分光光度法测定饮料中亚硝酸盐的含量

分光光度法测定饮料中亚硝酸盐的含量食品添加剂可以改善食品的味道，有效确保食品的新鲜度，并起到良好的防腐作用许多食品添加剂都有一定的毒性，亚硝酸盐是其中之一亚硝酸盐可以抑制某些微生物的生长,防止食品变质，尤其能够抑制肉毒芽抱杆菌的生长和繁殖，从而明显降低肉毒芽泡杆菌的中毒概率1实验部分

1.1ess分光光度法亚硝酸盐分光光度法分析中经典的方法是Griess分光光度法，控制一定酸度下，亚硝酸盐同对氨基苯磺酸反应产生重氮化合物，然后同盐酸蔡乙二胺发生偶合作用，生产紫红色的偶氮化合物

1.2其他磺化酸及乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙酸a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、亚铁氧化钾、乙二胺a.r、乙二胺a.r＞乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺a.乙二胺a.r＞乙二胺a.r＞乙二胺a.r、乙二胺、乙二胺a.r＞乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺、乙二胺a.r、乙二胺a.r、乙二胺、乙二胺a.r721分光光度计、电子天平、亚硝酸钠A.R、20%盐酸A.R、对氨基苯磺酸A.R、盐酸蔡乙二胺A.R、亚铁氧化钾A.R、硼砂A.R、乙酸锌A.R、各种饮料

1.3溶液初滤液的制备用量筒量取10m L的待测样品置于烧杯中，加入5m L饱和硼砂溶液，

12.5m L的亚铁氧化钾溶液利5m L乙酸锌溶液，可看到有沉淀生成，搅拌析出更多沉淀，再加入少量蒸储水搅拌均匀后用玻璃棒引流至500m L的容量瓶中，蒸储水洗涤烧杯3-4次，引流至容量瓶,定容混匀后将其转移至大烧杯中静置30min,待蛋白质完全沉淀，取上层清液抽滤，将30m L的初滤液倒入废液桶，其余滤液存储备用2结果与讨论

2.1亚硝酸钠标准使用液室温下于100m L容量瓶中，加入

2.0m L亚硝酸钠标准溶液，

4.0m L对氨基苯磺酸溶液，待其重偶氮化4min后再加入

2.0m L2g•L

2.2测定波长的测定其他条件不变，改变盐酸蔡乙二胺的量分别为L0,

2.0,

3.0,

4.0,

5.0,

6.0ni L测定吸光度,数据见表2以表2的数据作图，见图1由图1可知，随着盐酸蔡乙二胺用量的增加，吸光度在增大，并在

3.

06.0m L时逐渐趋于平衡，实验在

2.0m L时吸光度最大，因此本文选〜择盐酸蔡乙二胺加入量为

2.0m Lo

2.31对氨基苯磺酸溶液测定结果其他条件不变,分别加入L0,

2.0,

3.0,

4.0,

5.0,

6.0ni L对氨基苯磺酸溶液,测定吸光度,数据见表3以表3数据作图，见图2由图2可知，吸光度随着对氨基苯磺酸用量的增加呈现先增大后降低的趋势，在

4.Oin L时吸光度最大，因此本文确定对氨基苯磺酸取的用量为

4.0m Lo

2.4重偶氮化时间对测定吸光度的影响其他条件不变，改变重偶氮化时间为2,3,4,5,6,7min,测定吸光度，数据见表4以表4数据作图，见图3由图3可知，吸光度随着重偶氮化时间的增加先增加后减小因此本文中选择重偶氮化时间为3mino

2.5市售光度数据其他条件不变,分别测定显色时间为5,10,15,20,25,30min时的吸光度，数据见表5以表5数据作图，见图4由图4可知，吸光度随着时间的增加而增加，且在15min左右吸光度最大，因此本文显色时间确定为15mino综上，测定条件为538nm波长，控制重偶氮化时间为3min,盐酸蔡乙二胺（2g・L

2.6亚硝酸钠标准使用液分别吸取

0.00,

0.20,

0.40,

0.60,

0.80,

1.00,

1.50,

2.00,

2.50m L亚硝酸钠标准溶液（相当于0,1,2,3,5,7,10,

12.5ug亚硝酸钠）,测定吸光度，数据见表6以亚硝酸钠为横坐标,吸光度为纵坐标，作图，见图5由图5可知，线性回归方程为y=

0.0390x+

0.0114,相关系数R

2.7试剂用量的测定取

40.0m L的样液放置于100m L的容量瓶中按本文确定条件依次加入其它试剂稀释,定容，测定吸光度，数据见表7由表7可知，农夫山泉、雪碧、优酸乳、冰红茶和橙汁中亚硝酸盐含量分别为

0.0092,

0.0431,

0.0427,

0.0466,

0.0498u g•g3样品中亚硝酸盐含量本文采用分光光度法对软饮料中亚硝酸盐的含量进行测定实验表明，在波长538nm,显色时间为15min,显色剂中对氨基苯磺酸用量为

4.0m L,盐酸蔡乙二胺用量为

2.0m L的实验条件下，由实验得到的亚硝酸盐含量和回收率结果如下农夫山泉、雪碧、优酸乳、冰红茶和橙汁样品中亚硝酸盐的含量分别为

0.0092,

0.0431,

0.0427,

0.0466,

0.0498u g•g。