《培养基及其制备》课件

培养基及其制备培养基的概念及作用定义作用人工配制的营养物质，供微生物为微生物、植物或动物组织提供、植物或动物组织生长繁殖的基生长所需的营养物质，如碳源、质氮源、矿物质等分类根据用途，培养基可分为细菌培养基、真菌培养基、植物组织培养基等培养基的组成成分碳源氮源矿物质维生素为微生物生长提供碳骨架，主提供合成蛋白质等氮素化合物为微生物生长提供必需的无机提供微生物生长必需的生长因要包括糖类、有机酸等所需的氮，主要包括氨基酸、盐，主要包括磷、钾、镁、硫子，主要包括维生素族、维生B无机氮等等素等C碳源概念种类选择原则碳源是微生物生长所需的碳元素来源碳碳源的种类很多，常见的碳源包括糖类、选择碳源时需要考虑微生物的种类、生长源主要用于合成细胞物质，如蛋白质、核有机酸、醇类和脂肪阶段和培养目的酸和多糖氮源提供合成蛋白质、核酸等有机物的氮某些微生物可以利用简单的无机氮化元素合物，如氨、硝酸盐等植物则需要利用硝酸盐或铵盐作为氮源矿物质无机盐离子状态补充微量元素培养基中必需的无机盐类，为微生物矿物质在培养基中以离子状态存在，一些微量元素，如锰、锌、铜等，虽提供生长必需的元素，如磷、钾、镁参与微生物的代谢活动，维持细胞的然含量很少，但对微生物生长发育同、硫、钙、铁等渗透压和酸碱平衡样不可或缺维生素生长因子种类多样12维生素是微生物生长必需的物常见的维生素包括维生素族B质，通常用量很小、维生素、维生素等C K功能独特3维生素参与多种重要的代谢过程，如酶的辅因子、辅酶等其他辅助成分琼脂碳酸钙酵母提取物琼脂是一种从海藻中提取的多糖，它可以碳酸钙是一种无机盐，它可以作为培养基酵母提取物是一种由酵母菌经酶解和提取作为培养基的凝固剂琼脂无毒、无味、的缓冲剂，用于维持培养基的值稳定而得到的物质，它含有丰富的营养物质，pH不会被细菌分解，在培养基中可以形成固碳酸钙可以防止培养基的值发生剧例如氨基酸、维生素和矿物质酵母提取pH态的培养基琼脂培养基通常用于培养细烈的变化，从而保证微生物的正常生长物可以作为培养基的营养补充剂，促进微菌、真菌和酵母等微生物生物的生长培养基的种类固体培养基液体培养基半固体培养基含有琼脂或其他凝固剂，用于培养细菌、真不含凝固剂，常用于大量培养微生物或进行含有少量凝固剂，用于观察细菌运动或进行菌等微生物生物化学反应研究某些特殊实验常见细菌培养基营养琼脂培养基血琼脂培养基用于培养大多数细菌用于培养苛养菌，如肺炎链球菌巧克力琼脂培养基用于培养脑膜炎奈瑟菌等常见真菌培养基马铃薯葡萄糖琼脂培养基沙保培养基SabouraudPDA DextroseAgar广泛用于培养各种真菌，特别是霉菌和酵母菌富含葡萄糖，适用于培养皮肤癣菌等真菌麦芽汁琼脂培养基MEA主要用于培养大型真菌，例如蘑菇和木耳植物组织培养基无菌环境特定激素12培养基通常包含各种营养物质培养基中加入特定激素，可以，例如糖、氨基酸、维生素和诱导植物细胞分化形成根、芽激素，以支持植物细胞和组织或完整的植株的生长再生植株3植物组织培养技术可用于快速繁殖稀有或濒危植物，并用于生产无病植株培养基的值pH值的重要性最佳值值的影响pH pH pH值是培养基中氢离子浓度的量度，它大多数细菌在值到之间生长良不合适的值会导致微生物生长受阻或pH pH

6.

57.5pH对微生物的生长至关重要好，而真菌则喜欢稍微酸性的环境死亡培养基的消毒方法高压灭菌利用高压蒸汽将培养基中的微生物杀死，是最常用的消毒方法滤膜灭菌用滤膜将培养基中的微生物去除，适合对热敏感的培养基化学消毒使用化学试剂对培养基进行消毒，例如乙醇、过氧化氢等高压灭菌原理设备步骤利用高温高压蒸汽使培养基中的微生物高压蒸汽灭菌器，又称高压锅将培养基装入灭菌器，设定温度和时间蛋白质变性，达到灭菌目的，进行灭菌滤膜灭菌膜过滤一次性过滤器使用孔径小于细菌大小的滤膜，将细菌截留在滤膜上，达到灭菌的适用于小体积液体，操作简单，方便快捷，是常用的灭菌方法目的化学消毒化学物质选择合适的化学消毒剂，确保对培养基有效且不会对后续实验造成干扰使用化学物质如酒精、过氧化氢等进行消毒根据消毒剂的浓度和温度，严格控制消毒时间，确保达到消毒效果培养基的配制步骤称量原料1根据配方精确称取所需原料配制基础培养液2将原料溶解于水中，加热溶解调整值pH3使用酸碱溶液调节培养基的值pH分装培养基4将配制好的培养基分装到合适的容器中灭菌培养基5使用高压蒸汽灭菌或其他方法灭菌称量原料精确测量电子天平使用精确的仪器称量每种原料，以确保培养基的成分比例准确电子天平可以提高称量的精度，减少误差，确保培养基质量配制基础培养液称量溶解根据配方，准确称取各种成分，将称量好的成分加入到一定量的包括碳源、氮源、矿物质、维生蒸馏水中，并充分搅拌使其完全素等溶解定容将溶液定容到所需的体积，并用蒸馏水补充至刻度线调整值pH值的重要性调整方法pH大多数微生物在特定的值范围内生长良好不同的微生物对可以使用稀释的酸或碱来调整培养基的值例如，可以使用稀pH pH pH值的耐受性不同，例如细菌一般在值为的环境中生长释的盐酸或氢氧化钠溶液来降低或升高值pH

6.5-

7.5pH良好，而霉菌则更喜欢酸性环境分装培养基选择合适容器分装培养基12根据培养基的体积和培养方式将灭菌后的培养基分装到容器选择合适的容器，如试管、三中，装量应适宜，避免过满或角瓶、培养皿等过少封口处理3用棉塞或其他合适材料封口，防止污染灭菌培养基高压灭菌滤膜灭菌化学消毒常用方法，可杀死大部分微生物适用于热敏性物质，例如维生素溶液使用消毒剂，例如酒精或过氧化氢培养基的质量检验123外观检查无菌性检查值检测pH观察培养基的颜色、透明度和是否有沉进行无菌培养，观察培养基是否被污染使用计测量培养基的值，确保在pH pH淀物合适的范围内外观检查颜色透明度观察培养基的颜色是否正常，例观察培养基是否透明，无浑浊或如，肉汤培养基应为透明的淡黄沉淀现象，这表明培养基中可能色，琼脂培养基应为透明的淡黄存在污染物色或浅红色气泡检查培养基中是否有气泡，过多的气泡可能会影响微生物的生长无菌性检查培养基灭菌后，应进行无菌性检查，无菌性检查通常在无菌操作台或超净确保培养基中没有细菌或真菌污染工作台中进行，避免环境污染无菌性检查的方法包括培养法和显微镜检查法值检测pH重要性方法值对微生物生长至关重要，需要精确测量以确保培养基适合特使用计或试纸进行测量计更精确，但试纸更方便快捷pHpHpHpH定微生物的生长培养基的储存储存温度1一般在℃冷藏保存，防止细菌滋生4储存时间2建议在年内使用完，过期的培养基可能失去活性1注意事项3避免阳光直射，保持干燥通风，防止潮湿发霉储存温度℃℃4-20大多数培养基应储存在冰箱中，温度控制在℃左右，以保持一些敏感的培养基，如含有酶或抗生素的培养基，需要更低的4其稳定性和活性温度储存，例如℃，以延长其有效期-20存储时间液体培养基固体培养基液体培养基在℃冰箱中可保存周固体培养基在℃冰箱中可保存个月42-441-2注意事项在配制培养基时，要严格控制各种成培养基的消毒灭菌要彻底，以确保无分的用量和配比，避免出现误差菌状态培养基的储存时间不宜过长，应尽量在短时间内使用小结培养基是微生物生长和繁殖的必需物质，其制备是微生物研究和应用的基础。