够通过皮肤汲取，其作用具累积性称量丙烯酰胺与亚甲双丙烯酰胺时应戴手套与面具可认为聚丙烯酰胺无毒，但也应慎重操作，由于它还可能会含有少量未聚合材料一些价格较低的丙烯酰胺与双丙烯酰胺通常含有一些金属离子，在丙烯酰胺贮存液中加入大约
0.2体枳的单床混合树脂（MB-1Mallinckrodt）搅拌过夜，然后用Whatman1号滤纸过滤以纯化之在贮存期间，丙烯酰胺与双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰与双丙烯酸40%丙烯酰胺把380g丙烯酰胺DNA测序级与20gNN-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml的蒸馄水中继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理，但加热溶解后应以蒸储水补足至终体积为ILo【注意】见上述配制30%丙烯酰胺的说明，40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定放线菌素D溶液【配制方法】把20mg放线菌素D溶解于4mli00%乙醇中，110稀释贮存液，用100%乙醇作空白参照读取OD44O值放线菌素D分子量为1255纯品在水溶液中的摩尔消化系数为21900故而lmg/ml的放线菌素D溶液在440rmi处的吸光值为
0.182放线菌素D的贮存液应放在包有箔片的试管中，储存于-20℃【注意】放线菌素D是致畸剂与致癌剂，配制该溶液时务必戴手套并在通风橱内操作，而不能在开放在实验桌面上进行，防备吸入药粉或者让其接触到眼睛或者皮肤药厂提供的作治疗用途的放线菌素D制品常含有糖或者盐等添加剂只要通过测量贮存液在440nm波长处的光汲取确定放线菌素D的浓度，这类制品便可用于抑制自身引导作用
0.lmol/L腺昔三磷酸ATP溶液【配制方法】在
0.8ml水中溶解60mgATP用
0.Imol/LNaOll调至pH值至
7.0用蒸储水定容1ml分装成小份储存于-70℃10mol/L乙酸酰溶液【配制方法】把770g乙酸酰溶解于800ml水中，加水定容至1L后过滤除菌10%过硫酸钱溶液【配制方法】把1g过硫酸钱溶解于终量为10ml的水溶液中，该溶液可在4℃储存数周BCIP溶液【配制方法】把
0.5g的5-汶-4-氯-3-口引味磷酸二钠盐BC1P溶解于10ml100$的二甲基甲酰胺中，储存于4c2XBES缓冲盐溶液用总体积90nli的蒸馈水溶解
1.07g盐溶液BES[NN-双2-羟乙基-2-氨基乙磺酸]、
1.6gNaCl与
0.027gNa2HP04室温下用HC1调节该溶液的pH值至
6.
96、然后加入蒸储水定容至100ml用
0.22um滤器过滤除菌，分装成小份，储存于-20℃Imol/LCaC12溶液【配制方法】在200ml蒸福水中溶解54gCaC12-6H20用
0.22um滤器过滤除菌，分装成10ml小份贮存于-20℃【注意】制备感受态细胞时，取出一小份解冻并用蒸馄水稀释至100ml用Nalgene滤器
0.45Um孔径过漉除菌，然后骤冷至0℃
2.5mol/LCaC12溶液【配制方法】在20ml蒸储水中溶解
13.5gCaC12-6H20用
0.22Pm滤器过滤除菌，分装成1ml小份贮存于-20℃Imol/L二硫苏糖醇DTT溶液【配制方法】用20ml
0.01mol/L乙酸钠溶液pH
5.2溶解
3.09gDTT过滤除菌后分装成1ml小份贮存于-20℃【注意】DTT或者含有DTT的溶液不能进行高压处理脱氧核聚三磷酸dNTP溶液【配制方法】把每一种dNTP溶解于水至浓度各为100mmol/L左右，用微量移液器吸取
0.05mol/LTris碱分别调节每一dNTP溶液的pH值
7.0用pH试纸检测，把中与后的每种dNTP溶液各取一份作适当稀释，在卜表中给出的波长卜读取光密度计算出每种dNTP的实际浓度，然后用水稀释成终浓度为50mmol/L的dNTP分装成小份贮存于-70℃比色杯光径为1cm时吸光度=£M
0.5mol/LEDTApH
8.0溶液【配制方法】在800ml水中加入
186.1g二水乙二胺四乙酸二钠EDTA-Na-2H20在磁力搅拌器上剧烈搅拌，用NaOH调节溶液的pH值至
8.0约需20gNaOH颗粒然后定容至1L分装后高压灭菌备用【注意】EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的pH值调至接近
8.0才能完全溶解澳化乙锭10mg/ml溶液【配制方法】在100ml水中加入1g溟化乙锭，磁力搅拌数小时以确保其完全溶解，然后用铝箔包裹容器或者转移至棕色瓶中，储存于室温【注意】小心溪化乙锭是强诱变剂并有中度毒性，使用含有这种染料的溶液时务必戴上手套，称量染料时要戴面罩2XHEPES缓冲盐溶液【配制方法】用总量为90rnl的蒸储水溶解
1.6gNaCk
0.074gKCk
0.027gNa2P04・2H
2、
0.2g葡聚糖与IgHEPES用
0.5mol/LNaOH调节pH值至
7.05再用蒸储水定容至100ml用
0.22um滤器过滤除菌，分装成5ml小份，贮存于-20℃IPTG溶液【配制方法】IPTG为异丙基硫代-B-D-半乳糖甘分子量为
238.3在8nli蒸储水中溶解2gIPTG后，用蒸储水定容至10ml川
0.22um滤器过滤除菌，分装成1ml小份贮存于-20℃Imol/L乙酸镁溶液【配制方法】在800ml水中溶解
214.46g四水乙酸镁，用水定容至1L过滤除菌Imol/LMgC12溶液【配制方法】在800ml水中溶解
203.4gMgC12-6H20用水定容至1L分装成小份并高压灭菌备用【注意】MgC12极易潮解，应选购小瓶如100g试剂，启用新瓶后勿长期存放B-臻基乙醇BME溶液【配制方法】通常得到的是
14.4mol/L溶液，应装在棕色瓶中储存于【注意】BME或者含有BME的溶液不能高压处理NBT溶液【配制方法】把
0.5g氯化氮蓝四嘎溶解于10nli70%的二甲基甲酰胺中，储存于4℃酚/氯仿溶液【配制方法】把酚与氯仿等体积混合后用
0.Imol/LTris-HC1pH
7.6抽提几次以平衡这一混合物，置棕色玻璃瓶中，上面覆盖等体积的
0.01mol/LTris-HC1pH
7.6液层，储存于4℃o【注意】酚腐蚀性很强，并可引起严重灼伤，操作时应戴手套及防护镜，穿防护服所有操作均应在化学通风橱中进行与酚接触过的部位皮肤应用大量的水清洗，并用肥皂与水洗涤，忌用乙醇10mmol/L苯甲基磺酰氟PMSF溶液【配制方法】用异丙醇溶解PMSF成l.74nig/mllmmol/L分装成小份贮存于-20℃如有必要可配成浓度高达
17.4mg/ml的贮存液100mmol/L【注意】PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤，吸入、吞进或者通过皮肤汲取后有致命危险一旦眼睛或者皮肤接触了PMSF应立即用大量水冲洗之凡被PYSF污染的衣物应予丢弃PMSF在水溶液中不稳固应在使用前从贮存液中现用现加于裂解缓冲液中PMSF在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快，且25c的失活速率高于4℃pH值为0时20ummol/LPUSF水溶液的半寿期大约为85min这说明将PMSF溶液调节为碱性pH
8.6并在室温放置数小时后，可安全地予以丢弃磷酸盐缓冲溶液PBS溶液在800ml蒸储水中溶解8gNaCK
0.2gKCK
1.44gNa2HP04与
0.24gKH2P04用HC1调节溶液的pH值至
7.4加水定容至IL在151bf/in2（1034X105Pa）高压下蒸气灭菌20min储存于室温Imol/L乙酸钾（pH
7.5）溶液【配制方法】将
9.82g乙酸钾溶解于90ml纯水中，用2mol/L乙酸调节pH值至
7.5后加入纯水定容到1L储存于-20℃乙酸钾溶液（用于碱裂解）【配制方法】在60ml5moi/L乙酸钾溶液中加入
11.5ml冰乙酸与
28.5ml水即成钾浓度为3moi/L而乙酸根浓度为5mol/L的溶液3moi/L乙酸钠（pH
5.2与pH乙0）溶液【配制方法】在80ml水中溶解
408.1g三水乙酸钠，用冰乙酸调节阴值至
5.2或者用稀乙酸调节pll值至
7.0加水定容到1L分装后高压灭菌5mol/LNaCl溶液【配制方法】在800ml水中溶解
292.2gNaCl加水定容至1L分装后高压灭菌10%十二烷基硫酸钠（SDS）溶液【配制方法】在900ml水中溶解100g电泳级SDS加热至68c助溶加入几滴浓盐酸调节溶液的川值至
7.2加水定容至1L分装备用【注意】SDS的微细晶粒易扩散，因此称量时要戴面罩，称量完毕后要清除残留在称最工作区与天平上的SDS10%SDS溶液无须灭菌20XSSC溶液【配制方法】在800ml水中溶解
175.3gNaCl与
88.2g柠檬酸钠，加入数滴10mol/LNaOH溶液调节pH值至
7.0加水定容至1L分装后高压灭菌20XSSPE溶液在800ml水中溶解
17.5gNaCk
27.6gNaH2P04・H20与
7.4gEDTA用NaOH溶液调节pH值至
7.4约需
6.5mllOml/LNaOH加水定容至IL分装后高压灭菌100%三氯乙酸溶液【配制方法】在装有500gTCA的瓶中加入227ml水，形成的溶液含有100%M/VTCAImol/LTris溶液【配制方法】在800ml水中溶解
121.91gTris碱加入浓HC1调节pH值至所需值pHHC170ml60ml42ml应使溶液冷至室温后方可最后调定pH值，加水定容至1L分装后高压灭菌【注意】如Imol/L溶液呈现黄色，应予丢弃并置备质豉更好的Tris尽管多种类型的电极均不能准确测量Tris溶液的pH值，但仍可向大多数厂商购得合适的电极Tris溶液的pH值因温度而异，温度每升高1℃pH值大约降低
0.03个单位比如
0.05mol/L的溶液在5℃、25℃、与37℃时的pH值分别为
9.
5、
8.9与
8.6Tris缓冲盐溶液TBS25mmol/LTris【配制方法】在800ml蒸储水中溶解8gNaCK
0.2gKC1与3gTris碱，加入
0.015g酚并用HC1调至pH值至
7.4用蒸储水定容至1L分装后在151bf/in2L034X105Pa高压下蒸汽灭菌20min于室温储存X-gal溶液【配制方法】X-gal为5-溟-4-氯-3-吧咪-B-D半乳糖苜用二基甲酰胺溶解X-gal配制成的20mg/ml的贮存液储存于一玻璃管或者聚丙烯管中，装有X-gal溶液的试管须用铝箔封裹以防因受光照而被破坏，并应贮存于-20℃X-gal溶液无须过滤除菌杂交试验中用于降低背景的封闭剂过滤掉沉淀物RIPA1XPBS1%NP4O
0.5sodiumdeoxycholate
0.1%SDS（此液体可长期储存）下列抑制剂以储存液方式储存，临用前加入RIPA中10mg/mlPMSF异丙醇溶液（用量为lOgl/ml）Aprotinin（Sigma产品用量为30Wml）1OOOmMsodiumorthovanadate冷冻液（用量为lOgl/ml）BlottoA常规使用1XPBS5%milk
0.05%Tween20oBlottoB与Phosphotyrosine抗体共用，1XPBS1%milk
0.05%Tween20o部分实验中milk可完全去除，但可能引起背景增高实验室常用贮存液的配制参数•、核酸及蛋白质常用数据
2.常用核酸的长度与分子量
六、常用凝胶的技术参数
1.葡聚糖凝胶的某些技术数据
2.聚丙烯酰胺凝胶的技术数据
3.琼脂糖凝胶的技术数据
4.各处凝胶所同意的最大操作压
5.琼脂糖凝胶浓度与线性DNA分辨范围
6.染料在变性聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速度
7.染料在非变性聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速度
七、氨基酸的特性
八、遗传密码密码子的第二位
九、常用酸碱技术参数
1.常见的市售酸碱的浓度
2.各类浓度的酸碱贮存液的近似pH值Ja.N为光量浓度［INgImol/LX离子价数量
3.常用核酸蛋白换算数据
（1）重量换算1ug=10-6glpg=10-12glng=10-9glfg=10-15g
（2）分光光度换算1A260双链DNA=50Hg/ml1A260单链DNA=30ug/ml1A260单链RNA=40ug/ml
（3）DNA摩尔换算1uglOObpDNA=
1.52pmol=
3.03pmol末端1ugpBR322DNA=O.36pmolIpmollOOObpDNA=O.66ugIpmolpBR322=
2.8PgIkb双链DNA（钠盐）=
6.6X105道尔顿Ikb单链D”（钠盐）=
3.3X105道尔顿Ikb单链RNA（钠盐）=
3.4X105道尔顿
（4）蛋白摩尔换算lOOpmol分子量100000蛋白质=10Ug1OOpmo1分子量50000蛋白质=5UglOOpmol分子量10000蛋白质二lug氨基酸的平均分子量=
126.7道尔顿
（5）蛋白质/DNA换算:IkbDNA=333个氨基酸编码容量=
3.7义104MW蛋白质10000MW蛋白质=270bpDNA30000MW蛋白质=810bpDNA50OOOMW蛋白质=L35kb100OOOMW蛋白质=
2.7kbDNA
4.常用蛋白质分子量标准参照物
5.常用DNA分子量标准参照物续上表
二、常用缓冲液.分子克隆常用缓冲液.磷酸缓冲液
（1）25℃下
0.Imol/L磷酸钾缓冲液的配制※
（2）25＞下
0.Imol/L磷酸钠缓冲液的配制※※用蒸储水将混合的两种lmol/L贮存液稀释至1000ml根据Henderson-Hasselbalch方程计算其pH值pH=pK+lg（［质子受体］/［质子供体］）在此pK=
6.86（
2503.电泳缓冲液测序凝胶加样缓冲液98%去离子甲酰胺10mol/LEDTA（pH
8.0）
0.025舟二甲苯青FF
0.025%澳酚蓝甲酰胺许多批号的试剂级甲酰胺，其纯度符合使用要求，无须再进行处理只是，一旦略呈黄色，则应用在磁力搅拌器上将甲酰胺与DowexXG8混合床树脂共同搅拌1小时进行去离子处理，并用Whatman1号滤纸过滤2次，去向子甲酰胺分装成小份，充氮存于-70℃常用的电泳缓冲液说明
①TBE溶液长时间存放后会形成沉淀物，为避免这一问题，可在室温下用玻璃瓶储存5X溶液，出现沉淀后则予以废弃以片都以1XTBE作为使用液（即15稀释浓贮液）进行琼脂糖凝胶电泳但
0.5X的使用液已具备足够的缓冲容量目前几乎所有的琼脂糖胶电泳都以110稀释的贮存液作为使用液进行聚丙烯酰胺凝胶垂直槽的缓冲液槽较小，故通过缓冲液的电流量通常较大，需要使用1XTBE以提供足够的缓冲容量
②碱性电泳缓冲液应现用现配
③Tris-甘氨酸缓冲液用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳2XSDS凝胶加样缓冲液100mmol/LTris•HC1（
6.8）200nlmol/L二硫苏糖醇（DTT）4%SDS（电泳级）
0.2%澳酚蓝20%甘油不含DTT的2义SDS凝胶加样缓冲液可储存于室温，应在临用前取lmol/L贮存液现加于上述缓冲液中.凝胶加样缓冲液缓冲液类型6X缓冲液贮存温度15%聚蔗糖Ficoll400使用以上凝胶加样缓冲液的目的有三增大样品密度；以确保DNA均匀进入样品孔内；使样品呈现颜色，从而使加样操作更为便利，含有在电块中能以可预知速率向阳极泳动的染料浪酚蓝在琼脂糖中移动的速率约为二甲苯青FF的
2.2倍，而与琼脂糖浓度无关以
0.5XTBF作电泳液时，澳酚蓝在琼脂糖中的泳动速率约与氏300bp的双链线状DNA相同而二甲苯青FF的泳动则与长4kb的双链线状DNA相同在琼脂糖浓度为
0.5%〜
1.4%的范围内，这些对应关系受凝胶浓度变化的影响并不显著选用哪一种加样染料纯属个人喜恶但是，关于碱性凝胶应当使用澳甲酚绿作为示踪染料，由于在碱性pH条件下其显色较澳酚更蓝为鲜明.各类pH值的Tris缓冲液的配制
7.
736.
67.
834.
57.
932.
08.
029.
28.
126.
28.
222.
98.
319.
98.
417.
28.
514.
78.
612.
48.
710.
38.
88.
58.
97.04℃25℃37℃
8.
17.
57.
28.
27.
67.
37.
48.
37.
78.
47.
87.
58.
57.
97.
68.
68.
07.
78.
78.
17.
88.
88.
27.
98.
98.
38.
09.
08.
48.
19.
18.
58.
29.
28.
68.
39.
38.
78.
49.
48.
88.5缓冲液分子量pKa值缓冲范围Tris
012.
18.
087.1-
7.9HEPESb
283.
37.
477.2〜
8.2MPOSC
209.
37.
156.6〜
7.8PIPES
304.
36.
766.2〜
7.3MESe
195.
26.
095.4〜
6.8缓冲体系pKa20℃△pKa/10℃Mes
6.15-
0.110Ada
6.60-
0.110PiPes
6.80-
0.085Aces
6.90-
0.200Bes
7.15-
0.160Mops
7.20-
0.013Tes
7.50-
0.200Hepes
7.55-
0.014Tricine
8.15-
0.210Tris
8.30-
0.310Bicine
8.35-
0.180Glycylglycine
8.40-
0.280贮存液贮存温度反应浓度反应缓冲液温度预处理
0.01mol/LTrispH
7.8链霉蛋白酶.20mg/ml-20℃溶于水lmg/ml
0.01mol/LEDTA37℃自消化b
0.5%SDS
0.Olmol/LTrispH
7.8蛋白酶K20mg/ml-20*C溶「水50ug/ml
0.005mol/LEDTA37〜56℃无须预处理
0.5%SDS抗生素贮存液0工作浓度浓度储存条件严紧型质粒松弛型质粒氨茉青霉素50mg/ml（溶于水）-20℃20ug/ml60ug/ml竣苇青霉素50mg/ml（溶于水）-20℃20ug/ml60ug/ml氯霉素34mg/inl（溶于乙醇）-20℃25ug/ml170Pg/ml卡那霉素10mg/ml（溶于水）-20℃10ug/ml50ug/ml链霉素10mg/ml（溶于水）-20℃10iig/ml50iig/ml四环素b5mg/ml（溶于乙醇）-20℃10ug/ml50ug/ml碱基波长nm消化系数£[L/mol•cm]A
2591.54X10G
2531.37X10C
2719.10X103T
2607.40X103化合物分子量XmaxpH
7.01摩尔溶液（pH
7.0）中入max时的最大汲取值OD28O/OD21ATP
507259154000.15CTP
48327190000.97GTP
523253137000.66UTP
484262100000.38dATP
494259152000.15dCTP
46727193000.98dGTP
507253137000.66dTTP
48226796000.71核酸核甘酸数分子量XDNA48502（双链环状）
3.0X107PBR3224363双链
2.8X10628SrRNA
48001.6X1023SrRNA
37001.2X10试剂用途Denhardt试剂Northern杂交使用RNA探针的杂交单拷贝序列的Southern杂交将DNA固定于尼龙膜上的杂交Denhardt试剂通常配制50X贮存液，过滤后储存于-20℃可将该贮存液10倍稀释于预杂交液（常为含有
0.5%SDS与100Pg/ml经变性被打断的鲤精DNA的6XSSC或者6XSSPE）中50XDenhardt液中含5g聚蔗糖（Ficoll400型，Pharmacia）5g聚乙烯口比咯烷酮与5g牛血清白蛋白（组分V”Sigmal）加水至终体积为500mlBLOTTOGrunstein-Hogness杂交Benton-Davis杂交除单拷贝序列Southern杂交以外的所有Southern杂交斑点印迹1XBLOTT（牛乳转移技术优化液，BovineLactoTransferTechniqueOptimizer），是含5%胶脂奶粉与
0.02%叠氮钠的水溶液，应储存于使用前可用预杂交液稀释25倍BLOTTO不应与高浓度的SDS并用，由于后者会导致牛奶中蛋白质析出假如杂交背景不合要求，可在杂交液中加入NP-40至终浓度为l%oBLOTTO不能用作Northern杂交的封闭剂，由于这一封闭剂中可能含有RNA酶，其活性之高使人无法同意注意叠氮钠有毒性，取用时需戴手食小心操作含叠氮钠的溶液应予明确标记肝素Southern杂交原位杂交肝素（SigmaH-7005从猪中提取的二级产品或者相当等级的产品）用4XSSPE或者4XSSC溶解配制成50mg/m】的浓度，储存于4℃肝素在含有葡聚糖硫酸酯的杂交液中用作封闭剂的浓度为500Pg/ml在不含葡聚糖硫酸酯的杂交液中的浓度为50ug/mlo经变性并被打断的鲤精DNAsouthern与Northern杂交把蛇鱼精子DNACSigmaIII盐钠）溶解于水配制成10mg/ml的浓度，必要时于室温磁力搅拌2〜4h助溶把溶液中NaCl的浓度调至
0.Imol/L并用酚与酚/氯仿各抽提一次，回收水相合DNA溶液快速通17号皮下注射针头12次，以剪切DM加入2倍体枳用冰预冷的乙醛沉淀DNAo离心回收DNA并重溶于水配制成10mg/ml的浓度，测定溶液的0【送值并计算出精确的DNA浓度，然后煮沸10min分装成小份储存于-20℃使用前置沸水浴中加热5min然后迅速在冰浴中骤冷预杂交液中应含有100ug/ml经变性并被打断的鞋鱼精子DNA种类干颗粒直径u分子量分级范围床体积毫升/克干分子筛得水值溶胀最少平衡时间h柱头压力kPa⑵5cm直径柱肽及球形蛋白质葡聚糖线性分子室温沸水浴SophadcxG-1040〜120〜700〜7002〜
31.0+
0.131SephadexG-1040〜120〜
150015002.5〜
3.
51.5±
3.531SephadexG-25粗级100~300弋5〜100目中级50〜150=100〜200目1000〜5000100〜50004〜
61.5±
0.262细级20〜800*200〜400目超细10〜40SephadexG-50粗级100-200中级50〜1501500〜500〜细级20〜8030000100009〜
115.0±
0.362超细10〜40SephadexG-7540〜1203000〜1000〜超细10〜407000095000012〜
157.5+
0.
52433.92〜
15.86SephadexG-10040〜1204000〜1000〜超细10〜40150000015000015〜
2010.0+
1.
04852.35〜
9.41SephadexG-15040—1205000〜1000〜20〜30超细10-4040000015000018〜
2215.0+
1.
57250.88〜
3.53SephadexG-20040〜1205000〜1000〜30〜4010〜4080000020000020〜
2520.0±
2.
07250.39〜
1.57型号排阻的下限（分子量）分级分离范围（分子量）膨胀后的床体积（ml/g干凝胶）膨胀所需最少时间（室温h）Bio-gel-P-21600200〜
2003.82〜4Bio-gel-P-43600500-
40005.82〜4Bio-gel-P-646001000〜
50008.82〜4Bio-gel-P-10100005000-
1700012.42〜4Bio-gel-P-303000020000〜
5000014.910-12Bio-gel-P-606000030000〜
7000019.010〜12Bio-gcl-P-10010000040000-
10000019.024Bio-gel-P-15015000050000^
15000024.024Bio-gel-P-20020000080000〜
20000034.048Bio-gel-P-300300000100〜
40000040.048型号琼脂糖含量%（W/W）排阻的下限（分子量）分级分离的范围（分子量）生产厂家Sepharose4B
40.3X106—3X106PharmaciaSepharose2B22X10〜25X10Sagavac
10102.5X10，1X104—
2.5X105SeravacSagavac887X
1052.5X10-7X105Sagavac662X及5X10-2X106Sagavac4415X1062X105-15X106Sagavac22150X1065X105-15X107Bio-gelA-
0.5M
100.5X101X10*-
0.5X106Bio-RadBio-gelA-
1.5M
81.5X10“1X10’〜
1.5X10“Bio-gelA-5M65X1061X10-5X10^Bio-gelA-15M415X1064X101〜15X10，Bio-gelA-50M250X1061X105-50X106Bio-gelA-150M1150X1061X10-150X106凝胶最大静水压（kPa）SephadexG-
109.8G-
159.8G-
259.8G-
509.8G-
754.9凝胶浓度（%）线性DNA长度（bp）
0.51000~
300000.7800〜
120001.0500-
100001.2400〜
70001.5200~
30002.050〜2000凝胶浓度（％）溟酚蓝二甲苯青FF
5.035bp140bp
6.026bp106bp
8.019bp75bp
10.012bp55bp
20.08bp28bp凝胶浓度盘）澳酚蓝二甲苯青FF
3.5100bp460bp
5.065bp260bp
8.045bp160bp
12.020bp70bp
15.015bp50bp
20.012bp45bp氨基酸名称三字母缩写单字母缩写质量侧链电离的pHa值丙氨酸alanineAlaA
89.09精氨酸arginineArgR
174.
212.48天冬酰氨asparagineAsnN
132.1天冬氨酸asparticacidAspI
133.
13.86半胱氨酸systeineCysC
121.12谷氨酰胺glutamineGinQ
146.15谷氨酸glutamicacidGluE
147.
134.25甘氨酸glycineGlyG
75.07组氨酸histidineHisH
155.
166.0异亮氨酸isoleucinelieI
131.17亮氨酸leucineLeuL
131.17赖氨酸lycineLysK
146.19甲硫氨酸methionineMetM
149.21苯丙氨酸phenylanalinePheP
165.19脯氨酸prolineProP
115.13丝氨酸serinoSerS
105.06苏氨酸（threonine）ThrT
119.12色氨酸tryptophanTrpW
204.22酪氨酸tyrosineTyrY
181.
1910.07缀氨酸valineVaiP
117.15密码子的第一位（5，端）UCAG密码子的第三位（3端’）UuuuPheUCUSerUAUTyrUGUGysUncPheUCCSerUACTyrUGGGysCUUALeuUCASerUAA终止（赭石）UGA终止（乳白）AUUGLeuUGGSerUAG终止（琥珀）UGGTrpGUCCUULeuCCUProCAUHisCGAArgcueLeuCCCProCACHisCGCArgCCUALeuCCAProCAAGinCGAArgACUGLeuCCGProCAGGinCGCArgGAAUUHeACUThrAAUAsnAGUSerUAUCHeACCThrAACAsnAGCSerCAUAHeACAThrAAALysAGAArgAAUGMetACGThrAAGLysAGCArgGGUUVaiGCUAlaGAUAspGGUGlyUGGUCVaiGCCAlaGACAspGGCGlyCGUAVaiGCAAlaGAAGluGGAGlyAGUGVaiGCGAlaGAGGluGGGGlyG溶质分子式分子量mol/Lg/L重量%比重配制mol/L溶液的加入量ml/L冰乙酸CH.COOH
60.
0517.
40104599.
51.
05057.5乙酸
60.
056.
27376361.
045159.5甲酸HCOOH
46.
0223.
401080901.
20042.7盐酸HC
136.
5011.
60424361.
18086.
22.
90105101.
050344.8硝酸HNOa
63.
0215.
991008711.
42062.
514.
90938671.
40067.
113.
30837611.
37075.2高氯酸HclO
3100.
5011.
651172701.
67085.
89.
20923601.
540108.7磷酸1LPO.
80.
0018.
101445851.
70055.2硫酸H2P!
98.
1018.
01776961.
84055.6氢氧化钺NH.O1I
35.
0014.
80251280.
89867.6氢氧化钾KOH
56.
1013.
50757501.
52074.
11.
94109101.
090515.5氢氧化钠NaOH
40.
0019.
10763501.
53052.
42.
75111101.
110363.4溶质lNa
0.1Na
0.0lNaBOON乙酸
0.
402.
903.
403.90盐酸
0.
101.
072.
023.01硫酸
0.
301.
202.10柠檬酸
2.
102.60氢氧化铉
11.
8011.
3010.
8010.30氢氧化钠
14.
0513.
0712.
1211.13碳酸氢钠
8.40碳酸钠
11.
5011.0018SrRNA
19006.1X10519SrRNA
17005.5X1055SrRNA
1203.6X101tRNA（大肠杆菌）
752.5X10
（1）高分子量标准参照
（2）中分子晟标准参照
（3）低分子最标准参照肌球蛋白分子量磷酸化酶B97400碳酸酊酹31X肌球蛋白212000牛血清白蛋白66200大豆胰蛋白酶21500P-半乳糖甘酶B116000谷氨酶脱氢酶55000抑制剂磷酸化酶B97400卵白蛋白42700马心肌球蛋白16900牛血清白蛋白66200醛缩酶40000溶菌酶14400过氧化氢酶57000碳酸酊酷31000肌球蛋白（F1）8100醛缩酶40XX大豆腌蛋白酶21500肌球蛋白（F2）6200抑制剂肌球蛋白（F3）2500溶菌酶14400XDNA/Hindlll入DNA/EcoRIX/Hindlll+EcoRIpBR322/HaeIII23130212262122758712394167421514840510465575804497350489436156434268458802322484335304346420273530202726757564190423451125158421321137519218974184118311247564125pBR322/HinfIlx174/HinfIlx174/HaeIII4x174/TapI16317261401353291451771311810781175506553100872404396500826033273444176631023129841348281141221311422718722024940234541542002419433751511182072pHImol/LK2HP0tmlImol/LKH^O^ml
5.
88.
591.
56.
013.
286.
86.
219.
280.
86.
427.
872.
26.
638.
161.
96.
849.
750.
37.
061.
538.
57.
271.
728.
37.
480.
219.
87.
686.
613.
47.
890.
89.
28.
094.
06.2pHlmol/LNaJIPO.Cmllmol/LNalLPOml
5.
87.
992.
16.
012.
088.
06.
217.
882.
26.
425.
574.
56.
635.
264.
86.
846.
353.
77.
057.
742.
37.
268.
431.
67.
477.
422.
67.
684.
515.
57.
889.
610.
48.
093.
26.8缓冲液使用液浓贮存液（每升）Tris-乙酸TAEIX
0.04mol/LTris-乙酸50X242gTris碱
0.001mol/LEDTA
57.1ml冰乙酸100ml
0.5mol/LEDTApH
8.0Tris-磷酸TPEIX
0.09mol/LTris-磷酸10X10gTris碱
0.002mol/LEDTA
15.5ml85%磷酸
1.679g/ml40ml
0.5mol/LEDTApH
8.0Tris-硼酸TBEa
0.5X
0.045mol/LTris-硼酸5X54gTris碱
0.OOlmol/LEDTA
27.5硼酸20ml
0.5mol/LEDTApH
8.0碱性缓冲液1X:50mmol/LNaOH1X5mllOmol/LNaOHlmmol/LEDTA2ml
0.5mmol/LEDTApH
8.0Tris-甘氨酸01X:25mmol/LTris5X
15.1gTris250nunol/L甘氨酸94g昔氨酸（电泳级）（pH
8.3）
0.1%SDS50ml10%SDS电泳级I
0.25%溟酚蓝4℃
0.25%二甲苯青FF40%（W/V）蔗糖水溶液II
0.25澳酚蓝室温
0.25%二甲苯青FFIII
0.25%澳酚蓝4℃
0.25%二甲苯青FF30%甘油水溶液IV
0.25%溟酚蓝4℃40%W/V蔗糖水溶液碱性加样缓冲液300mmol/LNaOH6mmol/LEDTA18%聚蔗糖FicolMOOV
0.15%澳甲酚绿4℃
0.25%二甲苯青FF各类pH值的Tris缓冲液的配制所需pH值25C
0.Imol/LHC1的体积
7.
145.
77.
244.
77.
343.
47.
442.
07.
540.
37.
638.5。
个人认证
优秀文档
获得点赞 0
