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《植物总DNA的提取》PPT课件•植物总DNA提取概述•植物总DNA提取的步骤目录•植物总DNA提取的质量控制•植物总DNA提取的应用•植物总DNA提取的注意事项01植物总DNA提取概述DNA提取的定义DNA提取是指从生物样品中分离和纯化DNA的过程,是进行基因组学研究的重要基础步骤在植物研究中,DNA提取通常用于遗传多样性分析、基因克隆、基因表达研究等DNA提取的原理010203DNA提取基于不同物质在溶液通过加入适当的缓冲液和表面利用DNA与杂质如蛋白、RNA、中的溶解度和结合能力的差异活性剂,使细胞裂解,释放出细胞碎片等在溶解性上的差异,细胞核中的DNA通过离心和洗涤,将DNA与杂质分离DNA提取的方法分类化学法主要利用强酸、强根据提取原理,DNA提碱或变性剂使细胞裂解,取方法可分为物理法、化如酸碱裂解法和SDS裂解学法和酶法法A BC D物理法主要利用温度变化酶法则利用酶分解细胞膜和压力差来分离DNA,和蛋白质,释放出DNA,如热裂解法和超声波破碎如蛋白酶K法和碱性磷酸法酶法02植物总DNA提取的步骤植物材料的选取与处理选取新鲜、健康的植物组织选择新鲜、健康的植物组织,以保证DNA的提取质量清洗和处理将植物组织清洗干净,去除表面的污垢和杂质,然后剪成小块或研磨成粉末破碎细胞壁和释放DNA使用适当的破碎方法采用物理或化学方法破碎细胞壁,使DNA充分释放出来控制破碎程度破碎细胞壁时需控制破碎程度,避免过度破碎导致DNA降解去除杂质和纯化DNA去除蛋白质和酚类物质使用蛋白酶K和酚/氯仿进行蛋白质和酚类物质的去除沉淀和洗涤DNA将上清液中的DNA进行沉淀,然后洗涤去除残留的杂质DNA的沉淀和洗涤沉淀DNA的方法洗涤和干燥通过加入无水乙醇或异丙醇等试剂,使对沉淀的DNA进行洗涤和干燥,以去除DNA从溶液中沉淀下来残留的盐分和其他杂质VS03植物总DNA提取的质量控制DNA的纯度检测总结词判断DNA是否受到污染详细描述通过紫外吸收光谱法检测DNA在260nm和280nm处的吸光度,判断DNA的纯度纯DNA在该波长下的吸光度比值应在
1.8-
2.0之间DNA的浓度检测总结词详细描述确定DNA的浓度根据DNA在260nm波长下的吸光度,使用公式计算DNA的浓度同时,可以通过对比已知浓度的标准品,验证检测的准确性DNA的完整性检测总结词评估DNA的片段完整性详细描述通过电泳检测DNA的迁移行为,观察DNA是否出现降解或断裂完整的DNA在电泳图上应呈现单
一、明亮的条带,而降解的DNA则会出现多个弥散的条带04植物总DNA提取的应用遗传分析遗传多样性研究基因组测序通过提取植物的总DNA,可以分析不同植提取的DNA可以用于植物基因组的测序,物种类的遗传多样性,了解物种的起源、进从而绘制完整的基因组图谱,有助于深入了化和分类解植物的遗传结构和功能分子标记要点一要点二开发分子标记遗传改良利用提取的DNA开发分子标记,如SSR、SNP等,可用于通过分子标记辅助选择,可以快速有效地进行植物的遗传植物品种鉴定、遗传作图和基因定位等改良,提高农艺性状和抗逆性基因克隆与表达功能基因克隆基因工程与转基因提取的DNA可以用于克隆具有重要功能的基因,进一步提取的DNA可以用于基因工程和转基因研究,将有益基研究这些基因的表达和调控机制因导入到植物中,创造具有优良性状的转基因植物05植物总DNA提取的注意事项实验安全注意事项防护措施废弃物处理实验过程中需穿戴实验服、口罩和手套,以防止试剂实验结束后,应按照实验室规定正确处理废弃物,防溅到皮肤或眼睛止对环境和人员造成危害实验操作注意事项试剂配制操作规范确保试剂准确配制,避免使用过期试剂,以免影响实按照标准操作流程进行实验,避免剧烈摇晃或离心速度验结果过快,以免损坏细胞和DNA实验结果分析注意事项数据记录准确记录实验数据,避免遗漏或错误,为后续分析提供可靠依据结果解读对实验结果进行合理分析,避免主观臆断和过度解读,如有异常结果,需进行复核或重新实验感谢观看THANKS。
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