临床检验基础精液检查

第十四章精液检查本章考点.概述

1.标本采集

2.理学检查

3.化学检查

4.显微镜检查

5.免疫学检查

6.微生物学检查

7.精子功能检查

8.计算机辅助精子分析9精液检查的质量控制

10.

一、概述（-）精液的组成精液主要由精子和精浆部分组成精子产生于睾丸，在附睾内发育成熟，是男性的生殖细胞，约占精液的其余为精浆精浆是男性附性腺分泌的混合液，是运送精子的载体，也是营养精子、激发精子活力的5%,95%重要物质精液中含有大量维持精子生命活动的物质，如果糖、酸性磷酸酶、-核甘酸酶、精胺、无机盐等（锌、5镁、钙、铜、铁、钾、钠等）及其他各种具有催化作用的酶等止匕外，精液中尚含有少量白细胞、生殖道脱落的上皮细胞等

（二）精液检查的主要目的评估男性生育功能，提供不育症诊断和疗效观察的依据

1..辅助诊断男性生殖系统疾病

2.输精管结扎术疗效观察

3.计划生育科研

4.为体外授精和精子库筛选优质精子

5.法医学鉴定6

二、标本采集

（一）标本采集采集标本前应禁欲天、采前排净尿液；将一次射出的全部精液直接排入洁净、干燥的容器内（不能用3〜5乳胶避孕套）采集微生物培养标本须无菌操作送检时间不超过由

（二）标本运送精液采集后应立即保温送检（＜）温度低于或高于影响精子活动lh o20℃40℃

（三）标本采集次数一般应间隔周检查一次连续检查次1〜22〜3

三、理学检查

（一）精液的外观和气味正常人刚射出的精液一般为微混浊的灰白色，有一股腥味，自行液化后为半透明的乳白色，久未射精者的精液可略显浅黄色红色或酱油色见于前列腺和精囊腺炎症、结核、肿瘤或结石；黄色脓性精液见于前列腺炎或精囊炎

（二）精液量通常用规格为刻度吸管测定精液全量正常男性一次排精量为平均精液量少于10ml2〜6ml,

3.5ml1ml或大于即可视为异常，不利于生育8mL

（三）精液液化时间指新排出的精液由胶冻状转变为自由流动状态所需的时间室温下正常精液在排出后内自行液化30min刚离体的精液由于精囊腺分泌的凝固蛋白作用而呈稠厚的胶冻状，在前列腺分泌的蛋白分解酶作用下逐渐液化室温下正常精液在排钳后内自行液化,若超过仍未液化,则称为精液迟缓液化症前列腺炎时，可30min60min引起蛋白酶缺乏，导致液化时间延长，甚至不液化，抑制精子活动力，从而减少受孕机会检测方法常用吸管法，即刚排出的精液较为稠厚，一般难以吸入吸管，置水浴中，每检查一37c5min次，直至液化，记录凝固精液至完全液化的时间

（四）精液粘稠度系指完全液化后的粘度粘稠度增加的精液常伴有不液化，影响精子活力，致使精子穿透障碍；粘稠度下降，见于先天性无精囊腺及精子浓度太低或无精子症检测方法

1.直接玻棒法将玻棒插入精液标本，提棒时可拉起粘丝，正常精液粘丝长度不超过粘稠度增加时，2cm精液悬滴可形成长于的长丝2cm,粘度计法测定精液通过粘度计所需的时间即为精液粘稠度

20.5ml

（五）精液酸碱度（）pH用精密试带或酸度计在射精后内测定正常精液为伴少精症，常反映输精管pH lhpH

7.2〜

7.8,pH

7.0,道阻塞、先天生精囊缺如或附睾病变；常见于急性前列腺炎、精囊炎或附睾炎pH

7.8

四、化学检查

（一）精浆果糖测定

2.测定方法及评价

①间苯二酚比色法（国内常用）

9.11~

17.67mmol/L；

②咏朵显色法习311moi/1次射精，本法为WHO推荐方法

3.临床意义4先天性精囊腺缺如，果糖为阴性

②精囊腺炎时，果糖含量减低

③在无精症和射精量少于者,若1ml精浆中无果糖为精囊阻塞；有果糖，则为射精管阻塞

（二）精浆葡糖甘酶测定a-.测定方法及评价1比色法可测定精浆中-葡糖甘酶的活性葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖的生成量，反映葡糖甘酶的活性a a-国内临床上较为常用.临床意义精浆葡糖甘酶活性在一定程度上可反映附睾的功能状态对某些与附睾有关的不育症,如2a-阻塞性无精子症，葡糖甘酶活性下降，具有肯定性诊断价值；对鉴别输精管阻塞病变所致与睾丸生精障碍所a-致的无精子症具有一定意义

（三）精浆乳酸脱氢酶同工酶（）测定-X LD-X,测定方法及评价的电泳位置在之间其活性测定多采用聚丙烯酰胺凝胶电泳、酶联染1LD-X LD3-LD4色及光度计扫描法，求得其相对百分率国内临床上较为常用.参考值相对活性3LD-X N

42.6%.临床意义精子发生缺陷时无形成少精或无精者可致活性减低，精液常规检查正常的不4LD-X LD-X育患者，也可因活性下降而引起不育LD-X

（四）精浆酸性磷酸酶测定（ACP）参考值:（速率法）；＞次射精（供硝基酚法）L80-1000U/ml200U/

1.临床意义前列腺炎时活性减低；前列腺癌和前列腺肥大时，活性增高2ACP ACP

五、显微镜检查

（一）涂片检查精液液化后，取滴混匀的精液置于载玻片上，通常在低倍镜下粗略观察有无精子，是活动精子还是不活1动精子若遇无精子症，应将标本在下离心后取沉淀物重复检查600g15min

（二）检测指标精子活动率是对精子活力的定性检查

1.（）检测方法取液化均匀的精液滴置载玻片上，加盖玻片放置片刻，在高倍镜下观察个精子,计11100数活动精子与不活动精了的比例即为精了的活动率（）参考值正常人精液在排精内，精子活动率应230〜60min60%,精子存活率是对精子存活率的观察2（）检测方法取液化均匀的精液滴置载玻片上，加等量染色液（伊红、台盼蓝等）混匀，放置片11Y刻，推成薄片，在高倍镜下观察计数个精子中不着色的精子与着色精了的比例即为精广的存活率一般精100子死亡后，细胞膜的完整性受损，失去屏障功能，易于着色

（2）参考值有生育力男性精子存活率应N75%.精子活动力指精子向前运动的能力，是直接反映精子质量的一项指标3（）检测方法取液化均匀的精液滴置载玻片上，盖上盖玻片，放置片刻，在高倍镜下观察个视115〜10野，计数个精子并进行活动力分级，以百分率表示100

（2）结果判断WHO建议将精子活动力分为4级a.快速前向运动（III级直线运动）；b.慢或呆滞的前向运动（H级运动缓慢）；c.非前向运动I级原地运动；d.不动（0级不活动）

（3）参考值WHO规定正常生育者精子活动力射精后60min内，a级精子应＞25%；或a和b级精子的总和〉50%

（4）临床意义精子活动率减低，精子存活率减低，级、I级精子40%以上，见于精索静脉曲张，泌尿生殖系感染如前列腺炎等及使用某些药物如抗疟药，雌激素等

（三）精子计数是指单位体积中的精子数，即精子浓度精子计数乘以次射精量，即次射精的精子总数测定方法11及评价粗略估计法取液化均匀的精液滴置载玻片上，盖上盖玻片，放置片刻，在高倍镜下观察个视野，

1.15取每个视野的精孑平均数即为大概精子数该法操作简便，但只能作粗略估计Xi t•精确计数法

①血细胞计数板计数只能用于精子数量的观察，不能同时进行精子活动率和活动度、运2动轨迹和速度等的检查等

②Makler精子计数板它的特点是简便、快速，精液不需要稀释，一次加样不但可计数精子密度，还可分析精子的活动力和活动率

③计算机辅助精液分析（CASA）系统是利用图像和计算机视屏技术来进行精子计数，利用计数精子简单、快速，但易受精液中细胞成分和非精子颗粒物质的影响CASA

3.参考值精子总数N40xi（）6/次，精子浓度精子浓度N20X1（）9/L.临床意义精子数量减低可见于精索静脉曲张，先天性或后天性睾丸疾病，如睾丸畸形、萎缩、结核、4淋病、炎症等，输精管或精囊缺如，重金属损害，如铅、镉中毒或放射性损害，某些药物，如抗癌药等或长期服用棉酚和岁以上男性精子数逐年减少50

（四）精子形态检查.检测方法及评价1（）涂片染色检查将精液涂成薄片、干燥、固定后进行染色，或不固定直接进行瑞-吉染色，油1H-E镜下计数个精子，报告正常或异常精子的百分率本法不需特殊设备，目前临床上多用此法进行精子形态200观察（）相差显微镜检查用相差显微镜（）直接对新鲜精液湿片观察本法操作较简单，但需特殊设2600x备，目前在临床上开展较少,精子形态2

（1）正常形态正常精子形似蝌蚪状，由头、体（颈、中段）、尾三部分构成头部正面呈卵圆形，侧面呈扁平梨形；体部轮廓直而规则，长约5〜7/pm,宽l|im；尾部细长，一般长约50〜60|im

（2）异常形态

①头部异常包括大头、小头、锥形头、梨形头、无定形头等

②体部异常主要指肿胀和不规则

③尾部异常包括短尾、多尾、发夹状尾及断尾等（）临床意义正常精液中的异常精子应＜超过即会影响到精液质量，超过常可导致不320%40%50%育感染、外伤、高温、放射线、酒精中毒、药物和精索静脉曲张均可使畸形精子数量增加

（五）其他细胞.未成熟生殖细胞是指各阶段发育不完全的生精细胞，包括精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞及1发育不全的精子细胞参考值未成熟生精细胞＜临床意义正常人成熟精细胞＞在病理状况下，当1%o99%,曲细精管受损（如药物或其他因素），精液中可出现较多的未成熟生精细胞.红细胞、白细胞、上皮细胞2（）红细胞（偶见）和白细胞正常＜在生殖道炎症、结核、恶性肿瘤时，精液中红、白细胞数15/HP可增高

（2）上皮细胞正常偶尔可见前列腺上皮细胞，增多见于前列腺增生.癌细胞精液中查见癌细胞对生殖系恶性肿瘤的诊断将提供重要依据3

六、免疫学检查抗精子抗体

1.混合抗免疫球蛋白试验（MAR）用混匀的未加处理的新鲜精液，与包被IgG的胶乳粒或绵羊红细胞混合，再加入特异的单克隆抗抗血清若胶乳粒和活动精子之间形成混合凝集即表示精子表面存在抗IgG IgG体o

（1）参考值阴性

（2）临床意义N50%的精子与颗粒粘附，可能为免疫性不育；10%〜50%的精子与颗粒粘附，可疑为免疫性不育.免疫珠试验免疫珠是免抗人免疫球蛋白与聚丙烯酰胺通过共价结合的一种微球，此试验可同时检测

2、、类型的抗体IgG IgAIgM（）参考值免疫珠粘附率＜120%

（2）临床意义粘附率N20%为免疫珠粘附为阳性，但此时，精子在宫颈粘液中的穿透和体内受精无明显受损倾向；粘附率有临床意义N50%

3.精子凝集试验（SAT）血清、生殖道分泌物中存在的AsAb与精子膜上抗原相结合，精子可出现各种各样的凝集现象，如头-头，头-尾，尾-尾凝集（）参考值阴性1（）临床意义阳性结果提示血清、生殖道分泌物中存在2AsAb

七、微生物学检查男性生殖道任何部位感染均可从精液中检出微生物常见的有金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、淋球菌、支原体、衣原体等精液的微生物学检查应在常规消毒的条件下，以手淫法采集精液于无菌容器内，常规涂片进行革兰染色，亦可于液化后作细菌培养精液中淋球菌、衣原体等检查方法见阴道分泌物检查37℃30min

八、精子功能检查精子低渗肿胀试验（HOS）.检测方法将精子置入低渗溶液中，由于渗透压改变，精子为维持内外体液间的平衡，水分可通过精子1膜进入精子，由于精子尾部的膜更柔软、疏松，所以尾部可肿胀/弯曲用相差显微镜观察，计算个100〜200精子中出现肿胀的百分率.结果判断型，未出现肿胀；型，尾尖肿胀；型，尾尖弯曲肿胀；型，尾尖肿胀伴弯曲肿胀；型，2a bc de尾弯曲肿胀；型，尾粗短肿胀；型，全尾部肿胀f g,参考值型肿胀精子率3g50%.临床意义精子尾部低渗肿胀试验可作为体外精子膜功能及完整性的评估指标，预测精子潜在的受精能4力有研究表明，不育症的精子尾部肿胀率明显减低

九、计算机辅助精子分析

（一）概述计算机辅助精子分析（CASA）是利用计算机视屏技术，通过一台与显微镜相连接的录像机，确定和跟踪个体精子细胞的活动和计算精子活动的一系列“运动学”参数对精液既可定量分析精子总数、活动力、CASA活动率，又可分析精子运动速度和运动轨迹特征，所有参数均按规定的标准设定，在分析精子运动能力WHO方面显示了其独特的优越性在进行时，加精液标本于专门的载玻片上，然后加张规格为CASA7|J1特制的盖玻片；也可使用特殊的精子计数板22mmx22mm

（二）精子运动速度和运动轨迹特征CASA主要参数有

①轨迹速度（VCL）也称曲线速度，即精子头部沿其实际行走曲线的运动速度

②平均路径速度（VAP）精子头沿其空间平均轨迹的运动速度，这种平均轨迹是计算机将精子运动的实际轨迹平均后计算出来的，可因不同型号的仪器而有所改变

③直线运动速度（VSL）也称前向运动速度，即精子头部直线移动距离的速度

④直线性（LIN）也称线性度，为精子运动曲线的直线分离度，即VSL/VCLo

⑤精子侧摆幅度（ALH）精子头实际运动轨迹对平均路径的侧摆幅度，可以是平均值，也可以是最大值不同型号的CASA系统由于计算方法不一致，因此相互之间不可直接比较

⑥前向性（STR）也称直线性，计算公式为VSL/VAP,亦即精子运动平均路径的直线分离度

⑦摆动性（WOB）精子头沿其实际运动轨迹的空间平均路径摆动的尺度，计算公式为VAP/VCL

⑧鞭打频率（BCF）也称摆动频率，即精子头部跨越其平均路径的频率

⑨平均移动角度（MAD）精子头部沿其运动轨迹瞬间转折角度的时间平均值⑩运动精子密度每毫升精液中的精子数VAPOpim/s

十、精液检查的质量控制.标本处理要规范标本收到后，应立即放入水浴中保温观察精液的液化时间和粘稠度注意标木的137℃正确收集.避免交叉污染用于吸取标本吸管和测量精液量的刻度试管，应一人一管，避免吸管、试管等的交叉污2染.尽可能用标准化检测方法精液检查的项目较多，方法的标准化是结果准确的可靠保证尽可能保证在3同一实验室或同一地区，检查的项目、方法和结果判断一致.注意安全防护由于精液标本的特殊性，试验操作者应做好安全防护，防止被精液污染所造成的意外伤4害用过的精液标本应用火烧毁，也可将其浸入甲酚皂溶液中或过氧乙酸中后倒掉5%24h

0.1%12h第十五章前列腺液检查本章考点.标本采集

1.理学检查

2.显微镜检查3前列腺液是精液的重要组成部分，约占精液的前列腺液检查主要用于前列腺炎、结石、肿瘤和前列30%腺肥大的诊断及疗效观察，也可用于性传播性疾病检查

一、标本采集标本一般由临床医师行前列腺按摩术采集标本量少时可直接滴在载玻片上，量多时收集在洁净干燥的小试管内，立即送实验室并及时进行检查如需做细菌培养，需无菌操作，用无菌容器收集标本疑为前列腺结核、脓肿或肿瘤的患者禁忌前列腺按摩

二、理学检查.量成年男性经前列腺按摩一次可采集数滴至前列腺液前列腺炎时前列腺液减少11ml.外观为较稀薄、不透明的淡乳白色液体黄色混浊呈脓性或脓血性见于严重的化脓性前列腺或精囊2炎；红色见于前列腺炎、精囊炎、前列腺结核、结石和恶性肿瘤等或按摩时用力过重.酸碱度正常呈弱酸性，为岁以上者或混入精囊液较多时可增高3pH

6.3〜

6.5o50pH

三、显微镜检查

（一）检查方法一般可用非染色法前列腺液直接涂片后，置高倍镜下观察；也可用瑞氏染色、巴氏染色或苏木精-伊红染色法（HE）等作细胞学形态检查,非染色检查4

（1）卵磷脂小体为圆形或卵圆形，大小不等，多大于血小板，小于红细胞，折光性强正常前列腺液涂片中数量较多，分布均匀前列腺炎时数量常减少或消失，分布不均，有成簇分布现象（）红细胞正常前列腺液中偶见红细胞（＜）前列腺炎、结核、结石和恶性肿瘤时可见红细胞25/HP o增多；按摩时用力过重，也可导致出血而使红细胞增多

（3）白细胞正常前列腺液中白细胞散在，一般＜10/HP前列腺炎时白细胞增多，并成堆分布，同时亦可伴有多量上皮细胞如白细胞即可诊断为前列腺炎〜15/HP,

（4）前列腺颗粒细胞胞体较大，多为白细胞的3〜5倍，正常不超过1/HP,老年人增多前列腺炎时可增加至数倍并伴大量脓细胞10

（5）淀粉样小体体积较大，圆形或卵圆形，约为白细胞的10倍，呈微黄色或褐色的同心圆线纹层状结构，正常人前列腺液中可存在淀粉样小体，并随年龄增长而增多，一般无临床意义（）滴虫发现滴虫，可诊断为滴虫性前列腺炎6

（7）精子多为前列腺按摩时，精囊受挤压使少量精子溢出，无临床意义.染色检查当直接镜检见到畸形、巨大细胞或疑有肿瘤时，应作巴氏或染色，有助于前列腺肿瘤和5HE前列腺炎的鉴别

（二）微生物学检查前列腺液可直接涂片，作革兰染色或抗酸染色；但直接涂片染色，微生物检出率低，且不能鉴别，故宜作细菌培养或用其他检查方法进行微生物学检查第十六章阴道分泌物检查本章考点标本米集

1.一般性状检查

2.清洁度检查

3..病原学检查4阴道分泌物检查的质量控制

5.阴道分泌物是女性生殖系统分泌的液体，主要由阴道黏膜、宫颈腺体、前庭大腺及子宫内膜的分泌物混合而成，此外还有子宫内膜、阴道黏膜的分泌物常用于女性生殖系统炎症、肿瘤的诊断及雌激素水平的判断

一、标本采集阴道分泌物通常由妇产科医师采集标本采集前内禁止性交、盆浴、阴道灌洗和局部上药等一般用24h消毒棉拭子自阴道深部或阴道穹隆后部、宫颈管口等处取材制备成生理盐水涂片直接观察阴道分泌物，或制备成薄涂片.经固定、巴氏、姬姆萨或革兰染色后，进行肿瘤细胞或病原微生物检查

二、一般性状检查外观正常阴道分泌物，为白色稀糊状、无气味、量多少不等其性状与雌激素水平及生殖器充血情况

1.有关大量无色透明粘白带常见于应用雌激素药物后及卵巢颗粒细胞瘤；脓性白带黄色有臭味，化脓性细菌感染引起，见于慢性宫颈炎、老年性阴道炎、子宫内膜炎、宫腔积脓、阴道异物等；黄色泡沫状脓性白带，常见于滴虫性阴道炎；豆腐渣样白带常见于真菌性阴道炎；血性白带，有特殊臭味见于宫颈癌、宫颈息肉、子宫黏膜下肌瘤、慢性重度宫颈炎以及使用宫内节育器的副反应等

2.pH正常阴道分泌物呈酸性，pH4〜

4.5pH增高见于各种阴道炎，幼女和绝经后的妇女

三、清洁度检查（―）检测方法标本加生理盐水滴，涂片后高倍镜检查，根据所见的上皮细胞、白细胞（或脓细胞）、阴道杆菌与杂菌1的数量进行判断，并划分清洁度I、n度为正常，in、iv度为不清洁（表i-16-i）表阴道清洁度判断标准1-16-1清洁度杆菌上皮细胞白（脓）细胞（个）球菌胸床意义/HP++++++++—正常I0~5++++—正常II5~15——++提不炎症III15〜30IV——++++严重阴道炎

（二）参考值度I〜n

（三）临床意义、度为正常

1.1II度为不清洁，常可同时发现病原微生物，提示存在感染引起的阴道炎

2.IIL IV阴道清洁度与卵巢功能有关排卵前期阴道趋于清洁雌激素减低阴道不清洁

3.

四、病原学检查

（一）阴道毛滴虫可引起滴虫性阴道炎为寄生于阴道的致病性原虫，呈梨形，大小为白细胞的倍，前端有根前鞭毛，2〜34生长的最适为适宜温度为pH

5.5〜

6.0,25c〜42℃检测方法及评价直接涂片法将阴道分泌物与少许生理盐水混合涂片，高倍镜下观察直接湿片高倍镜检查法简便易行，

1.是最常用的方法阳性诊断率较低（约）革兰或瑞特染色油镜观察可提高检出率标本送检应注意保温50%o2,胶乳凝集快速检查法（LAT）本法操作简便、快速，敏感性和特异性高，优于直接湿片镜检和培养法，适合于临床常规应用,培养法阳性率可达但本法操作复杂，不宜常规应用398%

（二）真菌检查阴道真菌有时在阴道中存在而无害，但在阴道抵抗力减低时容易发病，真菌性阴道炎以找到真菌为诊断依据阴道真菌多为白色假丝酵母菌，偶见阴道纤毛菌、放线菌等，使人类致病者为白色念珠菌85%检测方法及评价.湿片检查同阴道滴虫检查本法简便易行，是目前临床上最常用的方法必要时可进行革兰染色后2油镜观察,浓集法检查取标本于清洁干燥试管内，加（）溶液约混匀后置水浴中

22.5mol/L NaH Ind,37℃3〜5min,取出低速离心取沉淀物作涂片镜检，可提高阳性检出率5min,.培养法本法阳性率高但操作复杂、费时，临床应用较少3

（三）加德纳菌检查阴道加德纳菌为革兰染色阴性或染色不定（有时成革兰染色阳性）的小杆菌，和某些厌氧菌共同引起的细菌性阴道炎属性传播疾病之一加德纳菌性阴道炎的实验室诊断依据为

①线索细胞（clue cell）为阴道鳞状上皮细胞粘附大量加德纳菌及其他短小杆菌后形成

②pH

4.5o

③胺试验阳性

④乳酸杆菌无乳酸杆菌（革兰阳性大杆菌），或〈5个/油镜视野

（四）淋球菌淋病是发病率较高的性传播疾病，是淋球菌（革兰阴性双球菌），在泌尿生殖道黏膜引起的特殊炎症目前，淋球菌的检查方法主要有涂片法、培养法、免疫荧光检查及淋球菌快速诊断法等检测方法及评价,涂片法以宫颈管内分泌物涂片阳性率最高女性阴道分泌物，因杂菌多等原因不推荐用革兰染1WHO色检查女性患者，而推荐用亚甲蓝染色,培养法本法对女性患者阳性检出率为是当前推荐的唯一方法.直接荧光抗体染色280%〜90%,WHO3法本法简便、快速，且对死菌也可呈现阳性但特异性欠佳，且要求特殊设备技术检测本法对淋病奈瑟菌数量少、杂菌过多的标本进行检测，有较高的特异性和灵敏度

4.PCR

（五）衣原体沙眼衣原体感染目前已成为最流行的性传播疾病标本主要来自泌尿生殖道拭子或刮片，少数取前列腺液、精液、关节液或输卵管、直肠活检物检测方法及评价衣原体培养分离法本法可靠但技术难度大，特异性、敏感性均不理想，且费时费钱，目前临床上己很

1.少应用,衣原体细胞学检查本法虽操作简便，但特异性和敏感性较差，阳性率较低

23.衣原体抗原的检测包括酶免疫反应（EIA）和直接荧光抗体检测（DFA）目前国内已有上述方法试剂盒供应需耍有经验的实验室技术人员操作技术检测:本法敏感性高，尤其对无症状感染者的检测有高的敏感性和特异性

4.PCR

五、阴道分泌物检查的质量控制阴道分泌物检查的质量控制包括熟练掌握标本中的各种成分的辨认、注意治疗用药物的影响和操作的规范化。