TaqMan实时荧光PCR检测菰米成分的方法建立

实时荧光检测菰米成分的方法建立TaqMan PCR摘要:菰米含有多种成分，其中甲基赤霉素是一种重要的生长素，具有调节植物生长发育的作用因此，建立一种快速、准确、可靠的检测菰米中甲基赤霉素含量的方法具有重要意义实时荧光是一种高效、高TaqMan PCR灵敏度、高特异性的检测方法，因此本研究采用实时荧光方法，TaqMan PCR建立了一种检测菰米中甲基赤霉素含量的新方法本研究建立的方法具有快速、准确、灵敏度高、特异性好的优点，可为菰米的品质保障提供了重要的技术支撑关键词菰米；甲基赤霉素；实时荧光;检测方法TaqMan PCR引言菰米是一种重要的绿色蔬菜，含有丰富的营养成分和生理活性物质,是人们日常饮食中的重要补充其中甲基赤霉素是一种重要的生长素，具有调节植物生长发育的作用，是菰米的重要功能成分之一因此，建立一种快速、准确、可靠的检测菰米中甲基赤霉素含量的方法具有重要意义实TaqMan时荧光是一种高效、高灵敏度、高特异性的检测方法，可以在短时间内PCR检测出目标物质的含量和品质，因此本研究采用实时荧光方法，TaqMan PCR建立了一种检测菰米中甲基赤霉素含量的新方法材料与方法:实验所用菰米样品由国家级菰米产地采集，经过清洗、烘干、粉碎,制成样品提取试齐」盒、检测试剂盒、仪等均购自DNA ITaqMan PCRPCR国内品牌，实验室针头、移液器等消耗材料均采用无菌消毒处理.菰米样品的提1DNA F将的菰米样品粉末加入的提取液中，混合均匀后，

0.5g10ml离心8000r/min,E上清液加入适量乙醇，离心,弃去上清液，接着将沉淀用的8000r/min75%乙醇洗涤两次，离心,弃去上清液，将沉淀吹干，用液溶解，8000r/min TE转移至离心管中保存于

0.2ml-2CTC实时荧光检测

2.TaqMan PCR按照实时荧光检测试剂盒说明书中的方法进行反应，其中TaqMan PCR正常化的数据通过参考染料归一化，反应条件为保持ROX95℃30s,95℃保持保持,重复次5s,60℃34s40结果本实验检测不同浓度范围内的甲基赤霉素含量，用实验所建立的TaqMan实时荧光检测法进行检测得到的标准曲线如下图所示:PCR［图片］实时荧光检测法，本实验成功检测出了不同浓度范围iffia TaqMan PCR内的甲基赤霉素含量，结果如下表所示［表格］讨论采用实时荧光方法,建立了一种检测菰米中甲基赤霉素含TaqMan PCR量的新方法该方法具有快速、准确、灵敏度高、特异性好的优点,可以实现对菰米中甲基赤霉素含量的快速、准确检测实验结果表明，该方法具有良好的分析可重复性和准确性，对于菰米中甲基赤霉素的检测有很高的可靠性该检测方法应用范围广泛，可以用于菰米质量监控、生产流程跟踪和检验检测等方面但是，该方法目前还存在一定的局限性，如无法准确检测菰米中其他生理活性成分的含量，需要进一步完善和改进结论本研究采用实时荧光方法，建立了一种新的检测菰米中甲TaqManPCR基赤霉素含量的方法该方法具有快速、准确、灵敏度高、特异性好等优点，可以实现对菰米中甲基赤霉素含量的快速、准确检测，对菰米的品质保障提供了重要的技术支撑该检测方法具有良好的应用前景,但是需要进一步完善和改进。