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《聚合酶链反应》PCR课件PPT是一种重要的分子生物学技术,可以在短时间内大量复制,被广泛PCR DNA应用于基因分型、医学诊断、病毒检测等领域本课件将全面介绍的原PCR理、应用和实验操作注意事项什么是聚合酶链反应PCR聚合酶链反应(,)是一种体外快速扩增的技术,能够Polymerase ChainReaction PCR DNA在几小时内在体外大量复制目标片段DNA技术的发展历程PCR发现聚合酶1DNA年,泰普先后从热泉中分离出了能够耐高温的细菌聚合酶1976DNA提出方法2PCR年,科里斯和穆利斯首次提出技术,并详细描述了其基本原理1983PCR改良方法3PCR年,蒂利等人改良了反应的条件和酶的性能,进一步推动了技1985PCR PCR术的发展在生物研究中的应用PCR基因表达研究遗传病检测进化分析可以用于分析基因可以用于检测遗传可以用于研究物种PCR PCR PCR表达水平和研究基因调病的致病基因,帮助人进化关系和群体遗传结控机制们进行早期预防和治疗构的基本原理及流程PCR的基本原理是通过反复进行的变性、引物结合和聚合酶扩增,将目PCRDNA标逐渐扩增为大量产物分为变性、退火和延伸三个步骤DNA PCR实验室操作注意事项PCR严格准守无菌操作控制引物和酶的浓度12减少外源污染,并确保反应的可靠性确保反应的特异性和高效性DNA PCR合理选择反应体系3PCR根据实验需求选择合适的缓冲液、引物和酶的材料准备和设备PCR仪器移液工具反应管和板PCR仪器用于控制温度和时使用准确的移液器可以避免选择适合的反应管和板,确PCR间,是反应的核心设备实验误差和交叉污染保反应的可靠性和高效PCRPCR性的反应体系组成PCR核酸模板目标,可以是基因组或已知序DNA DNA列的片段DNA引物特异性引物,用于定向扩增目标DNA聚合酶具有高温稳定性的聚合酶,用于DNA链合成DNA缓冲液提供适宜的条件和离子浓度,维持反应pH的稳定性脱氧核苷酸四种脱氧核苷酸,作为链延伸的原料DNA温度变化曲线及相关参数PCR反应通常包括变性、退火和延伸三个阶段,每个阶段都需要根据目标PCR的特性确定合适的温度和时间参数DNA。
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