Waters FX液相硬件01HPLC使用入门介绍

液相色谱入门HPLC-http:〃-High-Performance-Liquid-Chromatography-Begin ne1％27s-Guide/nav.htmlocale=zhCNcid=10048919（）过滤流动相与样品1流动相含盐流动相务必过滤并按照要求填写记录与标签样品过滤或离心，（过滤有吸附考虑离心）（）脱气（气泡来源与脱气方式）2脱气程度与所用检测器相关个人推荐脱气方式超声（抽滤）5min（）样品的准备自动进样小瓶鉴于某些实验进样量偏大，建议液面加至第三条横线处不3宜超过瓶肩（避免进样过程中溢出）瓶盖力量大小合适，拧上即可（）色谱柱的选择与安装41）色谱柱的使用极端条件）色谱柱的安装尽可能地减小死体积，力量大小合适，顺其自然不要磨损2http:〃）保护住的选择与使用，含有辅料的样品，包括成品的检测，推荐安装保护柱（保证柱芯与3色谱柱相同，分析方法开发过程中若遇到没有适合的柱芯的时候请提交采购计划））使用过程中不要突然增加流速或断开色谱柱，避免压力突变导致填料坍塌4http:〃（关于色谱柱）

（5）流动相的放置）保证管路通畅1）确保有充足的洗针液，洗泵液，及色谱柱冲洗液2）确保更换前后的溶剂互溶（如有正相流动相的使用请与仪器维护人员联系，确定脱气包不3收损害）（）开机5电脑与仪器的开关无先后顺序，检测器打开需要大约时间，平衡需要则至UV5min30min RI少（建议甚至更长）则需要保证氮气充足40min60min ELSD（）仪器运行前准备6（注意不要排空,使用低比例甲醇）,（洗针液与待测成分的相容性）,Seal washneedle washwet（排气泡）prime,purge injector的使用Dry prime仪器结构简单介绍7http:〃130407/4660735/各部件构造（）仪器运行及处理8Empower3►file share\\cnycosdfile X:►ARD►ARD User►实/仪息►仪►HPLC►软件►财翻l|B名称修改日期大小口伪2695现场培训教程2011/7/2515:05Adobe Acrobat...6,390KB伪补充教材一校正曲浅及柱效计算2011/6/2711:18Adobe Acrobat...5,324KB1）方法组的建立）样品组的建立2）处理方法的建立3

（9）Purge injector将含有缓冲盐的流动相替换为高比例甲醇（连续使用则无必要）

（10）色谱柱的冲洗与保存反向色谱柱（C8及C18）禁止用纯水冲洗色谱柱1）流动相中无盐及酸类，只有有机相与水直接用高比例有机相（eg90%MeOH）冲洗约20个柱体积，流速推荐为Iml/min2）流动相中含有有机酸碱，低比例有机相（eg10%MeOH）冲洗10〜20个柱体积，再用高比例有机相（eg90%MeOH）冲洗约15个柱体积，流速推荐为Iml/min3）流动相中含有缓冲盐，低比例有机相（eg10%MeOH）冲洗20〜30个柱体积，再用高比例有机相（eg90%MeOH）冲洗约15个柱体积，流速推荐为Iml/min色谱柱柱体积的计算对于内径填料粒径的色谱柱

4.6mm,5um（）为柱长V ml=

0.1*L Lcm

（11）色谱柱的使用记录与仪器的使用记录填写（若有异常，请及时上报）。