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文本内容:
实验报告植物体叶绿素含量的测定摘要本实验采用分光光度法,利用乙醇提取菠菜叶片中和番茄叶片中叶绿体95%色素,叶绿素叶绿素和类胡萝卜素最大吸收峰的波长分别是、a,b665rlm649nm和根据分光光度计测定的吸光度值,从而计算出乙醇提取液中叶绿470nm体色素含量实验原理利用乙醇提取叶绿体色素,叶绿素叶绿素和类胡萝卜素最大吸95%a,b收峰的波长分别是、和665nm649nm470nmo根据分光光度计测定的吸光度值,可以计算出乙醇提取液中叶绿体色素含量实验目的掌握分光光度计法对叶绿素、叶绿素、叶绿素总浓度和类胡萝卜素总a b浓度测定和计算的方法实验材料生物材料菠菜叶片自己培养的全素番茄苗叶片缺磷番茄苗
0.25g,
0.2g,叶片;
0.2g试剂乙醇、石英砂、碳酸钙;95%仪器分光光度计、电子天平、研钵、漏斗、玻璃棒、小烧杯、量10ml筒、容量瓶、剪刀、滤纸、滴管50ml实验步骤叶绿体色素的提取L取新鲜菠菜叶片擦干,去中脉,剪碎放入研钵,加入少许石英
0.25g,砂和再加入乙醇研磨成匀浆,再加乙醇静CaCCW95%3ml,95%10ml,置用漏斗滤去残渣,用乙醇反复冲洗研钵、残渣至无色;用容lOmin,量瓶定容至50mI.吸光度的测定2取光径比色杯,注入上述叶绿素提取液,以乙醇注入另一同1cm95%样的比色杯内作为空白对照,在波长、、和下测定吸665649470nm光度.结果计算3依据下列计算公式,分别计算出叶绿素、的浓度及其叶绿素总浓度a B和类胡萝卜素的浓度Ca(叶绿素a)=
13.95A一
6.8A665649一(叶绿素)b=
24.96A-
7.32A649665(叶绿素)C T=Ca+Cb=
18.16A649+
6.63A G65C.(类胡萝卜素)=(1OOOA O-
2.05C-
114.8C)/248x c47a b色素浓度()提取液体积(稀释倍数mg/L xZJx叶绿体色素含量二样品鲜重()g实验结果菠菜叶片提取液吸光值:波长/组别平均123665nm
0.
7060.
7040.
6990.703649nm
0.
2960.
2910.
2880.292470nm
0.
8350.
8310.
8250.830全素培养番茄叶片提取液吸光值:波长/组别平均123665nm
0.
3020.
3060.
3000.303649nm
0.
1320.
1320.
1310.132470nm
0.
3590.
3580.
3520.356缺磷培养番茄叶片提取液吸光值:波长/组别平均123665nm
0.
2610.
2650.
2630.263649nm
0.
1360.
1360.
1380.137470nm
0.
3260.
3310.
3310.329根据以上数据及计算公式可得:材料浓度叶绿素a叶绿素b叶绿素总浓度类胡萝卜素总浓g/度mg/L菠菜
7.
822.
149.
962.29全素番茄
3.
331.
084.
410.91缺磷番茄
2.
741.
504.
240.609材料色素含叶绿素a叶绿素b叶绿素总含量类胡萝卜素总含g/量量mg菠菜
1.
5640.
4281.
9920.458全素番茄
0.
830.
270.
110.23缺磷番茄
0.
5480.
30.
8480.122实验讨论:、测定叶绿素为什么选用红光波长?1ab叶绿素吸收红光和蓝紫光,故有两个吸收峰,光合色素还有类胡萝卜素,只吸收蓝紫光,所以不能选蓝紫光区测定,否则被类胡萝卜素干扰,只能用红光。
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