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猪瘟病理剖检猪瘟是一种高度传染性的猪病,会导致高死亡率病理剖检是诊断猪瘟的重要手段,可以帮助确定病因、了解病变程度,并制定有效的治疗方案课程大纲猪瘟概述猪瘟的传播途径猪瘟的定义、病原学、流行病学,以及其对养猪业的重大影响主要通过接触病畜、病畜排泄物、污染的饲料和水等途径传播猪瘟的临床症状猪瘟的病理剖检包括发热、食欲下降、精神沉郁、呼吸困难、腹泻等症状主要观察猪瘟患病猪只的肉眼病变,并分析其病理变化猪瘟概述猪瘟是由猪瘟病毒引起的急性、高度接触性传染病该病主要侵害猪的淋巴组织、单核吞噬细胞系统以及内皮细胞,以高热、出血、淋巴结肿大、内脏器官坏死为主要临床特征,病死率极高猪瘟的传播途径直接接触间接接触气溶胶传播生物媒介患病猪只与健康猪只直接接触通过污染的饲料、饮水、器械患病猪只咳嗽或打喷嚏时,病蚊蝇等生物媒介叮咬患病猪只,例如鼻腔分泌物、唾液或粪、车辆等物品接触传播毒可以通过气溶胶的形式传播后,可携带病毒传播到其他猪便等到空气中只猪瘟的临床症状发烧呼吸道症状消化道症状皮肤症状猪瘟的典型症状之一是发烧,猪瘟病毒会感染呼吸道,导致猪瘟病毒会破坏肠道黏膜,导猪瘟病毒会造成血管损伤,导温度通常会升高到℃以上,呼吸困难、咳嗽、打喷嚏,甚致腹泻、呕吐、食欲减退,粪致皮肤出现红斑、出血点,严40而且体温波动较大至肺炎等症状便稀薄且带有恶臭味重时可能出现弥漫性皮肤出血猪瘟患病猪只的外观特征猪瘟患病猪只的外观特征表现为精神沉郁,食欲下降,体温升高,呼吸困难,眼结膜充血,鼻腔流出浆液性鼻涕,咳嗽,腹泻,呕吐,排便次数增多,粪便呈稀水状,有时混有血液患病猪只的皮肤出现红斑,紫斑,甚至出血点,眼结膜充血,鼻腔流出浆液性鼻涕,咳嗽,腹泻,呕吐,排便次数增多,粪便呈稀水状,有时混有血液猪瘟猪只的解剖病理变化肝脏1肿大、出血、坏死脾脏2肿大、出血、坏死淋巴结3肿大、出血、坏死肾脏4肿大、出血、坏死肺脏5肿大、出血、坏死猪瘟病理剖检是诊断猪瘟的重要手段之一,主要通过观察病变特征进行诊断猪瘟病变部位主要集中在肝脏、脾脏、淋巴结、肾脏、肺脏等器官常见病理改变部位肝脏——肝脏肿大肝脏出血肝脏坏死肝脏脂肪变性猪瘟病毒感染可导致肝脏肿大严重感染的猪只,肝脏表面可肝细胞发生坏死,形成黄白色肝细胞内脂肪堆积,肝脏颜色,颜色变淡或呈黄褐色见出血点或斑块坏死灶,肝脏表面凹凸不平发黄,质地变脆常见病理改变部位脾脏——脾脏是重要的免疫器官,在猪瘟感染中,脾脏发生明显的病理变化,是诊断猪瘟的重要指标之一猪瘟病变脾脏体积增大,颜色变暗,表面可见出血点或斑块切开后,脾髓充血,呈暗红色,质地柔软,易碎镜下观察可见脾小体增生、淋巴细胞减少、血管扩张充血等病理变化常见病理改变部位肾脏——猪瘟病理剖检中,肾脏的病变较为明显,肾脏肿大,表面呈暗红色或灰白色切开后可见皮质和髓质交界处有出血点或条纹状出血肾小管上皮细胞肿胀、坏死,肾小球有炎症细胞浸润肾脏病变会影响猪瘟病情的严重程度,导致猪瘟的死亡率上升常见病理改变部位淋巴结——猪瘟病毒感染后,淋巴结会发生明显的变化淋巴结肿大,颜色变暗,质地变硬,切面呈出血点或斑块状淋巴结内的淋巴细胞大量增生,形成淋巴滤泡增生和淋巴小结,导致淋巴结肿大常见病理改变部位呼吸系统——肺脏充血出血气管炎和支气管炎肺间质炎肺脏呈暗红色,质地坚实,切面可见多个出气管和支气管黏膜充血肿胀,表面覆盖一层肺间质水肿,间质内有大量淋巴细胞浸润,血点粘液或脓性分泌物可出现肺泡壁增厚常见病理改变部位消化系——统猪瘟病理变化主要集中在消化系统,尤其是胃肠道胃黏膜呈现出血性炎症,肠道充血、水肿,肠黏膜糜烂,甚至坏死这些病理变化会导致动物出现呕吐、腹泻、消瘦等症状猪瘟病毒的免疫逃逸机制免疫抑制抗原变异免疫逃逸蛋白猪瘟病毒抑制宿主免疫细胞,例如淋巴细胞猪瘟病毒基因组不稳定,容易发生变异,导猪瘟病毒编码一些免疫逃逸蛋白,例如gp4和巨噬细胞的活化和增殖,阻碍机体免疫应致病毒蛋白结构发生变化,逃避宿主免疫系,能够干扰抗原呈递和免疫细胞活化,降低答统的识别和攻击宿主免疫应答猪瘟病毒致病机制病毒入侵免疫抑制12猪瘟病毒通过呼吸道或消化道入侵猪只机体,在宿主细胞内猪瘟病毒感染后,导致机体免疫系统功能低下,无法有效清复制增殖除病毒,甚至加剧病情组织损伤全身感染34病毒复制增殖过程中,破坏宿主细胞,导致各种组织器官损病毒通过血液循环扩散至全身,引发多种临床症状,最终导伤,例如肝脏、脾脏和淋巴结致机体衰竭死亡猪瘟诊断的实验室检查方法病理学检查血清学检测猪瘟病理学检查主要观察病变特血清学检测是检测猪瘟抗体,主征,例如肝脏、脾脏和淋巴结的要采用方法,可以快速检ELISA肿大或坏死根据病变部位和程测猪血清中的猪瘟抗体,判断猪度,可以初步诊断猪瘟是否感染猪瘟病毒分离培养核酸检测病毒分离培养需要将采集到的样核酸检测技术包括和实时荧PCR品进行培养,观察病毒的生长情光定量,可以直接检测猪瘟PCR况,并通过血清学方法进行鉴定病毒的基因,灵敏度高,可以快,可以确定感染猪瘟的病毒类型速准确诊断猪瘟抗体检测方法血清学检测实验室检测方法血清中抗体检测方法可用于检测猪瘟病毒抗体常用的实验室检测方法包括血清中和试验SN,确认猪只是否感染过猪瘟病毒,并判断其免、酶联免疫吸附试验以及免疫荧光试ELISA疫状态验等IFA核酸检测方法检测基因芯片检测PCR检测法利用引物特异性扩增目标基因,可检测病毒核酸的存基因芯片技术可同时检测多种病原体,包括猪瘟病毒此方法可PCR在采用实时荧光定量()可以更加灵敏地检测病毒以快速、高效地检测猪瘟病毒核酸,并进行病毒分型分析PCR qPCR核酸,并进行定量分析病毒分离培养细胞培养病毒增殖
1.
2.12将猪瘟病毒接种到细胞培养中病毒在细胞内增殖,导致细胞,如细胞病变,如细胞死亡PK-15病毒分离
3.3分离纯化的病毒,用于进一步的鉴定和研究猪瘟病毒基因分型病毒基因组提取特定基因片段扩增
1.
2.12从感染猪瘟病毒的样本中提取使用聚合酶链式反应PCR病毒基因组,例如血清、组织技术扩增猪瘟病毒基因组的特样本或细胞培养物定片段,例如编码核衣壳蛋白或糖蛋白的基因序列分析与比对基因分型结果分析
3.
4.34对扩增的基因片段进行测序,根据基因分型结果,可以确定并与已知的猪瘟病毒基因序列猪瘟病毒的流行株系,以及病进行比对,确定病毒的基因型毒的进化关系和传播路径猪瘟疫情监测猪瘟的防控措施生物安全隔离免疫接种严格控制人员和车辆进出,避免使用猪瘟疫苗进行免疫接种,提带入病毒高猪群的免疫力对猪舍进行消毒,防止病毒传播定期进行免疫接种,保持猪群的免疫保护疫病监测定期对猪群进行体检,及时发现病猪建立疫情报告制度,及时报告疫情生物安全隔离隔离猪舍人员隔离车辆隔离饲料隔离隔离猪舍用于隔离新引进的猪进入隔离区的人员应穿戴防护进入隔离区内的车辆应进行消隔离猪舍的饲料应单独存放,只,防止病原传播隔离猪舍服、口罩、手套等防护用品,毒,并限制其进出其他区域并进行消毒饲料应尽可能选应与其他猪舍保持一定距离,并进行严格消毒隔离区内应隔离区内应配备专门的车辆消择新鲜的,避免使用过期的或并设有独立的进出口、消毒设配备专门的消毒设施,定期进毒设施被污染的饲料施行消毒免疫接种猪瘟疫苗猪瘟疫苗分为弱毒疫苗和灭活疫苗免疫程序母猪和仔猪都需要进行免疫接种免疫效果免疫接种可以有效预防猪瘟的发生生物安全级别的划分生物安全实验室级别实验室等级划分生物安全实验室根据其所处理的病原体的危险程度,被分为四个级别处理低风险的微生物,例如大肠杆菌等级BSL-1BSL-2级别别处理中等风险的微生物,例如艾滋病毒等•一级生物安全实验室()级别处理高风险的微生物,例如炭疽杆菌等级BSL-1BSL-3BSL-4别处理最高风险的微生物,例如埃博拉病毒等•二级生物安全实验室()BSL-2•三级生物安全实验室()BSL-3•四级生物安全实验室()BSL-4实验室生物安全防护个人防护环境安全12正确佩戴口罩、手套、防护服定期消毒实验室环境,防止病等个人防护用品毒传播废弃物处理紧急预案34按照相关规定处理感染性废弃制定实验室生物安全事故的应物,防止污染环境急预案,确保安全病理剖检操作流程准备阶段1穿戴防护服,准备工具和器械,消毒工作区域解剖阶段2按照顺序解剖动物,记录观察各器官病变取样阶段3采集病变组织,制备切片,进行显微镜观察记录阶段4详细记录解剖过程,病变部位和特征,拍照留存整个操作流程需严格遵守生物安全规范,确保工作人员安全和防止病原扩散样品采集与保存样品采集准确、规范采集病料,确保样品代表性样品保存适当保存方法,防止腐败或污染,维持样品完整性样品标记妥善标记,包含日期、地点、动物编号等信息,方便追踪和管理解剖时的注意事项个人防护无菌操作详细记录样本采集操作人员必须穿戴防护服、手解剖工具要消毒,避免污染其详细记录解剖过程,包括病变采集病变组织样本,用于进一套、口罩,避免接触病原体他组织和环境部位、程度、颜色、质地等步的病理检查和病毒检测样品制备与观察固定1用福尔马林溶液固定组织样本,时间至少小时10%24切片2将固定后的组织样本进行脱水、透明、包埋、切片,制成病理切片染色3常用的染色方法包括苏木精伊红染色(染色)、吉姆萨染色等-HE观察4在显微镜下观察染色后的切片,记录病变特征病理诊断要点肝脏病变脾脏病变肝脏肿大,颜色苍白或呈淡黄色脾脏肿大,颜色暗红或呈紫红色,表面有出血点或斑块切面可,表面有出血点或斑块切面可见弥漫性或灶性坏死,肝细胞肿见脾髓充血、出血,淋巴滤泡增胀,核固缩或消失生或萎缩肾脏病变淋巴结病变肾脏肿大,颜色苍白或呈淡黄色淋巴结肿大,颜色暗红或呈紫红,表面有出血点或斑块切面可色,切面可见淋巴滤泡增生或萎见肾小管上皮细胞肿胀或坏死,缩,淋巴细胞减少或消失肾小球囊肿结论与总结猪瘟是高度传染性的猪病,对养猪业造成重大经济损失了解猪瘟病理剖检的要点,对防控猪瘟至关重要。
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