输血前免疫血液学检查疑难配血

输血前免疫血液学检查-一疑难配血血液标本得采集及准备

1、输血申请单必须含有病人姓名、住院号、床号及负责医师得签名还应包含申请日期、用血原因及时间、用血种类及数量；年龄、性别、种族、疾病诊断、输血史、妊娠史、输血反应史、有无不规则抗体及血型等

2、受血者血样

①认真核对后，方可采集；

②血液标本必须收集到有正确标记得带塞子得试管里，且标明病人姓名、住院号、采集日期及采集者；3血液标本应就是不抗凝血，以避免纤维蛋白、抗凝剂成分对血清学试验得干扰；4溶血或混入静脉输注液体而致标本稀释得血液标本不得使用；5须用输血前3天以内采集得血液标本；

⑥输血后，病人得血液标本须在4℃至少保存7天，以备重复试验

⑦用右旋糖肝、聚乙酰毗咯酮（PVP）等大分子物质治疗后采集得血标本（如已标记说明应将红细胞洗涤）脂肪乳可干扰配血实验结果，在输用脂肪乳之前应抽取血标本备用3献血员血样1从血袋上附着得血样小辫获得献血员血液标本；

②在标本收集管上粘贴血袋上有关血液制品号得条形码标签；

③准确核对血袋上及标本管上得号码血清学试验

一、受血者试验

（一）血型鉴定

1、ABO血型鉴定

（1）常规鉴定:2正定型用抗一A抗一B试剂检测受血者红细胞3反定型用A与B型试剂红细胞检测血清中得抗体

1、抗体鉴定技术

①低离子强度液（USS）—I AT

②聚乙二醇（PEG）—I AT

③微胶柱凝集技术

④聚凝胺（LIP）-I AT

⑤酶技术

2、抗体鉴定中得特殊技术:

①使用硫醇试剂

②吸收试验

③放散试验

④效价已配合血液得标记及发放取血与发血得双方必须共同查对病人姓名、性别、疾病诊断、病案号、门急诊/病室、病床号、ABO及Rh血型；血液有效期、血制品名称、数量与外观、供血者编号；交叉配血试验结果、试验人员姓名等；确保准确无误时，经双方共同签字后方可发出血液发出后，受血病人及供血者得血液样本至少须保存于26°C冰箱7天，〜以便追查输血不良反应得原因不规则抗体筛选与鉴定得方法方法有很多，试总结一下它们各自应用范围与优缺点人ABO血型就是由红细胞得抗原与血浆/血清中得抗体所决定，因此正反定型得结果应该一致表1常规ABO正反定型试验正定型反定型血型抗—A抗一B AB00+04-+00+A0+0B+++00AB⑵如果正反定型不一致，则需进一步鉴定可在正定型试验中增加抗一A

1、抗一表2疑难ABO正反定型试验正定型反定型自身对照抗-A抗-B抗-AB抗-AAl A2B0抗-HAB及抗一H,反定型试验中增加A

2、0及自身红细胞正定型试验中得抗一AB就是用来确认弱A与弱B抗原，抗一A1用于鉴定A亚型，抗一H用于鉴定亚型及孟买型反定型试验中得A2细胞就是用于鉴定A2亚型细胞用于鉴定就是否存在ABO系统以外得同种抗体影响定型，自身对照用于就是否存在自身抗体影响定型，如果与0细胞或自身对照为阳性，则定型结果不可靠，必须进一步进行血型鉴定3如果无法找到正反定型不一致得原因，则只能给病人输注0型红细胞，病人血型可请血液中心血型参比试验室协助鉴定4ABO定型不一致得原因I、反定型试验出现弱反应或缺失抗体新生儿；老人；低球蛋白症得白血病人或淋巴瘤病人恶性；使用免疫抑制剂而致低球蛋白得病人；先天丙球缺乏得病人；免疫缺陷者；骨髓移植病人；双胞胎嵌合体II、弱反应或缺失抗原A亚型、B亚型或AB亚型；白血病导致A或B抗原减弱，何杰金病有时会抑制抗原表达，与白血病类似；某种疾病如腹腔癌、胰腺癌导致血浆中存在大量得型物质，中与抗一A或抗一B抗体，引起正定型为假阴性或弱阳性；洗涤红细胞可解决此问题；获得性B；抗一A或抗一B试剂中存在低频抗原得抗体IIL蛋白或血浆不正常引起得正反定型不符某些疾病导致球蛋白水平增高引起缗钱状凝集，纤维蛋白原水平得增高也会引起缗钱状凝集，导致假阳性凝集；洗涤红细胞血浆增溶剂葡聚糖、PVP也会引起缗钱状凝集IV、其她原因引起得正反定型不符多凝集当病人感染细菌或病毒后，病毒或细菌产生得酶使红细胞上掩蔽得T抗原暴露激活，由于正常人血清中都含有抗一T抗体，因此可与正常人血清产生凝集反应，正定型试验假阳性；冷自身抗体引起得自家凝集反应，正反定型均可出现假阳性；DAT及IAT均阳性存在ABO系统得意外抗体,如A2或A2B个体血清中可能存在天然抗一A1,导致反定型试验多出抗体；被检者血清中存在ABO系统以外得同种抗体，反定型时出现假阳性反应；非抗一A及抗一B得抗体与相应抗原形成复合体吸附在红细胞表面，引起正定型非特异性凝集,如抗一B得染料叫噫黄

2、RhD血型鉴定1RhD抗原检测原则

①对受血者常规一般只测RhD抗原，而对献血员不仅要检查RhD抗原，并在其为阴性得前提下必须进一步确定就是否为弱RhD即D Uo

②RhD阴性及弱D得受血者只能提供RhD阴性血，不得使用D阳性及弱D得血即弱D针对受血者而言为D阴性，而对于供血者而言则为D阳性

③对直接抗人球蛋白试验阳性得Rh D阴性红细胞进行Rh D定型时，易引起假阳性反应，因此必须按照试剂生产商得试剂使用说明书要求，增加对照试验2RhD抗原检测方法:

①试管法；

②微柱凝胶法

二、不规则抗体得检测与鉴定

1、血型不规则抗体检测必须对有输血史、妊娠史或短期内需要接受多次输血者及交叉配血不合者进行抗体筛选试验1抗体筛选得重要性有利于早期发现与确认具有临床意义得抗体，并可以在配血前鉴定此意外抗体，获得充足得时间来选择缺少相应抗原得相配合得血，避免由于寻找不到相合得血液而造成患者病情得延误2抗体筛选用试剂红细胞

①试剂红细胞必须含有下列抗原D,C,E,c,e,M,N,S,s,P1,Lea,Leb,K,k,Fya,Fyb,Jka,与Jkb

②目前已商品化得试剂红细胞有两种，分别为双人份细胞与三人份细胞组Rh-II KellDuffy KiddLewis P MN LutheranXgrdonoreK FyaFybjka JkbLeaLebPl sLuaLub XgaMNR1R1++++II R2R200+++0++++两组细胞抗原分布图三组细胞抗原分布图Fya JkaLea LuadonorDC cE eKPIMNSs XgaLebLubFyb Jkb1R1R1++00++++++0R2R2+0++00+0+0+4-rr00+0+0++00+4-Rh-Hr KellDuffyKiddLewisPMNLutheranXg

③试剂红细胞就是保存在保存液中，一旦用生理盐水或Liss液洗涤后则应该在24小时内使用，否则会因污染、抗原丢失导致试验错误⑶抗体筛选技术

①技术要求尽可能多得检测出有临床意义得抗体尽可能少得检测出无临床意义得抗体尽可能快得完成抗体检测

②方法选择:每种方法都有自己得特点，适应于不同范围及情况立即离心盐水试验技术可以用于检测干扰ABO定型得盐水反应活性抗体，但此方法会检查出无临床意义得抗体，如冷凝集素抗一1及抗一IH等但漏检IgG性质得抗体L iss一间接抗人球技术（L iss-1AT）此方法可以有效得用于检测不规则抗体（I gG性质），目前市场上见到得微胶柱方法都就是L iss-1AT得方法,如澳斯邦（AusBio）得博唯优（BioVue）、达亚美（DiaMed）得ID-卡，以及Immucol得Capture技术也就是Liss-IAT方法此方法缺点就是无法排除无临床意义抗体得干扰酶试验（菠萝酶或木瓜酶）很少用于输血前检查中得抗体检测，因为酶方法会破坏一些红细胞抗原，如M,N,S,Fya与Fyb,但酶技术可以增强Rh及Ke II系统得抗体检测主要用于MNSs系统得抗体鉴定低离子聚凝胺技术（LIP-IAT）所需试验时间少（35分钟）、方法灵敏度高，但由于〜反应温度为室温，因此无法排除无临床意义抗体得干扰（尤其就是室温盐水反应性抗体）聚乙二醇-间接抗人球方法（PEG-1AT）PEG-1AT就是很灵敏且有效得检测抗体得方法，可以提高反应得强度，同时此方法可以有效得避免无临床意义抗体得干扰

（4）自身对照即使用病人自己得血清与自己红细胞进行抗体检测，有助于确定抗体筛选阳性结果就是同种抗体还就是自身抗体、或就是缗钱引起

2、抗体鉴定在病人血清不规则抗体检查为阳性时，且时间允许得情况下，在交叉配血之前，应该可以进行简单得抗体鉴定试验，确定抗体得特异性，会有助于选择无对应抗原得相合血如抗一cE抗体在人群中得相合率为30%0

二、供血者检测从供血中心获得得血液，交叉配血前须进行ABO定型，对于Rh（D）阴性得血液还需确认其非弱D型，并把检测结果与血袋上得标识相比较，确保一致交叉配血

一、血液得选择

（一）、血型

1、ABO系统:

①全血必须选择同样血型得全血

②成分血选择血型相配得血病人血型相合得血浆相合全血相合得红细胞000,A,B,AB00,A A,AB AA0,B B,AB BB0,A,B,AB AB ABA B

2、Rh系统

①Rh（D）阳性患者可以选择阳性血及阴性血

②Rh（D）阴性及弱D患者只能选择Rh⑻阴性血

3、其她系统对于已经明确抗体特异性得病人，则应选择缺乏相应抗原得血液

（二）、储存时间一般来说，首先使用较陈旧得血，但以下情况属于例外，需用新鲜血

1、病人将接受大量得血液（超过自身总血量）

2、新生儿换血及婴幼儿输血（病人本身血容量小，而用血量又大）

3、接受定期输血得病人（如地中海贫血病人、肾透析病人、再障病人），使输血间隔时间延长

（三）、新生儿换血得血液选择:

1、Rh⑻新生儿溶血病，选择Rh D阴性ABO血型与婴儿与母亲相配合，或0型Rh D阴性得洗涤红细胞及AB型血浆，用母血清进行交叉配血

2、ABO新生儿溶血病，选择ABO血型与婴儿及母亲相配合得且Rh血型与婴儿相同得红细胞及AB型血浆组成得血液使用

3、其她任何新生儿溶血，选择不含特异性抗体所对应抗原得ABO系统与婴儿相同得血输注新生儿溶血病换血用得ABO系统血型相合红细胞选择母血型供血者血型婴儿血型00,A,B00,B0AA,ABA,00,A0BB,AB B,000ABA A,0B B,0AB AB,A,B,0

二、交叉配血交叉配血有两个重要作用，其一就是确认供血者及受血者得AB0血型得相合性，其二就是可检测出受血者血清中不规则抗体，此抗体可能在抗体筛选试验中由于筛选试剂红细胞缺乏相应抗原而漏检一主侧交叉及次侧交叉试验

1、主侧交叉由病人血清及供血者红细胞组成次侧交叉由病人红细胞及供血者血清组成由于我市尚未对供血者进行抗体筛选，因此次侧交叉就是非常必要得自身对照病人自身血清及病人自身红细胞组成，自身对照有助于分析解释交叉配血试验中出现得阳性结果

2、常规配血技术选择得技术不仅要能检查出不配合得IgM抗体，还必须能检查出尽可能多得不配合得IgG抗体最大限度得减少抗体得漏检1立即离心技术配血法用于检查ABO得不配合及室温反应活性抗体引起得不配合⑵抗人球蛋白配血法用于检查不规则抗体IgG引起得交叉配血不配合，有Liss一抗人球法、PEG一抗人球法、LIP一抗人球法

3、特殊配血技术⑴预温配血技术主要用于解决室温反应活性得无临床意义得抗体引起得交叉配血不配合⑵冷型自家溶贫病人得配血试验，用于解决自身冷凝集引起得配血困难3温型自家溶贫病人得配血试验，用于解决自身温抗体引起得配血困难4纤原未完全析出得血样，如肾透析、凝血功能差得病人，在配血时引起假阳性

4、结果得解释1主侧交叉配血不相合得原因病人或供血者ABO定型不正确，或二者得ABO血型不配合病人血清中存在同种抗体，与供血者红细胞上得相应抗原反应病人血清中存在自身抗体，与供血者红细胞上得相应抗原反应供血者红细胞上已经包被了抗体，导致抗球蛋白试验阳性病人血清不正常，如白蛋白/球蛋白比例不正常引起缗钱状假凝集，血清中存在高分子聚合物得血浆扩容剂引起假阳性用盐水添加试验来解决试验系统被污染2次测交叉配血不相合得原因供血者血浆中存在针对病人红细胞抗原得抗体病人与供血者得ABO血型不相合病人得红细胞已经包被了抗体，直接抗人球蛋白试验阳性主侧配血不相合原因分析工门缶可能原因解决方案现象主侧+病人或供血者ABO错误重新定型自身一病人血清可能含ABO抗体检查病人亚型、输血史及移植史抗体筛选病人血清中有抗体，但筛选细胞上无相对病人血清进行抗体鉴定-应抗原检查供血者直接抗球蛋白试验供血者红细胞直接抗球蛋白试验阳性主侧+抗体筛选胞上相应抗原反应应抗原得血自身一病人血清中得同种抗体与供血者红细对病人血清进行抗体鉴定,选择无对病人血清中可能同时存在自身抗体与对病人血清自身吸收及抗体鉴定,用吸主侧+同种抗体收后血清配血自身+病人血清不正常盐水添加试验解决缗钱抗体筛选白蛋白/球蛋白比值不正常抽去新标本+血浆扩容物使用新器具污染*抗体鉴定可由血液中心来检验抗体鉴定可以鉴定抗体得特异性，有助于给病人选择相配合得血液,还可以预防新生儿溶血病

一、一般程序

（一）血液样本血清或血浆均可，但更多用血清

（二）病史记录病人临床诊断、输血史、妊娠史与近期使用得药物

（三）试剂:谱细胞就是挑选出得10个或更多个已知血型表现型得0型细胞谱细胞必须含有Rh、Kell、Duffy.Kidd、P、Lewi s与MNS系统得抗原，且对大部分单一得同种抗体有一个清楚得反应格局增强介质USS、PEG与LIP等，均有商品供应抗人球蛋白试剂抗-1gG与抗-1gG+抗-C3;但抗-1gG使用得更多

（四）自身对照有助于决定病人就是否有同种抗体，或有自身抗体，或两者兼有

二、血清学方法得选择无任何单一得方法可以检查出所有得抗体在选择方法时必须了解此方法得特异性、灵敏度、局限性、假阳性与假阴性情况影响抗原一抗体反应得因素有孵育温度、提高血清对细胞得比例、延长反应时间、改变pH与低离子强度。