牙膏中总氟的检验方法

附件7牙膏中总氟的检验方法（征求意见稿）Determination ofTotal Fluoridein Toothpaste范围1本方法规定了气相色谱法测定牙膏中总氟的含量本方法适用于牙膏中总氟含量的测定方法提要2样品经过衍生化提取后，采用气相色谱分离，氢火焰离子化检测器检测，根据保留时间定性，氟化物与内标峰面积比定量本方法对总氟的检出限为

0.001mg,定量下限为

0.002mg；取样量为

0.2g时-，本方法检出浓度为最低定量浓度为5mg/kg,10mg/kg0试剂和材料3除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯或以上规格，水为规定的一级水GB/T

66823.1高纯氮气（）

99.999%o高纯氢气（）

3.

299.999%甲苯

3.3三甲基氯硅烷（）

3.4TMCS o高氯酸:

3.570%〜72%正戊烷纯度

3.

6299.5%氟化钠基准氟化钠（干燥）

3.7105℃±2℃,2h氟离子标准溶液，浓度（有证标准溶液）

3.81000mg/L氯化钠溶液称取氯化钠于玻璃容量瓶中，用一级水稀释至刻度，摇匀

3.910%100g1L

3.10氟离子标准储备溶液精确称取

0.1105g基准氟化钠（

3.7）于500mL塑料容量瓶中，用一级水溶解并定容，摇匀，贮存于聚乙烯塑料瓶中，溶液浓度为或准确移取氟离子标准溶100mg/Lo液（

3.8）10mL于100mL塑料容量瓶中，用一级水稀释并定容到刻度，摇匀，贮存于聚乙烯塑料瓶中，溶液浓度为100mg/L正戊烷内标贮备液称取约（精确到）正戊烷（）于玻璃容量瓶中，

3.

110.5g

0.01g

3.6100mL用甲苯（

3.3）稀释至刻度，摇匀此内标贮备液存放于冰箱中，4℃保存

3.12正戊烷内标溶液用移液管移取

5.0mL正戊烷内标贮备液（

3.12）至250mL玻璃容量瓶中，用甲苯（

3.3）稀释并定容至刻度，摇匀此溶液临用时配制注同一分析过程中，所有标准溶液和样品溶液应使用同一内标溶液进行配制仪器和设备

44.1气相色谱仪，配有氢火焰离子化检测器（FID）,配置分流/不分流进样口天平，精度为

4.

20.0001g离心机

4.3涡旋混合仪

4.4振荡器

4.5冰箱，℃和-

4.6418℃o磁力搅拌器

4.7分析步骤5样品溶液的制备

5.1准确称取牙膏样品（精确至）至带盖塑料瓶中，加氯化钠溶

0.2g

0.0001g40mL10mL10%液（

3.10）,放入一个搅拌子，以磁力搅拌器400rpm搅拌至膏体完全分散标准系列溶液的配制

5.2分别准确移取氟离子标准储备溶液（）适量于个带盖塑料瓶中，加入氯化

3.11540mL10%钠溶液（

3.10）使总体积为10mL,得到氟离子标准系列溶液，其中含有氟离子分别为

0.01mg,

0.02（浓度范围可根据实际情况进行调整）mg,

0.1mg,

0.2mg,

0.5mg样品溶液和标准系列溶液的处理

5.3将溶液样品（

5.1）和标准系列溶液（

5.2）放入冰水中或冰箱冷冻室冷却10min,在通风橱中分别加入

0.5mL高氯酸（

3.5）、准确加入

10.0mL正戊烷内标溶液（

3.13）,再加入

0.5mL三甲基氯硅烷（

3.4）,每加完一种试剂立即加盖，涡旋30s后放在振荡器上，以300rpm振摇10min将上述样品溶液和标准系列溶液,转移至塑料离心管中，以离心后，50mL5000rpm15min于冰水中或冰箱冷冻室放置以加快其分层吸取上层清液于进样瓶中待分析30min,参考色谱条件

5.4色谱柱DB-5毛细管柱（30mx

0.25mmx

0.25|im）,或等效色谱柱；程序升温初始温度60℃,保持

1.8min,以每分钟40℃升至160℃,保持3min；进样口温度℃；200检测器（）温度℃；FID300载气氮气，流速；1mL/min分流比1:10；隔垫吹扫2mL/min；尾吹气氮气，；25mL/min进样量IpL；氢气30mL/min；空气300mL/mino测定

5.5标准曲线测定

5.

5.1在分析条件下，用标准系列溶液分别注入气相色谱仪，以氟离子质量为横坐标，“

5.4”

5.3氟化物与正戊烷内标的峰面积比为纵坐标，进行线性回归，建立标准曲线，其线性相关系数应大于

0.999o样品测定552按项方法处理取得待测样品溶液，注入气相色谱仪，按气相条件测定，根据保留

5.

35.4时间定性，内标与目标峰分离度应多以氟化物与正戊烷内标的峰面积比在标准曲线得到样品5待测溶液中氟离子的质量，按计算样品中的总氟含量“6”分析结果的表述6计算

6.1X100%3=叫mxlOOO式中样品中总氟含量，结果精确到小数点后两位数字，%；CO——从标准曲线得到的试样溶液中被测组分的质量，毫克；mi——mg样品取样量，克m——g在重复性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%o回收率和精密度

6.2总氟的回收率在之间，相对标准偏差小于88%-109%5%n=6图谱7图总氟标准溶液的参考色谱分离图11氟化物

2.63min；2正戊烷

2.83min附录A（资料性附录〉总氟阳性结果的确证对测定过程中有阳性结果的样品，必要时可用气相色谱-质谱法确认参考气相色谱-质谱条件A.1色谱柱（）或等效色谱柱；DB-530mx

0.25mmx

0.25|im,柱温初始温度60℃,保持

1.8min,以每分钟40℃升至160℃,保持3min；进样口温度℃；250离子源温度℃；230接口温度℃；280扫描模式选择离子监测（SIM模式）；柱流量恒流模式；LOmL/min,分流比10:1质谱参考特征离子A.2表总氟的质谱参考特征离子A.1名称特征离子丰度比（％）允许相对偏差（％）三甲基氟硅烷、、774749100:15:11±30%正戊烷、、434142//图谱A.3图标准溶液谱图A.1SIM500000i77400000-300000-200000-100000-4749十02030405060708090100质荷比m/z图氟化物质谱图A.21600000-431400000-1200000-学1000000-41800000-42600000-400000-200000-304050600--质荷比（m/z）20图内标质谱图A.3牙膏中总氟的检验方法（征求意见稿）起草说明为加强牙膏的监督管理，进一步提高牙膏使用安全性，中国食品药品检定研究院组织开展了《牙膏中总氟的测定》检测方法的研究制定工作现就工作有关情况说明如下

一、起草原则本方法制定时.，遵循先进性、科学性、合理性和可操作性的原则在保证先进性和科学性的基础上，尽量采用目前化妆品实验室普遍具有的分析仪器，以便方法的推广、执行，同时，方法条例清晰、操作性强，选择准确、可行、便于实际操作的分析条件，保证了检测方法的可操作性和重现性

二、起草过程中国食品药品检定研究院于年月委托开展牙膏中总氟的检验方法建立和验证工作202311通过查阅国内外相关文献资料，组织前期研究、试验，考察不同原料的牙膏基质、不同样品处理方法对总氟测定的影响，优化检测条件，建立了牙膏中总氟量的检测方法，并于年202312月委托五家单位开展实验室间方法学验证，最终形成了牙膏中总氟的检验方法三与我国已有相关标准的关系《化妆品监督管理条例》中规定牙膏参照有关普通化妆品的规定进行管理目前，国内现行的牙膏中总氟量的检测标准为《牙膏》，该标准样品前处理时间长，缺乏阳GB/T8372-2017性确证手段，同时，该方法中的衍生化试剂用量会对仪器及试验用品产生损害本方法结合实际检测中的问题深入研究，对样品前处理方法和仪器条件进行优化，建立高效、准确的牙膏总氟的气相色谱定量方法，并建立阳性确证气相色谱-质谱联用方法，解决当前牙膏总氟检测问题，弥补当前《化妆品安全技术规范》牙膏中总氟检测空白四与《规范》中原方法的对比情况《规范》现无相关方法

五、国际相关标准情况目前国外针对牙膏中氟含量的测定方法主要有ISO116092017《A testingof totalfluoride in和《dentifrices Directive83/514/EEC ThirdCommission Directiveon theApproximation ofthe Lawsofthe MemberStates Relatingto Methodsof AnalysisNecessary forChecking theComposition ofCosmeticProducts》其中，ISO116092017中氟离子选择电极对于检测体系pH要求较高，操作难度大，样品中不能被酸水解的氟难于被检出，适用于可溶氟和游离氟的检测，不适合总氟量的检测；和检测原理基本一样，同样存在上述方法问题Directive83/514/EEC GB/T8372-2017因此，进一步优化和建立牙膏中总氟量检测方法十分必要

六、实验室验证情况根据《化妆品中禁用物质和限用物质检测方法验证技术规范》（国食药监许「」）及2010455《化妆品补充检验方法研究起草技术指南》（国家药监局年第号通告），对本方法进202128行实验室内确认和实验室间方法验证选用种无本底的代表性牙膏样品基质方法验证,指标包1括方法特异性、线性及线性范围、检出限和定量下限、日内精密度、日间精密度、准确度、日内稳定性、日间稳定性、阳性确证方法验证，另选用种实际含氟牙膏样品进行验证，验证结1果均满足相关要求

七、其它需说明的问题.关于体例1本检测方法的体例主要参照《化妆品安全技术规范》的理化检验方法的体例，便于化妆品检验领域相关检验人员阅读和实际操作.关于检测方法的建立和验证2本方法规定了采用气相色谱-火焰离子检测器测定牙膏中总氟含量，并对阳性结果进行气相色谱-质谱法确证方法使用标准物质优化仪器条件，经过对样品前处理方法的选择，最终建立了牙膏中总氟的气相色谱检测方法，并辅以气相色谱-质谱法进行阳性结果确证采用在空白牙膏中加入不同含量的氟成分的方式，对方法进行了充分的验证，证明了方法准确、可靠，能满足实际样品的测试需求。