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文本内容:
一、实验目的.了解普通植物组织培养实验室和工厂育苗植物组织培养室的差别;
1.掌握植物组织培养实验室的组成及各分室的功能;
2.学会分析各种类型植物组织培养实验室的优点和缺点;
3.学会常见植物组织培养设备的使用方法4
二、试验原理物组织培养实验室是完成植物组织培养的重要场所,植物组织培养实验室设计合理1•与否植影响着植物组织培养的成败.植物组织培养实验室有准备室、接种室、培养室、温室2
①准备室在准备室主要进行一些常规实验操作,如各种药品的储备,称量,器皿洗涤,培养基配制,培养基和培养器皿的灭菌,培养材料的预处理等为了方便管理还可以将准备室进行适当的分区,如划分为药瓶储藏室,洗涤室,培养基配制室及灭菌室等药品储藏室1主要用于存放各种化学药品,要求室内干燥、通风、避光、应配制、备药品柜、冰箱等各类化学试剂应按要求分类存放,需要低温保存的药剂应置于冰箱内保存,有毒药品应按规定存放和管理⑵洗涤室用于玻璃器皿、用具及实验用具的洗涤、干燥和存放;;培养材料的预处理与清洗组培苗的出瓶、清洗与整理等要求有电源、自来水和水槽,上下水道畅通,排水良好,地面耐湿、防滑,便于清洁应配备工作台、烘箱、晒瓶架、周转筐、毛刷等培养基配制室3用于培养基的配制,还可以分为称重分室和配制分室药品称量需配制各种规格的天平,包括普通天平和分析天平培养基配制需要配备工作台、蒸储水器、电炉电饭锅或微波炉、水浴锅、磁力搅拌器、过滤装置、酸度计、分注器、各种试管、三角瓶、烧杯、量筒、吸管、移液管及移液管架以及贮藏母液的冰箱、移动式载物台医用小推车、周转筐等灭菌室4用于培养基、器皿、用具、及其它物品的灭菌灭菌室根据工作量的大小决定其面积的大小,一般控制在要求、通风、明亮,墙壁和地面应防潮、耐高温应配30~50nV置高压电源和排水设施、高压蒸汽灭菌装置、干热消毒柜或烘箱、细菌过滤装置及移动式载物台、周转筐等准备室也可设计成大的通间,使试验操作的各个环节在同一房间按程序完成,以便于程序化操作与管理,从而提高工作效率此外还便于培养基的配制、分装和灭菌的自动化操作程序设计,从而减少规模化生产的人工劳动,更便于无菌操作体系的建立
②无菌操作室(接种室)无菌操作室也叫接种室,主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的继代转接等无菌操作由于植物组织培养时间较长,尤其需要防止细菌、真菌污染因此,接种室内无菌条件控制的好坏直接影响培养物的污染率及接种工作效率等重要指标接种室面积根据需要和环境控制的难易程度而定,在工作方面的前提下易小不宜大室内地面、墙面、天花板应采用防水或耐腐蚀材料,符合无尘积累要求,易于清洁和消毒;门窗要求密闭性好,一般用滑动门窗,不能安装风扇,通风换气需通过空气调节装置进行无菌室内安装紫外灯,每周照射〜,每次使用前照射〜;定期用甲醛和高镒酸钾(或用臭氧发生12h1030min器)熏蒸消毒接种室内应配备超净工作台、灭菌器或酒精灯、酒精瓶及酒精棉球、接种工具、器械支架及移动式载物台接种室外还应设置预备室作为缓冲间,一方面可供操作人员更换工作服、工作帽、拖鞋及器皿准备、培养材料处理等,另一方面可减少工作人员将外界尘埃、杂菌等污染物直接带入接种室内缓冲间与接种室之间最好安装塑钢玻璃及滑动门,以便于观察;而且缓冲间与接种室的门应该错开,也不得同时开启,以防止在工作人员进出时空气对流带入杂菌缓冲间内应配备鞋架和衣帽挂钩,并备有清洁的工作服、工作帽、口罩及拖鞋;墙顶应安装盏紫外灯,定时照射杀菌1~2
③培养室用于对接种到培养瓶等器皿中的植物离体材料进行控制条件下的培养培养室内放置培养架,方便操作,.并充分利用空间培养室的大小可根据生产规模和培养架的大小、数目及其他附属设备而定,其设计以充分利用空间和节省能源为原则可采取多室设计方式,每个培养是面积不宜过大,约10~20m2,以满足不同培养材料对环境条件控制的不同要求,也便于对同室内环境条件的均匀控制室内天花板和内墙最好用塑钢板或瓷砖装修,地面铺设水模式或瓷砖,以保持室内明亮、平整,并方便清洁和消毒;室内还要安装紫外灯,定时进行杀菌处理培养室内需要安装空调,以控制室内温度,一般要求保持在20~27(之间,低于或高于对植物的生长不利培养室的光源一般使用白色日光灯,15℃35℃光周期可采用自动定时器来控制,光照强度一般控制为每天光照时间薇1000~6000IX,10需要大量的暗培养时可以增设暗培养室,或使用暗箱培养培养室内的相对湿度保~16ho持在为宜湿度过高,容易使培养及污染;湿度过低,容易使培养基失水变硬,70%~80%影响培养物生长在梅雨季节可使用除湿机人工除湿,干燥季节可利用加湿器来增加湿度,也可采取防治水盆的方法来调节湿度
④温室组培试管苗在进入大田栽培之前,必须经过一段时间的炼苗,即驯化移栽过程,使其逐渐适应自然条件北方(长江以北)通常建造日光温室,而南方通常建造连栋温室大棚进行试管苗得分驯化移栽⑴日光温室日光温室又称为钢拱式日光温室、节能温室,主要利用太阳能做热源提供室内温度这种温室跨度为米,中高米,后墙用砖砌成,厚厘米,5~
72.4~
3.050~80高米钢筋骨架,拱架为单片桁架,上弦为的圆钢,下弦为内他的
1.6~
2.084~$16,012~圆钢,中间用於~的钢筋做拉花,宽厘米,拱架上端搭在中柱上,下端固定在前41015~20端预埋水泥基础上拱架间用三道单片桁架花梁横向拉接,以使整个骨架成为一体温室后屋面可铺泡沫塑料板和水泥板,抹草泥封盖防寒,后墙没隔米设通风口4~5此种温室坚固耐用,采光和通风性好,操作方便,适于北方地区使用,能充分利用太阳能,降低生产成本⑵智能连栋式温室智能连栋式温室有屋脊形连栋温室和拱圆形连栋温室等类型,是由相等的双屋面借纵向侧柱相互连通,可以连续搭接,形成室内串通的大型温室此类温室又被称为现代化温室,每栋可达数千或上万平方米,框架采用镀锌钢材,屋面用铝合金材料做桁条,覆盖物可采用玻璃、玻璃钢、塑料板材或者塑料薄膜,冬季通过热水、蒸汽或者热风加温,夏季采用通风与遮阳相互结合的方法降温整栋温室的加温、通风遮阳和降温工作可全部或部分计算机控制。
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