《细胞学检测FNA》课件

细胞学检测FNA细针穿刺细胞学检查（Fine NeedleAspiration,FNA）是一种微创诊断技术，通过细针采集组织细胞样本进行病理学分析作为现代医学诊断的重要手段，FNA能够快速、安全地获取各类组织的细胞学信息，为临床决策提供关键依据目录基础知识1FNA概述、历史发展及重要性临床应用2适应症及各部位穿刺特点技术操作3操作流程、样本制备、超声引导技术诊断解读4细胞学诊断系统、特征识别、结果解读进展与挑战5细针穿刺（）概述

1.FNA定义特点细针穿刺是使用细针（通常微创、快速、经济，适用于为22-27号）穿刺可疑病变多种表浅和深部组织的诊断组织，通过负压吸引获取细在肿瘤早期诊断中具有重要胞样本的技术样本用于细价值，可避免不必要的手术胞学分析，帮助确定病变性质应用范围的定义FNA技术定义目的基本原理细针穿刺抽吸（Fine NeedleFNA的主要目的是获取足够的细胞样Aspiration,FNA）是一种使用直径小本用于细胞学分析，以区分良恶性病于1mm的细针（通常为22-27号），变，确定细胞类型，并在某些情况下通过穿刺和负压吸引获取组织细胞样提供确定性诊断本的诊断技术的历史发展FNA早期探索1847-193011847年，Kun首次报道了用针穿刺肿瘤获取细胞进行显微镜检查1883年，Leyden使用细针获取肺炎患者的肺部微生物1930年，Martin和Ellis在美国纪念医院开始系统使用针吸活检技术发展期1950-197021950年代，欧洲学者进一步发展了FNA技术瑞典团队在乳腺和甲状腺结节诊断中推广FNA1960年代，Zajdela和Zajicek建立了乳腺和甲状腺FNA的细胞学标准现代时期至今FNA19703在细胞学检测中的重要性FNA诊断价值微创优势12FNA是鉴别良恶性病变的相比传统手术活检，FNA首选方法，特别是对于甲创伤小、痛苦轻、并发症状腺、乳腺等部位的结节少，可门诊进行，无需住诊断准确率高，敏感性和院对于多发病灶，可同特异性可达90%以上，为时取材，提高诊断效率临床决策提供可靠依据医疗资源优化3FNA可避免不必要的手术，降低医疗成本，缩短诊断时间对于不适合手术的患者，提供了获取病理诊断的途径是现代精准医疗的重要组成部分的适应症

2.FNA甲状腺结节乳腺肿块直径大于1cm的结节或有可疑超声特临床或影像学检查发现的可疑肿块，征的较小结节低危结节可观察随特别是BI-RADS4-5类病变对于不12访，中高危结节需行FNA确定性质适合手术的患者，FNA可作为诊断手段淋巴结肿大其他软组织肿块原因不明的淋巴结肿大，疑似淋巴涎腺、皮下肿块、腹部肿块等难以43瘤、转移或感染性疾病颈部、腋通过影像学明确诊断的病变通常窝、腹股沟等表浅淋巴结容易进行结合超声或CT引导进行FNA甲状腺结节适应指征临床意义注意事项根据美国甲状腺协会ATA指南，直甲状腺结节极为常见（超声检查可发多结节甲状腺应根据超声特征选择最径≥1cm的甲状腺结节或1cm但有可疑现多达50%的成人），但恶性比例仅可疑结节进行穿刺甲状腺功能亢进超声特征的结节（如微钙化、边界不为5-15%FNA是甄别良恶性最有效的患者穿刺前应评估甲状腺功能有凝规则、低回声等）建议进行FNA高初步检查，可避免不必要的手术，节血功能障碍患者需谨慎评估危人群（有放射暴露史、家族史）的约医疗资源阈值可降低乳腺肿块临床表现临床检查可触及的乳腺肿块，尤其是质地坚硬、边界不清、固定或伴有皮肤改变的肿块影像学检查（乳腺X线、超声、MRI）发现的可疑肿块，特别是BI-RADS4-5类病变优势FNA作为快速、简便、经济的初步诊断方法，FNA可在门诊即刻完成对于明确的恶性肿瘤，可避免二次手术活检，直接制定治疗计划对于囊性病变，可同时起到诊断和治疗作用局限性乳腺FNA的假阴性率约为1-4%，在导管内癌和小叶癌诊断中准确性相对较低无法区分原位癌和浸润性癌目前在乳腺诊断中，粗针穿刺（CNB）使用更为广泛，但FNA仍有其适用价值淋巴结肿大临床评估位置、大小、质地、压痛、活动度1基础检查2血常规、感染标志物、影像学检查适应症FNA3不明原因持续性肿大、可疑转移或淋巴瘤优势FNA4快速确定良恶性，指导后续治疗淋巴结肿大是临床常见问题，原因包括感染、自身免疫性疾病、淋巴瘤和转移瘤对于持续2周以上不明原因的淋巴结肿大，特别是质地坚硬、无压痛、进行性增大的淋巴结，应考虑FNA检查FNA对于转移性肿瘤诊断的准确率高达90%以上，但对于淋巴瘤的诊断价值有限，通常需要结合流式细胞术或活组织检查确诊颈部、腋窝和腹股沟等表浅淋巴结易于穿刺，深部淋巴结则需影像学引导其他软组织肿块涎腺肿块皮下肿块深部器官肿块涎腺肿块是FNA的重要适应症，包括皮下脂肪瘤、纤维瘤、神经鞘瘤等良肺、肝、胰腺等深部器官的肿块常需腮腺和颌下腺肿块FNA可区分炎症、性肿块及皮肤附属器官肿瘤可通过在CT或超声引导下进行FNA这类穿良性肿瘤（如多形性腺瘤）和恶性肿FNA初步鉴别对于疑似转移性病变刺难度较大，并发症风险相对较高，瘤，准确率可达90%涎腺FNA的一的皮下结节，FNA可确定原发灶皮通常由介入科或超声科医师专门操作个重要应用是鉴别Warthin瘤，可避下肿块FNA操作简便，并发症少，适肺部结节FNA气胸发生率约为20-免不必要的手术合门诊开展30%的操作流程

3.FNA术前准备穿刺操作样本处理后续处理患者评估与信息告知，设备定位固定病变，针头插入，将获取的细胞材料快速涂片，压迫穿刺点止血，穿刺部位与材料准备，穿刺部位确定多方向抽吸，松开负压后退立即固定或风干，根据需要消毒包扎，嘱患者注意事项与消毒针选择不同染色方法患者准备病史询问知情同意12详细了解患者病史，包括向患者详细解释FNA的目肿块发现时间、生长速度、的、过程、可能的不适感有无疼痛及相关症状询及潜在并发症明确告知问既往手术史、放疗史、患者FNA的局限性，如可家族史，以及是否有出血能存在取样不足或需要重倾向或正在服用抗凝药物复穿刺的情况获取患者的书面知情同意书穿刺前准备3指导患者采取适当体位以便于操作避免使用过度的镇静剂，以保证患者的配合对于紧张患者，可考虑使用局部麻醉剂穿刺部位的皮肤消毒，使用碘伏或酒精擦拭设备和材料准备穿刺器材样本处理材料22-27号细针（针长根据穿刺部载玻片（至少4-6片，带磨砂端位选择），10-20ml注射器，注标记用），95%酒精固定液或射器固定器（提高操作稳定性商业固定喷雾，铅笔标记，防和单手操作能力）无菌手套、尘载玻片盒现场快速染色试消毒棉签、碘伏或75%酒精、剂（如Diff-Quik染色液）用于无菌纱布评估样本质量辅助设备超声设备（需要时），显微镜（用于现场评估样本质量），生物安全柜（处理可能感染性样本时）样本记录表格，患者标签，病理送检容器穿刺技术定位与固定用非主导手指固定目标病变，使其不易移动表浅病变可用两指固定于皮肤表面，深部病变可通过超声引导定位穿刺前再次确认穿刺点皮肤已完全消毒穿刺技术右手持注射器，快速穿刺入病变内确认针头在病变内后，拉动注射器活塞产生负压在保持负压的同时，在不同方向来回移动针头3-5次，使组织细胞被吸入针腔退针技术在退针前，先松开活塞释放负压，防止血液回流污染样本或空气将细胞吹出针腔缓慢退出针头，立即用无菌纱布按压穿刺点每个病灶通常需穿刺2-4次以获得足够样本样本采集样本采集原则样本转移技术每个病灶至少穿刺2-4次，增加样本量以提1退针后立即将样本转移至载玻片上，避免样高诊断率2本干燥现场评估采样不足处理4快速染色部分涂片以评估样本是否充足和有若样本不足或质量不佳，立即重新穿刺3代表性样本采集是FNA成功的关键环节穿刺获取的样本量通常极少，但细胞量应足够进行病理学评估穿刺后，将针头与注射器分离，抽取空气，重新连接针头，然后将针内物质缓慢均匀地喷射到载玻片上样本可制作常规涂片进行细胞学检查，也可制作细胞块用于免疫组化和分子检测对于疑似感染的样本，应同时准备微生物学培养穿刺过程中可能出现空针情况，此时应评估穿刺技术或考虑病灶特性（如囊性或纤维化）超声引导下

4.FNA适应证穿刺过程深部不可触及病灶，表浅但位置复杂病灶，复杂多房囊性病超声探头与穿刺针保持适当角度，实时监测针尖位置选择变，以往FNA结果不满意需重复穿刺的病例合适平面显示针尖和目标病灶，确保准确取样1234术前准备结束评估超声评估确定最佳穿刺路径，避开重要血管神经结构患者穿刺后超声再次扫查评估有无并发症，如血肿形成记录穿体位安排使穿刺部位充分暴露，皮肤消毒标记穿刺点刺情况于病历，包括超声所见和取材部位超声引导的优势提高准确性提高安全性提高效率超声实时引导使穿刺超声可清晰显示穿刺超声引导下FNA的取针精确到达目标病灶，路径上的重要结构，样不足率显著低于盲特别是直径小于1cm如血管、神经和胸膜，穿，减少了重复穿刺的微小病灶可以选有效避开这些结构，的需要研究显示，择性地穿刺病灶中最降低并发症风险对超声引导可将甲状腺可疑的区域，如实性于深部病灶，如甲状FNA的不满意率从15-部分或有血流信号的腺后方或颈深部淋巴20%降低至2-5%，区域，避开囊性、坏结，超声引导是安全提高了诊断效率和患死或钙化区域进行FNA的必要条件者体验操作流程病灶评估超声全面扫描目标器官，记录病灶大小、位置、内部回声、边界、有无钙化和血流信号对多发病灶，确定最可疑病灶进行穿刺标记最佳穿刺角度和进针路径，测量皮肤表面到病灶的深度设备准备准备超声探头和无菌探头套，选择适当频率的探头（浅表组织用高频探头，深部组织用低频探头）准备无菌耦合剂，FNA穿刺套件，以及样本处理材料穿刺者应熟悉超声设备和图像判读实时引导技术常用两种技术平行技术（针与探头平行）和交叉技术（针与探头成角度）平行技术可全程观察针路，适合浅表病灶；交叉技术便于操作，但只能看到针尖，适合有经验的操作者探头应稳定握持，始终保持针尖在超声视野内注意事项穿刺角度动态监测技术配合123穿刺针与超声探头的角度应根据病整个穿刺过程应在超声实时引导下超声引导FNA理想情况下需要两人灶深度和位置调整角度过大会导完成，确保针尖始终在视野内观配合一人操作超声探头和观察屏致针迹不清，过小则操作不便对察针尖周围组织变形可帮助判断针幕，一人进行穿刺操作单人操作于颈部穿刺，宜采用横切面，可同尖位置若针迹消失，应停止推时，应先固定探头位置，确认穿刺时显示两侧重要结构，降低损伤风进，调整超声平面重新定位，切勿路径后再进行穿刺操作者应接受险盲目前进专业培训，具备足够的超声和FNA经验样本制备

5.FNAFNA样本制备是影响诊断准确性的关键环节样本获取后需迅速进行处理，避免细胞变性主要包括涂片、固定和染色三个步骤不同的固定和染色方法适用于不同的诊断目的除常规涂片外，还可制备细胞块、液基细胞学和分子检测样本多种制备方法的合理应用可提高FNA的诊断价值和准确性专业的细胞学技术人员培训对确保样本质量至关重要涂片技术直接喷射法压榨涂片法毛细管涂片法适用于大多数FNA样本，尤其是含血量较适用于组织碎片较多的样本将样本置于适用于血性样本或液体样本利用毛细管少的样本将针与注射器分离，抽取空载玻片一端，用另一载玻片轻压后缓慢拉原理将样本收集后轻轻涂于载玻片也可气，重新连接后将样本直接喷射到载玻片开，形成逐渐变薄的涂片有助于保持细采用离心浓缩后再涂片的方法这种方法上可产生均匀分布的细胞涂片，便于观胞簇的完整性，但可能导致细胞变形可减少背景血液干扰，提高细胞可见度察细胞形态固定方法湿固定（酒精）干燥固定（风干）95%将涂片立即浸入95%酒精中固定将涂片在空气中自然干燥，不进10-15分钟，或使用商业细胞固定行任何化学固定适合后续进行喷雾剂进行喷雾固定适合后续Romanowsky染色（如Wright或进行Papanicolaou染色这种方Giemsa染色）风干固定有助于法可保存细胞核质的精细结构，观察胞浆颗粒和背景成分，对淋显示核染色质和核仁的细节，便巴组织和甲状腺样本特别有用于识别恶性细胞细胞块固定将剩余样本收集在含甲醛或特殊固定液的小管中，制成细胞块这种方法可保存组织结构，适合免疫组化和分子检测细胞块特别适用于无法通过常规涂片确诊的病例染色技术染色染色特殊染色Papanicolaou Romanowsky应用于湿固定的涂片，是细胞学最经包括Wright、Giemsa和Diff-Quik染包括免疫细胞化学染色、荧光原位杂典的染色方法能清晰显示核染色质色，应用于风干固定的涂片能突出交FISH等技术，用于特定分子标志模式、核膜和核仁结构细胞质染成显示胞浆颗粒和背景成分核染色质物的检测这些技术在淋巴瘤和一些蓝色或粉红色特别适合于上皮细胞呈紫色，胞浆呈蓝色适合于血液系特定类型癌症的诊断中发挥重要作用的观察，是宫颈细胞学和大多数FNA统疾病和甲状腺样本的染色Diff-例如，甲状腺癌的BRAF突变检测、样本的首选染色方法Quik由于操作简便快速，常用于FNA乳腺癌的HER2检测等现场快速评估细胞学诊断系统

6.标准化分类采用国际认可的诊断分类系统1诊断准确性2明确的分类标准提高诊断一致性风险分层3根据恶性风险指导临床决策治疗指导4不同分类对应不同治疗建议细胞学诊断系统是FNA结果解读和临床决策的基础目前广泛应用的诊断系统包括甲状腺的Bethesda系统、乳腺的IAC系统、唾液腺的Milan系统等这些系统采用标准化分类，明确每一类别对应的恶性风险，使全球细胞学诊断结果具有可比性标准化的诊断系统不仅提高了诊断准确性和一致性，还为临床处理提供了明确指导基于不同类别的恶性风险，医生可以决定是否需要手术干预、追加检查或临床随访，实现个体化的精准诊疗系统简介Bethesda发展背景系统设计12Bethesda系统全称为甲状腺细胞学Bethesda系统将甲状腺FNA结果分报告的Bethesda系统The为6个类别，每个类别有明确的诊断Bethesda Systemfor Reporting标准、恶性风险评估和临床管理建Thyroid Cytopathology,TBSRTC，议该系统基于大量病例分析和专由美国国立癌症研究所于2007年提家共识制定，具有较高的科学性和出，2017年进行了修订该系统旨实用性目前已在全球范围内广泛在标准化甲状腺FNA细胞学报告，采用，成为甲状腺FNA报告的金标解决过去报告格式不一致、术语混准乱的问题临床意义3系统的实施显著提高了甲状腺FNA的临床价值，减少了不必要的手术，优化了医疗资源分配它为临床医生和病理医生提供了一个共同的交流平台，便于多学科合作2017年修订版根据新的研究证据，更新了各类别的恶性风险数据和管理建议诊断分类分类诊断类别诊断标准I类不满意或不适合诊断细胞稀少、血液掩盖、固定或制备不当、缺乏滤泡上皮细胞II类良性良性滤泡结节、淋巴细胞性甲状腺炎、肉芽肿性甲状腺炎等III类非确定性意义的滤泡病变滤泡细胞排列模式介于良恶性之间，但细胞异型性不足以诊断恶性IV类滤泡肿瘤或可疑滤泡肿瘤高度细胞性，微小滤泡结构为主，细胞重叠，核偏大V类可疑恶性具有某些恶性特征，但因样本量少、保存不佳等不足以确诊VI类恶性乳头状癌、髓样癌、未分化癌、淋巴瘤、转移癌等每类别的恶性风险2007版恶性风险%2017版恶性风险%2017年Bethesda系统修订版根据更多临床研究数据，对各类别的恶性风险进行了更新不同Bethesda分类对应不同的恶性风险和临床处理建议I类建议重新穿刺；II类可临床随访；III类可考虑分子检测或诊断性手术；IV类通常需手术治疗；V-VI类需手术切除需要注意的是，恶性风险数据是基于大规模人群统计，个体患者实际风险会受多种因素影响，包括患者年龄、性别、结节超声特征和分子检测结果等临床决策应结合患者具体情况进行个体化评估甲状腺细胞学特征

7.FNA良性滤泡结节淋巴细胞性甲状腺炎乳头状癌细胞排列呈大的单层蜂窝状片，细胞背景有大量成熟小淋巴细胞，可见淋细胞排列紧密，形成乳头状或片状结边界清晰，细胞质丰富核圆形均匀，巴滤泡中心细胞滤泡上皮细胞可出构核特征是关键核大，形状不规染色质细腻，无明显核仁背景可见现Hürthle细胞变，胞质丰富嗜酸性，则，染色质细腻，有核沟和核内包涵胶质物质，有时可见泡沫细胞和血管核大但规则典型特征是淋巴细胞和体细胞质边界模糊，可见砂粒体和间质滤泡细胞混合分布异常胶质良性病变特征良性滤泡结节甲状腺炎症性病变最常见的良性甲状腺FNA结果细胞量适中，主要为滤泡淋巴细胞性甲状腺炎（桥本氏病）背景有大量成熟小淋上皮细胞，排列整齐，形成单层蜂窝状片细胞边界清巴细胞和浆细胞，滤泡细胞常出现Hürthle细胞变，胞质丰晰，细胞质丰富核圆形均匀，大小一致，染色质细腻，富嗜酸性，核大但规则，染色质细腻核仁不明显亚急性肉芽肿性甲状腺炎可见多核巨细胞和上皮样细胞背景可见丰富的胶质物质，呈粉红色或蓝色均质物可有形成肉芽肿，背景有炎性细胞浸润和组织碎片滤泡细胞少量泡沫细胞、血管间质和少量炎性细胞缺乏异型性和可有反应性变化但无异型性多形性是重要特征可疑病变特征非确定性意义的滤泡病变滤泡肿瘤或可疑滤泡肿瘤AUS/FLUS FN/SFN细胞学特征介于良性和可疑滤泡肿高度细胞性，以微小滤泡结构为瘤之间，难以明确归类可能表现主，几乎无胶质背景细胞排列拥为

①细胞学特征与临床信息不挤，有重叠，核偏大但形态相对均符；

②滤泡细胞少量核异型但不足一这类诊断难以通过细胞学鉴别以诊断恶性；

③标本质量欠佳但有良性滤泡腺瘤和滤泡癌，因滤泡癌少许细胞异常；

④局灶性微小滤泡的诊断需依靠组织学中的血管或包排列但背景有大量胶质膜侵犯证据可疑恶性SM具有某些恶性特征但不足以确诊的情况如疑似乳头状癌有部分核特征（核沟、核内包涵体）但不完全典型；疑似髓样癌细胞异型但钙化素免疫染色阴性；疑似淋巴瘤异型淋巴细胞但需要流式细胞术确认恶性病变特征乳头状甲状腺癌最常见的甲状腺恶性肿瘤细胞排列密集，形成乳头状或片状结构核特征是诊断的关键核大，形状不规则，染色质细腻呈磨砂玻璃样，核沟明显，可见核内假包涵体（细胞质内陷）细胞质边界常模糊，可见多核巨细胞和砂粒体，异常胶质（浓缩、胶状）常见髓样甲状腺癌起源于甲状腺C细胞细胞分散排列或形成松散集群，细胞形态多变，可呈圆形、梭形或多角形胞质丰富，可含嗜碱性颗粒核偏心，染色质颗粒状，可见双核或多核细胞背景可见淀粉样物质（刚果红染色阳性）免疫细胞化学钙化素染色阳性是确诊关键未分化（间变性）甲状腺癌高度恶性肿瘤，预后极差细胞学表现为高度异型性，细胞大小和形态变异显著核异常明显，染色质粗糙，核仁显著，常见核分裂象细胞可呈梭形、巨大多核或肉瘤样背景常见坏死物质和炎性细胞诊断困难，需要与非霍奇金淋巴瘤和转移性癌症鉴别乳腺细胞学特征

8.FNA乳腺FNA是乳腺肿块最初诊断的重要方法之一细胞学表现可分为良性、可疑和恶性三大类良性病变主要包括纤维囊性病变、纤维腺瘤和炎症；恶性病变主要为浸润性导管癌、浸润性小叶癌、粘液癌等乳腺FNA报告通常采用五分类系统C1（不满意）、C2（良性）、C3（非典型/不确定）、C4（可疑恶性）和C5（恶性）每类对应不同的恶性风险和临床处理建议乳腺FNA的准确性受操作者经验、病变特性和细胞学解读能力影响良性病变特征纤维囊性病变纤维腺瘤乳腺炎症细胞量通常较少，以细胞量丰富，以大片急性乳腺炎以大量中泡沫细胞（脂肪吞噬双相上皮细胞团为特性粒细胞为主，可见细胞）为主，可见少征细胞排列呈蜂窝少量反应性上皮细胞量双相上皮细胞（导状，边界清晰，少有慢性乳腺炎可见淋巴管和肌上皮细胞）重叠和变形背景可细胞、浆细胞和组织细胞排列松散，背景见裸核双极细胞（间细胞浸润，上皮细胞清洁，可有蛋白样物质来源）和少量间质可有反应性改变（核质细胞核小而均匀，碎片核圆形均匀，增大，核仁明显）但染色质细腻，无核仁染色质细腻均匀分布，无异型性肉芽肿性囊性病变可见大量组核仁不明显可见上乳腺炎可见上皮样细织细胞及少量上皮细皮细胞与双极细胞紧胞和多核巨细胞形成胞，背景有血液和蛋密相关的指状结构肉芽肿结构白样沉淀物可疑病变特征上皮增生非典型导管增生乳头状病变细胞量增多，上皮细胞排列紧密，形上皮细胞团较大，排列拥挤，有部分细胞排列呈乳头状或指状结构，可见成三维结构，细胞边界模糊可见轻重叠和三维结构核大小不一，形态纤维血管轴心上皮细胞排列有序，度核增大和形态不规则，但无明显异轻度不规则，核染色质颗粒状增粗，但可能有轻度核增大和形态不规则型性核染色质轻度增粗但分布均匀，可见小核仁细胞量通常有限，细胞乳头状病变包括导管内乳头状瘤和乳核仁可能轻度增大但不显著这类病异型性不足以诊断恶性这类病变是头状癌，FNA难以可靠鉴别，通常需变包括一些导管上皮增生和复杂性纤导管原位癌的前驱病变，恶性风险较要组织活检确诊临床和影像学特征维腺瘤，需要与低级别恶性肿瘤鉴别高，通常建议进一步活检确诊对判断意义重大恶性病变特征浸润性导管癌浸润性小叶癌12最常见的乳腺恶性肿瘤类型细胞细胞量较少，细胞体积小，排列分量丰富，排列疏松或形成不规则团散或成单行印戒样排列核圆形或块，细胞边界模糊，有明显的多形卵圆形，大小相对均一，染色质细性核明显增大，形态不规则，核腻但分布不均典型特征是细胞质质比增高染色质粗糙，分布不均内有单个空泡，使核偏向一侧细匀，核仁明显，可见核分裂象背胞凝聚性差，多数呈单个分布小景可有坏死物质，缺乏肌上皮细胞叶癌在FNA中易被误诊为良性或样（失去双相模式）高级别导管癌本不足，诊断敏感性较低细胞异型性更明显，形态变异更大特殊类型乳腺癌3粘液癌背景有丰富的粘液样物质，癌细胞浮于其中，常形成小团髓样癌细胞量极丰富，大型多形性细胞，背景有大量淋巴细胞化生性癌癌细胞呈梭形、鳞状或异源性分化炎性乳腺癌背景有大量炎性细胞，癌细胞可不明显，需仔细寻找淋巴结细胞学特征

9.FNA反应性增生淋巴瘤转移性肿瘤多种类型淋巴细胞混合分布，以小淋细胞单一性是关键特征，单一类型的异源性细胞与淋巴细胞明显不同，常巴细胞为主，可见生发中心大细胞和异型淋巴细胞占主导不同类型淋巴形成团簇不同原发肿瘤有特征性表免疫母细胞背景可见小血管内皮细瘤有特征性形态滤泡性淋巴瘤见混现腺癌见腺样结构；鳞癌见角化特胞和树突状细胞细胞多样性是反应合小裂细胞和大细胞；弥漫大B细胞淋征；黑色素瘤见色素颗粒；甲状腺癌性增生的典型特征巴瘤见大型异型细胞；霍奇金淋巴瘤见核特征可见Reed-Sternberg细胞反应性增生特征细胞组成形态特点常见病因反应性淋巴结增生以多种类型淋巴细细胞多样性是反应性增生的最重要特感染性病毒感染（EBV、CMV）、胞的混合分布为特征主要包括成熟征，没有单一类型细胞占绝对优势细菌感染（猫抓病、结核）、真菌感小淋巴细胞（体积小，核圆形致密，尽管可见较大的活化淋巴细胞，但它染和寄生虫感染自身免疫性系统胞质稀少）、中等大小淋巴细胞、生们数量有限，核形态相对规则，染色性红斑狼疮、类风湿关节炎等皮肤发中心大细胞（体积大，核泡状，有质均匀，无明显异型性可见吞噬现病相关银屑病、湿疹等药物反应核仁）和免疫母细胞（核大，有明显象和细胞碎片，反映免疫反应活跃抗惊厥药、抗生素等确定具体病因核仁）背景可见吞噬细胞、浆细胞根据病因不同，可见特定细胞类型增需结合临床表现、微生物学检查和特和小血管内皮细胞，呈多彩图像多，如病毒感染时免疫母细胞增多殊染色淋巴瘤特征细胞单一性常见淋巴瘤类型特征淋巴瘤的最关键特征是单一类型异型滤泡性淋巴瘤混合小裂细胞（犁沟淋巴细胞占主导地位，缺乏正常淋巴状核）和大中心母细胞，细胞大小均结的细胞多样性背景中缺少小淋巴一弥漫大B细胞淋巴瘤大型异型细细胞、浆细胞和吞噬细胞的混合分胞占主导，核大，核仁明显，细胞质布异型淋巴细胞表现为核形态不规量中等小淋巴细胞淋巴瘤小型单则、染色质异常和核仁异常等特征一淋巴细胞，FNA难以与反应性增生低级别淋巴瘤的细胞异型性可能不明鉴别霍奇金淋巴瘤特征性Reed-显，需与反应性增生仔细鉴别Sternberg细胞，双核或多核，核仁大似猫眼辅助诊断方法流式细胞术分析淋巴细胞表面标志物，确定单克隆性免疫细胞化学在细胞学涂片上检测特定标志物，如CD

20、CD

3、CD30等细胞遗传学和分子检测检测特定基因重排和染色体异常淋巴瘤FNA诊断应由有经验的血液病理专家进行，对不确定病例应进行活组织检查确认转移性肿瘤特征整体特征常见转移瘤特征12转移性肿瘤细胞与淋巴细胞有明显区腺癌细胞排列成腺样结构，胞质含别，呈异源性外观肿瘤细胞常排列有黏液空泡，核大而不规则，有明显成团块或单个散在与淋巴瘤不同，核仁鳞状细胞癌细胞呈多角形，背景可见正常淋巴细胞混合分布肿胞质丰富嗜酸性，可见角化现象，核瘤细胞表现出原发肿瘤的特征性形态，染色质粗糙乳头状甲状腺癌特征如腺体形成、角化、黏液分泌等细性核沟和核内包涵体黑色素瘤细胞学特征通常可提示原发灶部位，但胞多形性显著，可见色素颗粒，核大，无法完全确定核仁明显，核内可见假包涵体小细胞癌小细胞团块，核染色质细腻，胞质稀少，常有挤压变形诊断策略3通过细胞形态初步判断原发灶类型，结合患者既往肿瘤史和临床表现免疫细胞化学染色对原发灶判断有重要价值如TTF-1（肺和甲状腺）、乳腺特异标志物、黑色素细胞标志物、神经内分泌标志物等临床需同时进行原发灶搜索，如CT、MRI、PET-CT等影像学检查的局限性

10.FNA取样限制解读挑战1样本量少且代表性有限某些病变细胞学重叠导致鉴别困难2准确性限制操作者依赖4存在假阴性和假阳性风险3结果受操作者经验和技术影响FNA作为一种微创诊断技术，具有不可忽视的局限性首先，穿刺仅采集极少量组织细胞，可能不代表整个病灶，特别是对于异质性肿瘤或大型肿块其次，某些疾病在细胞学层面难以区分，如滤泡性腺瘤与滤泡性癌症FNA的准确性还受到操作者技术水平、细胞病理学家经验和实验室处理质量的影响判断依赖于细胞形态学特征，缺乏组织结构信息这些局限性导致FNA结果中存在不确定诊断的情况，需要临床医生正确理解并决定是否进行补充检查取样不足标准定义常见原因改进措施取样不足是指获取的细技术因素穿刺操作不现场快速评估由细胞胞不足以进行可靠诊断当，针头未到达目标病病理学家或经过培训的根据Bethesda系统，甲灶，负压过强或过弱，技术人员立即评估样本状腺FNA至少需要6组每样本转移至载玻片不当质量，不满意可立即重组10个以上滤泡细胞才病灶特性高度纤维化新穿刺改进穿刺技术被视为满意样本某些或硬化病变，囊性或坏选择适当针径（通常22-部位和病变类型有各自死为主的病变，血管丰25G最佳），多角度采样，的满意标准不满意样富病变，微小病灶标使用毛细管技术处理血本导致诊断延迟、重复本处理问题涂片过厚性样本超声引导提穿刺和潜在误诊，增加或过薄，固定不当，染高穿刺精准度，特别是医疗成本和患者焦虑色质量不佳小针径对于小病灶或深部病灶（如25G以上）可能获取培训提升操作者和细细胞量不足胞技术人员的系统培训和经验积累诊断不确定性病理形态重叠1多种良恶性病变有相似细胞学特征局限于细胞学评估2缺乏组织结构信息限制诊断特殊病变鉴别困难3滤泡肿瘤等需组织学确诊不足以确定分级4肿瘤分级通常需组织切片评估诊断不确定性是FNA的固有局限之一某些疾病在细胞学层面表现相似，导致难以明确诊断以甲状腺为例，Bethesda III类（非确定性意义的滤泡病变）和IV类（滤泡肿瘤或可疑滤泡肿瘤）表示细胞学表现不足以明确良恶性，必须通过手术获取组织样本进行评估滤泡性甲状腺癌与滤泡性腺瘤的区别在于是否有血管或包膜侵犯，这一特征无法通过FNA评估同样，乳腺导管原位癌与浸润性导管癌、淋巴瘤不同亚型的鉴别，以及肿瘤的确切分级和分型，往往需要组织学评估理解这些局限性对临床决策至关重要假阴性和假阳性假阴性率%假阳性率%假阴性指恶性病变被误诊为良性，是FNA最主要的诊断问题，发生率约1-10%假阴性的主要原因包括取样误差（针头未穿刺到肿瘤部分）、样本制备不当（涂片过厚或固定不良）、诊断解读错误（尤其是低分化肿瘤）、特殊类型肿瘤（如淋巴瘤和小叶癌）等假阳性指良性病变被误诊为恶性，发生率较低（约1-3%）常见原因包括反应性或修复性改变的过度解读（如甲状腺炎症）、技术因素导致的细胞变形、某些良性病变特殊形态（如Hürthle细胞病变）、缺乏足够的临床信息等免疫染色和分子检测可帮助减少这些错误的并发症

11.FNA轻微常见并发症穿刺点疼痛、轻微出血1中度并发症2血肿形成、轻度感染严重罕见并发症3神经损伤、气胸、大出血器官特异性并发症4甲状腺危象、肿瘤种植FNA是一种相对安全的微创诊断程序，严重并发症发生率极低（1%）最常见的并发症是局部不适和轻微出血，通常数分钟内自行缓解局部血肿形成是第二常见的并发症，一般在24-48小时内自行吸收严重并发症与穿刺部位和技术密切相关颈部穿刺可能损伤神经或血管，胸部穿刺可导致气胸，腹部脏器穿刺可引起出血或感染服用抗凝药物的患者出血风险增加，需评估调整药物虽然罕见，但了解这些风险对于知情同意和并发症早期识别非常重要出血常见表现风险因素轻微出血是FNA最常见的并发症，约70-80%的患者会出现患者因素抗凝或抗血小板药物治疗（如华法林、阿司匹穿刺点少量渗血，通常通过短时间压迫（3-5分钟）即可控林、氯吡格雷）、凝血功能障碍（如血友病、肝硬化、血制血肿形成发生率为1-2%，表现为穿刺部位肿胀、轻度小板减少症）、年龄80岁疼痛和瘀斑大多数血肿体积小，自行吸收，不需特殊处操作因素多次穿刺、粗针使用（23G）、穿刺技术不当理（过度活塞抽吸或剧烈针头移动）、缺乏影像引导、术者严重出血（需要医疗干预）发生率极低（

0.1%），主要经验不足见于血管丰富区域（如甲状腺、肝脏）的穿刺，或有凝血病灶特性血管瘤、高度血管化肿瘤（如甲状腺髓样癌）、功能障碍的患者颈部大血管损伤、肝包膜下血肿、腹膜邻近大血管的病灶、深部脏器如肝脏的穿刺后出血等为严重但罕见的并发症感染发生率和风险临床表现12FNA后感染是罕见并发症，发生率感染通常在穿刺后24-72小时内发

0.1%虽然穿刺过程中理论上可能生早期表现为穿刺部位红肿、发将皮肤表面的细菌带入组织，但实热、疼痛加重，逐渐可出现局部波际临床中感染极少发生风险因素动感（脓肿形成）全身症状包括包括免疫功能低下（如糖尿病、发热、寒战、不适严重感染可导艾滋病、长期使用皮质类固醇或免致蜂窝织炎、脓肿、甚至全身性感疫抑制剂）、局部皮肤感染、穿刺染和感染性休克某些特定部位的囊性或感染性病变、操作无菌技术感染可能导致严重并发症，如深颈不严格、复杂或深部穿刺部感染、纵隔感染等预防和处理3预防严格的无菌操作（穿刺部位皮肤彻底消毒、操作者戴无菌手套）、避免穿刺明显感染的皮肤区域、对高风险患者考虑预防性抗生素处理早期症状可用局部热敷和口服抗生素治疗形成脓肿需穿刺引流或切开引流深部感染需住院治疗，静脉抗生素，必要时外科干预培养病原体并根据药敏结果调整抗生素其他罕见并发症气胸甲状腺相关并发症深部脏器穿刺并发症主要见于肺部FNA，发生率约10-30%，甲状腺危象高功能性甲状腺结节穿刺胰腺穿刺可引起胰腺炎、假性囊肿、多数为轻度不需特殊处理严重气胸后甲状腺激素大量释放，导致心率增胆道损伤胆道穿刺胆汁渗漏、化脓（约5%）表现为呼吸困难、胸痛、血氧快、发热、烦躁等颈部神经损伤可性胆管炎肝脏穿刺门静脉损伤、胆下降，需胸腔引流胸部FNA前应评估损伤喉返神经导致声音嘶哑，极为罕见道出血、胆管炎种植性转移穿刺针患者肺功能，有严重肺气肿者相对禁但可能永久甲状腺囊肿急性扩大穿沿穿刺道转移肿瘤细胞，极罕见忌刺导致囊内出血，压迫引起疼痛或呼吸（

0.01%）术前规划和影像引导可减困难少这些风险结果解读

12.FNA报告解读原则FNA报告应包含足够信息用于临床决策，但解读需结合临床背景结果分类系统不同器官采用特定的分类系统，明确诊断及风险评估不确定结果处理对不确定结果明确进一步行动计划，如重复FNA或组织活检多学科讨论复杂或不典型病例需临床医师、病理医师、影像科医师共同讨论报告格式样本信息样本质量评估标准FNA报告应首先包含完整的样本评估样本是否满意对结果解读至关重信息部分患者基本信息（姓名、年要细胞数量是否足够、细胞保存质龄、性别、ID号）、送检日期和报告量如何、是否有干扰因素（如过多血日期、临床诊断或提供的临床信息、液或坏死物）、细胞代表性如何（对穿刺部位和方法（如超声引导）、穿肿块的采样是否充分）不满意样本刺操作者姓名、固定和染色方法样应明确说明原因，并建议重新穿刺或本信息确保结果正确归属,并提供解进行其他检查读背景形态学描述详细描述观察到的细胞学特征细胞量、排列方式、细胞形态特点（大小、形状）、核特征（大小、形状、染色质、核仁）、胞质特征、背景成分（如黏液、坏死物质）、特殊结构（如砂粒体、腺样结构）形态学描述应客观详细，为最终诊断提供依据结果分类器官分类系统主要类别甲状腺Bethesda系统I-不满意；II-良性；III-意义不明的滤泡病变；IV-滤泡肿瘤；V-可疑恶性；VI-恶性乳腺IAC系统C1-不满意；C2-良性；C3-非典型可能良性；C4-可疑恶性；C5-恶性唾液腺Milan系统I-非诊断性；II-非肿瘤性；III-未确定意义；IVA-良性肿瘤；IVB-未确定恶性潜能；V-可疑恶性；VI-恶性淋巴结无统一系统通常分为不满意；反应性；可疑恶性（详述具体类型）；确定恶性（详述具体类型）胰腺Papanicolaou系统I-非诊断性；II-良性；III-不确定；IV-可疑恶性；V-确定恶性；VI-其他临床意义良性结果解读不确定结果处理恶性结果管理良性结果通常意味着可以不确定结果是FNA的常见确定恶性结果通常需要进避免手术干预，但解读需问题，如甲状腺一步治疗术前规划非常谨慎甲状腺FNA良性结Bethesda III-V类处理重要确定肿瘤类型、分果的假阴性率约2-5%，原则包括评估临床风险化程度、可能的原发灶因此对于临床高度可疑恶因素（年龄、家族史、放（对转移瘤）不同部位性的患者，即使FNA显示射暴露史）；考虑影像学恶性肿瘤处理不同甲状良性，也应考虑复查或其特征（是否有可疑恶性征腺癌通常需手术切除；乳他检查方法大多数良性象）；可选择重复FNA腺癌需评估分子分型和分结果建议定期随访，特别（可提高诊断率10-期；淋巴瘤需进一步活检是对于甲状腺和乳腺结15%）；考虑分子检测和分型；转移瘤需寻找原节如结节体积增大或出（如甲状腺BRAF、RAS发灶免疫组化和分子检现新的临床症状，应考虑突变）；某些情况下进行测对肿瘤分型和治疗选择重新评估诊断性手术多学科讨论至关重要对复杂病例尤为重要与其他检查方法的比较

13.FNA（细针穿刺）FNA1最微创，并发症少，门诊即可进行，成本低，快速获得结果局限性包括取样量小，组织结构信息有限，某些疾病诊断困难（粗针穿刺）CNB2获取组织条块，保留组织结构，诊断准确率高，可进行更多特殊检测创伤较FNA大，出血风险增加，通常需局部麻醉切开活检3获取较大组织样本，包括开放式和微创式诊断价值最高，但创伤最大，恢复期长，成本高，并发症风险增加影像学检查4完全无创，可全面评估病变大小、位置、内部特征和周围结构无法提供确定性组织学诊断，常需与穿刺活检联合使用与影像学检查的比较影像学检查特点相互补充关系影像学检查包括超声、CT、MRI和PET-CT等，完全无创，FNA与影像学检查在临床实践中相互补充而非替代关系无并发症风险可评估病变的大小、位置、内部结构和与影像学检查通常是初步筛查手段，发现可疑病变后进行周围组织关系，适合筛查和随访能评估多发病灶和全身FNA确认超声作为引导FNA的工具提高了穿刺精准度情况，某些病变有特征性影像表现可提示诊断影像学对FNA穿刺靶点选择至关重要，特别是对异质性肿瘤局限性在于无法提供细胞或组织学确诊，许多良恶性病变病变的影像特征与FNA结果结合可提高诊断准确性如影影像表现重叠影像特征的敏感性和特异性通常不如细胞像高度可疑恶性但FNA显示良性，应考虑取样错误可能学检查，特别是对于早期病变某些影像学检查成本高对大型或混合性病变，影像引导可确保对实性部分而非囊（如MRI、PET-CT），有辐射暴露（CT）或其他禁忌症性或坏死区域进行穿刺多学科协作，结合影像学和细胞病理学证据，是现代精准诊断的基础与粗针穿刺的比较取样特点对比操作与安全性12细针穿刺FNA使用22-27G针头，主要FNA操作简单快速，一般无需局部麻获取细胞样本；粗针穿刺CNB使用14-醉，可门诊进行；CNB通常需局部麻18G针头，获取组织条块FNA样本制成醉，操作时间较长FNA针径细，创伤涂片评估细胞形态；CNB样本可进行常小，出血风险低；CNB创伤较大，出血规组织病理学处理FNA取样量较小和疼痛风险增加FNA适合表浅和深部（几百到几千个细胞）；CNB可获取毫病灶；CNB主要用于表浅病灶，深部脏米级组织条块，保留组织架构信息器CNB风险增加FNA几乎无禁忌症；FNA难以评估浸润性，对某些需评估组CNB在凝血功能障碍患者相对禁忌织结构的疾病（如滤泡性甲状腺癌、乳FNA可重复多次穿刺增加样本量；CNB腺原位癌）诊断受限通常仅进行1-3次穿刺临床应用选择3FNA适合甲状腺结节初步评估、表浅淋巴结评估、乳腺囊性病变、深部脏器肿块初步诊断CNB适合FNA结果不确定的病例、需要组织学诊断的特定疾病（如乳腺病变和淋巴瘤）、需要大量样本进行特殊检测的情况实践中，两种方法常补充使用先进行FNA初步诊断，若结果不确定再考虑CNB某些中心使用细粗联合（FNAC）技术，同时获取细胞学和组织学样本与手术活检的比较特点细针穿刺FNA手术活检创伤程度微创，针孔，无需缝合创伤较大，需切口和缝合麻醉要求通常无需麻醉或仅局部浸润麻醉局部浸润麻醉、区域麻醉或全身麻醉操作时间5-15分钟30分钟至数小时恢复时间即刻恢复，无需休息数天至数周并发症风险极低（1%）较高（5-10%），包括出血、感染、瘢痕形成诊断信息主要提供细胞学信息提供完整组织学和结构信息诊断准确率70-97%（视部位和病变而定）95-100%样本量极少（几百至几千个细胞）充足（可获取整个病变）特殊检测能力有限，主要用于免疫细胞化学和部分分子检测全面，包括免疫组化、分子检测、基因分析等费用低高（通常为FNA的5-10倍）适用情况初步诊断、良恶性鉴别FNA诊断不确定、需完整切除的病变的新进展

14.FNA临床应用优化诊断拓展快速现场评估（ROSE）成为标准流程，提高样技术创新传统FNA主要用于肿瘤诊断，现扩展至炎症和本满意率多学科穿刺小组合作模式，整合影超微细针（28-30G）用于甲状腺和唾液腺微小感染性疾病FNA与微生物学结合，在结核、像、病理和临床专家标准化报告系统在更多病变，减少创伤自动化针吸系统提高样本质真菌和特殊感染诊断中发挥作用深部病灶器官部位推广远程数字病理学用于实时咨询量的一致性人工智能辅助超声引导，提高穿FNA与内镜技术结合，如内镜超声引导下FNA和质量控制FNA结果与临床决策路径整合，刺精准度智能定量细胞学分析系统，减少主（EUS-FNA）和支气管内超声引导下FNA优化患者管理观判读差异单细胞技术用于罕见肿瘤细胞分（EBUS-FNA）新型液基细胞学技术提高了析样本保存质量和诊断率分子检测技术样本获取与处理分子检测方法1优化FNA样本保存方法专用于分子检测PCR、测序、FISH等技术应用于FNA样本2质量控制临床应用4标准化流程确保结果可靠性和准确性3辅助诊断、预后评估和治疗方案选择FNA与分子检测技术的结合是近年来最重要的进展之一传统FNA仅提供形态学信息，而整合分子检测可获取基因和蛋白表达谱，极大提高了诊断精准度和临床价值从FNA样本中提取DNA、RNA和蛋白质进行分析，可应用于诊断、分类、预后评估和治疗选择甲状腺FNA中BRAF、RAS、RET/PTC等基因检测可提高良恶性鉴别率肺癌FNA中EGFR、ALK、ROS

1、PD-L1检测指导靶向和免疫治疗淋巴结FNA结合流式细胞术和基因重排分析提高淋巴瘤诊断率液基细胞学和细胞块技术优化了FNA样本用于分子检测的保存方法，扩展了检测范围人工智能辅助诊断图像分析技术临床应用进展计算机视觉和深度学习算法应用于FNA细胞学图像分析是甲状腺FNA是AI应用最广泛的领域之一，研究显示AI系统人工智能辅助诊断的基础这些技术可自动识别关键细胞在区分Bethesda分类方面准确率可达90%以上乳腺FNA形态特征，如核大小、形状、染色质模式、核仁特征和胞中，AI辅助能提高导管原位癌和浸润性癌的鉴别能力宫质特点卷积神经网络CNN等先进算法通过学习大量标颈细胞学筛查中，AI辅助系统已获FDA批准用于初筛，减记图像，能够区分正常、反应性和恶性细胞变化轻工作量并提高敏感性数字病理学平台结合AI分析，可快速筛查大量细胞，标记AI系统作为第二读者与病理医师合作，提高了诊断准确可疑区域供病理医师关注AI系统还能识别罕见细胞类型，性和效率现场评估ROSE中，AI辅助可快速判断样本质提高检测敏感性图像标准化处理和量化分析减少了主观量和初步类别AI与分子检测集成的多组学诊断平台正在判读的变异性发展，整合形态学和分子特征进行更精准分类总结与展望技术价值总结多学科整合未来发展方向123细针穿刺细胞学检查作为微创诊断技术，FNA最大价值体现在多学科协作框架中精准医学时代，FNA将发展为获取生物在临床医学中具有不可替代的价值其病理医师、放射科医师和临床医师的紧样本进行综合分析的平台新型保存液低创伤性、高效率、成本效益和可重复密合作确保了准确诊断和适当治疗超和处理技术将优化样本质量单细胞测性使其成为肿瘤初步诊断的重要工具声引导技术与FNA的结合提高了取样准序和多组学分析将从微量FNA样本获取FNA减少了不必要的手术，优化了医疗确性细胞学与分子病理学的整合扩展全面信息人工智能和数字病理将提高资源配置，提高了患者体验标准化的了诊断深度FNA结果与临床决策路径诊断标准化和效率远程细胞学将扩大报告体系如Bethesda系统极大提高了诊的系统整合优化了患者管理流程未来技术可及性液体活检技术与传统FNA断一致性和临床实用性多学科一体化诊治中心将成为发展趋势的结合将产生新的诊断模式FNA将持续发挥连接临床与实验室的桥梁作用。