尿毒清颗粒对糖尿病肾病大鼠P-选择素水平的影响

尿毒清颗粒对糖尿病肾病大鼠选择素水平的影响P-王玉洋安雅臣赵晓晶史国辉摘要目的观察尿毒清颗粒对糖尿病肾病大鼠选择素水平的影响，探讨其肾脏保护的作用机制方P-法采用腹腔注射链麻佐菌素制造成糖尿病肾病大鼠模型，健康周龄雄性清洁级大鼠只随机分8Wistar50为正常对照组组、糖尿病肾病模型组组、尿毒清颗粒治疗组嗯・腹腔注射，组]应用N DN[40/kg d,T免疫组化的方法检测大鼠肾组织中的选择素蛋白表达水平，观察各组大鼠肾组织中选择素的表达水平P-4有何差异结果免疫组化分析提示组大鼠的肾组织■选择素呈弱阳性表达，组和组大鼠的肾N PDN T组织4选择素表达明显强于组结论在糖尿病肾病的发生发展过程中存在着4选择素表达水平的变化，N尿毒清颗粒的治疗对选择素有一定的抑制作用，从而可以延缓糖尿病肾病大鼠肾功能的衰减P-关键词糖尿病肾病；尿毒清颗粒；选择素P-The effectof Niaoduqing-granule on the P-selectin levelin ratswith diabeticnephropath WANGYu-xun,AN Ya-chen,ZHAOXiao-jing,SHI Guo-hui.Affliated Hospitalof theNorth CoalMedical University,Tangshan063000,ChinaCorresponding author:AN Ya-chen E-mail:anyachen007@

126.com[Abstract]Objective Toobserve theeffect ofNiaoduqing-granule therapyon theP-selectin levelin ratswith diabeticnephropathy,to explorethe mechanismof kidneyprotection.Methods Therats modelof diabetic nephropathy wereestablishedby intraperitonealinjections ofstreptozotocin.50rats wererandomly dividedinto normalcontrol groupN group,diebeticnephropathy groupDNgroup,and Niaoduqing-granule groupT group.The P-selectin expressionlevels weredetected byimmunohistochemistiy.Results P-selectin ofkidney tissuesin Ngroup wasweak positive.P-selectin ofkidney tissuesin DNandT groupwere muchstronger thanNgroup.Conclusion Thereexist inP-selectin expressionchange in the processof developmentofdiabetic nephropathy,Niaoduqing-granule mayplay arenoprotective rolein inhibitingthe expression of P-selectin.【Key words]Diabetic nephropathy;Niaoduqing-granule;P-selectin糖尿病肾病（diabeticnephropathy）特有的病脏保护的作用机制理改变是肾小球微血管病变所致肾小球硬化［1］,材料与方法1肾脏具有强大的代偿功能，如果在刚出现微量蛋白

1.1实验动物分组及模型建立健康8周龄雄性Wistar尿时进行干预治疗，则可防止向大量蛋白尿发展或大鼠50只（购自北京维通利华实验动物技术有限公延缓其发展速度P-选择素是血小板活化的标志，近司），清洁级，体重180200g,然后随机分成3组〜年来大量研究证实在糖尿病肾病患者的肾组织中P-正常对照组（N组）10只、糖尿病肾病模型组（DN选择素表达程度要显著高于正常对照组和其他肾小组）20只、尿毒清颗粒治疗组（T组）20只DN组球疾病组，其分布主要位于肾小球毛细血管和间质与T组按60nig/kg体重一次性腹腔注射链胭佐菌素小管周围毛细血管［2］尿毒清颗粒为中药复方制（STZ）［3-］N组则注射等量的枸椽酸钠缓冲液剂，目前已广泛应用于慢性肾脏疾病的治疗，本实72h后连续测3d血糖N

16.7mmol/L,尿糖》++即算验采用横向分组，纵向观察的方法研究活造模成功，稳定1周后人选若血糖

16.7mmol/L,尿糖〈++,则予以剔除

1.2药物干预N组和DN组每日给予与DN组等容积doi:1（

0.15〜

0.20矶）的生理盐水灌胃1次，共8周T基金项目河北联合大学附属医院博硕科研基金项目（编号:组每日给予尿毒清颗粒（广东康臣药业有限公司BS05009）生产）［40mg/（kg・d）,腹腔注射］,用生理盐水

0.作者单位河北省唐山市，河北联合大学附063000稀释予以灌胃次，连续周15~

0.20mL18属医院肾内科肾组织病理学检测肾组织标本行染色，用普通信作者安雅臣E-mail:anyachen007@

126.com

1.3HE通光学显微镜检查肾组织染色方法苏木体大鼠在糖尿病肾病模型组中P-选择素蛋白表达水HE Harris精染色自来水冲洗多余染液盐酸酒精分化平与尿毒清颗粒治疗组的差异，探讨尿毒清颗粒肾7min;3min;l%数秒使细胞核呈蓝色；自来水充分洗涤；氨水中数性表达组大鼠肾小球、肾小管的选择素均呈阳1%DN P-秒至返蓝；自来水至蒸储水冲洗数次；伊红染色性表达，组与组比较组较组的选择素1%T DNT DN P-表达有所抑制以上结果表明组大鼠的肾小球、肾3min DN结果小管中有高度表达的选择素尿毒清颗粒的治疗对2P-组大鼠肾小球、肾小管中的选择素呈微弱阳选择素有一定的抑制作用见图N P-P-1〜3❹❷❸图组大鼠肾组织免疫组化选择素表达图组大鼠肾组织免疫组化选择素表达义1NP-xlOO2DN P-300图组大鼠肾组织免疫组化选择素表达3T P-X3003讨论脏，它是糖尿病及其并发症治疗的有效手段之一王琼等采用尿毒清颗粒的基本组成配方大黄、黄黄、由于糖尿病长期代谢紊乱，使肾组织发生肾小球[8川号、白术、茯苓、菊花等进行体外实验证实，该方微血管病变、肾动脉硬化等病理改变，因此糖尿病肾剂能抑制糖基化终产物引起的肾小球系膜细胞病成为糖尿病最常见的一种并发症，严重影响了患者AGEs的增殖，减少作用下中羟脯氨酸含量的增的机体功能，所以尽早控制糖尿病肾病的发生和防止AGEs ECM加为尿毒清颗粒抑制糖尿病肾病的发生发展提供了疾病的发展尤为重要5客观依据因此尿毒清颗粒能通过抗血小板活化继而近年来大量研究证实在糖尿病肾病患者的肾组织降低肾组织内选择素的水平，缓解由凝血系统参与P-中选择素主要位于肾小球毛细血管和间质的小管周P-所致的肾脏局部炎症反应对肾脏组织的损伤作用围毛细血管一方面，高糖能刺激肾小球内皮细胞

[2]o参考文献高度表达选择素含选择素配体的白细胞中性4P-P-粒细胞、单核-巨噬细胞等通过受体-配体结合方式黏

[1]Wang X,McLennan SV,Twigg SM.CCN-2is up-regulated byand附于血管内皮细胞，介导白细胞在血管内皮上的锚定mediates effectsof matrixbound advancedglycated end-products inhumanrenal mesangialcells[J|.J CellCommun Signal,和滚动，这是白细胞浸润的第一步，引起血管内皮细2011,53:193-

200.胞损伤，白细胞从内皮细胞间隙渗出，炎性细胞在肾

[2]Naji Y,Amol B,Neal K,et al.Platelet abnormalitiesin diabetesmellitus小球、间质中大量浸润，导致炎症损伤；另一方面，[J].Coronary ArteryDisease,2003,145:365-

371.高糖能刺激血小板膜上高表达选择素，促使血小板P-

[3]Sato TN,Tozawa Y,Deutsch U,et al.Distinct rolesof thereceptor tyrosin聚集活化，介导血小板与内皮细胞白细胞的黏附及微kinases Tie-1and Tie-2in bloodvessel formation[J].Nature,1995,3766535:70-

74.血管内血栓形成心因此，选择素可能是肾小管上P-于德民，吴锐.实验性链胭佐菌素糖尿病动物模型的研究.

[4][J]皮细胞的活化标志，参与了肾小管间质的病变中国糖尿病杂志，1995,32:105-

109.本实验证实了选择素在糖尿病大鼠肾组织上表

[5]陶凯.氯沙坦对糖尿病大鼠肾脏的保护作用[J].实用医学杂志，P-2012,2820:3354-

3356.达明显等研究证明糖尿病并发肾病组比糖尿Omoto

[6]Hitoshi O,Naotsuka O,Kenro I,et al.Effects ofACE病无并发症组中的选择素明显增加，而且糖尿病肾P-inhibitorsACEIsand angiotensinreceptor blockersARBsonthe病患者外周血选择素阳性的血小板数量要比正常对P-endothelial-neutrophil adhesionand thesurface expressionof照组及无并发症的糖尿病组都要明显升高，在给予抗endothelial adhesionmolecules mediatedby highglucose[JJ.血小板药物后选择素阳性的血小板水平显著下降Diabetes,2003,52Sl:A

178.P-所以选择素是血小板的活化标志，这就认为血小板

[7]Omoto S,Nomura S,.Shouzu A,et al.Significance ofP-plateletderived microparticlesand activatedplatelets indiabetic活化在糖尿病的发病机制中发挥了重要的作用糖尿nephropathy fJ].Nephron,1999,813:271-

277.病时由于血小板活化因子产生增多可使选择素的表P-王琼，汪宁，余黎，等.中药复方对糖基化终末产物培养下的

[8]达增加，促使肾病的进一步发展抗血小板治疗可以肾小球系膜细胞增殖以及系膜基质增生的影响中国中[J].抑制血小板的活化，减轻患者的高凝状态从而保护肾医药信息杂志，2007,142:35-

36.收稿编辑吴淑金2012-12-29蛛网膜下腔出血后迟发性血管痉挛大鼠变化研究Caveolin-1熊叶游慧超谭显西摘要目的观察蛛网膜下腔出血后迟发性血管痉挛大鼠subarachnoid hemorrhage’s AHdelayed cerebral vasospasm,DCVS在基底动脉中的表达情况方法大鼠只，分为空白组、生理盐水组和组组、生理盐水组又分Caveol in7SD150SAH SAH为建模后第、、、天组采用枕大池二次注血法建模，观察基底动脉病理改变，检测蛋白含量变化结357144Caveol in-1果1动物建模情况SAH组大鼠各时间点上Bederson评分21分，证明DCVS建模成功；2血管痉挛情况SAH后第3天出现明显管腔变小，第7天管腔变小达高峰，中膜平滑肌层增厚最为明显P

0.05;3Caveol in-1情况SAH组第7天Caveol in7表达较生理盐水组及空白组显著下降P

0.05结论基底动脉Caveol inT的下调可能与SAH大鼠DCVS有关，可能成为诱发治疗的潜在靶点，为的治疗提供方向SAH DCVSDVCS关键词蛛网膜下腔出血；迟发性血管痉挛；Caveolin-1Research of Caveolin-1changing after delayed cerebralvasospasm in rat modelof subarachnoid hemorrhage XIONGYe,YOU Hui-chao,TAN Xian-xi.Department ofNeurosurgery,The FirstAffiliated Hospitalof WenzhouMedical College,Wenzhou325000,ChinaCorresponding author:TAN Xian-xi E-mail:drtxxwz@

163.comI AbstractObjective Toobserve theexpressionofCaveoion-1in thebasilal arteryafterdelayed cerebral vasospasmDCVSin ratmodelof subarachnoidhemorrhage SAH.Methods Onehundred andfifty SDrats wererandomly dividedinto blankgroup,saline group andSAH group.The SAHgroupandsaline groupwere dividedinto three,five,seven andfourteen daysafter establishingmodel.SAH modelwasestablished bydouble injectionof autologousarterial bloodinto thecisterna magana,test thechanging of Caveoin-1in thebasal artery.ResultslThe situationof SAHmodel:in SAHgroup,all animalsBederson neurologicalseverity scores1,proving thesuccess ofmodel.2The situationofvasospasm;the lumenof basilarartery inthe SAH groups lessenedgradually andpeaked onthe7th days,the thicknessof vascularsmoothmuscle layerof basilarartery significantlyincreased P

0.

05.3The situationofCaveolin-1:the protein expression ofCaveolin-1by westernblot testintheSAHgroupsdecreased tothe lowestpoint onthe7th days,significandy decreasedcompared withthat inthesaline groupsand blankgroups.Conclusion TheproteinexpressionofCaveoin-1is down-regulated inbasilal arteryafter DCVSinratmodel ofSAH,Caveoin-1may bea potentialinhibitor forDCVS andprovide thedirection forDCVS treatment.[Key words]Subarachnoid hemorrhage;Delayed cerebralvasospasm;Caveoion-1脑血管痉挛cerebralvasospasm,CVS是蛛网膜下腔重的并发症之一，其发病率高达16%66%临床中迟〜出血subarachnoidhemorrhage,SAH最严发性脑血管痉挛delayedcerebralvasospasm,DCVS是初次出血患者致残和致死的主要原因2目前对DCVS无确切的预防和治疗方法有研究⑶表明，Caveolin-1基因敲除小鼠的血管平滑肌增生较野生作者单位温州医学院附属第一医院神经外科325000型明显然而Caveolin-1蛋白是否参与了通信作者谭显西E-mail:drtxxwz@

163.com。