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第五章血型和输血血型定义早期指红细胞表面抗原的差异,现知,血小板和白细胞表面抗原也存在差异,因此,血型是抗原抗体系统的遗传特征血型研究的应用治疗输血、器官移植、骨髓移植、法医鉴定、考古研究等第一节红细胞ABO血型系统本节考点1ABO血型系统的抗原及抗体检查2ABO血型系统的亚型3ABO血型鉴定4交叉配血法5ABO血型鉴定及交叉配血中常见错误6ABO血型系统主要临床意义一ABO血型系统的抗原及抗体检查1996年,国际输血协会ISBT将红细胞表面抗原分为23个血型系统、5个血型关联和2个血型系歹U血型系统指由一个或数个基因所编码的数个相关联抗原的组成目前,国际输血协会对红细胞血型系统的命名,有2种方法一种是6位数字法,如001001为ABO血型系统的A抗原;另一种是字母加数字法,如RH1为Rh血型系统D抗原
1.AB0血型抗原1AB0抗原的遗传AB0血型系统的产生及定位由3个分离位点的基因所控制,即ABO、Hh、Sese基因基因Hh和Sese紧密相连在第9对染色体上现在一般接受“三复等位基因”学说认为在决定AB0血型遗传的基因座上,有A、B、三个等位基因AB0遗传座位在第9号染色体的长臂3区4带A和B基因对于0基因而言为显性基因,0基因为隐性基因父母双方如各遗传给子代一个基因.则可组成6个基因型;
00、AA、AO、BB、BO、AB;4种表现型A、B、
0、AB2AB0抗原的发生56周胎儿红细胞已可测出ABH抗原新生儿A、B抗原位点较成人少,一般在生〜后18个月时才能充分表现出抗原性,但抗原性也仅为成人的20%此外,ABH抗原频率亦随种族而不同3AB0分泌型ABH抗原不仅存在于红细胞膜上,也可存在于白细胞、血小板及其他组织细胞上ABH血型特异物质存在于唾液含量最丰富、尿、泪液、胃液、胆汁、羊水、血清、精液、汗液、乳汁等体液中,但不存在于脑脊液这些可溶性抗原又被称为“血型物质”凡体液中有血型物质者为分泌型可以中和或抑制抗体与具有相应抗原的红细胞发生凝集,无血型物质者为非分泌型血型物质意义
①测定唾液血型物质,可辅助鉴定血型
②中和AB0血型系统中的“天然抗体”,有助于检查免疫性抗体,鉴别抗体的性质
③检查羊水可预测胎儿AB0血型等
2.AB0系统抗体1天然抗体与免疫性抗体天然抗体是在没有可觉察的抗原刺激下而产生的抗体,以IgM为主,又称完全抗体或盐水抗体;也可能是由一种无觉察的免疫刺激产生而得免疫性抗体有IgM、IgG、IgA,但主要是IgG抗A和抗B可以是IgM与IgG,甚至是IgM、IgG、IgA的混合物,但主要是IgM,而0型血清中以IgG为主2天然抗体和免疫抗体的主要区别;见表『5-1一类是血小板特异的抗原人类血小板特异性抗原(HPA)有5个血型系统和10个抗原,为HPAT(Zw)、HPA-2(Ko系统)、HPA-
3、HPA-
4、HPA-5
(二)血小板抗体同种抗体由输血或妊娠等同种免疫产生,多为IgG型自身抗体多在原发性血小板减少性紫瘢中检出,也多为IgG型
(三)检测方法主要有血清学法,操作简单,重复性和特异性较高分子生物学法,常用PCR技术
(四)临床意义
1.提高血小板输注疗效选择与患者血小板和HLA相配的供血者,可提高输注浓缩血小板效果
2.诊断新生儿同种免疫血小板减少性紫瘢
3.诊断原发性血小板减少性紫瘢第七节血液保存液本节考点
(1)血液保存液的主要成分与作用
(2)贮存温度和时间(-)血液保存液的主要成分与作用L血液保存液常用种类配方可分为ACD(A,枸椽酸;C,枸椽酸三钠;D,葡萄糖)保存液与CPD(C,枸椽酸三钠;P,磷酸盐;D,葡萄糖;以及枸椽酸、腺喋吟)两大类保存液在CPD中加腺喋吟即为CPDAT
2.血液保存液主要成分
(1)枸檬酸盐是所有抗凝保存液中的基本抗凝物质最常用的是枸椽酸三钠,除抗凝作用外,它还能阻止溶血的发生
(2)枸椽酸避免保存液中的葡萄糖在消毒中焦化
(3)葡萄糖是红细胞代谢所必需的营养成分,可延长红细胞保存时间,且防止溶血;并减慢细胞中有机磷的消失,防止红细胞储存损伤
(4)腺喋吟可促进红细胞ATP合成,延长红细胞的保存期(达35天),并增强红细胞放氧功能
(5)磷酸盐提高保存液pH,延长红细胞的保存期ACD液pH较低,对保存红细胞不利,只能保存21天,且放氧能力迅速下降CPD保存液中加入腺喋吟与磷酸,从而延长红细胞的生存期
(二)贮存温度和时间血液制品的保存温度和时间见表l-5-3o表1-5-3血液制品贮存温度和时间血液制品贮存温度贮存时间全血和红细制剂2~6℃21天ACD2~6℃35天CDPA-12~6℃24天洗涤红细胞20~24℃浓缩血小板7天20~24℃24h浓缩粒细胞-30℃新鲜冰冻血浆、冰冻血浆、冷沉淀物1年-65℃10年低温冷冻红细胞第八节输血与输血反应本节考点
(1)输血适应证、输血种类与选择
(2)输血不良反应
(3)输血传播性疾病及预防由于输血可能发生不良反应,能不输血的尽可能不输血;即使必须进行输血,尽量用成分输血,不用全血,以利于安全和经济
(一)输血适应证、输血种类与选择
1.输血适应证主要有
①出血;
②严重贫血;
③低蛋白血症;
④严重感染;
⑤凝血障碍
2.输血种类与选择
(1)全血输注全血是指血液的全部成分,包括各种血细胞及血浆中各种成分,还有抗凝剂及保存液全血有保存全血及新鲜全血之分常用保存于4±2℃的全血新鲜全血定义难以统一规定,要依输血目的而定为了补充新鲜红细胞,可用保存5天的ACD全血或10天的CPD全血;如同时还要补充血小板或白细胞,则应分别用保存1天及12h内的全血全血中主要是含有载氧能力的红细胞和维持渗透压的白蛋白,可应用于
①各种原因(手术、创伤等)引起的急性大量失血需要补充红细胞及血容量时
②需要进行体外循环的手术时
③换血,特别是新生儿溶血病换血全血输注缺点有全血中所含血小板与白细胞可引起的抗体,可在再输血时引起反应;对血容量正常的人,特别是老人或儿童,易引起循环超负荷目前,全血输注已逐渐减少,而代之以成分输血
(2)成分输血优点
①疗效高将血液成分提纯、浓缩而得到高效价的制品
②反应少可减少输全血引起各种不良的抗原抗体的免疫反应
③合理用血液成分将全血分离制成不同的细胞及血浆蛋白成分,供不同目的应用
④经济既可节省宝贵的血液,又可减低患者的医疗费用
(3)成分输血主要种类1)红细胞输注
①少浆血
②浓缩红细胞
③代浆血或晶体盐红细胞悬液
④少白细胞的红细胞
⑤洗涤红细胞
⑥其他冰冻红细胞、年青红细胞、照射红细胞等主要用于需要输注红细胞的患者,适用于
①任何原因的慢性贫血均可输注浓缩红细胞,因对血容量影响较少而不会引起心功能不全或肺水肿
②急性失血如无全血时,可输入代浆血
③洗涤红细胞最常用于因输血而发生严重过敏的患者
④如输血后有反复发热的非溶血性输血反应时,可输少白细胞的红细胞2)粒细胞输注应用浓缩白细胞应十分慎重,因为粒细胞可引起输血副作用主要适应证
①用于治疗当患者白细胞少于O.5X1()9/L、有严重细菌感染而经抗生素治疗2448h无效时
②用于预防当治疗白〜血病或骨髓移植后引起粒细胞缺乏症时,输白细胞可能减低合并严重感染的危险,但引起副作用的弊病可能更大
③新生儿败血症,可明显减低其死亡率输粒细胞时必须用与患者AB0和Rh同型的血液,若HLA血型相配则更为有益3)单个核细胞输注包括淋巴细胞、单核细胞、造血干细胞淋巴细胞输注用于病毒感染、肿瘤、白血病等造血干细胞用于自体骨髓移植、肿瘤化疗后等血小板输注
①富含血小板血浆
②浓缩血小板
③少白细胞血小板输血小板的适应证
①血小板数减少一般血小板数<20X10/L且合并出血时应给输血小板
②血小板功能异常如血小板无力症、血小板病、巨大血小板综合征、药物或肝肾功能引起的血小板功能异常等4)血浆及血浆蛋白输注血浆适应于
①患有导致一种或多种凝血因子缺乏的疾病,如DIC等
②肝功能衰竭而伴有出血倾向时
③应用华法林等抗凝药物过量等血浆白蛋白主要用于补充血管内或血管外白蛋白缺乏扩充血容量是使用白蛋白的重要指征,如血容量损失50%80%者、白蛋白丢失(烧伤等)、体外循环、失代偿肝硬化〜免疫球蛋白输注
①预防某些传染病和细菌感染,如麻疹、传染性肝炎等,可使用正常人免疫球蛋白
②代替异种血清制品,如破伤风免疫球蛋白,以避免不良反应免疫缺陷疾患、新生儿败血症等,可用正常免疫球蛋白或静脉注射免疫球蛋白凝血因子制品输注
①新鲜冰冻血浆含有全部凝血因子,可用于凝血因子缺乏患者
②vm因子浓缩剂可用于甲型血友病止血治疗及出血的预防也可用DNA重组技术
③凝血酶原复合物浓缩制剂是一种混合血浆制成的冻干制剂,含有维生素依赖性的n、vn、ix、x因子可用于血友病出血的治疗K5)自身输血由于输血传播疾病,尤其是艾滋病的传播,现已重视自身输血法自身输血的意义
①有利于稀有血型输血
②避免输血反应血型抗原等引起的同种免疫或免疫作用而引起的过敏反应
③避免输血传染疾病等
④自身输血者反复放血,可刺激红细胞再生
⑤为无条件供血的地区提供血源
(二)输血不良反应常见输血不良反应
1.免疫性溶血反应、非溶血性发热反应、过敏反应、尊麻疹、非心源性肺水肿、移植物抗宿主病、输血后紫瘢、对红细胞、白细胞、血小板或血浆蛋白的同种(异体)免疫等
2.非免疫性高热(有休克)、充血性心力衰竭、理化性溶血、空气栓塞、出血倾向、枸椽酸钠中毒、钾中毒、血液酸化、高血氨、含铁血黄素沉着症、血栓性静脉炎、疾病传播(乙肝、丙肝、艾滋病、梅毒、疟疾,巨细胞病毒感染等)
(三)输血传播性疾病及预防
1.输血传播性疾病常见的有乙型、丙型肝炎,艾滋病,巨细胞病毒感染,梅毒,疟疾,弓形体病等献血者有EB病毒感染,黑热病、丝虫病、回归热感染时,均有可能通过输血传播止匕外,如血液被细菌污染,可使受血者由此引起菌血症,严重者可致败血症在由输血引起的疾病中,以肝炎和艾滋病危害性最大2,预防
(1)肝炎采用灵敏的乙型与丙型肝炎的筛选试验对献血者和血液制品严格进行乙型与丙型肝炎血清学检测;提高献血者人群肝炎试验的灵敏度与特异性;提高血浆制品中肝炎病毒灭活效果;提倡使用一次性注射器和输血、输液器;对血液透析机应彻底消毒;所有被血液污染的物品和工作台面需彻底消毒处理;工作人员进行血液检验时需戴手套2)艾滋病对高危人群和献血者加强监测,主要进行HIV抗体的检测并注意阻断HIV传播的途径,实验与临床工作者都应严格执行消毒制度检测血清HIV抗体的初筛试验可选择酶联免疫吸附试验(ELISA)、明胶颗粒凝集试验(PA)、免疫荧光法(IF)、免疫酶法(IE)和乳胶凝集试验(LA),或其他世界卫生组织评价过的方法,可以使用混合血清法对献血者进行HIV抗体筛检多聚酶链反应(PCR)技术现已开始用于HIV、HBV、HCV和CMV感染的诊断,但由于此种技术操作复杂,试剂昂贵,还需一定的仪器设备,故目前尚不能普遍用于献血者的检查确认试验可选择蛋白印迹法(WB)或由卫生部门指定其他卫生组织评价或推荐方法习题盐水介质交叉配血时,当血清和红细胞发生肉眼可见的凝集反应,则血清中的抗体是()A.IgMB.IgGC.IgED.IgAE.IgA+IgE一[答疑编号500731050301]『正确答案J A习题交叉配血用酶介质法,其中酶的作用是()A.在红细胞膜表面之间起桥梁作用B.在致敏抗体之间起桥梁作用C.中和红细胞表面电荷D.改变致敏抗体结构E.破坏红细胞表面的唾液酸分子♦[答疑编号500731050302]『正确答案』E习题为避免由于红细胞亚型抗原性弱而出现的漏检或误定,应采取那项主要措施()A.使用符合标准的抗A和抗B血清B.加用型(抗A、B)血清C.采用试管法D.采用反向定型E.B+C,[答疑编号500731050303]『正确答案』E习题以下那种情况可以导致AB0血型鉴定和交叉配血中出现假性不凝集现象()A.多发性骨髓瘤等高球蛋白血症B.静脉使用高分子血浆代用品后C.某些癌症患者D.婴儿或老年人E.船和A2B血型的人3[答疑编号500731050304]『正确答案』D习题某些细菌性感染的患者,之所以A型血被鉴定为AB型,是因为()A.红细胞被大量抗体包被B.特异性A型物质末端N-乙酰胺基半乳糖水解成半乳糖C A或B抗原变弱D.细菌酶消化了红细胞表面的唾液酸,暴露出T抗原E.红细胞血型出现嵌合体,[答疑编号500731050305]『正确答案』B『答案解析』AB0血型鉴定和交叉配血时常常因为分型血清和对照红细胞两方面的原因产生错误本题涉及的是对照红细胞方面的问题细菌可以使红细胞表面发生变化,从而影响血型鉴定和交叉配血一种情况是有些细菌含有乙酰基酶,能使特异性A型物质末端N-乙酰胺基半乳糖水解成半乳糖,从而使A型获得B抗原后易误定为AB型;另一种情况是细菌污染红细胞,细菌的细菌酶消化了红细胞表面的唾液酸,暴露出人人都有的T抗原,被具有抗T活性的IgM凝集本题是前一种情况习题Rh血型鉴定不能使用下列哪种方法()A.低离子强度盐水试验B.酶介质法C.抗人球蛋白法1).聚凝胺法E.盐水介质法3[答疑编号500731050306]『正确答案』E习题为查明输血反应的原因,应首选的试验是()A.复查AB0血型B.查Rh血型C.查AB0亚型D.查HLA分型E.查血小板血型,[答疑编号500731050307]『正确答案』C第六章尿液生成和标本采集及处理第一节尿液生成本节考点
(1)肾组织基本结构
(2)尿液生成机制尿是血液流经肾脏时,经肾小球的滤过、肾小管和肾集合管的重吸收与分泌后生成,再流经输尿管,在膀胱内暂时贮存,最终排出体外(-)肾组织基本结构肾单位是肾脏生成尿的基本功能单位,由肾小体和肾小管组成集合管包括皮质集合小管、直集合小管、乳头管肾脏基本结构与功能的完整性,是完成泌尿功能的基础
(二)尿液生成机制L肾小球滤过当机体的循环血液流经肾小球时,由于肾小球滤过膜的屏障作用,血液中的细胞成分及大部分血浆蛋白无法通过,而其余成分几乎全部被滤入肾小囊腔内,形成肾小球滤过液,称为原尿
(1)屏障作用
①孔径屏障肾小球滤过膜的毛细血管内皮细胞间缝隙为直径50lOOnm,是阻止血细胞〜通过的屏障,称为细胞屏障;基膜是滤过膜中间层,由非细胞性的水合凝胶构成,除水和部分小分子溶质可以通过外,它还决定着分子大小不同的其他溶质的滤过,称为滤过屏障,是滤过膜的主要孔径屏障正常情况下,肾小球滤过膜只允许相对分子质量小于L5万的小分子物质自由通过;
1.5万7万的物质可部分通过;而相〜对分子质量大于7万的物质(如球蛋白、纤维蛋白原等)几乎不能通过
②电荷屏障指肾小球滤过膜的内皮细胞层与上皮细胞层带负电荷的结构,可阻止那些带负电荷较多的大分子物质的滤过
(2)滤过膜通透性主要取决于被滤过物质相对分子质量大小及其所带的电荷性质物质相对分子质量有效半径增大,滤过量则减低带正电荷的物质较易被滤过,而带负电荷的物质则较难通过滤过膜
(3)原尿成分原尿除了无血细胞及含极少蛋白质外,其他物质如葡萄糖、氯化物、无机磷酸盐、尿素、肌酎和尿酸等的浓度,渗透压及酸碱度几乎与血浆相同
2.肾小管与集合管重吸收在近曲小管,滤过液中的葡萄糖、小分子蛋白质、大部分水等重吸收,而肌酎则几乎不被重吸收而随尿排出体外肾近曲小管是重吸收的主要场所原尿物质,当其浓度超过肾小管重吸收能力时,则可出现于终尿中在抗利尿激素的作用下,远曲小管、集合管是肾脏最终实现浓缩和稀释尿液功能的主要场所
3.肾小管分泌肾小管分泌作用包括肾小管和集合管的泌H\NH;的作用及NaMT交换作用习题1那种蛋白在正常情况下也不能通过肾小球基底膜滤过,A.B2-微球蛋白B.ci1-微球蛋白C.本周蛋白D.白蛋白E.球蛋白[答疑编号500731060101]『正确答案』E第二节尿液检验目的本节考点尿液检验目的尿检验是临床上最常用的重要检测项目之一,主要用于L泌尿系统疾病诊断和治疗监测肾病时尿就可能会出现蛋白、细胞、管形等病理成分;发生炎症、结石、肿瘤、血管病变等,各种产物可进入尿,引起尿成分的变化
2.其他系统疾病诊断任何系统疾病的病变影响血液成分改变时,均可引起尿成分的变化如糖尿病时尿糖增高、急性胰腺炎时尿淀粉酶增高、肝胆疾病时尿胆色素增高等
3.安全用药监测庆大霉素、卡那霉素、多粘菌素B、磺胺药、抗肿瘤药等药物,常可引起肾脏的损害,监测尿的改变,可及时采取措施,确保用药安全
4.职业病辅助诊断检验尿中重金属如铅、镉、钿、汞等排出量,对职业病的诊断、预防及开展劳动保护,具有实用的价值
5.健康状况评估尿检验是一种无创伤性检查,可筛查肾、肝、胆疾病和糖尿病等疾病,有助于发现亚健康人群,进行早期诊断及疾病预防尿一般检验临床应用价值见表1-6-1o检■类型检测日体..主鲁应用阶段原干化界粒查*ft量白+++*/-果*限自++++/—+««»MM感+十十+/一++-+-+/一++染■原病++++/一++量白尿血尿++++++++++++4++++++++十十++++++++++++♦*++++++++++++++++«IAA++十++++++肿・炎症++++++屎微生森病■■集++++++++♦#检熔版ICfl1后+♦+哀水•南81H的・大小♦示无■刖0曲卸1第三节尿标本采集本节考点
(1)患者准备
(2)标本容器准备
(3)尿标本采集种类
(4)尿标本采集质量管理尿标本采集是尿检验基础必须坚持尿检验全过程分析前、中、后全面质量控制标本需具备最基本的内容是
①患者全名、性别、科别、床号
②采集日期、时间、标本类别
③采集方法、尿量、保存条件等不合格标本是造成假阳性或假阴性结果的主要原因之一(-)患者准备为了正确收集尿标本,应以口头和书面形式指导患者正确收集尿标本如清洁标本采集部位;明确标记;避免月经、阴道分泌物、粪便、清洁剂等各种物质的污染;使用合格容器,细菌培养的标本,应使用消毒培养瓶或无菌、有盖的容器清洁尿包括中段尿、导尿标本或耻骨上穿刺尿
(二)标本容器准备(专业知识,专业实践能力,掌握)容器应符合以下条件材料由不与尿成分发生反应的隋性一次性环保型材料制成;一般应能容纳50nli以上尿的容积;必须干燥、清洁,无污染物、无渗漏、无化学物质
(三)尿标本采集种类尿标本种类主要有1,晨尿即清晨起床后第一次排尿时收集的尿标本,即为首次晨尿这种标本尿较为浓缩,可用于肾脏浓缩能力评价首次晨尿常偏酸性,其中的血细胞、上皮细胞、病理细胞、管形或管形等有形成分,以及如人绒毛膜促性腺激素(HCG)等的浓度较高但夜尿在膀胱内停留时间过长,硝酸盐及葡萄糖易被分解,不利于检出在酸性环境中易变的物质,因而推荐采集第2次晨尿代替首次晨尿2•随机尿这种标本不受时间限制,但此尿标本,仅反映某一时段的现象,且易受多种因素(如运动、饮食、用药、情绪、体位等)的影响,可致尿检成分浓度减低或增高
3.计时尿按特定时间采集尿标本(l)3h尿一般是收集上午69时时段内的尿,多用于检查尿有形成分,如lh尿排泄率检查等〜
(2)餐后尿通常收集午餐后至下午2时的尿这种尿标本,有利于检出病理性糖尿、蛋白尿或尿胆原有助于肝胆疾病、肾脏疾病、糖尿病、溶血性疾病等的临床诊断
(3)24h尿患者上午8时排尿一次,将膀胱排空,弃去尿,此后收集各次排出的尿,直至次日上午8时最后一次排尿的全部尿尿中某些成分24h不同时间内的排泄浓度不同,如肌酢、总蛋白质、电解质等,为了较准确地定量分析这些成分,必须采集24h尿
(4)特殊试验尿
①尿三杯试验多用于男性下尿路及生殖系统疾病定位初步判断
②耐受性试验尿:如经前列腺按摩后排尿收集尿标本
4.无菌尿常用的方法有
(1)中段尿留尿前先清洗外阴,在不间断排尿过程中,弃取前、后时段的尿,以无菌容器只接留中间时段的尿
(2)导管尿、耻骨上穿刺尿患者发生尿潴留或排尿困难时采用
(四)尿标本采集质量管理尿标本采集质量管理的内容,包括各种规范化管理文件,涉及分析前的检验申请单要求、患者准备、标本采集(包括容器和器材准备)、按规定的标本转运时间、标本接收处理;分析中的室内质量控制;分析后的及时、准确报告检验结果等各个环节第四节尿标本处理本节考点
(1)尿标本保存
(2)质量控制检验前的处理,是为了更好地保存尿刚排出时的标本成分的质和量,以保证检验结果的可靠性
(一)尿标本保存尿标本采集后,一般应在2h内及时送检,最好在30min内完成检验,或进行以下处理
1.保存多保存在2c8c冰箱内,或保存于冰浴中低温可抑制微生物迅速生长,可保持尿中存在的有〜形成分形态基本不变
2.防腐常用的防腐剂有甲醛又称福尔马林对尿细胞、管形等有形成分的形态结构有较好的固定作用甲苯可在尿标本表面形成一层薄膜,阻止尿中化学成分与空气接触常用于尿糖、尿蛋白等化学成分的定性或定量检查麝香草酚可抑制细菌生长,保存尿有形成分,用于尿显微镜检查、尿浓缩结核杆菌检查,以及化学成分保存浓盐酸用作定量测定尿17-羟,17-酮、肾上腺素、儿茶酚胺、CH’等标本防腐冰乙酸用于检测尿5-羟色胺、醛固酮等的尿防腐戊二醛用于尿沉淀物的固定和防腐
(二)质量控制
1.冷藏时间尿标本冷藏时间最好不超过6h
2.甲醛甲醛是一种还原性物质,可产生假阳性用量过大可与尿素产生沉淀,干扰显微镜检查
3.甲苯用量必须足够取样检验时,应插入穿过甲苯液层,吸取尿
4.麝香草酚用量过多时,可使尿蛋白加热乙酸法呈假阳性反应,干扰尿胆色素检出习题2体育运动员兴奋剂检查时尿标本适宜防腐剂为A.甲醛B.甲苯C.浓盐酸D.麝香草酚E.戊二醛[答疑编号500731060102]『正确答案』CUM心”H^ClBMMliai■1”■桢m tM■加tilt*mM»V IIItfti*W4UUlttUtlimM4*Bt tVKMUttqwomm*•W%
(3)抗A、B抗体0型人3血清中不仅有抗A、抗B抗体,还含有一种抗A、B抗体它与A型或B型红细胞都能凝集,但当用A或B型红细胞分别吸收时,不能将其分为特异的抗A和抗B它与两种红细胞反应的活性不能通过特异吸收来分离即使用A和B型红细胞反复吸收,它仍保持与A和B型红细胞都发生反应的活性所以,不可能在抗A和抗B的混合液中找到抗A、B具有的血清学活性这可能是0型血清中的抗A、B是一种直接针对A和B抗原的共同抗体结构
(二)AB0血型系统的亚型亚型是指属同一血型抗原,但抗原结构和性能或抗原位点数有一定差异AB0血型系统中以A亚型最多见,A亚型主要有A1和A2,占全部A型血的
99.9%,其他A亚型(A,、Ax、Av)为数少;作AB0血型鉴定时,应加型血清,以防对A亚型误定型B亚型(Bs、BM、BX)比A亚型少见,临床意义不大.LA
1、A2亚型基本特征A1亚型的红细胞上具有和A抗原,其血清中含有抗B抗体;A2亚型的红细胞上只有A抗原,其血清中除含抗B抗体外,还有少量抗A1抗体在直接凝集反应中,Ai、A2亚型两种红细胞的A1与A2抗原均能与抗A试剂发生凝集反应但抗A1不仅存在于A2亚型,在B型和0型人的血清中除含抗A外还有抗A,所以可以从B型人血清中获取抗A1试剂
2.A]、A2亚型的鉴定方法以抗4试剂可区别A
1、A血清,方法是
①可从B型人血清获取抗试剂,B型血清有抗A、抗其中抗A抗体能与A型红细胞的A、A2抗原凝集,如吸收抗A,就只剩下抗Ai
②鉴定Ai、A2亚型,凡与抗A1试剂发生凝集反应者为A”如果同时还与抗B凝集,则为AB型;不与抗4试剂凝集者,为A或AzB型
3.A]、A2亚型鉴定的意义目的是防止误定血型尽管我国A、AzB型在A与AB型中所占比例少于1%,但定型时易将弱A亚型误定为0型,如果给其输入0型血,不会有太大问题,但是如果把弱A亚型误定为0型,并输给0型人,则受血者的抗A抗体就可能与输入的弱A亚型的红细胞起反应,引起血管内溶血性输血反应因此,应避免将弱的A亚型定为0型,如Ax型红细胞与B型血清(抗A抗体)不发生凝集,但与0型血清可发生程度不一的凝集,这可能是因为0型血中抗A效价比B型血抗A效价高,故现做AB0血型鉴定时,应加0型血清(内含抗A、抗B及抗AB),以防将Ax型误定为型
(三)ABO血型鉴定1,原理常用盐水凝集法检测红细胞上存在的血型抗原,以及血清中存在的血型抗体,依据抗原抗体存在的情况判定血型常规的方法有
①正向定型用已知抗体的标准血清检查红细胞上未知的抗原
②反向定型:用已知血型的标准红细胞检查血清中未知的抗体结果判定凡红细胞出现凝集者为阳性,呈散在游离状态为阴性ABO血型定型原则见表1-5-2萌尊啊匚一JU IBM AH~blT31i4♦♦---H
2.鉴定方法
(1)生理盐水凝集法
①玻片法操作简单,适于大量标本检查,但反应时间长;被检查者如血清抗体效价低,则不易引起红细胞凝集,因此,不适于反向定型
②试管法由于离心作用可加速凝集反应,故反应时间短,而且,借助于离心力可以使红细胞接触紧密,促进凝集作用,适于急诊检查红细胞亚型抗原性弱,如抗A抗B标准血清效价低时,易造成漏检或误定如加用0型(抗A、B)血清和反向定型,可避免此类错误玻片法凝集结果判断红细胞呈均匀分布,无凝集颗粒,镜下红细胞分散在低倍镜下凝集程度强弱判断标准
①呈一片或几片凝块,仅有少数单个游离红细胞为(++++)
②呈数个大颗粒状凝块,有少数单个游离红细胞为(+++)
③数个小凝集颗粒和一部分微细凝集颗粒,游离红细胞约占1/2为(++)
④肉眼可见无数细沙状小凝集颗粒于镜下观察,每凝集团中有58个以上红细胞凝集为(+)
⑤可见数个红细胞凝集〜在一起,周围有很多的游离红细胞(±)
⑥可见极少数红细胞凝集,而大多数红细胞仍呈分散分布为混合凝集外观
⑦镜下未见细胞凝集,红细胞均匀分布为(-)
(2)凝胶微柱法是红细胞抗原与相应抗体在凝胶微柱介质中发生凝集反应的免疫学方法血型抗体为单克隆抗体,加入试剂、标本,用专用离心机离心后可直接用肉眼观察结果或用血型仪分析此法操作标准化,定量加样,确保结果准确性3,抗A、抗B和抗AB标准血清标准准血清均采自健康人,并应符合下述条件
①特异性只能与相应的红细胞抗原发生凝集,无非特异性凝集
②效价我国标准抗A和抗B血清效价均在1128以上
③亲和力我国标准要求抗A对A
1、A及A B22发生反应开始出现凝集的时间分别是15s、30s和45s;抗B对B型红细胞开始出现凝集的时间为15s凝集强度为3min时,凝块不小于1川卡
④冷凝集素效价在14以下
⑤无菌
⑥灭活补体
4.血型鉴定操作时注意事项一般注意事项
①所用器材必须干燥清洁、防止溶血,凝集和溶血的意义一样为避免交叉污染,建议使用一次性器材标准血清从冰箱取出后,应待其平衡至室温后再用,用毕后应尽快放回冰箱保存
②加试剂顺序一般先加血清,然后再加红细胞悬液,以便核实是否漏加血清
③虽然IgM抗A和抗B与相应红细胞的反应温度以4c最强,但为了防止冷凝集现象干扰,一般在室温20℃24c内进行试验,而37℃条件,可使反应〜减弱
④幼儿红细胞抗原未发育完全、老年体弱者抗原性较弱,最好采用试管法鉴定血型
⑤玻片法反应时间不能少于lOmin,否则较弱凝集不能出现,造成假阴性
⑥正、反定型结果一致才可发报告
⑦反定型法先天性免疫球蛋白缺陷,长期大量应用免疫抑制,血型抗体可减弱或消失;血清中存在自身免疫性抗体、冷凝集素效价增高、多发性骨髓瘤、免疫球蛋白异常均可造成反定型困难;新生儿体内可存在母亲输送的血型抗体,且自身血型抗体效价又低,因而出生6个月以内的婴儿不宜做反定型老年人血清中抗体水平大幅度下降或被检者血清中缺乏抗A及(或)抗B抗体,可引起假阴性或血型鉴定错误
(四)交叉配血法最重要的是ABO血型配合必须在ABO血型相同,且交叉配血无凝集时才能输血
1.目的检查受血者与供血者是否存在血型抗原与抗体不合的情况
2.原则主侧加受血者血清与供血者红细胞;次侧加受血者红细胞与供血者血清,观察两者是否出现凝集
3.方法1盐水配血法简便快速主要缺点是只能检出不相配合的完全抗体,而不能检出不完全抗体2抗球蛋白法配血法又称Coombs试验是最可靠的确定不完全抗体的方法,但操作繁琐抗球蛋白法配血法是最早用于检查不完全抗体的方法直接抗球蛋白法可检查受检者红细胞是否已被不完全抗体致敏;间接抗球蛋白法可用于鉴定Rh血型及血清中是否存在不完全抗体本法虽较灵敏,但也有一定限度,且操作复杂,不利于急诊检查和血库的大批量工作试剂抗球蛋白试剂盒包括抗广谱、抗C
3、抗IgG3种试剂阳性对照IgG型抗D致敏5%RhD阳性红细胞生理盐水悬液阴性对照正常人5%红细胞生理盐水悬液注意事项
①标本采集后应立即进行试验,延迟试验或中途停止可使抗体从细胞上丢失
②抗人球蛋白血清应按说明书最适稀释度使用,否则可产生前带或后带现象而误为阴性结果
③阴性对照凝集可能是抗人球蛋白血清处理不当,仍有残存的种属抗体,或被细菌污染,应更换血清重做试验核实阴性结果方法在该试管中加1滴IgG致敏红细胞,如结果为阳性,则表示试管内的抗球蛋白血清未被消耗,阴性结果可靠
④阳性对照不凝集可能是抗人球蛋白血清或用于致敏红细胞的不完全抗D血清失效,或红细胞未洗净带人球蛋白所致,应更换血清或洗净红细胞后重做
⑤如需了解体内致敏红细胞的免疫球蛋白的类型,则可分别以抗IgG、抗IgM或抗C3单价抗球蛋白血清进行试验3聚凝胺法配血法可以检出IgM与IgG两种性质的抗体,能发现可引起溶血性输血反应的几乎所有规则与不规则抗体,故本法已逐渐推广使用配血原理聚凝胶分子是带有高价阳离子多聚季镀盐,溶解后带有很多正电荷可以中和红细胞表面负电荷,有利于红细胞凝集,低离子强度溶液也能减低红细胞的Zeta电位,可进一步增加抗原抗体间的吸引力当血清中存在IgM或IgG类血型抗体时,与红细胞发生紧密结合,此时加入枸椽酸盐解聚液以消除聚凝胶的正电荷,使IgM或IgG类血型抗体与红细胞产生凝集不会散开如血清中不存在IgM或IgG类血型抗体,加入解聚液可使非特异性凝集消失4凝胶配血法又称微管板凝胶抗球蛋白试验,此法在凝胶中进行,保持了传统抗球蛋白试验的准确、具有简便、可靠的特点,全自动血型分析仪进行交叉配血,也是利用凝胶配血其他可检出不完全抗体的方法有蛋白酶法、胶体介质法等卡式配血/血型鉴定检测法已成为国际安全输血检查的推荐方法
4.质量控制1血液标本交叉配血的血液标本,受血者标本应为新鲜血,供血者标本应为血袋两端刚剪下小管中的血液2选用方法用试管法做交叉配血3溶血现象配血管出现溶血现象,为配血不合五AB0血型鉴定及交叉配血中常见错误
1.分型血清方面的原因1自制分型血清抗体效价太低、亲和力不强,造成定型不准确2患者纤维蛋白原增高或为异常蛋白血症如多发性骨髓瘤,巨球蛋白血症等,可产生缗线状假凝集新生儿脐血中含有华顿胶或操作中使用了质量差的玻璃管瓶,误认其脱下的胶状硅酸盐为串钱状凝集3患者输入了高分子血浆代用品或静脉注射造影剂等药物可引起红细胞聚集,易误认为凝集
(4)血清中可能存在的不规则抗体如A和AzB型患者血清内有抗A1抗体,能凝集红细胞此外还有抗I抗体等有些癌症患者(如胃癌、胰腺癌等)血中含有大量可溶性A或B物质,这些物质可中和抗血清的抗体,从而抑制反应造成假性不凝集克服的办法是红细胞先洗涤后再试验.
(5)婴儿尚未产生自己的抗体或有从母亲获得的血型抗体新生儿不宜用血清作反定型
(6)老年人血型抗体水平下降某些免疫缺陷的人或慢性淋巴细胞白血病,遗传性无丙种球蛋白血症以及有些用了免疫抑制剂的患者,由于免疫球蛋白下降,血型抗体也下降甚至缺如可出现反向定型错误
2.红细胞方面的原因
(1)用近期内输过血的患者血液做对照红细胞此时,患者血液红细胞为混合型细胞
(2)患者红细胞被大量抗体包被例如某些自身免疫疾病或新生儿溶血病患者的红细胞,或红细胞悬浮于高浓度蛋白的介质中,红细胞都会自发地发生凝集
(3)红细胞膜有遗传性或获得性异常
(4)抗原变异A或B的弱抗原易判为不凝集(假阴性),而由细菌引起的获得性类B抗原易误判为阳性有些细菌含有乙酰基酶,能使特异性A型物质末端的N-乙酰氨基半乳糖水解成半乳糖,从而使A型获得类B抗原后易误定为AB型由于患白血病或某些恶性肿瘤使A或B抗原变弱婴儿及老年人的红细胞抗原也较青壮年为弱
(5)血清中有高浓度血型物质当用血清配制红细胞悬液时,血型物质则会中和分型血清中的抗体,而不再与红细胞抗原起反应
(6)红细胞被细菌污染细菌的酶消化了红细胞表面的唾液酸,暴露了人人都有的T抗原,被具有抗T活性的IgM凝集
(7)嵌合体现象混合细胞群见于异卵双生子如,有98%型红细胞,2%B型红细胞会定为型,但血清中只有抗A抗体3•操作方面的原因是最常见原因
(1)操作器材玻璃器皿不洁或使用了严重污染的血清、红细胞,可出现假阳性试管污染洗涤剂会造成假阴性
(2)红细胞与血清比例和离心红细胞与血清比例不当、过度离心或离心不足可引起假阳性或假阴性
(3)溶血现象误认为溶血现象为阴性结果
(4)试验温度温度过高会造成假阴性ABO血型系统的IgM抗体最适温度为4℃22℃,如达37℃凝〜集力即下降
(5)信息记录差错标本、试剂、标签、加样弄错,或出现记录错误大批标本检查时搞错标本号,张冠李戴最易造成错误
(六)ABO血型系统主要临床意义L输血是治疗与抢救生命的重要措施输血前必须检查血型,选择血型相同的供血者,进行交叉配血,结果完全相合才能输血
2.新生儿溶血病母婴ABO血型不合引起的新生儿溶血病(常为第1胎溶血),主要依靠血型血清学检查作出诊断
3.器官移植受者与供者必须ABO血型相符才能移植第二节红细胞Rh血型系统检查本节考点
(1)Rh系统的命名
(2)Rh的抗原与抗体
(3)Rh系统血型鉴定4交叉配血法5质量控制6Rh血型系统临床意义Rh血型系统是红细胞血型中最复杂的系统,其临床的重要性仅次于ABO血型系统-Rh系统的命名
1.起源1940年,Landsteiner和Wiener发现用恒河猴的红细胞免疫家兔所得抗血清能与约85%白种人红细胞发生凝集反应,认为这些人红细胞含有与恒河猴红细胞相同的抗原,即命名为Rh抗原但Levine与Stetson却从一名新生儿溶血病胎儿的妇女血清中发现了与这种抗原反应的抗体虽然,Landsteiner用动物血清鉴别的抗原和Levine用人抗体确定的抗原仍不完全相同,但因为Rh这个术语已普遍采用,故一直沿用至今因此,把Landsteiner用动物血清鉴别的那种抗原命名为LW抗原但目前,普遍用采自人体的血清抗体,而不用免疫动物得到的抗体
2.Rh系统的命名及遗传有Fisher-Race、Wiener、Rosenfield3种命名法Fish-er-Race命名法又称CDE命名法,这种学说认为Rh遗传基因位于第1号染色体的短臂上,Rh血型有3个紧密相连的基因位点,每一位点有一对等位基因D和d,C和c、E和e,这3个基因是以一个复合体形式遗传3个连锁基因可有8种基因组合,即CDe、cDE、cDe、CDE、Cde、cdE、cde和CdE,两条染色体上的8种基因组合可形成36种遗传型Rh抗原命名为C、D、E、c、d、e,虽从未发现过d抗原及抗d活性,但仍保留“d”,符号,以相对于D因此,Rh抗原只有5种,有相应5种抗血清,可查出18种Rh表现型临床上,习惯将有D抗原者称Rh阳性,而将虽有其他Rh抗原而无D抗原者称为Rh阴性D阴性人中最常见的基因型为cde/cde二Rh的抗原与抗体LRh系统抗原Rh抗原已发现40多种Rh抗原,与临床关系最密切的5种为D、E、C、c、e,这5种抗原中D的抗原性最强,对临床更为重要N弱D为一组弱D抗原尽管产的抗原性较D为弱,但仍是Rh阳性细胞,所以将D11血输给Rh阴性受血者时,仍有引起产生抗D的可能性,因此应将y型供血者做Rh阳性处理,而DL型受血者归入Rh阴性则较为安全如果把状血输给有抗D者,也可以产生严重的溶血性输血反应-D--D-/-D-遗传基因型红细胞只有D抗原,而缺乏C、c、E、e抗原此型能与抗D抗体在盐水中凝集
2.Rh系统抗体Rh抗体中,除偶尔可见天然的抗E、抗CW抗体外,其余各种Rh抗原的抗体多系输血或妊娠时,由外来红细胞免疫刺激后产生这些抗体均为IgG,但在免疫应答的早期,也可有IgM成分D抗原是非AB0红细胞抗原中免疫性最强的抗原,可以引起抗D的产生,抗D与D红细胞产生严重的溶血反应习惯将D阴性者认为是Rh阴性,多不再进行其他Rh抗原检测,除D抗原外,通常抗E和抗c比较多见抗CW及抗其他Rh抗原的抗体偶尔也可引起迟发性溶血性输血反应或新生儿溶血病三Rh系统血型鉴定红细胞Rh表型可用特殊的具有抗D、C、c、E和e抗血清检测来鉴定虽然Rh血型系统中有许多种抗原,但常规只用抗D血清检查有无D抗原当有特殊需要如家系调查、父权鉴定、配血不合等情况时才需用抗C、抗c、抗E、抗e等标准血清做全部表型测定Rh抗体属IgG,不能在盐水介质中与红细胞发生凝集,因此必须采用以下几种鉴定方法1,低离子强度盐水试验可提高抗D抗体与D阳性红细胞结合率,并提高其灵敏度
2.酶介质法木瓜酶或菠萝酶可以破坏红细胞表面的唾液酸,使红细胞膜失去电荷,缩小红细胞间的距离;同时酶还可以部分地改变红细胞表面结构,使某些隐蔽的抗原得以暴露,增强凝集性;且对IgG的作用大于IgM,故有利于检出不完全抗体
(1)试剂IgG型抗D标准血清、1%木瓜酶(或菠萝蛋白酶)溶液、5%D阳性红细胞生理盐水悬液、5%D阴性红细胞生理盐水悬液
(2)注意事项
①Rh血型系统的抗体多由获得性免疫产生,血清中很少有天然抗体,故不需要做反定型
②对照酶易失活,故每次试验都要设置阳性对照若阳性对照不出现凝集,表明酶或抗血清已经失效酶活性过强出现假阳性结果,因而要设立阴性对照,以排除假阳性只有在阳性对照管出现凝集而阴性对照管不凝集的情况下,才说明被检管的结果是可靠的
③结果阴性说明被检红细胞上无相应抗原,但由于IV抗原性弱,因此,如被检者无凝集,还应进一步检查以排除什的可能
(四)交叉配血法Rh血型系统的交叉配血的原则与ABO血型系统的交叉配血相同由于此系统的抗体为不完全抗体,故应选用酶介质法、抗球蛋白法或聚凝胺法等
(五)质量控制
1.严格设定试剂和抗原阳性和阴性对照系统
2.严格控制反应条件试验介质、浓度、温度、离心、反应时间等条件
3.受检者红细胞必须洗涤干净,以免血清蛋白中和抗球蛋白,出现假阴性
(六)Rh血型系统临床意义抗Rh抗体主要通过输血或妊娠免疫而产生,较大量的Rh阳性(D抗原阳性)细胞进入Rh阴性者体内后,25个月内血浆中可测到抗体,如经再次免疫,3周内抗体浓度可达高峰〜受血者或孕妇血浆中含有Rh抗体时,当再与含相应抗原血液相遇,将引起严重输血反应或新生儿溶血病(常为第2胎溶血)因此Rh抗体具有十分重要的临床意义第三节新生儿溶血病检查本节考点
(1)新生儿溶血病的发病机制与临床表现
(2)新生儿溶血病实验室检查及诊断依据
(一)新生儿溶血病的发病机制与临床表现
1.发病机制新生儿溶血病(HDN)主要原因为母婴血型不合,孕母体内IgG类血型抗体通过胎盘进入胎儿体内,胎儿红细胞被母亲的同种抗体包被,这种抗体是针对胎儿红细胞上父源性的抗原被包被的红细胞在分娩前后加速破坏,发生溶血,造成胎儿发生以溶血为主要损害的一种被动免疫性疾病
2.临床表现主要表现为
①贫血正常新生儿血红蛋白为180220g/L,此时病儿的血红蛋白多低于180g/L,甚至低于〜120g/L
②高胆红素血症由于溶血后产生大量胆红素,浓度可达255u mol/L340u mol/L,超过340nmol/L〜可疑存在核黄疸,血清中未结合胆红素增高患儿皮肤严重黄染
③肝脾肿大由于贫血使器官组织缺氧,导致代偿性肝脾肿大
④组织水肿
⑤肌张力减低,各器官功能障碍等本病的血型抗体以抗A,抗B,抗A、B,抗D等为多见,病情程度从重到轻依次为抗D抗体、Rh系统其他抗体、ABO血型抗体
(二)新生儿溶血病实验室检查及诊断依据HDN的诊断除应注意产妇的妊娠史,分娩史、输血史及健在子女的血型和健康状况外,无论对诊断与治疗实验室诊断都是非常重要的
3.确诊患婴的依据
(1)红细胞直接抗球蛋白试验阳性从患儿红细胞上直接查到了被吸附的抗体,证明红细胞已经受累本试验为直接证据2从红细胞上释放了具有血型特异性的抗体
①用热释放法检查ABO血型不合婴儿的红细胞是否释放了抗A,抗B,抗A、B抗体或ABO血型系统以外的抗体
②用乙酸释放法检查Rh血型不合的婴儿红细胞是否释放了抗D、抗C或抗E抗体本试验也为直接证据3血清中存在与患婴红细胞上抗原相对应的游离抗体
4.辅助诊断依据1高胆红素血症出生时脐血胆红素超过
85.8umol/L50mg/L,24h血清胆红素超过
102.6u mol/L60mg/L,且以未结合胆红素为主2孕母血清内查到与胎儿红细胞不相合的完全抗体
5.产前试验如怀疑有HDN可能时,最好在产前开始检查,以期及早诊断及采取适当的预防与治疗措施1血清学检查首先要对孕妇做ABO血型系统及Rh系统的D抗原检查及不规则抗体筛选,所有筛选出阳性抗体都要区别是IgG或IgM,并应进一步做抗体鉴定分析,以确定是否会引起HDN因为抗体的存在并不一定都会发生IIDNo2羊水分析有必要时,并且在有条件的情况下可以做子宫穿刺抽取羊水进行分析,检查胎儿血型物质,确定胎儿血型在450nm处测定胆红素含量的吸光度值,吸光度值越高表示宫内溶血越严重第四节自动化血型分析仪本节考点1原理2主要用途3检测特点4质量控制一原理L凝胶微柱法在凝胶微柱介质中,红细胞抗原与相应抗体结合,经低速离心凝集的红细胞悬浮于凝胶中,未和抗体结合的红细胞则沉于凝胶底部
2.玻璃柱法微柱中装有细小的玻璃柱,利用离心力将凝集的红细胞阻于微柱的上端,未凝集的红细胞通过微柱间的缝隙到达微柱的底部二主要用途AB0血型鉴定、Rh血型鉴定、交叉配血、抗体筛检,抗体鉴别三检测特点主要有
①操作;规范、标准和简便、省时、安全
②灵敏度高、准确性好
③结果直观稳定、可靠清晰、易于保存
④数据可电脑管理四质量控制
1.标本应及时检测,否则应贮存于2c8C,并在规定的时间内检测标本溶血出现假阴性标本存在纤〜维蛋白或凝块、蛋白量异常或有自身抗体出现假阳性
2.试剂应保存于2℃25℃,不能冷冻微柱破裂和产生气泡出现假阳性〜
3.操作器材污染可出现假阳性加样必须准确,使用3%5%红细胞悬液〜第五节人类白细胞抗原检查本节考点:1HLA抗原和抗体2HLA分型方法3HLA检测临床意义人类白细胞上有3类抗原红细胞血型抗原、白细胞特有抗原、与其他组织共有但也是最强的人类白细胞抗原HLA一HLA抗原和抗体L抗原HLA是糖蛋白抗原,又称组织相容性抗原、移植抗原和组织抗原HLA由一系列紧密连锁的基因编码,这些基因称为组织相容性复合物MHC,也称为HLA基因,定位在第6号染色体短臂上,共有6个座位,至少含4个与移植有关的基因区即HLA-A,HLA-B,HLA-C和HLA-D HLA-D又分为HLA-DR.HLA-DQ HLA-DPO亚区HLA-A、HLA-B、HLA-C基因编码的抗原称I类抗原HLA-DR、HLA-DQ、HLA-DP基因编码的抗原称H类抗原HLA也存在于其他许多组织细胞上,是调控人体特异性免疫应答和决定疾病易感性个体差异的主要基因系统,在破坏表达外来抗原的靶细胞方面有重要作用,通过HLA配型能提高移植物的存活率;HLA已用于有关疾病及人类遗传学的研究,也有助于提高成分输血的疗效及防止输血反应
2.HLA抗体:大部分是IgG、少数是IgM二HLA分型方法
1.淋巴细胞毒试验为HLA抗原分型常用方法原理淋巴细胞膜上的HLA抗原与相应抗体结合后,在补体作用下,细胞膜损伤,细胞溶解破裂被染色,计算显微镜下观察着色细胞的百分率20%为阳性反应I类抗原分型时可用T淋巴细胞或外周血淋巴细胞;进行H类抗原分型时需用B淋巴细胞
2.混合淋巴细胞培养试验多用于组织相容性方面的研究,临床上主要用于器官移植
3.分子生物学技术一类是PCR为基础的基因分型,一类是以测序为基础的基因分型三HLA检测临床意义
1.器官移植HLA配型的作用为
①在肾移植中,供受双方共有的DR抗原越多,或已检出的DR错配抗原数越少,移植存活率就越高
②在移植前输血的患者中,DR配型能提高存活率
③骨髓移植前不宜输血,以防受体被免疫心、肝、肺等器官的移植,多用于生命垂危的患者,主要要求AB0血型相同2,输血成分输血疗法时,如HLA同型血液,则能提高疗效临床输血的发热反应中,有些是由HLA抗体引起,尤其是多次输血的患者,HLA抗体可以破坏白细胞,为避免HLA引起输血反应,可在输血前做交叉淋巴细胞毒试验在70%的非溶血性输血反应是发热反应,一般认为是白细胞被HLA抗体破坏后释放致热原物质所致可先将白细胞过滤后再输血
3.亲子鉴定由于HLA系统的高度多态性,使HLA成为亲子鉴定中的一个有力工具,具有重要法医学意义
4.疾病诊断发现许多疾病与HLA有关,例如强直性脊椎炎患者91%带有B27抗原,而正常人带B27抗原者只占
6.6%但目前大多数疾病的HLA分型意义有限第六节血小板血型系统检查本节考点1血小板抗原2血小板抗体3检测方法4临床意义一血小板抗原血小板表面有2类抗原一类是为非特异性抗原或血小板相关抗原,与AB0血型系统和HLA有关,另。
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