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血液的实验室检查实验室血液检查是现代医学诊断中不可或缺的重要工具通过对血液样本的分析,临床医生能够获取关于患者健康状况的宝贵信息,从而辅助疾病诊断、监测疾病进展和评估治疗效果本课程将系统介绍血液检查的基本原理、操作规范、结果解释及临床应用,帮助学习者建立科学的血液检验知识体系,提高临床检验实践能力课程概述1血液检查的重要性血液检查是疾病诊断的基础工具,通过分析血液成分的变化可以发现多种疾病血液作为人体内重要的循环组织,能反映全身各系统的状态,为临床诊断提供客观依据2本课程主要内容课程将介绍血液组成、样本采集与处理、常规检查、特殊检查及质量控制等内容通过系统学习,学员将掌握血液检查的理论知识、操作技能和结果解释能力,为临床工作提供可靠的实验室支持血液组成血浆血细胞血浆是血液的液体部分,约占血液总量的,呈淡黄色透明液血细胞包括红细胞、白细胞和血小板,约占血液总量的红55%45%体血浆主要由水90%和各种溶质10%组成,包括蛋白质、细胞主要运输氧气和二氧化碳,白细胞参与机体免疫防御,血小电解质、葡萄糖、脂质、激素、酶和代谢产物等板则在止血和凝血过程中起关键作用血浆蛋白主要有白蛋白、球蛋白和纤维蛋白原,它们在维持血浆这些血细胞由造血干细胞分化而来,通常在骨髓中产生血细胞渗透压、运输物质、免疫防御和血液凝固中发挥重要作用的数量、形态和功能异常可反映多种疾病状态,是血液学检查的重要内容血液检查的分类常规检查血液常规检查是临床最基本、最常用的检验项目,包括血细胞计数、血红蛋白测定、红细胞指数计算、白细胞分类计数和血小板计数等这些检查通常使用自动血液分析仪完成,并可通过血涂片形态学检查进行辅助确认此外,血沉和凝血功能检查也属于常规检查范畴,可反映机体的炎症状态和凝血功能常规检查操作简便、结果快速,是筛查疾病的首选方法特殊检查特殊血液检查包括骨髓检查、血液生化检查、免疫学检查、分子生物学检查和细胞遗传学检查等这些检查通常针对特定疾病或病理生理过程,需要专门的设备和技术特殊检查有助于确诊复杂血液疾病,如白血病、骨髓增生异常综合征、血友病等,同时也为血液系统疾病的分型、分期、预后评估和治疗监测提供依据血液样本采集静脉采血毛细血管采血静脉采血是最常用的血液样本采集方法,通常从肘部静脉采集操作时应先准毛细血管采血主要从手指尖、耳垂或婴幼儿足跟部位采集少量血液,适用于血备采血器材,包括采血针、采血管、止血带、消毒棉球等采血前需确认患者常规、血糖等简单检查穿刺部位应预先消毒,使用一次性采血针或采血刀快身份,正确使用止血带,并选择合适的静脉速穿刺操作过程中要遵循无菌原则,采血完成后应立即轻压穿刺点并抬高肢体,防止采血时应挤压穿刺点周围组织使血液自然流出,避免过度挤压导致组织液混入出血和血肿形成抽取的血液样本应轻轻混匀,避免溶血首滴血通常弃去,收集后续血滴进行检测此方法操作简便但血量有限,不适合需要大量血液的检查采血注意事项患者准备1采血前应向患者详细解释采血目的和过程,减少紧张情绪某些检查项目需要患者空腹或遵循特定饮食要求,如空腹血糖检查需禁食小时8-12对于长期卧床的患者,应调整体位以便采血特殊情况如正在输液的患者,应从未输液的对侧肢体采血,或暂停输液分钟后再采集样本15-30操作规范2操作者应严格遵守无菌技术,使用一次性采血器材,避免交叉感染止血带应适度收紧,使用时间不超过一分钟,过长会导致血液成分浓缩抽血顺序应按照特定顺序无添加剂管、凝血管、肝素管、管,以避EDTA免添加剂交叉污染采血管应按规定填充量采集,过少或过多均可影响检测结果采血完成后应立即轻轻颠倒混匀,但不可剧烈摇晃以防溶血血液样本保存温度要求保存时间防护措施大多数血液样本应在2-血液样本的保存时间因样本应避光保存,特别8℃条件下保存,避免检测项目而异血常规是胆红素等光敏感物质高温或冻结特殊检查检查应在采集后4小时的检测运输过程中应如某些酶学检测可能需内完成;凝血功能检测使用专用保温箱,防止要-20℃或-80℃超低样本最好在2小时内检剧烈震动导致溶血样温保存,以维持活性测,最长不超过4小时本管应密封良好,防止血气分析样本应置于冰;生化检查血清可在2-挥发、污染或泄漏水混合物中,在分℃保存小时30824-48钟内完成检测血常规检查概述定义血常规检查是对血液中各种细胞成分进行定量和定性分析的基础检查方法它包括红细胞系统、白细胞系统和血小板系统的检测,以及相关参数的计算和形态学观察检测方法现代血常规检查主要采用全自动血液分析仪,基于电阻抗法或光散射法原理分析仪可同时提供多达余项参数,包括细胞计数、体30积分布和各种指数重要异常结果需通过血涂片显微镜检查进行复核确认临床意义血常规检查是临床最常用的实验室检查,可初步筛查贫血、感染、炎症、白血病、出血性疾病等多种病症它不仅是疾病诊断的基础,也是治疗效果评估和病情监测的重要工具红细胞计数()RBC
4.5-
5.
53.5-
4.5男性正常值女性正常值单位×10^12/L单位×10^12/L
4.0-
5.0儿童正常值单位×10^12/L红细胞计数是血常规检查中的基础项目,反映循环血液中红细胞的数量计数升高见于原发性红细胞增多症、继发性红细胞增多症(如高原居民、慢性缺氧等)以及血液浓缩状态计数降低常见于各种类型的贫血,包括缺铁性贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫血等红细胞计数应结合血红蛋白和红细胞比容等指标综合判断,单一指标的异常可能不足以确认贫血的存在或分类血红蛋白()测定HGB采血测定方法1EDTA抗凝血液氰化高铁血红蛋白法2结果解释仪器分析43与参考范围比较血液分析仪测定血红蛋白是红细胞中的主要蛋白质,负责氧气运输,由四个亚基组成,每个亚基含有一个血红素和一条多肽链测定方法主要采用氰化高铁血红蛋白法,通过分光光度计在波长处测定吸光度540nm正常参考范围男性,女性血红蛋白水平降低是贫血的主要表现,升高可见于真性红细胞增多症、严重脱水等情况血130-175g/L115-150g/L红蛋白测定是评估贫血严重程度和分类的重要指标,也是监测治疗效果的关键参数红细胞比容()HCT临床应用1评估贫血、多血症和脱水状态测定方法2离心法或计算法测定原理3血液中红细胞体积占全血比例红细胞比容也称血细胞比容或压积,表示红细胞在全血中所占的体积百分比传统测定采用微量离心法,将抗凝全血置于毛细管中离心,直接读取红细胞柱高度与全血柱高度的比值现代血液分析仪通常通过红细胞计数和平均体积计算得出正常参考范围男性,女性红细胞比容与血红蛋白值基本平行变化,但在某些特殊情况下可出现不一致,如球形红细胞病40-50%35-45%(比容降低但血红蛋白正常)或高铁血红蛋白血症(比容正常但血红蛋白升高)红细胞比容是输血指征和手术适应症评估的重要参考指标红细胞指数指数名称计算公式正常范围临床意义平均红细胞体积HCT÷RBC×1080-100fL区分大、正、小细MCV胞性贫血平均红细胞血红蛋HGB÷RBC×1027-34pg评估单个红细胞含白含量MCH血红蛋白量平均红细胞血红蛋HGB÷HCT×100320-360g/L判断红细胞血红蛋白浓度MCHC白饱和度红细胞分布宽度红细胞体积分布曲
11.5-
14.5%反映红细胞大小异RDW线宽度质性红细胞指数是描述红细胞形态特征的一组计算参数,包括MCV、MCH、MCHC和RDW这些指标对贫血的分类诊断具有重要价值,可帮助鉴别不同类型的贫血例如,缺铁性贫血通常表现为MCV降低、MCH降低、MCHC降低和RDW增宽;而巨幼细胞性贫血则表现为MCV显著增高、MCH增高红细胞指数与血涂片形态学检查结合,可为贫血的诊断和分类提供可靠依据白细胞计数()WBC成人正常值
14.0-
10.0×10^9/L儿童正常值
24.0-
12.0×10^9/L新生儿正常值
39.0-
30.0×10^9/L白细胞计数反映循环血液中白细胞的总数,是评估机体感染和炎症状态的重要指标计数升高称为白细胞增多,常见于细菌感染、炎症反应、组织损伤、白血病、应激状态等;计数降低称为白细胞减少,可见于病毒感染、骨髓抑制、脾功能亢进、自身免疫性疾病等白细胞计数的变化需结合患者临床表现及白细胞分类计数综合分析同时,白细胞计数是监测疾病进展和评估治疗效果的重要指标,尤其在感染性疾病、自身免疫性疾病和肿瘤治疗过程中具有重要参考价值白细胞分类计数单核细胞嗜酸性粒细胞淋巴细胞正常比例3-8%正常比例
0.5-5%正常比例20-40%主要功能吞噬和抗原呈递主要功能参与过敏和抗寄生虫中性粒细胞主要功能免疫应答,产生抗体反应嗜碱性粒细胞正常比例50-70%正常比例0-1%主要功能吞噬细菌,参与急性3炎症反应主要功能释放组胺和肝素2415白细胞分类计数是对不同类型白细胞的相对百分比和绝对数量的测定现代血液分析仪可基于细胞大小、核形态和细胞质颗粒的差异进行自动分类,通常采用五分类法,包括中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞白细胞分类计数在感染性疾病诊断中具有重要价值细菌感染通常引起中性粒细胞增多,病毒感染常导致淋巴细胞增多,过敏反应和寄生虫感染可引起嗜酸性粒细胞增多异常白细胞的出现如原始细胞或幼稚细胞,则可能提示白血病中性粒细胞形态特征功能中性粒细胞直径约10-12μm,有分叶核和粉红色细胞质颗粒中性粒细胞是人体抵抗细菌感染的第一道防线,具有强大的趋化成熟中性粒细胞通常有2-5个核叶,连接呈哑铃状或串珠状性、吞噬能力和杀菌能力当机体受到细菌侵犯时,中性粒细胞细胞质中含有特异性颗粒(呈紫红色)和非特异性颗粒(呈淡迅速移行至感染部位,通过变形能力穿过血管壁,吞噬并杀灭病蓝色),这些颗粒含有溶菌酶、碱性磷酸酶、髓过氧化物酶等多原体种酶类中性粒细胞还能释放多种细胞因子和炎症介质,参与炎症反应的调节在某些自身免疫性疾病中,中性粒细胞的异常活化可导致组织损伤淋巴细胞T淋巴细胞B淋巴细胞NK细胞淋巴细胞在胸腺中发育成熟,负责细胞淋巴细胞在骨髓中发育成熟,负责体液自然杀伤细胞是一种特殊类型的淋巴T BNK免疫反应根据功能和表面标志可分为免疫反应活化的B细胞可分化为浆细胞细胞,不具有特异性抗原受体,能非特异CD4+辅助T细胞、CD8+细胞毒性T细胞和,产生特异性抗体B细胞通过B细胞受体性识别和杀伤肿瘤细胞和病毒感染细胞调节性T细胞T细胞通过T细胞受体识别识别抗原,在抗感染免疫和过敏反应中起NK细胞在先天免疫中发挥重要作用,是抗原,在病毒感染、肿瘤免疫和移植排斥重要作用某些B细胞可发展为记忆B细胞机体抗肿瘤免疫的重要组成部分反应中发挥关键作用,为机体提供长期免疫保护单核细胞单核细胞是循环血液中体积最大的白细胞,直径,具有不规则或肾形核和丰富的灰蓝色细胞质细胞质内含有少量细小的嗜15-20μm天青颗粒和溶酶体,具有较强的吞噬功能单核细胞在血液中循环天后迁移至组织,分化为各种组织巨噬细胞或树突状细胞1-3作为单核巨噬细胞系统的一部分,单核细胞在固有免疫和适应性免疫中发挥多重作用清除病原体和死亡细胞;处理和呈递抗原;分-泌细胞因子调节免疫反应;参与组织修复和重建单核细胞在慢性炎症、肉芽肿形成和某些自身免疫疾病的发病机制中起重要作用嗜酸性粒细胞形态特征功能嗜酸性粒细胞直径约12-15μm,嗜酸性粒细胞参与过敏反应和抗具有2-3叶的分叶核和含有大量寄生虫防御在过敏反应中,可嗜酸性颗粒的细胞质这些特异通过释放组胺、白三烯和前列腺性颗粒在瑞氏染色下呈橙红色或素等介质引起气道高反应性和组砖红色,内含主要碱性蛋白、嗜织损伤对抗寄生虫时,通过释酸性细胞过氧化物酶、组胺和多放主要碱性蛋白和嗜酸性细胞阳种细胞因子离子蛋白直接杀伤寄生虫相关疾病嗜酸性粒细胞增多常见于过敏性疾病(如哮喘、过敏性鼻炎、特应性皮炎)、寄生虫感染(如蛔虫、钩虫、血吸虫)、嗜酸性粒细胞增多综合征、某些皮肤病、药物反应和某些肿瘤(如淋巴瘤)嗜碱性粒细胞形态特征嗜碱性粒细胞是外周血中数量最少的白细胞,占总白细胞的它直0-1%径约10-14μm,具有S形或分叶不明显的核和含有大量嗜碱性颗粒的细胞质这些颗粒在瑞氏染色下呈深蓝紫色,常掩盖细胞核,内含组胺、肝素、慢反应物质等功能嗜碱性粒细胞参与过敏反应和炎症过程释放的组胺可引起血管扩张和通透性增加;肝素具有抗凝和脂蛋白脂酶激活作用;还可释放、IL-4IL-13等细胞因子调节免疫反应嗜碱性粒细胞与肥大细胞关系密切,但二者在组织分布和功能上有所不同临床意义嗜碱性粒细胞增多较为罕见,可见于慢性粒细胞白血病、骨髓增生性疾病、某些过敏反应、某些内分泌疾病和恢复期感染嗜碱性粒细胞减少临床意义不明确,因其本身数量就极少血小板计数()PLT正常值范围血小板增多血小板正常计数范围为血小板计数称为血100-300×10^9/L300×10^9/L血小板是无核细小板增多,分为原发性和继发性胞片段,由骨髓巨核细胞胞质断裂原发性血小板增多见于骨髓增生性形成,直径约2-4μm正常人每肿瘤,如原发性血小板增多症;继天产生约1×10^11个血小板,寿命发性血小板增多常见于急性感染、为7-10天,约30%储存在脾脏中慢性炎症、恶性肿瘤、出血后、铁血小板计数可反映骨髓造血功能缺乏、脾切除术后等和外周血小板消耗情况血小板减少血小板计数称为血小板减少,可由产生减少或破坏增加所致100×10^9/L产生减少见于骨髓衰竭、白血病、巨幼细胞性贫血等;破坏增加见于免疫性血小板减少性紫癜、弥散性血管内凝血、血栓性血小板减少性紫癜等网织红细胞计数测定原理网织红细胞是尚未完全成熟的红细胞,含有残余通过超活性染料(如RNA亮晶蓝、新亚甲蓝)可将染成网状或颗粒状结构,使网织红细胞与成熟RNA红细胞区分开现代血液分析仪可使用荧光染料特异性标记,通过流式RNA细胞术原理进行自动计数正常参考值网织红细胞相对计数正常值为,绝对计数为
0.5-
2.0%24-84×10^9/L新生儿网织红细胞计数较高,可达网织红细胞在外周血中循环约2-6%1-天后完全成熟为红细胞,因此其计数可实时反映骨髓红系造血功能2临床应用网织红细胞计数是评估骨髓红系造血功能的重要指标,可用于贫血的病因鉴别和治疗效果监测在溶血性贫血中,网织红细胞计数显著增高,反映骨髓代偿性增生;而在再生障碍性贫血中,网织红细胞计数显著降低,提示骨髓造血功能衰竭血涂片制作玻片准备1选用洁净、无油脂、无划痕的载玻片和推片载玻片一端用铅笔标记患者信息操作前确保手部清洁干燥,避免指纹污染取血2取一小滴新鲜抗凝全血(约2-3μL)置于载玻片距标记端约1-2cm处血量过多或过少均会影响涂片质量,应保持适量推片3将推片以30-45°角放在血滴前方,轻轻回拉接触血滴使血液沿推片边缘均匀铺开,然后以平稳速度向前推动,制作长约3cm的涂片干燥4迅速在空气中自然干燥涂片,避免加热或吹风,防止红细胞变形干燥后的涂片应呈浅黄色,厚薄均匀,前端有羽毛状边缘血涂片染色瑞氏染色法Wrights stain姬姆萨染色法Giemsa stain瑞氏染色是最常用的血涂片染色方法,属于罗曼诺夫斯基姬姆萨染色也属于罗曼诺夫斯基染色系统,特别适用于血液寄生染色系统染色液主要成分是伊红美蓝虫检查和骨髓涂片染色染色液主要含有姬姆萨粉(由伊红和Romanowsky Yeosin-methylene blue,可同时显示细胞核和细胞质结构亚甲蓝组成)染色步骤将干燥的血涂片平放,滴加瑞氏染色液覆盖全片,静染色步骤先用甲醇固定血涂片3-5分钟,晾干;将工作染色液置分钟;不倒出染色液,加入等量缓冲液()(通常稀释)覆盖涂片,染色分钟;用缓冲水1-3pH
6.4-
6.81:10-1:2015-30,轻轻吹匀,形成金属光泽,静置分钟;用清水轻轻冲洗轻轻冲洗;立起晾干后镜检姬姆萨染色对嗜碱5-10pH
7.0-
7.2,直至薄处呈粉红色;立起晾干后镜检性颗粒和细胞核仁显色较好,特别适合寄生虫形态学观察红细胞形态学检查红细胞形态学检查是通过显微镜观察染色血涂片中红细胞的大小、形状、染色特性和包涵体等特征正常红细胞呈圆盘状双凹形,直径约,中央凹陷明显,边缘较厚,染色均匀呈粉红色7-8μm大小异常包括小细胞(缺铁性贫血)、大细胞(巨幼细胞性贫血)和大小不等(再生障碍性贫血)形状异常包括靶形细胞(地中海贫血)、镰状细胞(镰状细胞病)、球形细胞(遗传性球形红细胞增多症)、椭圆形细胞(遗传性椭圆形红细胞增多症)和棘状细胞(尿毒症)等染色异常有浓染(高铁血红蛋白血症)和淡染(缺铁性贫血)红细胞内包涵体如霍威尔约利小体、疟原虫等也具有重要诊断价值-白细胞形态学检查白细胞形态学检查是通过显微镜观察染色血涂片中各类白细胞的数量比例、形态特征和异常变化正常外周血中主要见到成熟的中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞,其形态特征各有不同中性粒细胞的毒性改变(如毒性颗粒、空泡化、多格核)常见于严重感染;核左移(出现带状核和杆状核)提示急性感染或炎症;反应性淋巴细胞(胞质增多、深蓝色、有空泡)常见于病毒感染如传染性单核细胞增多症;异常淋巴细胞可见于淋巴细胞白血病;原始细胞出现可能提示急性白血病;浆细胞可见于多发性骨髓瘤;幼稚粒细胞系列可见于骨髓增生性疾病白细胞形态学检查是血液系统疾病诊断的基础血小板形态学检查大小异常形态异常功能异常正常血小板直径为2-正常血小板呈圆形或椭血涂片上血小板聚集可4μm,大于4μm称为圆形异常形态包括畸反映血小板活化状态巨大血小板,常见于特形血小板(形状不规则伪性血小板减少症是由发性血小板减少性紫癜)、血小板碎片(灰胡于EDTA抗凝剂引起的、伯纳德-索利尔综合子综合征)和血小板卫体外血小板聚集,导致征等小于2μm的微小星现象(免疫性血小板自动计数结果偏低此血小板可见于骨髓发育减少症)在一些特殊时血涂片观察可见血小不良综合征血小板大疾病如灰色血小板综合板成簇聚集,实际血小小差异增大(血小板分征中,血小板缺乏颗板总数正常某些先天α布宽度增加)可见于免粒,呈灰色透明状性或获得性血小板功能疫性血小板减少症异常患者,尽管血小板计数正常,但可能伴有出血倾向血沉()ESR测定原理测定方法血沉(红细胞沉降率)是测定抗凝常用方法包括魏氏法和温氏微量法全血在垂直放置的特定管中,红细魏氏法使用专用血沉管,管长胞在小时内沉降的距离(,内径;温氏微1mm/h200mm
2.5mm)当血浆中纤维蛋白原、球蛋白量法适用于儿科,仅需少量血液等大分子蛋白增加时,会增强红细现代实验室常采用自动血沉仪,可胞的聚集力,促使红细胞形成连串在30分钟内快速得出结果正常状(钱串状),加速沉降值范围男性0-15mm/h,女性,老年人可略高0-20mm/h影响因素生理性因素女性高于男性,老年人高于青年人,妊娠期升高病理性因素感染、炎症、组织损伤、恶性肿瘤、自身免疫性疾病等可使血沉加快技术因素温度升高、管道倾斜、振动、血液稀释等可造成假性升高;延迟检测、血液混匀不充分等可影响结果准确性凝血功能检查概述凝血因子筛查血小板功能1计数聚集功能PT,APTT,TT,FIB,2天然抗凝系统纤溶系统43蛋白蛋白二聚体C,S,AT-III D-,FDP凝血功能检查是评估血液凝固和纤溶系统功能的一组实验室检测正常凝血过程包括三个主要阶段
①血管收缩和血小板黏附、聚集形成血小板栓;
②凝血因子激活形成纤维蛋白;
③纤溶系统激活分解血凝块任何环节异常都可能导致出血或血栓形成常用凝血功能检查包括外源系统检查()、内源系统检查()、共同途径检查()、纤维蛋白原测定、血小板计数和功能检查以及纤PT APTTTT溶系统检查(二聚体、等)这些检查在出血性疾病诊断、抗凝治疗监测、手术前评估、血栓性疾病诊断等方面具有重要价值D-FDP凝血时间()CT测定原理凝血时间是衡量全血凝固所需时间的检查方法,反映了内源性和外源性凝血系统的综合功能试验通过收集新鲜全血置于℃水浴中,每3730秒轻轻倾斜试管观察是否形成凝块,记录从采血到凝块形成的时间正常值正常凝血时间为分钟凝血时间延长可见于严重凝血因子缺乏(如5-11血友病)、血小板减少症、严重肝病、等但当凝血因子活性大于DIC时,凝血时间可能仍正常,因此敏感性较低30%临床应用局限凝血时间受多种因素影响,如采血技术、血液与试管壁接触面积、温度等,导致重复性差现已被更精确的和所取代,临床应用减少APTT PT,主要用于基层医疗机构简易筛查活化部分凝血活酶时间()APTT原理正常值是评估内源性凝血系统、正常范围为秒,具体参APTT XIIAPTT25-40XI、IX、VIII因子和共同途径X、考值因试剂和方法而异延长超过对、、因子功能的试验通过加入照秒以上具有临床意义,提示内源V II I10磷脂和活化剂如高岭土、硅土等激性或共同途径凝血因子缺乏或存在抗活内源性凝血途径,记录从加入钙离凝物质APTT缩短通常不具有特殊子到纤维蛋白形成的时间临床意义临床应用常用于血友病因子缺乏和血友病因子缺乏的筛查;肝素抗凝APTT AVIIIBIX治疗的监测,目标通常为正常值的倍;狼疮抗凝物质的筛查;手术前出血
1.5-
2.5风险评估等肝素中和试验和混合试验可帮助鉴别延长的原因APTT凝血酶原时间()PT测定原理1检测反映外源性凝血途径因子和共同途径、、、因子的功PT VIIX VIII能测定时向血浆中加入组织因子组织凝血活酶和钙离子,激活外源性凝血途径,记录从试剂加入到纤维蛋白形成的时间正常值2正常范围通常为秒,但具体参考值因试剂和仪器而异,实验室应建PT11-14立自己的参考范围结果常与对照值比较,延长超过对照秒以上具有临PT3床意义,提示外源性或共同途径凝血因子活性降低结果解释3延长可见于维生素缺乏(新生儿出血症、长期抗生素使用);肝功能PT K不全(肝硬化、急性肝炎);凝血因子缺乏(先天性或获得性);华法林等抗凝药物治疗;等缩短临床意义不大,可见于高凝状态DIC PT国际标准化比值()INR
1.02-3正常人INR值常规抗凝范围无需抗凝治疗用于静脉血栓等
2.5-
3.5高强度抗凝范围用于机械瓣膜等国际标准化比值INR是为解决不同实验室PT结果差异而引入的标准化表达方式它通过计算公式INR=患者PT/正常对照PT^ISI来获得,其中ISI是国际敏感度指数,反映试剂对维生素K依赖性凝血因子的敏感度INR主要用于监测华法林等口服抗凝药物治疗的强度,弥补了不同实验室间PT结果不可比的缺陷根据不同疾病,INR的治疗目标值有所不同普通静脉血栓为
2.0-
3.0;机械心脏瓣膜为
2.5-
3.5;复发性血栓栓塞为
3.0-
4.0INR低于目标值提示抗凝不足,有血栓风险;高于目标值提示抗凝过度,有出血风险纤维蛋白原()FIB时间小时纤维蛋白原水平g/L纤维蛋白原FIB是肝脏合成的一种可溶性糖蛋白,是凝血过程中最终形成纤维蛋白的前体在凝血酶作用下,纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白,形成血凝块正常血浆中FIB浓度为
2.0-
4.0g/LFIB测定方法主要有Clauss法(最常用)、免疫比浊法和派生法FIB增高见于急性感染、炎症、组织损伤、恶性肿瘤和妊娠等,是急性期反应蛋白之一;FIB降低见于重症肝病(合成减少)、DIC和原发性纤溶亢进(消耗增加)、先天性缺乏或异常(如无纤维蛋白原血症)等上图显示了典型炎症过程中FIB浓度的动态变化二聚体D-临床应用1肺栓塞、DVT和DIC的诊断影响因素2年龄、妊娠和手术等测定方法3免疫学和酶学方法基本原理4继发纤溶的特异性标志物D-二聚体是交联纤维蛋白在纤溶酶作用下降解的特异性产物,反映体内既有凝血激活又有继发性纤溶活动,是凝而溶的标志物正常人血浆中D-二聚体含量极少,参考值通常
0.5mg/L或
0.5μg/mlD-二聚体检测方法包括乳胶凝集法、免疫比浊法、酶联免疫法ELISA和免疫荧光法等D-二聚体升高见于深静脉血栓DVT、肺栓塞PE、弥散性血管内凝血DIC、动脉粥样硬化性疾病、严重感染、恶性肿瘤、妊娠、手术后、年龄增长等其中对DVT和PE的排除诊断价值最高,阴性预测值95%,但特异性较低DIC患者D-二聚体常显著升高,是诊断和监测的重要指标血型检查ABO血型系统Rh血型系统血型由红细胞表面抗原和抗原决定,分为型、型、系统是继系统后第二重要的血型系统,包含多种抗原,ABO AB AB RhABO型和型四种主要类型血清中存在与红细胞表面不同的抗其中抗原临床最重要根据抗原存在与否,分为阳性AB OD DRh原相应的抗体,如型血含抗抗体,型血含抗抗体,型和阴性中国人群中阴性比例仅约A-B B-A OD+Rh D-Rh
0.3-
0.5%血含抗和抗抗体,型血不含抗或抗抗体,远低于白种人-A-B AB-A-B15%血型检测包括正定型(检测红细胞抗原)和反定型(检测血型检测主要采用盐水介质试管法、抗人球蛋白试验和微柱ABO Rh血清抗体)方法包括试管法、玻片法、微柱凝胶法和固相法等凝胶法等Rh血型对输血和妊娠有重要影响,Rh阴性孕妇携带正反定型结果一致才能确定血型,不一致需进一步检查Rh阳性胎儿可能发生新生儿溶血病弱D型和变异D型的检测需特殊技术直接抗人球蛋白试验(直接试验)Coombs原理直接抗人球蛋白试验DAT检测红细胞表面是否被抗体或补体成分致敏当患者红细胞表面附着有IgG抗体或补体成分时,这些蛋白质通常不足以直接引起红细胞凝集,但加入抗人球蛋白试剂后可与红细胞表面的人球蛋白结合,形成桥梁使红细胞发生凝集方法常规方法为试管法患者红细胞经洗涤3-4次去除游离蛋白后,加入抗人球蛋白试剂,混匀并离心,观察红细胞是否凝集现代实验室也采用微柱凝胶法、固相法等多特异性抗人球蛋白可同时检测IgG和补体,单特异性抗人球蛋白可分别检测IgG、IgM、IgA、C3d等临床应用DAT用于自身免疫性溶血性贫血AIHA的诊断,AIHA患者95%以上DAT呈阳性温型AIHA主要检出IgG,冷型AIHA主要检出C3d其他阳性情况包括同种免疫性溶血(输血反应、新生儿溶血病)、药物相关性免疫性溶血(如青霉素、甲基多巴)、多发性骨髓瘤和系统性红斑狼疮等间接抗人球蛋白试验(间接Coombs试验)原理间接抗人球蛋白试验IAT检测血清中是否存在能与红细胞结合的不完全抗体IgG抗体这些抗体在生理条件下能与红细胞上相应抗原结合,但不足以直接引起红细胞凝集,需通过抗人球蛋白试剂桥接才能观察到凝集反应方法基本步骤将受检血清与筛选红细胞混合,37℃孵育使抗体与红细胞结合;洗涤红细胞3-4次去除未结合的蛋白质;加入抗人球蛋白试剂,混匀离心后观察凝集反应现代实验室多采用微柱凝胶法或固相法,自动化程度高,敏感性好临床应用IAT广泛应用于输血前相容性检验、不规则抗体筛查、抗体鉴定和滴度测定等它能检出针对红细胞上微量抗原的抗体,如Rh、Kidd、Duffy等系统抗体,对预防溶血性输血反应至关重要此外,IAT还用于自身免疫性溶血性贫血、新生儿溶血病风险评估和器官移植前交叉配型等骨髓检查概述骨髓穿刺涂片制作1采集骨髓液标本制备染色骨髓涂片2特殊检查细胞学分析43细胞化学、免疫、分子生物学等计数和形态学检查骨髓检查是通过骨髓穿刺或活检获取骨髓样本,进行细胞学、组织学和特殊检查的一种重要诊断方法它直接反映造血系统的形态和功能状态,是血液系统疾病诊断的金标准骨髓检查的适应症包括各类不明原因的血细胞减少或增多;贫血的病因诊断;白血病的诊断、分型和疗效评估;骨髓增生异常综合征和骨髓增生性肿瘤的诊断;多发性骨髓瘤和淋巴瘤的诊断和分期;不明原因发热查找感染灶和寄生虫;评估化疗后骨髓抑制程度等禁忌症包括严重凝血功能障碍、局部感染和患者不配合等骨髓穿刺穿刺前准备标本处理穿刺前应告知患者操作目的和过程,签署知情同意书检查凝血功能,排除禁忌症迅速将骨髓液分装滴2-3滴于载玻片上立即制作涂片;部分加入抗凝管用于计数准备穿刺工具包括骨髓穿刺针、注射器、载玻片和消毒用品等穿刺部位常选择、特殊染色或流式细胞术;必要时留取标本送病理切片或细胞遗传学检查操作后胸骨第二肋间、髂后上棘或胫骨上端儿童,应避开感染区域和放疗部位加压止血,观察有无出血或其他不适123穿刺操作患者取适当体位,常规消毒、铺巾后,局部浸润麻醉至骨膜穿刺针垂直刺入至骨膜,用力旋转进入骨髓腔,有落空感拔出针芯后接上注射器,抽吸5-10ml骨髓液若为干抽,应微调针位重试操作应轻柔迅速,减少患者痛苦骨髓涂片制作与染色涂片制作染色技术骨髓涂片制作技术要求较高,目的是获得细胞分布均匀、形态保存完好的标本骨髓涂片常用的染色方法包括瑞氏Wright染色和姬姆萨Giemsa染色瑞氏常用推片法取一滴骨髓液置于载玻片一端,用另一载玻片以25-30°角快速均染色可显示细胞核染色质结构和胞质颗粒特征;姬姆萨染色对核仁和嗜碱性胞质匀推开,形成长约3-4cm的涂片显色较好骨髓粒块涂片是将骨髓液中的小块组织捡出,轻轻压碎铺展成薄片这种方法保特殊染色包括铁染色普鲁士蓝法用于评估骨髓铁储备;PAS染色检测糖原;存了骨髓组织结构,有助于观察造血细胞岛和红系造血岛,更好评估骨髓增生程苏丹黑染色检测脂质;过氧化物酶染色鉴别髓系和淋系细胞;酸性磷酸酶和碱性度磷酸酶染色等这些特殊染色对白血病分型具有重要辅助价值骨髓细胞学检查粒系细胞红系细胞淋巴细胞单核细胞浆细胞巨核细胞其他细胞骨髓细胞学检查包括骨髓增生程度评估和各系细胞比例计数通过低倍镜观察骨髓粒块数量和细胞密度,评估骨髓增生程度为低下、正常或活跃成人骨髓增生度正常参考值为30-50%,老年人可略低,儿童略高骨髓象分析通常计数500个有核细胞,计算各类细胞比例正常骨髓中粒系占约50%,红系约30%,淋系约15%,单核系约2%,粒红比例约为2-4:1各系统细胞应按发育阶段分类计数,观察成熟过程是否正常同时注意有无异常细胞如原始细胞增多、幼稚细胞异常积累、形态异常细胞或寄生虫等完整的骨髓细胞学报告还应包括巨核细胞数量和形态、铁储备状况等特殊血液检查血液生化铁代谢叶酸和维生素B12铁代谢检查包括血清铁、总铁结合叶酸和维生素是红细胞生成所必需SI B12力TIBC、转铁蛋白饱和度TS和铁的维生素,缺乏可导致巨幼细胞性贫血蛋白测定这些检查对缺铁性贫血清叶酸正常值为SF
3.1-
17.5ng/ml血的诊断和铁过载状态的评估具有重要,红细胞内叶酸浓度更能反映机体长期价值叶酸状况缺铁性贫血典型表现为降低、血清维生素正常值为SI TIBCB12187-增高、降低和显著降低;,测定多采用放射免疫法或TS16%SF883pg/ml而铁过载状态如血色病则表现为增高化学发光法维生素缺乏还可通过SI B
12、TS增高45%和SF显著增高测定血清和尿甲基丙二酸、同型半胱氨酸等代谢产物间接评估红细胞酶活性红细胞酶活性检测主要用于先天性红细胞酶缺陷的诊断,如葡萄糖磷酸脱氢酶-6-缺乏、丙酮酸激酶缺乏等这些酶缺陷可导致溶血性贫血,多采用分光G6PD PK光度法或荧光法测定酶活性血清铁蛋白测定1测定原理2正常参考值铁蛋白是体内主要的铁储存蛋白,SF正常参考值因性别、年龄而异由蛋白壳和铁核组成血清铁蛋白成年男性为30-300ng/ml,成年水平与组织铁储备量密切相关女性为,儿童为SF15-200ng/ml7-,是评估铁状态的敏感指标测绝经后女性铁蛋白水SF140ng/ml定多采用免疫方法,如免疫比浊法平接近男性不同实验室因方法学、放射免疫法、酶联免疫法和化学差异,参考范围可能略有不同发光法等,通过特异性抗体与样本中铁蛋白结合,根据信号强度定量3临床意义降低是缺铁的敏感指标,出现在血红蛋白和红细胞形态改变之前SF12ng/ml增高见于铁过载状态血色病、多次输血、炎症和感染作为急性期反应物、SF肝病、恶性肿瘤和某些血液系统疾病如急性白血病由于也是急性期蛋白,炎SF症状态下即使存在缺铁,也可能正常或升高,此时需结合转铁蛋白受体等其他SF指标综合判断血清转铁蛋白测定转铁蛋白TF是一种β-球蛋白,由肝脏合成,是血浆中运输铁的主要载体蛋白每个TF分子可结合两个三价铁离子,将其从吸收和储存部位运送到需要部位,特别是骨髓红系前体细胞转铁蛋白测定方法包括免疫比浊法、免疫散射比浊法和免疫荧光法等正常参考值为2-
3.6g/L通常不直接测定TF,而是通过总铁结合力TIBC间接评估,TIBC与TF水平高度相关TF水平受铁状态调节缺铁时合成增加,铁过载时合成减少此外,TF是负急性期蛋白,在炎症状态下合成减少因此,缺铁性贫血表现为TF增高,而慢性病贫血炎症性贫血表现为TF正常或降低,可作为两种贫血鉴别的指标叶酸和维生素测定B12叶酸测定维生素B12测定叶酸是合成必需的辅酶,参与嘌呤和嘧啶合成叶酸缺乏维生素钴胺素参与合成和神经髓鞘形成,缺乏可导致DNA B12DNA可导致合成障碍,引起巨幼细胞性贫血和神经系统症状巨幼细胞性贫血和脊髓亚急性联合变性吸收需要胃内因子DNA B12血清叶酸反映近期摄入状况,红细胞内叶酸反映长期体内储备介导,主要储存在肝脏测定方法包括微生物学法、放射免疫法、化学发光法等正常值测定方法主要包括微生物学法、放射免疫法、酶联免疫法和化学血清维生素B12为187-883pg/ml维生素B12缺乏见于恶性发光法等正常值血清叶酸,红细胞内叶酸贫血胃内因子缺乏、全胃切除、回肠疾病或切除、严格素食者
3.1-
17.5ng/ml叶酸缺乏见于饮食不足、妊娠需求增加、肠和寄生虫感染等血甲基丙二酸和同型半胱氨酸是功能性缺140-628ng/ml B12道吸收不良和某些药物如甲氨蝶呤、苯妥英钠干扰乏的敏感标志物,在血正常但功能缺乏时升高B12血液免疫学检查血液免疫学检查是利用抗原抗体反应原理,检测血液细胞表面标志物和血清中免疫球蛋白等的检验方法这类检查在血液系统疾病特别是-白血病、淋巴瘤的诊断、分型和预后评估中具有关键作用流式细胞术是现代血液免疫学检查的主要方法,通过荧光标记的单克隆抗体识别细胞表面或胞内抗原,进行免疫表型分析常用的细胞表面标志包括系列抗原、、用于细胞识别;、用于细胞识别;、、用于髓系细胞识别;CD CD3CD4CD8T CD19CD20B CD13CD33CD
117、用于干祖细胞识别等急性白血病的免疫分型对确定白血病细胞的起源和谱系归属至关重要,是分类方案的重要依据CD34CD38/WHO,也有助于微小残留病灶的监测和预后评估血液肿瘤标志物标志物相关血液肿瘤临床应用β2微球蛋白多发性骨髓瘤、CLL、NHL预后评估,疾病监测LDH各类淋巴瘤、白血病肿瘤负荷,预后指标免疫球蛋白骨髓瘤、华氏巨球蛋白血症诊断,疗效监测尿本周蛋白多发性骨髓瘤诊断,疗效监测可溶性IL-2受体T细胞淋巴瘤/白血病诊断,疗效监测血清游离轻链轻链骨髓瘤,淀粉样变早期诊断,疗效评估血液肿瘤标志物是反映血液肿瘤存在或进展的生物分子,对血液系统恶性疾病的诊断、疗效监测和预后评估具有重要价值这些标志物可能来源于肿瘤细胞本身,或是机体对肿瘤的反应产物多发性骨髓瘤的重要标志物包括血清和尿中的单克隆免疫球蛋白M蛋白、尿本周蛋白、血清游离轻链和β2微球蛋白等淋巴瘤可检测LDH、β2微球蛋白、可溶性IL-2受体等白血病特异性标志物较少,但某些融合基因产物如BCR-ABL蛋白可作为慢性粒细胞白血病的标志物这些标志物不仅用于初诊,更重要的是监测疾病进展和治疗反应,部分还是预后分层的重要指标血液分子生物学检查PCR技术基因突变检测聚合酶链反应PCR技术是分子生物学基因突变检测对血液肿瘤的诊断、分类检查的基础,通过特异引物和DNA聚和治疗选择至关重要常用技术包括合酶扩增特定DNA片段常用PCR变PCR结合测序、等位基因特异性PCR、式包括反转录PCRRT-PCR用于熔解曲线分析和芯片技术等重要的血RNA模板;实时定量PCR用于基因表液肿瘤相关基因突变包括慢性粒细胞达水平和病毒载量测定;多重PCR用于白血病的BCR-ABL融合基因;急性髓同时检测多个目标;数字PCR提供更精系白血病的FLT
3、NPM
1、CEBPA突确的绝对定量变;骨髓增生性肿瘤的JAK
2、CALR、MPL突变;骨髓增生异常综合征的SF3B
1、TET2突变等二代测序技术二代测序技术NGS能同时对数百上千个基因进行平行测序,已成为血液肿瘤研究和临床诊断的强大工具NGS可用于全基因组测序、全外显子组测序或靶向基因panel测序,能发现新的致病变异,检测微小残留病灶,预测疾病进展和治疗反应NGS在精准医疗中的应用越来越广泛,为血液肿瘤个体化治疗提供分子依据血液病的细胞遗传学检查染色体核型分析荧光原位杂交FISH技术染色体核型分析是观察染色体数目和结构异常的经典方法样本采集后需体外培FISH技术结合分子生物学和细胞遗传学原理,使用特异荧光探针与目标DNA序养使细胞分裂,秋水仙素阻断有丝分裂中期,制备染色体标本并进行显带G带、列杂交,通过荧光显微镜观察FISH较传统核型分析敏感度高,无需分裂细胞Q带等通过显微镜观察,可发现染色体数目异常如+
8、-7和结构异常如易,可检测较小的染色体异常和核型分析难以识别的隐匿性异常位、缺失、倒位常用FISH探针包括针对特定易位断点、基因扩增或缺失区域的探针在白血病经典血液肿瘤相关染色体异常包括慢性粒细胞白血病的t9;22形成中,常用FISH检测BCR-ABL、PML-RARA融合基因;在骨髓增生性肿瘤中检Philadelphia染色体;急性早幼粒细胞白血病的t15;17;滤泡性淋巴瘤的测JAK
2、MPL基因异常;在淋巴瘤中检测IGH重排和MYC异常等FISH也是t14;18等这些异常对诊断分型和预后评估具有重要价值微小残留病监测的重要工具血液疾病的实验室诊断基础检查血液疾病诊断的第一步是血常规检查,包括血细胞计数、分类和形态学观察,初步筛查异常大多数血液病会导致一种或多种血细胞的数量或质量异常这一步骤通常在基层医院即可完成专科检查基于血常规结果,进一步进行骨髓形态学、组织病理学、细胞化学染色、免疫表型分析等专科检查,明确细胞起源和分化方向这些检查通常在二级以上医院或专科医院进行,需要专业技术人员操作和解读分子与遗传学检查对于某些血液病,特别是恶性肿瘤,需要分子生物学和细胞遗传学检查确定特异性标志物,如基因突变、染色体异常或融合基因,这些对精确诊断和分类至关重要,也是指导治疗和预后评估的基础铁缺乏性贫血的实验室诊断铁缺乏性贫血正常参考值铁缺乏性贫血IDA是全球最常见的贫血类型,其实验室诊断依赖于血液学检查和铁代谢指标测定血液学表现为小细胞低色素性贫血血红蛋白降低、MCV减小80fL、MCH降低27pg和MCHC降低320g/L血涂片可见小细胞、低色素红细胞,重度贫血时可出现靶形红细胞和异形红细胞铁代谢指标是IDA诊断的关键血清铁降低
10.7μmol/L、TIBC增高72μmol/L、转铁蛋白饱和度降低16%和血清铁蛋白显著降低12ng/mL,铁蛋白30ng/mL即可诊断铁缺乏骨髓铁染色显示可染铁减少或消失鉴别诊断需考虑慢性病贫血ACD,后者铁蛋白正常或升高,TIBC正常或降低某些情况下可测定血清转铁蛋白受体水平,在IDA中升高而ACD中正常巨幼细胞性贫血的实验室诊断巨幼细胞性贫血主要由维生素或叶酸缺乏引起,其特征性实验室表现反映了合成障碍导致的细胞分裂异常血常规显示大细胞性B12DNA贫血血红蛋白降低、显著增高、红细胞计数明显减少网织红细胞计数绝对值减低,提示造血功能低下MCV100fL血涂片特征性改变包括大卵圆形红细胞巨红细胞,细胞直径;中性粒细胞核过分叶叶;白细胞和血小板可减少全血细胞减10μm≥6少骨髓检查显示增生活跃,红系前体细胞呈巨幼细胞样改变细胞体积增大,核质发育不平衡,核染色质细致,呈棋盘状特异性诊断需测定血清维生素和叶酸水平,正常值,叶酸正常值补充诊断可检测血清甲基丙二酸和同型B12B12187-883pg/ml
3.1-
17.5ng/ml半胱氨酸,缺乏时两者均升高,叶酸缺乏仅同型半胱氨酸升高B12溶血性贫血的实验室诊断溶血实验室证据溶血机制分型检查溶血性贫血的诊断首先需确定存在确定溶血存在后,需明确溶血机制溶血证据血红蛋白降低、网织红免疫性溶血性贫血AIHA的特细胞计数增高4%;血清间接胆异检查是直接抗人球蛋白试验红素升高
17.1μmol/L;血清乳DAT,温暖型AIHA呈IgG型阳酸脱氢酶升高;血清结合珠性,冷凝集素病呈型阳性溶LDH C3d蛋白降低;尿含血红蛋白原升高血严重程度可通过游离血红蛋白和骨髓检查显示红系增生活跃,可见结合珠蛋白水平评估核胞质不平衡-红细胞本身缺陷检查红细胞膜缺陷性溶血需进行渗透脆性试验、红细胞自溶试验等;红细胞酶缺陷需测定相关酶活性,如、活性;血红蛋白病需进行血红蛋白电泳、高G6PD PK效液相色谱和分析遗传性红细胞病通常需要基因检测确诊,如HPLC DNA球形红细胞增多症的、基因检测,缺乏症的基因检SPTB SPTA1G6PD G6PD测等急性白血病的实验室诊断特殊检查骨髓形态学检查免疫表型分析(流式细胞术)对确定白血病细胞谱系血常规检查骨髓穿刺是急性白血病诊断的金标准典型表现为骨归属和分型至关重要AML常表达CD
13、CD
33、急性白血病的初筛通常始于血常规异常多数患者有髓增生活跃,原始细胞显著增多(20%),正常造CD
117、MPO等髓系标志;ALL表达CD
19、CD10不同程度的贫血、血小板减少和白细胞异常(可增高血受抑制根据WHO标准,急性髓系白血病AML、CD20B-ALL或CD
2、CD
3、CD7T-ALL等或降低)血涂片检查可见原始细胞或幼稚细胞,但和急性淋巴细胞白血病ALL的骨髓原始细胞比例均细胞化学染色如POX、SBB、NSE和PAS有助于不能仅凭外周血确诊,必须进行骨髓检查应≥20%形态学评估包括细胞大小、核质比、核形AML与ALL鉴别细胞遗传学和分子生物学检查对、染色质、核仁、胞质量和颗粒等特征白血病分型、危险度分层和治疗方案选择有指导价值,如t15;17/PML-RARAAPL、t8;21/RUNX1-RUNX1T
1、FLT3-ITD、NPM1等慢性白血病的实验室诊断慢性粒细胞白血病CML慢性淋巴细胞白血病CLL的特征性实验室改变包括外周血白细胞显著增高,常典型的实验室表现包括外周血淋巴细胞绝对数持续增高,CML CLL,可达数百;各阶段粒细胞均增多,呈左移现,维持至少个月;淋巴细胞形态特征为成熟小淋巴50×10^9/L≥5×10^9/L3象,但原始细胞少于;碱性磷酸酶积分降低或阴性;细胞,有少量前淋巴细胞;血涂片可见破碎细胞(5%NAP血小板多正常或增高;贫血常不明显Gumprecht小体);骨髓淋巴细胞浸润≥30%诊断的关键是检测染色体或融合的免疫表型特征性表现为细胞克隆性增殖表达CML Ph[t9;22]BCR-ABL CLLCD5+B基因染色体检出率以上,可通过常规细胞遗传学或、、,表达弱的、和,通常Ph95%CD19CD5CD23sIg CD20CD79b检测融合基因可通过检测,敏感度、的预后与多种遗传学改变相关缺FISH BCR-ABL RT-PCR CD10-FMC7-CLL17p更高,阳性率接近定量也是治疗反应监失突变预后最差;缺失和复杂核型预后差;单独100%BCR-ABL PCR/TP5311q13q测的重要手段,用于评估分子学缓解状态缺失预后好此外,IGHV基因突变状态、ZAP70和CD38表达也是重要预后指标血小板减少症的实验室诊断基础检查骨髓检查特殊检查血小板减少症骨髓检查是鉴别血小板减ITP诊断通常为排除性诊PLT100×10^9/L的少原因的关键重点观察断,但可检测抗血小板自实验室诊断首先确认血小骨髓增生程度、巨核细胞身抗体(阳性率仅60%板计数真实降低,排除假数量和形态免疫性血小左右)血小板相关抗体性血小板减少外周血涂板减少症ITP骨髓表现PAIgG、血小板膜糖片镜检可发现EDTA依赖为巨核细胞数量正常或增蛋白特异性抗体对ITP诊性血小板聚集此外,评多,但产板功能障碍;再断有辅助价值疑诊TTP估其他血细胞是否异常,生障碍性贫血和白血病浸时,应检测ADAMTS13有无形态学异常,以及血润则表现为巨核细胞明显活性和抑制物药物相关小板形态和大小是否正常减少;MDS可见巨核细性血小板减少应进行药物胞形态异常依赖性抗体检测HIV、和感染也HCV H.pylori应常规筛查弥散性血管内凝血()的实验室诊断DIC时间小时血小板×10^9/L纤维蛋白原g/L D-二聚体mg/L弥散性血管内凝血DIC是一种获得性凝血障碍综合征,特征为全身性凝血激活,导致微血栓形成和继发性纤溶亢进,最终引起多器官功能衰竭和严重出血DIC的实验室诊断依赖于凝血和纤溶系统的一系列标志物变化DIC的实验室表现包括
①血小板计数进行性减少,通常100×10^9/L;
②凝血时间延长,PT和APTT均可延长;
③纤维蛋白原水平降低,通常
1.5g/L;
④FDP和D-二聚体水平显著升高,D-二聚体5mg/L提示DIC可能;
⑤抗凝蛋白如AT-III水平降低血涂片可见破碎红细胞国际血栓与止血学会ISTH制定的DIC诊断积分系统综合考虑上述指标≥5分诊断为明确DIC动态监测这些指标对评估病情进展和治疗效果至关重要,如上图所示DIC典型指标变化趋势血液检查的质量控制外部质评内部质控2与其他实验室比对水平1实验室每日操作的质量监控方法学评估精密度、准确度检验35人员培训仪器维护技能考核和继续教育4日常和定期维护保养血液检查质量控制是确保检验结果准确可靠的关键环节内部质量控制是实验室日常工作的基础,包括使用已知浓度的质控品监测检测系统性能,IQC绘制质控图并根据规则判断检测系统是否处于受控状态质控品应覆盖临床相关的浓度水平,至少包括正常和异常两个水平Westgard外部质量评价通过实验室间比对,评估检测方法的准确性和可比性参加国家、省级或国际是实验室认可的必要条件方法学验证包括精密EQA EQA度、准确度、线性范围、参考区间验证等仪器维护与校准按照规定计划执行,确保设备处于最佳工作状态人员培训和能力评估也是质量保证体系的重要组成部分,包括新进人员培训、定期能力评估和继续教育血液检查结果的解释临床应用原则临床相关性评估实验室检查结果应与临床资料紧密结合,遵循结果分析结果异常需评估其临床意义,考虑以下因素以下原则不应单纯依赖实验室检查确诊(部血液检查结果解释应遵循科学方法,综合分析变化幅度(轻微异常可能无临床意义);变化分疾病除外);不应仅靠单项检查结果下结论各项指标首先判断结果是否超出参考区间,趋势(动态观察比单次结果更有价值);相关;重视检查的时间序列变化;对关键异常结果参考区间通常覆盖95%健康人群,超出不一定指标变化(组合解读如红细胞三项);与临床应考虑复查确认;认识检查方法局限性;重视代表疾病需考虑生理变异年龄、性别、种族表现一致性(结合症状和体征);疾病特异性实验室与临床的沟通,特别是重要或危急值的、月经周期、妊娠和非疾病因素药物、饮食(某些指标对特定疾病高度特异)及时通报、运动、高原的影响总结与展望课程回顾血液检查的未来发展本课程系统介绍了血液实验室检查的基本理论和实践技能,涵盖了血液组成、样血液检验技术正向自动化、微型化、快速化和个体化方向发展人工智能辅助血本采集与处理、常规检查(血细胞计数、形态学)、特殊检查(骨髓检查、分子细胞形态学识别将大大提高工作效率和准确性;液体活检技术可通过检测循环肿生物学、细胞遗传学)以及质量控制等内容这些知识构成了血液检验的完整体瘤DNA/RNA早期发现肿瘤;单细胞测序技术将揭示血液细胞异质性;微流控技系,是临床诊断和治疗决策的重要依据术将实现床旁即时检测未来血液检验将与基因组学、蛋白组学等多组学技术融合,为精准医疗提供更全面的分子诊断信息,实现疾病的早期预测、个体化治疗和预后评估。
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