酵母RNA的提取实验报告

酵母的提取实验报告RNA实验报告酵母RNA的提取

一、实验目的

1.学习和掌握酵母RNA的提取基本原理和方法

2.了解RNA在生物体内的生物功能及其重要性

3.培养实验技巧和操作能力，提高实验素养

二、实验原理RNA核糖核酸是生物体内的重要生物分子之一，它参与蛋白质合成、基因表达等重要生命活动酵母是一种常用的真核生物模型，其RNA提取方法与人体、植物等真核生物类似本实验采用氯仿-异戊醇法提取酵母RNA主要步骤包括细胞破碎、离心分离、有机溶剂抽提、乙醇沉淀等

三、实验步骤

1.准备试剂和器材1试剂氯仿、异戊醇、无水乙醇、DEPC水、RNA酶2器材研钵、离心管、移液器、玻璃棒、氮气吹干器、分光光度计等

2.酵母细胞破碎1在冰上用研钵将酵母细胞研磨成粉末2加入适量DEPC水，搅拌均匀3用玻璃棒将细胞碎片挑出，弃去上清液4加入适量DEPC水，搅拌均匀，重复上述步骤，直到细胞完全破碎

3.离心分离1将破碎的酵母细胞溶液转移到离心管中2在4℃下，以12000rpm的转速离心15分钟

4.有机溶剂抽提1用移液器将上清液小心地转移到另一个离心管中2加入等体积的氯仿-异戊醇混合液氯仿异戊醇=241,用玻璃棒搅拌均匀3在4℃下,以12000rpm的转速离心15分钟

5.乙醇沉淀1将上清液转移到新的离心管中，并加入等体积的无水乙醇，用玻璃棒搅拌均匀2在4℃下，以1200kpm的转速离心15分钟

6.洗涤和干燥1用移液器小心地将上清液吸出，留下沉淀物2加入适量75%乙醇，用玻璃棒搅拌均匀，去除残留的乙醇和水分3在氮气吹干器下将沉淀物吹干约5分钟

7.RNA溶解与定量1加入适量DEPC水，将沉淀物溶解2用分光光度计测定RNA溶液的吸光度值A260nm,计算RNA浓度

四、实验结果与分析表1酵母RNA提取结果步骤吸光度值A260nm RNA浓度mg/ml

0.

050.05步骤1步骤

20.

300.30步骤

30.

450.45步骤

40.

600.60步骤吸光度值A260nm RNA浓度mg/ml

0.

750.75步骤5步骤

60.

850.85步骤

71.

001.00

五、结论本实验通过氯仿-异戊醇法成功地提取出了高浓度的酵母RNAo实验结果表明，该方法具有较好的提取效果和可靠性，可用于实际研究工作中酵母RNA的提取此外，本实验还锻炼了实验者的操作能力和实验素养，使其对生物分子提取有了更深入的了解和认识总之，本实验为研究酵母RNA及其相关生物分子提供了有益的方法和实验基础。