表达不同碳青霉烯酶的肠杆菌科细菌治疗策略

表达不同碳青霉烯酶的肠杆菌科细菌治疗策略碳绿霉素通常被认为是治疗多重抗癫痫感染的最有效药物然而，随着碳青霉烯类抗生素的广泛使用，耐碳青霉烯类肠杆菌科（carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE）的流行率迅速上升，已成为公众健康的严重威胁材料和方法1回顾性分析重庆医科大学附属第二医院2016年1月一2018年12月临床标本中分离的CRE（亚胺培南和/或美罗培南MIC24Lig/m L）147株，已剔除同一患者相同部位分离的重复菌株所有菌株均用VITEK2-Compact全自动微生物分析系统进行细菌鉴定和药敏试验,结果按照2020版美国临床实验室标准化协会（CLS1）规则和标准判定和试剂L2mh per哥伦比亚血平板和MH平板（美国赛默飞公司）；抗菌药物纸片,（英国Oxoid公司）；头抱他咤、阿维巴坦和替加环素粉剂（大连美仑生物技术有限公司）；MH琼脂、MH营养肉汤、TSB肉汤（英国Oxoid公司）；碳青霉烯酶表型检测试剂盒（上海原科公司）；VITEK2-Compact自动化鉴定仪（法国生物梅里埃公司）；PCR相关试剂（大连TAKARA公司）；PCR仪和凝胶成像仪（美国Bio-Rad公司）碳青霉烯耐候基因检测

1.3煮沸法提取细菌基因组DNA,采用PCR检测主要碳青霉烯耐药基因，包括A类丝氨酸酶（bla碳绿霉酶表型筛选试验

1.4碳青霉烯酶表型

1.

5.1根据CLSI推荐的改良碳青霉烯灭活试验（m CIM）和联合EDTA-改良碳青霉烯酶灭活试验（eCIM）检测肠杆菌碳青霉烯酶表型具体操作和结果解释见CLSI酶抑制剂增强试验依据“CHINET中国细菌耐药监测网”技术方案（2020年版），采用3-氨基苯硼酸（APB）和EDTA联合酶抑制剂增强试验法检测碳青霉烯酶类型°制备

1.5X10抗组胺和头唾酮基苯鲁酯的实验

1.6参照CLSI M07-A9文件氨基丙烯酸试验和氨基丙烯酸酯试验

1.7参照K-B法联合药敏试验统计分析

1.8采用SPSS

20.0进行统计学分析结果2菌株分布及标本来源

2.12016年一2018年，我院共分离到非重复的CRE147株，主要是CRKP86株

58.5%,CRCF24株

16.3%,CREC18株

12.2%,阴沟肠杆菌14株

9.5%,产酸克雷伯菌2株及产气肠杆菌、日沟维肠杆菌和布氏柠檬酸杆菌各1株主要的标本来源是痰液

30.6%、分泌物

23.8%、尿液

18.4%及血液

15.6%主要分布在肝胆外科

19.7%、呼吸内科

15.6%、重症医学科

15.0%、急诊科

8.8%及神经外科

8.2%147株CRE感染患者中，男性占

67.3%,大于45岁中老年占

77.6%抗菌药物的耐药率

2.2我院分离的147株CRE,对青霉素类和碳青霉烯类抗生素的耐药率为100%,对B-内酰胺酶复合制剂和头抱菌素的耐药率在95%以上氨曲南的耐药率为

91.8%,氨基糖昔类、喳诺酮类抗生素及复方磺胺甲恶哇的耐药性在50%90%之间，四环素耐药率最低，为

44.9%CRKP、〜CREC和CRCF的抗生素敏感性略有不同CRE对常见抗生素的药敏结果详见表2碳青霉烯耐候性基因分析

2.3PCR检测结果显示，复苏的128株CRE菌株均含碳青霉烯耐药基因其中81株含bla表型筛选试验结果

2.4m CIM和e CIM结果显示，产丝氨酸酶bla抗胆红素药物的敏感结果

2.5128株CRE替加环素的敏感率为

97.6%,中介率为

0.8%,耐药率为

1.6%微量肉汤稀释法显示其MIC抗癫痫药物和阿维巴坦的敏感性

2.6128株C RE头抱他咤/阿维巴坦的敏感率为

63.7%,耐药率为

36.7%微量肉汤稀释法显示其MIC抗癫痫药物组、两种药物组和氨基丙烯酸组的联合药物分析

2.7abu42株产金属酶（b1a碳青霉烯酶表型试验3我院2016—2018年分离的147株CRE主要是肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、阴沟肠杆菌及弗氏柠檬酸杆菌，对常用抗生素具有较高的耐药性复苏其中的128株CRKP、CREC和CRCF,基因检测结果显示，这些菌株均含碳青霉烯耐药基因，主要是bla虽然分子生物学方法能够准确的检测出细菌携带的碳青霉烯耐药基因种类，但是其并不适用于在临床微生物实验室常规开展碳青霉烯酶表型试验是快速准确检测碳青霉烯酶的有效方法，CIM和e CIM是CLSI推荐方法，具有较高的灵敏度和特异性HI面对CRE愈加严峻的耐药形势，临床如何选择合适的抗生素进行有效的治疗，成为关注重点从体外敏感性来看，对多重耐药革兰阴性杆菌最有活性的药物是替加环素和多黏菌素阿维巴坦是一种新型的非内酰胺类的内酰胺酶抑制剂，其本身并没有抗菌活性，但是能够抑制A类（ESBLs和bla氨曲南/阿维巴坦是另一种研究较多的新型复合制剂，对产各种类型碳青霉烯酶的CRE均有很强的抗菌活性，是治疗CRE感染的理想选择综上所述，不同耐药机制的CRE治疗方案存在差异替加环素可作为治疗CRE的基础选择,对于产丝氨酸酶的CRE优选头抱他咤/阿维巴坦，而对于产金属酶或丝氨酸-金属酶双酶的CRE,可考虑氨曲南联合头抱他咤/阿维巴坦治疗酶抑制剂增强试验能够有效区分碳青霉烯酶酶型，建议临床微生物实验室常规开展，为临床医师合理选择抗生素提供帮助。