牙膏中二甘醇和乙二醇的检验方法

附件8牙膏中二甘醇和乙二醇的检验方法（征求意见稿）Determination ofDiethylene Glycoland Glycolin Toothpaste1范围本方法规定了气相色谱法测定牙膏中二甘醇和乙二醇的含量本方法适用于牙膏中二甘醇和乙二醇含量的测定2方法提要样品提取后，经气相色谱仪分离，氢火焰离子化检测器检测，根据保留时间定性，峰面积定量，以标准曲线法计算含量本方法二甘醇和乙二醇的检出限均为

1.5ng,定量限均为5ng当取样量为1g时，检出浓度均为

37.5mg/kg,最低定量浓度均为125mg/kgo3试剂和材料除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯或以上规格，水为GB/T6682规定的一级水

3.1甲醇，色谱纯

3.2氯化钠

3.3标准品乙二醇和二甘醇标准品信息详见附录A

3.4高纯氮（

99.999%）

3.5高纯氢（

99.999%）

3.6无油压缩空气，经装5X分子筛的净化管净化

3.7混合标准储备溶液称取乙二醇和二甘醇各10mg（精确至

0.0001g）至10mL容量瓶中，用甲醇（

3.1）溶解并定容至刻度，配制成浓度为lg/L的混合标准储备溶液，于4℃保存1个月4仪器和设备

4.1气相色谱仪，氢火焰离子化检测器（FID）

4.2超声波清洗器中醇超声提取GC-FID+GC-MS HP-INNOWAX2010~500GB/T32115-2015口腔护理产品中乙二醇与二甘醇的测定方法饱和氯化钠超声GC-FID ZB-WAXplus40020~500QB/T5411-2019提取，正己烷除化妆品中禁用物质二甘醇杂的测定气相色谱法甲醇超声提取GC-MS HP-INNOWAX1961-10SN/T4505-2016091N-113化妆品中二甘醇残留量的测定气质联用法

四、与《规范》中原方法的对比情况《规范》中无牙膏相关方法

五、国际相关标准情况未检索到国外相关标准

六、实验室验证情况根据《关于印发化妆品中禁用物质和限用物质检测方法验证技术规范的通知》（国食药监许［2010J455号）验证要求，选取无本底值的牙膏样品，进行方法特异性、线性及线性范围、检出限和定量下限、精密度、准确度和稳定性实验，同时对实际样品进行了检测并对阳性样品进行了定性判定经本实验室内部和3家外部实验室验证，结果满足检测要求

七、其他需说明的问题本方法的体例主要参照《化妆品安全技术规范》（2015年版）的理化检验方法的体例,以规范和统一书写，方便化妆品检验领域相关检验人员的阅读和使用

4.3分析天平:感量

0.0001g和

0.00001go

4.4涡旋振荡器

4.

50.22pm滤膜5分析步骤

5.1混合标准系列曲线制备精密移取混合标准储备溶液

3.

70.

050.

10、

0.

20、

0.

40、

0.

80、

1.0mL于10mL容量瓶中，用甲醇

3.1定容，配制成

0.

005、

0.0k

0.

020.

040.

080.1g/L混合标准系列溶液注实验室可根据实际情况调整合适的标准系列溶液浓度范围

5.2样品处理称取样品1g精确至

0.001g,置于25mL具塞比色管中，加甲醇

3.1定容至刻度，再加入1g氯化钠，涡旋震荡1min,使试样与提取溶剂充分混匀，超声提取20min,提取液经

0.22pm滤膜过滤，滤液作为待测液

5.3参考色谱条件色谱柱DB-62430mx

0.32mmxl.80pim,或等效色谱柱；程序升温1初始温度40℃,保持3min,以10℃/min升至90℃,保持3min,以20℃/min升至160℃,保持5min,以20℃/min升至180℃,保持5min,以30℃/min升至240℃,保持9min；可根据实际情况调整升温程序；载气氮气，纯度，

99.999%；流速

1.5mL/min；进样口温度240℃；检测器温度:280℃；进样方式分流进样，分流比101;进样量11L；程序升温2初始温度90℃,保持3min,以10℃/min升至170℃,保持8min,以20℃/min升至240℃,保持10min；载气氮气，纯度

299.999%；流速

1.2mL/min；进样口温度240℃；检测器温度280℃；进样方式分流进样，分流比101;进样量1RL；注当待测样品有干扰时可采用程序升温2排除干扰

5.4测定在“

5.3”参考色谱条件下，取混合标准系列溶液

5.1分别进样，记录色图谱，以标准系列溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线在“

5.3”参考色谱条件下，取待测样品溶液进样，记录色图谱，以保留时间定性，测得峰面积，根据标准曲线得到待测溶液中各组分的浓度，按“6”计算样品中各组分的含量6分析结果的表述6」计算pxVxlOOOco=-------------m式中co——样品中待测组分的含量，mg/kg；p——试样溶液中待测组分的质量浓度，g/L；V-----样品定容体积，mL；m-----样品取样量，g；在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%o

6.2回收率和精密度多家实验室验证乙二醇和二甘醇的回收率在

93.6%〜

113.3%之间，相对标准偏差小于

2.2%n=6o7图谱

38000.

036000.

034000.

032000.

030000.

028000.

026000.

024000.

022000.

020000.0浴

18000.

016000.

014000.0自二

12000.0磔

10000.

08000.

06000.

04000.

02000.

00.0-

2000.

04000.0，

0.

002.

004.

006.

008.

0010.

0012.

0014.

0016.

0018.

0020.

0022.

0024.

0026.

0028.

0030.

0032.

0034.

0036.00Mnutes||2图1程序升温1标准溶液色谱图1乙二醇

15.242min；2二甘醇

21.693min

40000.

038000.

036000.

034000.

032000.

030000.

028000.

026000.

024000.

022000.

020000.0绛

18000.

016000.

014000.

012000.

010000.

08000.

06000.

04000.

02000.

00.0--

2000.

04000.

00.

004.

006.

008.

0010.

0012.

0014.

0016.

0018.

0020.

0022.

0024.

0026.

0028.

0030.

0032.0CMinutes图2程序升温2标准溶液色谱图I乙二醇

10.352min；2二甘醇

17.208min附录A表A.1乙二醇和二甘醇标准品信息表序号中文名称CAS号分子式相对分子量纯度（％）1乙二醇2二甘醇107-21-1C2H

62.

07299.562附录B气相色谱-质谱结果确证如气相方法中检出结果存在不确定因素，可采用气相色谱-质谱法进行确证

8.1样品前处理过程见

5.

28.2参考色谱条件色谱柱DB-624色谱柱（30mxO.25mmx

1.40|jm）,或等效色谱柱；程序升温初始温度40℃,保持1min,以10℃局由速率升温至150℃,保持511±1；再以30℃/min速率升温至250℃,保持5min；载气高纯氢（纯度

99.99%）；进样口温度250℃；MSD传输线温度250℃；流速LOmL/min,恒流模式；进样方式分流进样，分流比30:1；进样量LO|uL

8.3参考质谱条件

8.4为EI源，电离能量70eV；离子源温度250℃；

8.5迟

4.0min；测定方式选择离子监测（SIM）采集模式，扫描范围10〜150amu各组分的参考特征离子见表B.k表B.1各组分的的质谱参考特征离子组分名称分子量定量离子定性离子和丰度比332962乙二醇623110035133757631二甘醇10645100241211在相同的试验条件下，如样品中检出的色谱峰的保留时间与标准溶液中对应组分一致，所选择的监测离子对的相对丰度比与相当浓度标准溶液的离子对相对丰度比的偏差不超过表B.2规定范围，则可判断样品中存在对应的待测组分表B.2结果确证时相对离子丰度比的最大允许偏差相对离子丰度（K）K50%50%》K20%20%》K10%KW10%允许的最大偏差±20%±25%±30%±50%36I39101112131413161Y181920212223242o262/282930Countsv«.竟失疗何ein图B.1混合标准溶液GC-MS色谱图1乙二醇

8.018min；2二甘醇

13.220minI-r----------------r7075质荷比m/z+SIM

7.954-

6.179min,43scans**s

4.DXo.

0.

0.

0.

0.

0.

0.

0.

0.1A o298765432119876543210图B.2乙二醇质谱图.155-

13.386min,44scans**s

4.DElmo

45.0s

2.25-2-

1.75-

1.5-

75.

01.25-1-

29.

00.75-

0.5-

31.

00.25-ixx Ii rI IH55606570753035404550质荷比m/z图B.3二甘醇质谱图55455672•03••

40125573.2牙膏中乙二醇和二甘醇的检验方法（征求意见稿）起草说明为加强牙膏的监督管理，进一步提高牙膏使用安全性，中国食品药品检定研究院组织开展了牙膏中乙二醇和二甘醇的检验方法的研究制定工作现就工作有关情况说明如下

一、起草原则本方法目的是为牙膏中乙二醇和二甘醇的检测提供方法，该方法兼顾先进性和可行性,具条理清晰，可操作性强的特点，采用目前化妆品检测实验室普遍具备的分析技术，选择准确、可行、便于实际操作的分析条件，保证方法的可操作性和重现性二起草过程中国食品药品检定研究院于2023年11月组织开展牙膏中乙二醇和二甘醇的检验方法的建立和验证工作在充分收集、认真研究国内相关标准和文献的基础上，经过试验摸索，确定了方法的分析条件，建立了方法，并经过实验室内和3家实验室外验证，验证过程和结果符合《关于印发化妆品中禁用物质和限用物质检测方法验证技术规范的通知》（国食药监许

[2010]455号）验证技术规范要求，最终形成了《牙膏中乙二醇和二甘醇的检验方法》三与我国已有相关标准的关系目前检索到的国内相关标准主要见表lo从表中可见现行标准检测乙二醇与二甘醇主要采用气相色谱法定量，气相色谱-质谱联用法确证；主要用甲醇、无水乙醇、饱和氯化钠溶液等提取，极性色谱柱分离，方法检出浓度在6〜400|Ig/g之间，线性范围在1-1000|ig/mL之间表1国内相关标准检测标准提取方法检测方法色谱柱检出浓度皿线性范围仙）/g）/mL无水乙醇提取GC-FID+GC-MS DB-WAX301-16《化妆品安全技术规范》

2.20二甘醇甲醇超声提取GC-FID+GC-MS HP-INNOWAX5010~1000GB/T21842-2008牙膏中二甘醇的测定水溶解GC-FID DB-624//GB/T22114-2021牙膏用保湿剂甘油和聚乙二醇。