《抗体制备过程》课件

抗体制备过程课程目标了解抗体制备的基本原掌握单克隆抗体和多克了解抗体的性质和应用展望抗体技术未来发展理隆抗体的区别趋势学习抗体的结构、功能、检掌握抗体制备的基本流程，深入了解单克隆抗体和多克测方法以及在生物医药领域了解重组抗体技术、人源化包括免疫、杂交瘤技术、抗隆抗体的特点、制备方法以的应用抗体、纳米抗体等最新发展体纯化等及应用领域方向免疫学基础免疫系统概述抗原和抗体免疫系统是机体抵御病原体入侵抗原是能够刺激机体产生免疫反和维持机体内部环境稳定的防御应的物质，而抗体是免疫系统产体系生的特异性蛋白，能够识别并结合抗原细胞免疫和体液免疫细胞免疫是指由免疫细胞直接杀伤病原体或感染细胞，而体液免疫则是指由抗体介导的免疫反应免疫系统概述

1.1防御入侵识别和消灭免疫系统保护机体免受病原体入侵，免疫系统识别和消灭入侵的病原体，例如细菌、病毒和真菌以及体内产生的异常细胞记忆功能免疫系统具有记忆功能，可以记住曾经接触过的病原体，以便下次遇到时更快地作出反应抗原和抗体

1.2抗原抗体可以诱导机体产生特异性免疫应答的物质，通常是蛋白质或多糖由免疫系统产生的特异性蛋白质，可以识别和结合特定的抗原细胞免疫和体液免疫

1.3细胞免疫体液免疫12主要由淋巴细胞介导，识别主要由淋巴细胞介导，产生T B和清除被感染细胞或肿瘤细胞抗体以识别和中和病原体单克隆抗体制备

2.免疫细胞融合杂交瘤细胞筛选抗体纯化将免疫的脾脏细胞与骨髓瘤细胞融合，产通过培养基筛选出分泌抗体的杂交瘤使用各种方法纯化单克隆抗体，如亲和层HAT生杂交瘤细胞细胞析杂交瘤技术

2.1免疫细胞B从免疫动物脾脏中分离出能够产生特异性抗体的淋巴细胞B骨髓瘤细胞使用永生化的骨髓瘤细胞株，这些细胞能够无限增殖融合利用等融合剂将细胞和骨髓瘤细胞融合在一起，形成杂PEG B交瘤细胞杂交瘤细胞的培养和筛选

2.2筛选1选择产生特异性抗体的杂交瘤细胞培养2在合适的培养基中增殖杂交瘤细胞融合3将免疫淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合B单克隆抗体的纯化

2.3亲和层析1利用抗原或抗体特异性结合的原理离子交换层析2利用抗体的电荷性质分离凝胶过滤层析3根据抗体分子大小进行分离多克隆抗体制备抗原的選擇免疫動物抗體純化選擇與目標抗原具有高度特異性的抗原使用適當的免疫動物，例如小鼠、兔子使用不同的方法纯化抗體，例如蛋白A/G，以提高抗體的效價和特異性或山羊，根據抗原性質和研究目的選擇亲和层析或免疫沉淀，以獲得高純度的合适的動物抗體免疫原的设计和选择

3.1抗原性1选择具有强抗原性的免疫原，能有效刺激机体产生抗体纯度2免疫原的纯度越高，越能有效地刺激机体产生针对特定抗原的抗体稳定性3选择稳定的免疫原，可以长期保存并有效地刺激机体产生抗体动物的免疫和血清采集免疫原注射将制备好的免疫原，根据动物种类和免疫方案，选择合适的注射途径和剂量，进行多次免疫血清采集免疫结束后，从动物体内采集血液，分离血清，即含有抗体的血浆部分抗体效价检测对采集的血清进行抗体效价检测，以确定免疫效果和抗体浓度多克隆抗体的纯化

3.3蛋白亲和层析A/G1利用抗体段与蛋白的亲和性进行纯化Fc A/G盐析法2利用不同盐浓度使抗体沉淀离子交换层析3利用抗体表面电荷差异进行分离抗体的性质和应用抗体的结构与功能抗体的检测方法12抗体是由免疫系统产生的蛋白多种检测方法可用于检测和定质，能识别并结合特定的抗原量抗体，例如酶联免疫吸附测，从而发挥免疫作用它们具定法和免疫印迹法ELISA有高度的特异性和亲和力，能这些方法被Western blot够与目标抗原紧密结合，从而广泛应用于疾病诊断、药物开阻断其活性或标记其位置，以发和生物研究等领域便免疫系统将其清除抗体在生物医药中的应用3抗体在生物医药领域拥有广泛的应用，包括疾病诊断、药物开发、治疗和预防例如，单克隆抗体被用于治疗癌症、自身免疫性疾病和感染性疾病等疾病抗体结构与功能形结构抗原结合位点Y抗体呈形，由两个轻链和两个每个抗原结合位点特异性地识别Y重链组成，形成两个抗原结合位和结合特定抗原，从而发挥免疫点防御作用效应功能抗体的效应功能包括中和、沉淀、调理作用和补体激活，这些功能共同帮助机体抵抗感染和疾病抗体的检测方法

4.2ELISA免疫印迹酶联免疫吸附测定是一种常用的免疫印迹是一种常用的ELISA WesternBlot抗体检测方法，利用酶标记的抗体或抗原抗体检测方法，利用抗体与目标蛋白结合与待测抗体或抗原反应，通过酶催化显色，通过电泳分离蛋白，然后用抗体探测，反应来定量或定性检测抗体最后通过显色或化学发光检测来定量或定性检测抗体流式细胞术流式细胞术是一种常Flow Cytometry用的抗体检测方法，利用荧光标记的抗体与细胞表面的抗原反应，通过激光照射和检测荧光信号来定量或定性检测抗体抗体在生物医药中的应用诊断和治疗各种疾病研究疾病机制和药物开发生物制药和疫苗生产未来发展趋势重组抗体技术人源化抗体纳米抗体重组抗体技术利用基因工程技术，在实人源化抗体是指从动物抗体中改造而来纳米抗体是单域抗体，比传统的抗体尺验室中合成抗体这种方法可以更有效的抗体，更接近于人类自身的抗体，因寸更小，可以更容易地进入细胞，并具地生产抗体，并可以定制抗体以满足特此在治疗上更安全有效有更强的穿透力定的需求重组抗体技术

5.1基因工程定制化12利用基因工程技术，将抗体基可以通过对抗体基因进行改造因克隆到表达载体中，然后转，定制具有特定功能和性质的入宿主细胞进行表达抗体，例如增加亲和力或改变靶点安全性3重组抗体可以避免传统抗体生产中可能存在的动物源性病原体污染，提高安全性人源化抗体降低免疫原性增强治疗效果提高药物研发效率通过减少非人源抗体的免疫原性，提高抗通过增强抗体的靶向性和亲和性，提高药简化抗体的人源化改造过程，加速药物的体在人体内的安全性物的疗效研发进程纳米抗体

5.3结构特性应用纳米抗体是由单链可变区片段纳米抗体具有高稳定性、易于生产、纳米抗体在诊断、治疗、药物靶向、VHH组成，源于骆驼科动物抗体的重链抗易于修饰等优点，使其成为新一代生成像等方面有广泛应用前景，例如开体它们比传统抗体小得多，仅约物制药工具的理想选择发针对特定疾病的纳米抗体药物大小1/10课程总结抗体基础单克隆抗体多克隆抗体抗体应用理解抗体结构、功能和制备原掌握单克隆抗体技术，能够应熟悉多克隆抗体制备方法，并展望抗体在生物医药领域的应理，为深入研究打下基础用于科研和临床诊断了解其在不同领域应用用前景，激发研究兴趣问答环节欢迎大家积极提问，我们将尽力解答您的疑问。