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十、常用蛋白质分子量标准参照物高分子量标准参照中分子量标准参物低分子量标准参照蛋白质蛋白质蛋白质Mr MrMr肌球蛋白磷酸化酶碳酸酎酶212000B9740031000一半乳糖甘酶牛血清清蛋白大豆胰蛋白酶制剂B1160006620021500磷酸化酶谷氨酸脱氢酶马心肌球蛋白B974005500016900牛血清清蛋白卵清蛋白溶菌酶662004270014400过氧化氢酶醛缩酶肌球蛋白()5700040000F18100醛缩酶碳酸好酶肌球蛋白()4000031000F26200大豆胰蛋白酶抑制剂21500肌球蛋白(F3)2500溶菌酶14400
十一、层析法常用数据表及性质(-)离子交换纤维素目前常用的离子交换纤维素列于下表蛋白吸附容量(毫克/克)床体积(毫升/克)DEAE-长度交换当量形状胰岛素牛血清清蛋白纤维素(微米)(毫克当量/克)pH
8.5(pH
8.5)pH
6.0pH
7.5DE-22改良纤维性*12〜
4001.0±
0.
17504507.
77.7DE-23同上(除细粒)18〜
4001.0±
0.
17504508.
39.1DE-32微粒性(干粉)24〜
631.0±
0.
18506606.
06.3DE-52同上(溶胀)24〜
631.0±
0.
18506606.
06.3CM-纤维素溶菌酶7S-y球蛋白pH
5.0pH
7.5pH
5.0pH
5.0CM-22改良纤维性12〜
4000.6±
0.
066001507.
77.7CM-23同上(除细粒)18〜
4000.6+
0.
066001509.
19.1CM-32微粒性(干粉)24〜
631.0±
0.11,
2604006.
86.7同上(溶胀)CM-5224〜
631.0±
0.
11.
2604006.
86.7*英国厂的型号,原来有旧型号如为长纤维性,长度微米还有Whatman DE-1,1000DE-11,纤维性,微米,对牛血清清蛋白的吸附容量仅为毫克/克50〜25130分子量=溶液为克/升Na HPO-2H O
178.05,
0.2mol/L
85.61242Na2HPO4・2H2分子量=
358.22,
0.2mol/L溶液为
71.64克/升分子量=溶液为克/升Na HPO-2H O
156.03,
0.2mol/L
31.21242磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液21/15mol/Lmol/L/15Na HPOmol/L//15KH POmol/L//15Na HPOmol/L//15KH PO24242424P P«-蓟««■H H
40.
109.
9077.
003.
00.
920.
509.
50.
178.
002.
0051.
009.
0079.
001.
00.
292.
008.
00.
389.
500.
5053.
007.
0079.
750.
25.
914.
006.
00.
739.
900.
1065.
005.
00810.
000.
246.
004.
00.
0468.
47.
3468.
64.
6768.
81.
186.98分子量=溶液为克/升Na HPO-2H O
178.05,1/15M
11.876242分子量=溶液为克/升KH2Po
4136.09,1/15M
9.078磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液
8.
0.05M毫升毫升加水稀释至毫升X
0.2M K2PCU+Y
0.2N NaOH29新毫升pH20℃X«^Y pH20℃X Y
5.
850.
3727.
052.
9636.
050.
5707.
253.
5006.
250.
8607.
453.
9506.
451.
2607.
654.
2806.
651.
7807.
854.
5206.
852.
3658.
54.680巴比妥钠-盐酸缓冲液()
9.18℃
0.04M巴比妥
0.2V盐酸
0.2N盐酸(毫pH pH巴比妥
0.04M钠溶液升)钠溶液(毫升)
6.
810018.
48.
41005.
217.
010017.
88.
61003.
827.
210016.
78.
81002.
527.
410015.
39.
01001.
657.
610013.
49.
21001.
137.
810011.
479.
41000.
708.
01009.
399.
61000.
358.
21007.21100巴比妥钠盐分子量溶液为克/升=
206.18;
0.04M
8.25盐酸缓冲液
10.Tris-
0.05M,25℃HOCH2NH250毫升
0.1M三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与X毫升
0.1N盐酸混匀后,加水稀释至100毫升(毫升)(毫升)pH XpH X
7.
1045.
78.
1026.
27.
2044.
78.
2022.
97.
3043.
48.
3019.
97.
4042.
08.
4017.
27.
5040.
38.
5014.
77.
6038.
58.
6012.
47.
7036.
68.
7010.
37.
8034.
58.
808.
57.
9032.
029.
28.
907.
08.00三羟甲基氨基甲烷()Tris HOCH2CH2OH分子量=
121.14;溶液为克/升溶液可从空气中吸收二氧化碳,使用时注意将瓶盖严
0.1M
12.114Tris硼酸-硼砂缓冲液(硼酸根)
11.
0.2M硼砂硼砂硼砂硼酸
0.05M
0.2M
0.05M
0.2MPH pH(毫升)(毫升)(毫升)(毫升)
7.
41.
09.
08.
23.
56.
57.
61.
58.
58.
44.
55.
57.
82.
08.
08.
76.
04.
08.
03.
07.
09.
08.
02.0硼砂Na2B4O7・H2,分子量=
381.43;
0.051^溶液(=
0.2M硼酸根)含
19.07克/升硼酸分子量溶液为克/升H2BO3,=
61.84,
0.2M
12.37硼砂易失去结晶水,必须在带塞的瓶中保存硼酸-硼砂缓冲液(硼酸根)
11.
0.2M硼砂硼酸硼砂硼酸
0.05M
0.2M
0.05M
0.2MpH pH(毫升)(毫升)(毫升)(毫升)
7.
41.
09.
08.
23.
56.
57.
61.
58.
58.
44.
55.
57.
82.
08.
08.
76.
04.
02.
08.
03.
07.
09.
08.0硼砂Na2B4O7・10H2O,分子量=
381.43;
0.05M溶液(=
0.2M硼酸根)含
19.07克/升硼酸分子量溶液为克/升H BO,=
61.84,
0.2M
12.3723硼砂易失去结晶水,必须在带塞的瓶中保存甘氨酸-氢氧化钠缓冲液()
12.
0.05M毫升甘氨酸毫升加水稀释至毫升X
0.2M+Y
0.2NnaOH200pH X Y pH X Y
8.
6504.
09.
65022.
48.
8506.
09.
85027.
29.
0508.
810.
05032.
09.
25012.
010.
45038.
69.
45016.
810.
65045.5甘氨酸分子量溶液含克/升=
75.07;
0.2M
15.010硼砂-氢氧化钠缓冲液(硼酸根)
13.
0.05M毫升硼砂毫升加水稀释至毫升X
0.05M+Y
0.2NNaOH200pH X Y pHX Y
9.
3506.
09.
85034.
09.
45011.
010.
05043.
09.
65023.
010.
15046.0硼砂Na2B4O7・10H2,分子量=
381.43;
0.05M溶液为
19.07克/升碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液
14.
0.1MCa2\Mg2+存在时不得使用pH O.lMNa2co3(毫升)01MN2HCO3毫升20℃37℃
9.
168.
77199.
409.
12289.
519.
40379.
789.
50469.
909.
725510.
149.
906410.
2810.
087310.
5310.
288210.
8310.5791分子量溶液为克/升Na CO210H O=
286.2;
0.1M
28.6222分子量溶液为克/升N HCO=
84.0;
0.1M
8.4023缓冲液
15.“PBS”PH
7.
67.
47.
27.0H0100010001000100ml2NaCl
8.
58.
58.
58.5gNa HPO
2.
22.
22.
22.2g24NaH2Po
40.
10.
20.
30.4g
十三、实验室中常用酸碱的比重和浓度名称分子式分子量比重面分浓度当量浓度配1升1N溶液所需毫%W/W粗略N升数盐酸HC
136.
471.
1937.
212.
0841.
1835.
411.
81.
1020.
06.0硫酸H2s
498.
091.
8495.
636.
0281.
1824.
86.0硝酸HNO
63.
021.
4270.
9816.
06321.
4065.
314.
51.
2032.
366.1冰乙酸CH3COOH
60.
051.
0599.
517.459乙酸CH3COOH
98.
06366.0磷酸H2PO
435.
051.
7185.015,30,4567(以15N(依反应而计)定)氨水NH4OH
0.
9015670.
90427.
014.
3700.
9125.
013.
40.
9610.
05.6氢氧化NaOH
40.
01.
550.01953钠溶液
十四、硫酸铁饱和度的常用表调整硫酸核溶液饱和度计算表()
1.25℃硫整硫酸镂终浓度,%饱和度10202530333540455055606570758090100每升溶液加固体硫酸镂的克数
①1硫056114144176196209243277313351390430472516561662767酸105786118137150183216251288326365406449494592694钱2029597891123155190225262300340382424520619初2530496193125158193230267307348390485583浓3019306294127162198235273314356449546度3312437410714217721425229233342652235316394129164200238178319411506%40316397132168205245285375469饱45326599134171210250339431和503366101137176214302392度553367103141179264353603469105143227314653470107190275703572153237753611519880771579079
①在下,硫酸镀溶液由初浓度调到终浓度时,每升溶液所加固体硫酸钱的克数25℃调整硫酸核溶液饱和度计算表
2.0℃在℃硫酸镂终浓度,%饱和度20253035404550556065707580859095100每毫升溶液加固体硫酸镂的克数
①100硫
010.
613.
416.
419.
422.
625.
829.
132.
636.
139.
843.
647.
651.
655.
960.
365.
069.7酸
57.
910.
813.
716.
619.
722.
926.
229.
633.
136.
840.
544.
448.
452.
657.
061.
566.2钱
10538.
110.
913.
916.
920.
023.
326.
630.
133.
737.
441.
245.
249.
353.
658.
162.7初
152.
65.
48.
211.
114.
117.
220.
423.
727.
130.
634.
338.
142.
045.
050.
354.
759.2浓
2002.
75.
58.
311.
314.
317.
520.
724.
127.
631.
234.
938.
742.
746.
951.
255.7度
2502.
75.
68.
411.
514.
617.
921.
124.
528.
031.
735.
539.
543.
647.
852.
23002.
85.
68.
611.
714.
818.
121.
424.
928.
532.
336.
240.
244.
548.8%
3502.
85.
78.
711.
815.
118.
421.
825.
429.
132.
936.
941.
045.3饱
4002.
95.
88.
912.
015.
318.
722.
225.
829.
633.
537.
641.8和
4502.
95.
99.
012.
315.
519.
022.
626.
330.
234.
238.3度
5003.
06.
09.
212.
515.
919.
423.
026.
830.
834.
85503.
16.
29.
512.
916.
419.
723.
527.
331.
36003.
16.
39.
713.
216.
820.
123.
127.
96503.
16.
39.
713216.
820.
524.
47003.
26.
59.
913.
417.
120.
97503.
26.
610.
113.
717.
48003.
36.
710.
313.
98503.
46.
810.
59003.
47.
09503.51000
①在下,硫酸镀溶液由初浓度调到终浓度时,每毫升溶液所加固体硫酸筱的克数0℃100
十五、常见蛋白质分子量参考值(单位)dalton蛋白质分子量220,000165,000130,000100,000肌球蛋白94,000[myosin]甲状腺球蛋68,000S[thyroglobulin]半乳糖白酶[63,000B-B-galactosidase]60,000副肌球蛋白[paramyosin]57,000磷酸化酶a[phosphorylase a]53,000血清白蛋白[serum albumin]53,000氨基酸氧化酶L-[L-amino acidoxidase]50,000地氧化氢酶[catalase]49,000丙酮酸激活酶[pyruvate kinase]43,000谷氨酸脱氢亮氨酸氨肽酶@§[glutamate dehydrogenase][glutamae41,000-球蛋白,链[丫延胡索酸酶反丁dehydrogenase]Y H-globulin,H chain]41,000烯二酸酶卵白蛋白[fumarase][ovalbumin]40,000醇脱氢酶烯醇酶H[alcohol dehydrogenaseliver][enolase]40,000醛缩酶[aldolase]40,000肌酸激酶胃蛋白酶原[creatine kinase][pepsinogen]37,000氨基酸氧化酶D-[D-amino acidoxidase]37,000醇脱氢酶酵母[alcohol dehydrogenaseyeast]甘油醛磷酸脱氢酶[dlyceraldehyde phosphatedehydrogenase]36,000原肌球蛋白[tropomyosin]36,000乳酸脱氢酶[lactate dehydrgenase]36,000胃蛋白酶[pepsin]35,000转磷酸核糖基酶[phosphoribosy1transferase]35,000天冬氨酸氨甲酰转移酶,C链[aspertate transcarbamylase,C chain]34,000竣肽酶A[carboxy peptidaseA]34,000碳酸酉千酶[carbonic anhydrase]29,000枯草杆菌蛋白酶[subtilisin]27,600Y-球蛋白,L链丫-blobulin,L chain[]23,500糜蛋白酶原(胰凝乳蛋白酶原)[chymotrypsinogen25,700胰蛋白酶23,300[trypsin]木瓜蛋白酶(竣甲基)()23,000[papain carboxymethyl]18,400-乳球蛋白[B B-lactoglobulin|17,500烟草花叶病毒外壳蛋白(TWV外壳蛋白)[TWV coatprotein17,200肌红蛋白[myoglobin]17,000天门冬氨酸氨甲酰转移酶,链血红R[aspartate transcarbamylase,R chain]15,500蛋白()[h aemoglobin]15,000外壳蛋白Q[QB coatprotein]14,30013,750溶菌酶[lysozyme]13,700外壳蛋白Ri[Rn coatprotein]11,700核糖核酸酶或[ribonuclease RNase]或11,00013,000细胞色素C[cytochrome C]糜蛋白酶(胰凝乳蛋白酶)[chymotrypsin]
十六、常见蛋白质等电点参考值(单位)pH蛋白质等电点
12.1蛙精蛋白[]salmine
12.1鲫精蛋白[]clupeine
11.71酮精蛋白[sturiinej胸腺组蛋白[thymohistone]
10.8珠蛋白(人)[()]
7.5globin human卵白蛋白伴清蛋白血清白蛋[ovalbuin][conal bumin]
4.71;
4.59白肌清蛋白肌浆蛋白[serum albumin][myoal bumin]
6.8;
7.1[myogen A]-乳球蛋白[卵黄蛋白B B-lactoglobulin][livetin]
3.5一球蛋白人[丫一球蛋白Y i-globulinhuman]Y
26.3人肌球蛋白原肌[Y2-globulinhuman]A[myosin A]球蛋白铁传递蛋白胎球蛋白[myosin A][siderophilin][fetuin]血纤蛋白原[fibrinogen]
5.8;
6.6a-眼晶体蛋白[a-crystallin]
7.3;
8.2B-眼晶体蛋白[B-crystallin]花生球蛋白[arachin]伴花
525.5生球蛋角蛋白类还原角蛋白
5.1B|conarrachin][keratins]胶原蛋白鱼胶白明胶
5.9[keratein][collagen][ichthyocol]-酷蛋白[[gelatin]a a-casein]酷蛋白[
5.558B-B-casein]酷蛋白[丫
4.8Y--casein]
6.0-卵清粘蛋白「粘蛋白a[a-ovomucoid]a[a i-mucoprotein]
5.1卵黄类粘蛋白尿促性腺激素[vitellomucoid][urinary
3.
94.
55.
5323.
36.99溶菌酶肌红蛋白gonadotropin][lyso zyme][myoglobin]
7.
077.
236.
925.6血红蛋白人血红蛋白[hemoglobinhuman]鸡血红蛋白[hemoglobinhen]马血蓝蛋白[hemoglobinhorse][hemerythrin]蚯蚓血红蛋白血绿蛋白[chlorocruorin]
5.2[chlorocruorin]
5.5无脊椎血红蛋白细胞色素[erythrocruorins]
5.4视紫质C[cytochrome C][rhodopsin]
5.9促凝血酶原激酶[thromboplastin]
3.75脂蛋白a i-[a i-lipoprotein]
5.3脂蛋白B i-[B i-lipoprotein]
6.
855.73卵黄脂磷蛋白[芜菁黄花病毒B-B-lipovitellin]
5.35牛痘病毒生[turnip yellowvvirus][vaccinia virus]左右
1.0长激素催乳激素胰岛素[somatotropin][prolactin]
8.1胃蛋白酶[insulin][pepsin]
4.9糜蛋白酶胰凝乳蛋白酶牛血清白[chymotrypsin]
7.8蛋白核糖核酸酶牛[bovine serumalbumin]胰或[ribonuclease Rnasebpancreas]
4.58甲状腺球蛋胸腺核组蛋白S[thyroglobulin][thy左右4monucleohistone]
十七、元素的原子量表(录自年国际原子量表,并全部取四位有效数字)1997元素原子量原子序数id r钢Ac
227.089银Ag
107.947铝Al
26.9813锢Am
[243]95
(二)聚丙烯酰胺凝胶的技术数据膨胀所需最少时间(室排阻的下限分级分离的范围膨胀后的床体积型号温,小时)(Mr)(Mr)(干凝胶)mL/gBio-gel-P-21600200-
20003.82〜4Bio-gel-P-43600500-
40005.82~4Bio-gel-P-646001000-
50008.82〜4Bio-gel-P-10100005000〜
1700012.42〜4Bio-gel-P-303000020000〜
5000014.910〜12Bio-gel-P-606000030000〜
7000019.010〜12Bio-gel-P-10010000040000-
10000019.024Bio-gel-P-15015000050000-
15000024.024Bio-gel-P-20020000080000-
30000034.048Bio-gel-P-300300000100000-
40000040.048注上述各种型号的凝胶都是亲水性的多孔颗粒,在水和缓冲溶液中很容易膨胀,生产厂为Bio-Rad Laboratories,Rich-mond,California,U.S.A.
(三)琼脂糖凝胶的技术数据(琼脂糖是琼脂内非离子型的组分,它在范围内是稳定的)〜4℃,pH4〜9名称、型号凝胶内琼脂糖百分排阻的下限(Mr)分级分离的范围(Mr)生产厂商含量(W/W)Sagavac
10102.5xl05lxlO
2.5xlO5Seravac Laboratories,Sagavac887xl
052.5X104-7X105Maidenhead,EnglandSagavac662xl065x1O4〜2x16Sagavac4415xl062X105-15X106Sagavac22150xl065X105-15X107Bio-GelA-
0.5M
100.5x1051X
102.5X106Bio-Rad Laboratories,Bio-Gel A-
1.5M
81.5xl061X
101.5X106California,U.S,A.Bio-GelA-5M65xl061X104-5X106Bio-GelA-15M415xl054xl015xl06Bio-GelA-50M250x1061X15〜50X16Bio-GelA-150M1150xl061x106〜150x16氧Ar
39.9518碑As
74.9233做At
[210]85金Au
197.079硼B
10.815钢Ba
137.356钺Be
9.0124秘Bi
209.083错Bk
[247]97溟Br
79.9035碳C
12.010钙Ca
40.0820镉Cd
112.448铀Ce
140.158弼Cf
[251]98氯Cl
35.4517镉Cm
[247]96钻Co
58.9327铭Cr
52.0024钠Cs
132.955铜Cu
63.5529镐Dy
162.566镶Er
167.368银Es
[254]99铺Eu
152.063氟F
19.009铁Fe
55.8526镣Fm1257]100Fr
[223]87钱Ga
69.7231札Gd
157.364锌Ge
72.5932氢H
1.0081氮He
4.0032饴Hf
178.572汞Hg
200.680秋Ho
164.967碘I
126.953锢In
114.849钺Ir
192.277钾K
39.1019氟Kr
83.8036锢La
138.957锂Li
6.9413错Lu
175.071镑Lr
[260]103镐Md
[258]101镁Mg
24.3112镒Mn
54.9425铝Mo
95.9442氮N
14.017钠Na
22.9911铝Nb
92.9141铉Nd
144.260Ne
20.1810银Ni
58.7028锌No
[259]102锋Np
237.093氧
016.008钺OS
190.276磷p
30.9715镁Pa
231.091铅Pb
207.282Pd
106.446钢Pm
[147]61针Po
[209]84错Pr
140.959钳Pt
195.178杯Pu
[244]94镭Pa
226.088锦Pb
85.4737铢Pe
186.275铭Ph
102.945氮Pn
[222]86钉Pu
101.144硫S
32.0616锦Sb
121.851铳Sc
44.9621硒Se
78.9634硅Si
28.0914彭Sm
150.462锡Sn
118.750锢Sr
87.6238祖Ta
180.973钺Tb
158.965W Tc
[97]43硅Te
127.652铳Th
232.090钛Ti
47.9022铭T
1204.481锈Tm
168.969铀U
238.092V
50.9423铝W
183.974Xe
131.354亿Y
88.9139Yb
173.070Zn
65.3830Zr
91.2240镜锌错为离心机头的半径(角头),或离心管中轴底部内壁到离心机转轴中心的距离(甩平头),单位为厘r米为离心机每分钟的转速rpm为相对离心力,以地心引力即重力加速度的倍数来表示,一般用(或数字)表示RCF gXg附图是由下述公式计算而来的11RCF=
1.119x W5x rx(rpm)2将离心机转数换算为离心力时,首先,在标尺上取已知的半径和标尺上取已知的离心机转数,然r rpm后,将这两点间划一条直线,在图中间标尺上的交叉点即为相应离心力数值注意,若已知转数值处于RCF标尺的右边,则应读取标尺右边的数值同样,转数值处于标尺左边,则读取标尺左边的rpm RCFrpm RCF数值
(四)凝胶过滤层析介质的技术数据颗粒最快凝胶过滤介质pH稳定耐压Mpa大小流速分离范围特性/应用名称性工作(u m)(cm/h)Superdex301000024〜44肽类、寡糖、小蛋白等3〜
120.3100Superdex753000-7000024〜44重组蛋白、细胞色素3〜
120.3100Superdex20010000-60000024〜44单抗、大蛋白3〜
120.3100Superose65000-5x10620〜40蛋白、肽类、多糖、核酸3〜
120.430Superose121000-30000020〜40蛋白、肽类、寡糖、多糖3〜
120.730Sephacryl S-1001000-10000025〜75肽类、小蛋白3〜
110.220〜39HRSephacryl5000〜25000025〜75蛋白,如清蛋白3〜
110.220〜39S-200HRSephacryl10000〜
1.5X10625〜75蛋白、抗体3〜
110.220〜39S-300HRSephacryl20000-8x10625〜75多糖、具延伸结构的大分子3〜
110.220〜39S-400HR如蛋白多糖、脂质体Sepharose6Fast10000〜4x106平均90巨大分子2〜
120.1300Flow巨大分子如重组乙型肝炎Sepharose4Fast60000-20x106平均90表面抗原2〜
120.1250FlowSepharose2B70000-40x10660〜200蛋白、大分子复合物、病毒、4〜
90.00410不对称分子如核酸和多糖(蛋白多糖)Sepharose4B60000-20x10645〜165蛋白、多糖4〜
90.
00811.5Sepharose6B10000〜4x1645〜165蛋白、多糖
0.0214Sepharose70000〜40x10660〜200蛋白、大分子复合物、病毒、4〜
90.00515CL-2B不对称分子如核酸和多糖(蛋白多糖)Sepharose60000-20x105蛋白、多糖3〜
130.0122645〜165CL-4B
0.0230Sepharose10000〜4x1645〜165蛋白、多糖3〜13CL-6B溶胀最少颗粒干凝胶最快pH凝胶过滤介质分离大小稳定性溶胀体积平衡时间h流速特性/应用名称范围工作u mmL/gcm/h室温沸水SephadexG-10700干粉40〜1202~132〜3312〜5SephadexG-151500干粉40〜1202〜1325-
3.5312〜5SephadexG-25干粉100-3002〜134~6622〜51000-5000脱盐及交换缓冲液用Coarse2〜134~6622〜5SephadexG-251000〜5000干粉50〜150脱盐及交换缓冲液用MediumSephadexG-251000-5000干粉20〜802〜134〜6622〜5脱盐及交换缓冲液用FineSephadexG-251000-5000干粉10〜402〜134〜6622〜5脱盐及交换缓冲液用SuperfineSephadexG-501500-30000干粉100〜300小分子蛋白质分离2~109〜11622〜5CoarseSephadexG-50干粉50-150小分子蛋白质分离2~109-11622〜51500〜30000MediumSephadexG-501500〜30000干粉20〜80小分子蛋白质分离2〜109〜11622〜5Fine622〜51500〜30000干粉10〜40小分子蛋白质分离2〜109〜11SephadexG-50Superfine干粉40〜120中等蛋白质分离2~1012〜1524372SephadexG-753000-800002431612~15SephadexG-753000^70000干粉10-40中等蛋白质分离2〜10Superfine2-1015-2048547SephadexG-1004000〜
1.5x105干粉40-120中等蛋白质分离SephadexG-1004000-1x105干粉10〜40中等蛋白质分离2~1015〜2048511SuperfineSephadexG-1505000-3x105干粉40〜120稍大蛋白质分离2-1020〜3072521SephadexG-1505000〜
1.5x15干粉10-40稍大蛋白质分离2〜1018〜
227255.6SuperfineSephadexG-2005000-6x105干粉40〜120较大蛋白质分离2〜1030〜4072511SephadexG-2005000〜
2.5x105干粉10-40较大蛋白质分离2〜1020〜
257252.8SuperfineSephadexLH20100〜干粉特别为使用有机溶剂而设计适合分离脂类、、胆固醇、脂肪酸、激素、嗜脂性维生素及其他小生物分子此分离范围指以酒精为溶剂的分离400025〜106五离子交换层析介质的技术数据pH稳定性离子交换介质名称最高载量颗粒大小u m特性/应用耐压MPa工作最快流速cm/hSOURCE15Q152-124180025mg蛋白SOURCE15S15418002〜1225mg蛋白24-
440.3150Q Sepharose2〜1270mg BSAH.P.SP Sepharose55mg核糖核酸24-443-
120.3150H.P.酶
0.2400Q Sepharose120mg45〜1652〜12F.F.HSA
0.2400SP Sepharose45〜1654〜1375mg BSAF.F.45~
1650.2300HOmg2〜9DEAE SepharoseF.F.HSACM Sepharose50mg核糖核酸100-3006-
130.2300F.F.酶100-3002-
120.31200〜Q SepharoseBig Beads1800SP SepharoseBig干粉4〜
120.31200〜Beads60mg BSA40〜1201800离子交换介质名颗粒大最快流速最高载量特性/应用pH稳定性工作耐压MPa称小u mcm/h纯化低分子量蛋白、多肽、核昔以及巨大l.2mg甲状腺球QAE Sephadex干粉40〜分子蛋白2-
100.11475A-25120Mr200000,在工80mgHSA业传统应用上具有重要作用批量生产和预处理QAE Sephadex干粉用,分离中等大小的2-
110.0145A-50l.2mg甲状腺球40-120生物分子蛋白80mgHSA30-200000纯化低分子量蛋白、
1.Img IgG多肽、核昔以及巨大SP Sephadex70mg牛防合血红干粉40〜分子2-
100.13475C-25蛋白230mg核糖120Mr200000,在工核酸酶业传统应用上具有重要作用批量生产和预处理8mg IgGSPSephadex干粉40〜用,分离中等大小的HOmg牛锻合血2-
100.0145C-50120生物分子30-200000红蛋白纯化低分子量蛋白、Img甲状腺球蛋白DEAE Sephadex干粉40〜多肽、核计以及巨大3Omg HAS140mg2〜
90.11475A-25120分子Mr200000,a-乳清蛋白在工业传统应用上具有重要作用批量生产和预处理用,分离中等大小的DEAE Sephadex2mg甲状腺球蛋白干粉40〜生物分子2〜
90.1145A-50HOmg USA120Mr200000,在工作传统应用上具有重要作用纯化低分子量蛋白、多肽、核甘以及巨大
1.6mg IgG70mg牛CM Sephadex干粉40〜分子粉合血红蛋白6〜
130.13475C-25120Mr200000,在工190mg核糖核酸酶业传统应用上具有重要作用7mg IgG140mg牛批量生产和预处理CM Sephadex黑合血红蛋白干粉40〜用,分离中等大小的6〜
100.0145C-50120mg核糖核酸酶120生物分子30-200000
十二、常用缓冲溶液的配制方法甘氨酸-盐酸缓冲液
1.
0.05mol/L毫升甘氨酸毫升再加水稀释至毫升X
0.2mol/L+Y
0.2mol/L HCL200pHX Y pHXY
2.
05044.
03.
05011.
42.
45032.
43.
2508.
22.
65024.
23.
4506.
42.
85016.
83.
6505.0甘氨酸分子量甘氨酸溶液含克/升=
75.07,
0.2mol/L
15.01邻苯二甲酸-盐酸缓冲液
2.
0.05mol/L毫升邻苯二甲酸氢钾再加水稀释到毫升X
0.2mol/L+
0.2mol/L HC1,20pH20℃XYpH20℃XY
2.
254.
0703.
251.
4702.
453.
9603.
450.
9902.
653.
2953.
650.
5972.
852.
6423.
850.
2633.
052.022邻苯二甲酸氢钾分子量邻苯二甲酸氢溶液含克/升=
204.23,
0.2mol/L
40.85磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液
3.
0.2mol/L
0.2mol/LPH PHNa HPO
0.1mol/L Na HPO
0.1mol/L2424毫升毫升柠檬酸毫升柠檬酸毫升
2.
20.
4010.
605.
210.
729.
282.
41.
2418.
765.
411.
158.
852.
62.
1817.
825.
611.
608.
402.
83.
1716.
835.
812.
097.
913.
04.
1115.
896.
012.
637.
373.
24.
9415.
066.
213.
226.
783.
45.
7014.
306.
413.
856.
153.
66.
4413.
566.
614.
555.
453.
87.
1012.
906.
815.
454.
554.
07.
7112.
297.
016.
473.
534.
28.
2811.
727.
217.
392.
614.
48.
8211.
187.
418.
171.
834.
69.
3510.
657.
618.
731.
274.
89.
8610.
147.
819.
150.
855.
010.
309.
708.
019.
450.55分子量=溶液为克/升Na HPO
14.98,
0.2mol/L
28.4024分子量=溶液含克/升Na2HPO4-2H
2178.05,
0.2mol/L
35.01分子量溶液为克/升C4H2O7•H2O=
210.14,
0.1mol/L
21.01柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液
4.钠离子浓度柠檬酸(克)氢氧化钠(克)盐酸(毫升)最终体积(升)PH()(浓)
①mol/L C6H87•H oNaOH97%HC
122.
20.
2021084160103.
10.
2021083116103.
30.
2021083106104.
30.
202108345105.
30.
3524514468105.
80.
4528518610510106.
50.38266156126
①使用时可以每升中加入克克酚,若最后值有变化,再用少量氢氧化钠溶液1pH50%或浓盐酸调节,冰箱保存柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液()
5.
0.1mol/L
0.1mol/L
0.1mol/L
0.1mol/LPH PH柠檬酸柠檬酸钠柠檬酸钠
0.1mol/L(毫升)(翻)(毫升)柠檬酸(毫升)
3.
018.
61.
45.
08.
211.
83.
217.
22.
85.
27.
312.
73.
416.
04.
05.
46.
413.
63.
614.
95.
15.
65.
514.
53.
814.
06.
05.
84.
715.
34.
013.
16.
96.
03.
816.
24.
212.
37.
76.
22.
817.
24.
411.
48.
66.
42.
018.
04.
610.
39.
76.
61.
418.
64.
89.
210.8柠檬酸C6H87•Ho分子量
210.14,
0.1moVL溶液为2LOI克/升2柠檬酸钠Na C6H5O7-2HO分子量
294.12,
0.1mol/L溶液为
29.41克/毫升32乙酸-乙酸钠缓冲液
6.
0.2mol/L
0.3mol/L
0.3mol/L
0.2mol/L HAc
0.2mol/L HAcpH18℃pH18℃NaAc―却NaAc»»
2.
60.
759.
254.
85.
904.
103.
81.
208.
805.
07.
003.
004.
01.
808.
205.
27.
902.
104.
22.
657.
355.
48.
601.
404.
43.
706.
305.
69.
100.
904.
64.
905.
105.
89.
400.60分子量=溶液为克/升Na Ac-3H O
136.09,
0.2mol/L
27.2222磷酸盐缓冲液
7.磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液
10.
20.3mol/L
0.2mol/L
0.3mol/L
0.2mol/L NaH2PO4pH pH毫NaHPO24NaH2PO4毫升NaHPO«24升
5.
88.
092.
07.
061.
039.
05.
910.
090.
07.
167.
033.
06.
012.
387.
77.
272.
028.
06.
115.
085.
07.
377.
023.
06.
218.
581.
57.
481.
019.
06.
322.
577.
57.
584.
016.
06.
426.
573.
57.
687.
013.
06.
531.
568.
57.
789.
510.
56.
637.
562.
57.
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