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兽医临床病理学欢迎学习兽医临床病理学课程本课程将系统介绍兽医临床病理学的基本理论、检查技术和诊断方法,帮助您掌握动物疾病的实验室诊断能力通过学习各种体液和组织的采集、处理和分析方法,您将能够运用科学的检测手段为动物疾病提供准确的诊断依据兽医临床病理学是连接基础医学与临床医学的桥梁,对于提高兽医诊断水平、指导临床治疗具有不可替代的作用希望通过本课程的学习,能够提升您的专业技能,为动物健康保驾护航课程目标和学习成果知识目标掌握各类临床病理学检查的基本原理和方法,理解检查结果与疾病之间的关系,熟悉常见动物疾病的实验室诊断特征技能目标能够正确采集、处理和保存各类临床样本,熟练操作常用病理检查设备,准确解读检查结果并进行临床分析能力目标培养临床思维和问题解决能力,提高综合分析和诊断能力,具备独立开展兽医临床病理诊断的专业素养职业目标为从事动物医疗、疾病预防、科学研究等工作打下坚实的专业基础,提升职业竞争力和发展潜力兽医临床病理学的定义和范围基本定义学科范围兽医临床病理学是研究动物体液包括血液学、尿液学、粪便学、和组织样本的形态学、理化特性体腔积液学、细胞学、组织病理及其变化规律,以辅助疾病诊断学、生化学、免疫学、微生物学的兽医学分支学科它通过实验等多个方面,涵盖从样本采集到室检查手段,为临床诊断提供客结果解释的全过程观依据应用领域广泛应用于动物疾病的诊断、预后评估、治疗监测、健康筛查、科学研究等领域,是现代兽医实践的重要组成部分兽医临床病理学在兽医实践中的重要性提高诊断准确性提供客观数据支持临床判断指导治疗方案帮助选择最佳治疗方法评估治疗效果监测疾病进展和治疗反应疾病预防与控制早期发现潜在健康问题兽医临床病理学检查已成为现代兽医诊疗不可或缺的一部分它不仅能够帮助兽医师确认临床诊断,还能发现亚临床状态下的异常,实现早期干预通过客观的实验室数据,兽医师能够更全面地评估动物的健康状况,提高诊疗的科学性和有效性临床病理学检查的基本步骤制定检查计划根据临床症状和初步诊断,确定需要进行的检查项目,合理安排检查顺序和优先级样本采集遵循正确的采样方法和技术,确保样本的代表性和质量,避免污染和变质样本处理按照标准程序进行样本的保存、运输和前处理,保证检查结果的准确性实验室检测使用适当的仪器设备和方法进行检测,严格控制检测过程中的质量结果分析与解释结合临床情况对检查结果进行分析和解释,为疾病诊断提供依据样本采集和处理技术血液样本尿液样本其他样本采集部位犬猫常用颈静脉、前臂静脉;采集方法自然排尿、导尿、膀胱穿刺粪便采集新鲜样本,避免环境污染大动物可用颈静脉、尾静脉;禽类可用翅体腔积液严格无菌操作,分装于不同试膀静脉处理方法尽快检查或4°C保存,避免细管用于不同检查抗凝剂选择EDTA用于血常规,肝素用菌繁殖导致样本变质细胞学样本制作涂片需迅速干燥,避免于生化检查,枸橼酸钠用于凝血检查注意事项记录采集方法,避免粪便和生细胞形态改变注意事项避免溶血,采血量和抗凝剂比殖道分泌物污染例适当,及时混匀但不可剧烈震荡血液学检查概述血常规检查血涂片检查包括红细胞计数、白细胞计数、血小板计数、观察血细胞形态,进行白细胞分类计数,检查血红蛋白、红细胞压积等基本指标血细胞异常和血液寄生虫临床应用特殊血液检查用于贫血诊断、感染性疾病评估、血液系统疾网织红细胞计数、骨髓细胞学检查、特殊染色病诊断、全身性疾病监测等技术等血液学检查是兽医临床病理学中最基础也是最常用的检查方法之一通过对血液细胞数量和形态的分析,可以获取大量有关动物健康状况的信息,为疾病诊断和治疗提供重要依据红细胞检查方法红细胞计数RBC测定单位体积血液中红细胞的数量,反映骨髓造血功能和红细胞的生存状况不同动物种类有不同的参考值范围血红蛋白测定Hb测量血液中血红蛋白的含量,反映血液携氧能力常用氰化高铁血红蛋白法测定红细胞压积HCT/PCV红细胞在全血中所占的体积百分比,通过微量离心法或自动血液分析仪测定红细胞指数包括平均红细胞体积MCV、平均红细胞血红蛋白量MCH和平均红细胞血红蛋白浓度MCHC,用于贫血分类形态学检查通过血涂片观察红细胞大小、形状、染色特性和包涵体的异常变化,为疾病诊断提供依据常见红细胞异常及其临床意义异常类型形态特征临床意义大红细胞红细胞体积增大再生性贫血、维生素B12或叶酸缺乏小红细胞红细胞体积减小缺铁性贫血、慢性疾病贫血多染性红细胞呈蓝灰色,含残余RNA红细胞再生增加,表明骨髓反应良好网织红细胞含网状结构评估骨髓造血功能,再生性贫血指标红细胞碎片不规则碎片微血管病性溶血性贫血核红细胞红细胞内含核严重贫血、骨髓受损、重度应激球形红细胞呈球形,无中央淡区免疫介导性溶血性贫血白细胞检查方法总白细胞计数WBC测定单位体积血液中白细胞的总数量,反映机体的防御和免疫状态可通过手工计数法或自动血液分析仪测定白细胞分类计数2在瑞氏或姬姆萨染色的血涂片上鉴别并计数各类白细胞的相对百分比,包括中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞绝对数值计算3将白细胞分类百分比与总白细胞计数相乘,得到各类白细胞的绝对数量,更准确地反映各类白细胞的实际变化形态学检查观察白细胞的大小、核形态、胞质特征、颗粒多少和染色性等,检查是否存在异常形态、有毒变化或包涵体等白细胞分类计数及其临床意义中性粒细胞淋巴细胞嗜酸性粒细胞正常范围犬60-70%,猫50-70%增正常范围犬12-30%,猫30-45%增高正常范围犬2-10%,猫2-12%增高常高见于细菌感染、组织坏死、急性炎症、代见于慢性感染、病毒感染、淋巴细胞增生性与寄生虫感染、过敏反应、某些皮肤病及嗜谢性疾病及某些肿瘤;减少见于病毒感染、疾病;减少见于应激反应、免疫抑制状态及酸性粒细胞增多综合征相关;减少见于应激严重感染及骨髓抑制核左移表示未成熟细某些病毒感染反应性淋巴细胞提示持续的反应和糖皮质激素治疗效应胞增多,提示急性炎症反应抗原刺激血小板检查及其临床意义检查方法临床意义血小板减少血小板计数通常使用自动血液分析仪进行,但结果应通过血涂片估计来核实,特别是猫的血小板易聚集导致计数偏低•免疫介导性血小板减少症形态学检查包括观察大小、数量、聚集状态和异常形态,如巨大•骨髓抑制或浸润血小板等•消耗增加(DIC、血管炎)血小板功能检查包括出血时间、凝血块回缩和血小板聚集试验等,•脾脏滞留评估止血功能•药物反应•某些传染病(犬细小病毒、犬埃立克体病)血小板增多•继发性(炎症、创伤、恶性肿瘤)•原发性血小板增多症(罕见)贫血的分类和诊断确认贫血分类红细胞计数、血红蛋白和红细胞压积低于根据红细胞大小MCV和血红蛋白浓度参考值范围MCHC分类确定病因评估再生反应4结合临床症状、实验室检查找出原发疾病网织红细胞计数、多染性红细胞观察贫血是兽医临床中常见的血液学异常根据病因可分为失血性、溶血性和造血障碍性贫血;根据再生反应可分为再生性和非再生性贫血;根据红细胞大小可分为小细胞性、正细胞性和大细胞性贫血诊断贫血需要全面评估,包括血液学检查、骨髓检查和其他辅助检查血液疾病案例分析
(一)病例信息5岁柯基犬,雌性,出现精神沉郁、食欲不振、尿色加深、黄疸、贫血等症状血液检查结果2RBC↓,Hb↓,HCT↓,网织红细胞↑↑,血涂片可见球形红细胞和红细胞凝集试验Coombs直接Coombs试验强阳性诊断免疫介导性溶血性贫血IMHA免疫介导性溶血性贫血是犬常见的自身免疫性疾病,特征是机体产生针对自身红细胞的抗体,导致红细胞破坏典型的实验室表现包括再生性贫血、高胆红素血症、球形红细胞和红细胞凝集治疗主要是免疫抑制治疗,预后取决于疾病严重程度和并发症状况血液疾病案例分析
(二)病例信息检验结果特殊检查3岁家猫,雄性,近期出现全血细胞计数显示全血细胞猫白血病病毒FeLV抗原检进行性消瘦、食欲减退、精减少症贫血HCT15%、测呈阳性;骨髓检查显示骨神沉郁,体检发现苍白粘膜白细胞减少
2.3×10^9/L和髓细胞增生异常和淋巴结肿大血小板减少80×10^9/L血涂片发现非典型淋巴细胞诊断猫白血病病毒相关的骨髓抑制,疑似向淋巴瘤转变预后不良,建议支持治疗和密切监测尿液检查概述检查意义尿液检查是评估泌尿系统健康状况的重要手段,也可反映全身性疾病尿液异常可提示肾脏、膀胱、尿道等部位的疾病,以及某些代谢性和内分泌疾病样本采集常用方法包括自然排尿法(中段尿)、导尿法和膀胱穿刺法膀胱穿刺获得的样本最为无菌和纯净,适合微生物学检查;自然排尿最为方便但易受污染检查内容完整的尿液检查包括三部分物理性状检查(颜色、透明度、比重等)、化学检查(尿试纸测定pH值、蛋白质、葡萄糖等)和显微镜检查(尿沉渣中的细胞和结晶等)注意事项尿液样本应尽快检查,若需延迟,应在4°C保存不超过12小时检查前应让样本回温至室温并充分混匀尿沉渣检查需在10分钟内完成以避免细胞破坏和结晶形成的改变尿液理化检查方法物理性状检查颜色正常呈黄色至琥珀色,异常颜色如红色(血尿)、深棕色(胆红素)透明度正常为清亮透明,混浊提示存在细胞、细菌、结晶等比重反映肾脏浓缩稀释功能,使用尿比重计或折射仪测定化学检查pH值反映酸碱度,肉食动物通常偏酸性蛋白质正常尿液含微量或不含,增高提示肾脏或尿路疾病葡萄糖正常不含,出现提示糖尿病或肾小管功能异常酮体脂肪代谢异常如糖尿病酮症时增高胆红素肝胆疾病时可出现潜血红细胞或血红蛋白存在时阳性蛋白质/肌酐比值更准确评估蛋白尿的量化指标排除浓缩尿液的影响临床上用于监测肾病蛋白尿的严重程度和治疗效果尿沉渣显微镜检查红细胞白细胞上皮细胞正常尿液中极少见数量增多提示尿路出血,正常尿液中偶见数量增多(5个/HPF)分为鳞状上皮细胞(来自远端尿道和生殖可见于泌尿系统感染、结石、肿瘤、创伤等提示尿路炎症,特别是中性粒细胞增多常见道)、过渡上皮细胞(来自膀胱和近端尿道)需鉴别是否为采样过程中造成的污染形态于细菌性尿路感染白细胞与细菌同时增多和肾小管上皮细胞(来自肾小管)过渡上学特征可帮助确定出血部位,如变形的红细强烈提示感染性疾病,应结合尿培养确诊皮细胞增多提示膀胱炎;肾小管上皮细胞增胞多来自肾脏多提示肾小管损伤尿液检查结果的临床解释检查参数异常结果可能原因尿比重低(稀释尿)多饮多尿、肾功能不全、尿崩症尿比重高(浓缩尿)脱水、发热、腹泻尿蛋白阳性肾小球疾病、尿路炎症、发热尿葡萄糖阳性糖尿病、肾小管重吸收障碍、应激尿潜血阳性尿路出血、溶血尿胆红素阳性肝胆疾病、溶血性贫血尿酮体阳性糖尿病酮症、饥饿、碳水化合物摄入不足尿结晶存在尿路结石、代谢异常常见泌尿系统疾病的尿液特征肾小球肾病•持续性蛋白尿(UPC
2.0)•尿比重正常或低下•可见脂肪管型•一般无明显的尿沉渣异常肾小管疾病•轻度蛋白尿(UPC
2.0)•尿比重低下(等渗尿)•可见肾小管上皮细胞和管型•葡萄糖尿(肾性糖尿)急性肾损伤•尿量减少或无尿•蛋白尿、血尿•多种管型(颗粒管型、细胞管型)•肾小管上皮细胞脱落尿路感染•大量白细胞(脓尿)•细菌数量增多•常伴有血尿和蛋白尿•尿pH常升高(细菌分解尿素)粪便检查概述临床意义评估消化吸收功能和消化道健康状况检查内容2物理性状、显微镜检查、微生物学检查主要应用寄生虫检查、消化功能评估、出血鉴别采样要求4新鲜样本、避免环境污染、足够量粪便检查是评估动物消化系统健康状况的简便有效方法通过宏观观察和显微镜检查,可以获取有关消化吸收功能、肠道菌群平衡和寄生虫感染等信息对于消化道症状如腹泻、便秘、消化不良和消化道出血的动物,粪便检查是必不可少的诊断手段粪便宏观检查和显微镜检查宏观检查显微镜检查颜色正常为棕色,异常如黑色(上消化道出血)、灰白色(胆直接涂片快速评估粪便中的微生物、寄生虫和细胞成分汁分泌障碍)、鲜红色(下消化道出血)脂肪染色使用苏丹III或苏丹黑染色检测脂肪消化吸收功能性状正常为成形软便,异常如稀水样(小肠疾病)、糊状(大Wright染色观察白细胞和上皮细胞,评估炎症程度肠疾病)、干硬(便秘)革兰染色观察肠道菌群平衡状况气味异常发酵或腐败气味可提示消化不良特殊染色如抗酸染色检测隐孢子虫等异物如寄生虫成体、异物、未消化食物等漂浮法浓集和检测寄生虫卵、包囊和孢子黏液增多提示肠道炎症,尤其是大肠炎沉淀法适用于检测较重的寄生虫卵如吸虫卵粪便寄生虫检查方法直接涂片法取少量新鲜粪便与生理盐水混合,制作薄涂片,直接在显微镜下观察简便快速,适合检查原虫滋养体、活动性幼虫等,但敏感性低漂浮浓缩法利用高比重漂浮液(如硫酸锌、硫酸镁或蔗糖溶液)使寄生虫卵和囊肿浮于液面,适合检测线虫卵、球虫卵囊等是最常用的粪便寄生虫检查方法沉淀浓缩法通过离心或重力沉淀使寄生虫卵集中于沉淀物中,适合检测较重的寄生虫卵如吸虫卵、绦虫卵等福尔马林-乙醚沉淀法是常用方法之一法Baermann利用线虫幼虫趋水性和热性,使其从粪便中游出并沉降到水底,适合检测肺线虫等寄生虫的幼虫需要新鲜粪便样本和特殊装置培养法将粪便在适宜条件下培养,使虫卵发育为易于识别的幼虫或成虫适用于某些难以通过卵鉴别的线虫,如钩虫和粪类圆线虫的鉴别粪便检查结果的临床意义1消化功能评估未消化食物增多提示消化不良,可能由胰腺外分泌功能不全、小肠吸收不良或肠蠕动加快引起脂肪球增多提示脂肪消化吸收障碍,常见于胰腺疾病淀粉颗粒增多提示碳水化合物消化不良2炎症指标粪便中白细胞增多提示炎症性肠病,特别是中性粒细胞增多提示细菌性肠炎红细胞增多提示肠道出血或溃疡黏液增多提示大肠炎症上皮细胞增多提示肠黏膜损伤和脱落3寄生虫感染检出寄生虫卵、囊肿、幼虫或成虫提示相应的寄生虫感染但需注意,阴性结果不能完全排除寄生虫感染,因为某些寄生虫排卵间歇性,或感染轻微时卵量很少,需多次检查确认4菌群失调正常肠道菌群以革兰阴性和革兰阳性菌平衡存在菌群失调如革兰阴性菌过度生长,或出现大量酵母菌,提示肠道微生态失衡,可能与抗生素使用、饮食改变或应激有关体腔积液检查概述体腔积液类型采样方法检查内容主要包括胸腔积液、腹腔积液通过胸腔穿刺、腹腔穿刺或心包括物理性状检查(颜色、透和心包积液正常情况下,体包穿刺获取样本采样应遵循明度、气味)、生化检查(蛋腔内只有极少量液体用于润滑无菌操作原则,避免污染样白含量、比重、乳酸脱氢酶当产生过多或性质异常的液体本应分装于EDTA管(用于细胞等)、细胞学检查(细胞计数、时,称为体腔积液学检查)、普通试管(用于理分类和形态学)以及微生物学化检查)和无菌培养管(用于检查(培养、药敏等)微生物学检查)临床意义体腔积液检查有助于确定积液性质(渗出液或漏出液),找出积液形成的潜在原因,如心力衰竭、肝硬化、肾病、肿瘤、炎症或感染等,指导临床治疗体腔积液的分类和特征积液类型物理特征细胞学特征生化特征常见病因纯漏出液清亮、淡黄色、透明细胞数1000/μL,主要为单核细胞蛋白
2.5g/dL,比重
1.017低蛋白血症,心力衰竭,肝硬化纯渗出液浑浊、黄色至琥珀色细胞数3000/μL,主要为中性粒蛋白3g/dL,比重
1.025炎症,感染,肿瘤细胞混合型轻度浑浊,淡黄色细胞数1000-3000/μL,混合细胞蛋白
2.5-3g/dL,比重
1.017-
1.025慢性炎症,肿瘤早期类型脓性液浑浊,乳白色或黄绿色,有臭味细胞数极高,主要为变性中性粒细蛋白高,溶菌酶增高细菌感染,脓胸胞血性液红色至暗红色含大量红细胞,可见其他细胞类型蛋白高,与血清接近创伤,出血性疾病,肿瘤乳糜液乳白色,离心后上清仍浑浊细胞数变化大,以淋巴细胞为主甘油三酯增高,乙醚试验阳性淋巴管阻塞,胸导管破裂体腔积液细胞学检查炎症性细胞间皮细胞肿瘤细胞中性粒细胞急性炎症的主要标志,大量存正常积液中可见少量剥脱的间皮细胞炎症恶性积液中可见肿瘤细胞特征包括细胞异在于感染性渗出液中变性的中性粒细胞刺激下,间皮细胞可出现反应性增生,表现形性明显、核染色质粗糙、核仁肥大、核质(核碎裂、胞质肿胀)提示细菌感染嗜酸为细胞增大、核仁明显、胞质丰富间皮细比例失调、细胞团块形成等常见的恶性积性粒细胞增多可见于过敏反应或寄生虫感染胞增生和恶性间皮瘤有时难以区分,需结合液包括转移性腺癌、淋巴瘤、间皮瘤等某淋巴细胞增多见于慢性炎症和某些肿瘤临床和其他检查综合判断些肿瘤细胞需通过免疫组化等特殊染色进一步确认体腔积液检查在疾病诊断中的应用肿瘤诊断感染性疾病诊断其他疾病应用体腔积液细胞学检查是诊断恶性肿瘤的重体腔积液中大量变性中性粒细胞提示感染心源性积液通常为漏出液,蛋白含量低,要手段,特别是对于转移性肿瘤和原发性性疾病,特别是细菌感染通过直接涂片细胞稀少肝硬化导致的腹水也表现为漏体腔肿瘤如间皮瘤通过寻找典型的肿瘤革兰染色可迅速发现细菌,指导初步抗生出液特征,但可能伴有肝细胞胰腺炎导细胞特征,如细胞和核的异形性、多核细素选择,但最终应以培养和药敏结果为准致的腹水中可检测到胰淀粉酶和脂肪酶活胞、核分裂像增多等,可提供肿瘤诊断的性增高直接证据某些特殊感染如结核病、真菌感染和猫传乳糜胸是淋巴管破裂或阻塞导致的特殊体对于某些难以区分的肿瘤细胞,可结合特染性腹膜炎FIP也有特征性表现FIP患腔积液,呈乳白色,甘油三酯含量高于血殊染色和免疫细胞化学检查提高诊断准确猫的腹水呈高蛋白含量、黏稠性增加,细清,与心脏病或肿瘤导致的积液鉴别诊断性例如,使用PAS染色区分腺癌和间皮胞学上可见以巨噬细胞和中性粒细胞为主具有重要意义瘤,使用CD3和CD21标记鉴别淋巴瘤类的混合炎症反应型骨髓检查技术适应症持续性血细胞减少或增多、不明原因贫血、疑似血液系统肿瘤、发热原因不明、疑似骨髓侵犯性疾病、治疗效果评估等情况需要进行骨髓检查穿刺部位选择犬常用髂骨嵴、肱骨大结节、股骨大转子;猫常用髂骨嵴、股骨大转子;大动物可选用胸骨穿刺部位应根据动物种类、体型和临床状况选择,避开重要血管神经穿刺技术严格无菌操作,局部麻醉后使用专用骨髓穿刺针垂直进入骨皮质穿透骨皮质后取下针芯,连接装有抗凝剂的注射器,快速抽吸获取骨髓样本抽吸压力不宜过大,以避免样本稀释或污染样本处理立即制作骨髓涂片,使用瑞氏或姬姆萨染色如需特殊检查,可分装部分样本用于流式细胞术、细胞遗传学或分子生物学检查骨髓活检可同时进行,获取组织学样本评估骨髓整体结构骨髓细胞学分析骨髓增生度评估1低倍镜下观察骨髓细胞密度,评估骨髓增生是正常、增生还是低增生骨髓增生度反映造血功能状态,与外周血细胞计数结合分析可判断是中心性还是外周性血粒红比例计算细胞异常计算粒系细胞与红系细胞的比例M:E比,正常为2-4:1比例升高提示粒系增生或红系抑制;比例降低提示红系增生或粒系抑制不同动物种类有不同的参考范各系细胞分析围观察红系、粒系、巨核系各阶段细胞的比例和形态评估细胞成熟过程是否正常,有无发育异常注意是否有异常细胞如原始细胞增多、异型细胞或非造血细胞浸铁储备评估润使用普鲁士蓝染色评估骨髓内铁储备,有助于贫血分类诊断铁储备减少见于缺铁性贫血;铁储备增加但红系细胞内铁减少见于慢性疾病贫血骨髓病理性改变及其临床意义骨髓增生异常•低增生造血干细胞损伤、药物毒性、放射损伤、纤维化•高增生感染、慢性失血、溶血、慢性炎症•增生异常综合征细胞形态异常、无效造血、多系列发育异常红系异常•红系增生溶血、失血、红细胞生成素增加•红系减少原发性骨髓疾病、慢性肾病、内分泌疾病•异常形态核分裂异常、多核、细胞质异常、巨幼红细胞改变粒系异常•粒系增生感染、炎症、白血病反应•粒系减少药物毒性、病毒感染、自身免疫性疾病•发育异常核形态异常、胞质颗粒减少、有毒颗粒恶性病变•急性白血病原始细胞≥20%,分化受阻•慢性白血病成熟细胞异常增殖•转移性肿瘤实体瘤细胞浸润骨髓•骨髓瘤异常浆细胞增殖淋巴结穿刺细胞学检查1适应症和操作技术淋巴结肿大是淋巴结穿刺细胞学检查的主要适应症操作采用细针穿刺抽吸FNA技术,通常使用22-25G针头连接5-10ml注射器固定淋巴结后,针头快速进入组织,抽吸创建负压,然后在组织内来回移动针头收集细胞松开负压,撤出针头,将获取的细胞材料推出制作涂片2正常淋巴结细胞学特征正常淋巴结涂片主要包含小淋巴细胞约85%,呈均一的圆形核和稀少胞质;少量中等大小淋巴细胞和大淋巴细胞约10-15%;散在的浆细胞和巨噬细胞不同发育阶段的淋巴细胞混合存在,细胞形态均一,无明显异形性3反应性增生反应性淋巴结增生表现为各种发育阶段淋巴细胞比例改变,免疫母细胞和大淋巴细胞数量增多,可见浆细胞增多细胞多样性是反应性增生的特征,虽然细胞数量增加但形态保持正常常见于局部或全身性感染、免疫介导性疾病和某些炎症反应4淋巴瘤诊断淋巴瘤的细胞学特征包括淋巴细胞单一群体增殖,细胞形态异常,高度一致性常见大量中等至大型淋巴母细胞,核染色质粗糙,核仁明显,核分裂像增多细胞单一性和异形性是区别于反应性增生的关键淋巴瘤类型确定通常需要组织学检查或流式细胞术辅助诊断皮肤刮片和印迹细胞学检查皮肤刮片技术印迹细胞学技术临床应用皮肤刮片是兽医皮肤病学中最基础的检查方印迹细胞学是将组织表面直接压印在载玻片寄生虫性皮肤病蠕形螨病、疥螨病、毛囊法之一,主要用于检测外寄生虫和皮肤真菌上的简便技术,特别适用于渗出性或溃疡性螨病等通过刮片检出相应寄生虫感染皮肤病变真菌性感染皮肤刮片可检出皮肤癣菌的菌浅层刮片使用刀片涂抹少量矿物油,以45°干印迹直接将干燥的病变表面按压在载玻丝和孢子,马拉色菌感染显示特征性足球队角轻刮皮肤表面至角质层,适用于疥螨、蠕片上,适合检查细菌和马拉色菌排列形螨等表浅寄生虫检查挤压印迹轻轻挤压病变部位,使组织液渗细菌性感染印迹检查可见中性粒细胞和细深层刮片在挤压皮肤使之充血后,用刀片出后印迹,适合收集深部细胞菌,细菌位于细胞内提示深部感染深刮至出血,适用于毛囊螨等深层寄生虫检擦拭印迹用棉签轻擦病变表面后涂抹在载肿瘤诊断皮肤肿块的印迹可提示肥大细胞查玻片上,适合大面积或难以直接接触的部位瘤、组织细胞瘤等肿瘤的初步诊断刮取的材料置于载玻片上,加盖玻片后在显免疫介导性疾病天疱疮等自身免疫性皮肤微镜下检查寄生虫、虫卵或孢子印迹后进行瑞氏染色或革兰染色,观察炎症病可见棘细胞松解(棘层松解细胞)细胞、微生物和肿瘤细胞等细针穿刺活检()技术FNA结果判读涂片制作样本满意度评估检查细胞数量是否操作步骤分离针头和注射器,吸入空气后重新足够,是否有代表性细胞,是否过度设备准备固定目标组织,进行局部消毒将针连接,将材料喷射到载玻片上可采血液稀释观察细胞形态特征,确定FNA所需设备包括22-25G针头、头连接注射器,快速刺入病变部位用挤压法(两片载玻片轻压后水平分细胞类型(上皮细胞、间叶细胞、圆5-10ml注射器(或专用穿刺枪)、抽动注射器活塞创建负压,同时在组开)或拖拉法(使用另一载玻片以细胞等),评估是否存在异常特征如干净载玻片(至少4-6片)、染色试织内多方向移动针头收集细胞放松45°角拖拉样本)制作薄涂片迅速异型性、异常核分裂等,初步判断良剂(瑞氏或迪夫-快染)对于深部活塞,解除负压后撤出针头,避免穿风干或者热固定,然后进行染色恶性病变可能需要超声或X光引导所有过正常组织污染样本器材应确保清洁干燥,避免污染在肿瘤诊断中的应用FNA圆细胞肿瘤上皮性肿瘤间叶性肿瘤圆细胞肿瘤在FNA中易于获取丰富的细胞量,上皮性肿瘤在FNA中常呈现细胞团块排列良间叶性肿瘤细胞采集较困难,常获取细胞较少诊断准确率高肥大细胞瘤显示特征性的胞质性肿瘤如腺瘤表现为均一整齐的上皮细胞团块,典型表现为梭形细胞,轮廓不清,常有细胞外内紫色颗粒;组织细胞瘤表现为大型单核细胞,胞质丰富,核圆整一致;恶性肿瘤如腺癌则表基质成分良性病变如纤维瘤细胞形态一致,胞质丰富泡沫状;淋巴瘤可见均一的大型淋巴现为细胞异型性明显,核大小不一,核染色质核均匀;恶性病变如纤维肉瘤则有明显的核多母细胞群体;透明细胞肉瘤可见含透明胞质的粗糙,核仁突出,核质比例增高乳腺肿瘤、形性和异型性骨肉瘤可能出现骨样基质;血细胞群圆细胞肿瘤通常可通过FNA直接确诊肛门囊腺瘤/癌和甲状腺肿瘤是常见的上皮性肿管肉瘤可见血管腔形成间叶性肿瘤通常需要瘤组织病理进一步确认血液生化检查概述肝功能检查肾功能检查ALT、AST、ALP、GGT、总胆红素、白蛋尿素氮、肌酐、磷、钙等,反映肾小球滤过白、胆汁酸等,评估肝细胞损伤和胆汁淤积功能和电解质平衡状况程度电解质平衡心肌和肌肉检查钠、钾、氯、钙、磷、镁等,维持神经CK、LDH、肌钙蛋白等,评估心肌和骨肌肉功能和细胞内外平衡骼肌损伤程度蛋白质代谢胰腺检查总蛋白、白蛋白、球蛋白、A/G比值等,反淀粉酶、脂肪酶、TLI等,用于胰腺炎和胰外映营养状况和炎症反应分泌功能不全的诊断肝功能检查指标及其临床意义检查指标参考值范围犬特异性升高原因临床意义ALT谷丙转氨酶10-100U/L肝细胞特异性高肝细胞损伤、坏死活跃性肝损伤的敏感指标AST谷草转氨酶0-50U/L中等,存在于多种肝细胞、肌肉、心非特异性肝损伤标组织肌损伤志物ALP碱性磷酸酶20-150U/L低,存在于多种组胆汁淤积、骨骼生胆汁淤积性肝病的织长、皮质醇增多症敏感指标GGTγ-谷氨酰转0-6U/L较高,主要在肝胆胆汁淤积、药物诱胆道疾病的特异性肽酶系统导指标总胆红素0-
0.4mg/dL高,胆红素代谢异肝细胞功能障碍、黄疸的生化基础常胆道阻塞、溶血白蛋白
2.5-
4.0g/dL中等,反映肝合成不升高,而是降低慢性肝病的晚期指功能标胆汁酸空腹5μmol/L高,肝功能的敏感肝功能障碍、门体肝功能评估的金标指标分流准肾功能检查指标及其临床意义肌酐Cr肌肉代谢产物,几乎完全通过肾小球滤过排出当肾功能下降至正常的25-30%以下时才开始升高,是比较稳定但不够敏感的肾功能指标不受饮食影响,但与肌肉量相关参考值犬
0.5-
1.5mg/dL,猫
0.8-
2.0mg/dL尿素氮BUN2蛋白质代谢终产物,主要通过肾小球滤过排出除肾功能外,还受蛋白质摄入量、消化道出血、饥饿和脱水等因素影响通常肾功能下降至正常的60-75%时开始升高参考值犬猫7-27mg/dL对称性二甲基精氨酸SDMA精氨酸代谢产物,完全通过肾小球滤过排出比肌酐更敏感,当肾功能下降至正常的40%时即可检测3到升高不受肌肉量影响,对于老年、消瘦或肌肉萎缩的动物特别有价值参考值犬猫14μg/dL尿蛋白/肌酐比值UPC评估蛋白尿程度的定量指标正常值犬
0.5,猫
0.4;边界值犬
0.5-
1.0,猫
0.4-
1.0;显著蛋白尿犬
1.0,猫
1.0持续性蛋白尿提示肾小球疾病,是慢性肾病进展和预后的重要指标电解质平衡检查及其临床意义135-145钠Na+mEq/L主要细胞外阳离子,维持细胞外液体渗透压和水平衡高钠血症常见于脱水、尿崩症;低钠血症常见于肾上腺功能减退、重度呕吐腹泻和水中毒
3.5-
5.5钾K+mEq/L主要细胞内阳离子,对心肌和神经肌肉功能至关重要高钾血症可见于急性肾功能衰竭、尿道梗阻;低钾血症常见于呕吐、腹泻和肾小管酸中毒100-115氯Cl-mEq/L主要细胞外阴离子,与钠共同参与酸碱平衡高氯血症见于脱水、肾小管酸中毒;低氯血症见于呕吐、代谢性碱中毒
8.5-
11.5钙Ca2+mg/dL神经肌肉功能、血液凝固和酶活性所必需高钙血症常见于恶性肿瘤、原发性甲状旁腺功能亢进;低钙血症常见于急性胰腺炎、慢性肾病和哺乳期母犬内分泌功能检查概述基础激素水平测定动态功能试验分子生物学检查影像学检查测量血液中特定激素的基通过给予刺激或抑制剂,通过PCR、基因测序等方通过超声、CT、MRI等影础浓度,如甲状腺素T
4、观察内分泌腺体的反应能法检测与内分泌疾病相关像技术评估内分泌腺体形皮质醇、胰岛素等简便力包括ACTH刺激试验、的基因突变如检测犬多态结构可直观显示甲状易行,但受多种因素影响,地塞米松抑制试验、TRH发性内分泌肿瘤MEN相腺、肾上腺、胰腺等器官如昼夜节律、应激和非甲刺激试验等能更准确评关基因、猫糖尿病易感基的肿大、肿瘤或萎缩情况,状腺疾病等,灵敏度和特估内分泌系统的储备和反因等有助于早期筛查、辅助定位和性质判断,指异性有限应能力,是诊断多种内分预防和遗传咨询导后续治疗泌疾病的金标准甲状腺功能检查及其临床应用总T4测定测量血清中总甲状腺素T4浓度,是首选筛查试验犬参考值
1.0-
4.0μg/dL,猫
0.8-
4.7μg/dL升高见于甲亢(尤其是猫),降低见于甲减(尤其是犬)和非甲状腺疾病对明显的甲亢和甲减诊断价值高,但中度病例可能落在灰区游离T4测定测量血清中未与蛋白结合的T4,反映生物活性部分受非甲状腺因素影响较小,对边界病例有更高的诊断价值通过平衡透析法测定最为准确在总T4结果不确定时作为补充检查TSH测定测量促甲状腺激素水平,与甲状腺功能呈负反馈关系犬甲减TSH升高,甲亢TSH抑制犬的检测已商品化,但猫的特异性TSH测定尚未广泛应用正常TSH不能排除甲减,但升高的TSH结合低T4高度提示甲减放射性碘摄取试验通过测量甲状腺对放射性碘123I或131I的摄取率评估功能甲亢摄取率增加,甲减摄取率降低是甲状腺功能的金标准检查,但需要特殊设备和放射防护,主要用于难诊断病例和治疗前评估肾上腺功能检查及其临床应用皮质醇过多症库欣综合征检查皮质醇不足症阿狄森病检查嗜铬细胞瘤检查尿皮质醇/肌酐比值UCCR采集主人在家基础皮质醇和电解质阿狄森病基础皮质醇血浆皮质醇胺和去甲肾上腺素嗜铬细胞瘤收集的晨尿,测定皮质醇与肌酐的比值正通常
2.0μg/dL,常伴有高钾、低钠血症患者分泌过多儿茶酚胺,尤其是去甲肾上腺常犬10×10^-6灵敏度高但特异性低,适单纯低皮质醇不足以诊断,需ACTH刺激试验素和肾上腺素血浆和尿儿茶酚胺水平升高合初步筛查和排除确认低剂量地塞米松抑制试验LDDST注射低ACTH刺激试验阿狄森病患者注射ACTH后尿香草扁桃酸VMA和间甲氧基羟基苯乙醇剂量地塞米松
0.01-
0.015mg/kg后监测血皮质醇反应不足,刺激后皮质醇
2.0μg/dL MHPG是儿茶酚胺的代谢产物,在嗜铬细清皮质醇水平正常动物8小时皮质醇被抑制高度提示肾上腺皮质功能不全,是诊断的金胞瘤患者尿液中增加比儿茶酚胺更稳定,至
1.0μg/dL,库欣病例抑制不明显诊断库标准测定更可靠欣综合征的金标准醛固酮测定在原发性阿狄森病中,刺激前CT/MRI影像学肾上腺肿块的定位诊断,确ACTH刺激试验静脉注射合成ACTH后测量后醛固酮均明显降低,有助于区分原发性和定病变大小、边界和影像特征,指导手术治皮质醇反应正常犬刺激后皮质醇6-17继发性肾上腺功能不全疗μg/dL,肾上腺依赖性库欣病例反应过度,肾上腺功能不全反应不足检测肾上腺储备功能的最佳方法血液气体分析原理采样技术血气分析要求动脉血样本(评估氧合功能)或静脉血样本(评估组织灌注)采集时使用肝素抗凝,避免气泡混入,并立即密封保持厌氧条件,在30分钟内完成分析采样部位通常选择股动脉、桡动脉或耳动脉测量参数直接测量参数pH值(反映酸碱度)、二氧化碳分压pCO2(反映呼吸功能)、氧分压pO2(反映氧合功能)计算参数碳酸氢盐HCO3-、总二氧化碳含量TCO
2、碱剩余BE、氧饱和度SaO2动脉血氧分压正常值80-100mmHg;二氧化碳分压35-45mmHg;pH
7.35-
7.45酸碱平衡原理pH值由HCO3-/pCO2比例决定,而非绝对值根据Henderson-Hasselbalch方程pH=
6.1+log[HCO3-]/
0.03×pCO2碳酸氢盐由肾脏调节,代表代谢因素;二氧化碳分压由肺通气调节,代表呼吸因素两者共同维持正常酸碱平衡温度校正血气分析仪通常在37°C下测量,但动物体温可能不同低温时血液pH升高,气体溶解度增加;高温时相反临床应考虑温度校正,特别是体温异常的动物校正公式△pH=
0.015×37-T,其中T为实际体温酸碱平衡紊乱的诊断和解释紊乱类型pH pCO2HCO3-常见病因代偿机制呼吸性酸中毒↓↑正常或轻度↑低通气麻醉、肾脏保留HCO3-胸部创伤、神经(慢性)肌肉疾病呼吸性碱中毒↑↓正常或轻度↓高通气疼痛、肾脏排泄HCO3-焦虑、发热、早(慢性)期休克代谢性酸中毒↓正常或轻度↓↓乳酸酸中毒、糖呼吸性代偿(加尿病酮症、尿毒速通气降低症、下痢pCO2)代谢性碱中毒↑正常或轻度↑↑呕吐、胃液流失、呼吸性代偿(减大量利尿剂使用慢通气增加pCO2)混合性酸碱紊乱变化不一变化不一变化不一多种原因同时存复杂,需根据临在如休克+呕床和实验室综合吐判断凝血功能检查方法23初步筛查检查特殊凝血检查整体凝血功能评估出血时间BT评估血小板功能和血管完整性,正凝血因子活性测定定量测定各凝血因子血栓弹力图TEG动态评估血凝块形成、强度和常值犬2-5分钟Ⅱ,Ⅴ,Ⅶ,Ⅷ,Ⅸ,Ⅹ,Ⅺ,Ⅻ活性溶解全过程活化部分凝血活酶时间APTT评估内源性和共血小板功能检查血小板聚集试验、血流细胞仪检旋转血栓弹力测定ROTEM类似TEG,提供凝血同凝血途径,正常值犬猫10-20秒测血小板活化功能的全面图像凝血酶原时间PT评估外源性和共同凝血途径,纤维蛋白降解产物FDP DIC诊断的重要指标,自动凝血分析仪整合多项参数,提供凝血-抗凝-正常值犬猫6-10秒正常值10μg/ml纤溶系统综合评估血小板计数正常值犬猫150-500×10^9/L D-二聚体特异性纤维蛋白降解产物,DIC和血栓形成的标志物常见凝血障碍的诊断凝血因子检查1针对特定凝血因子缺陷的检测实验室检测2凝血时间、血小板计数、特殊凝血试验临床症状评估出血部位、程度、发病年龄、品种特点病史收集家族史、既往出血史、用药情况常见凝血障碍包括血小板减少症、血小板功能障碍、凝血因子缺乏和弥散性血管内凝血DIC诊断凝血障碍需综合考虑临床表现和实验室检查结果原发性止血障碍如血小板问题通常表现为皮肤、粘膜的点状出血和瘀斑;继发性止血障碍如凝血因子问题则表现为深部组织、关节和伤口的大量出血免疫学检查概述液体免疫检测细胞免疫检测抗体和抗原检测方法淋巴细胞功能与表型分析变态反应检测分子免疫检测3过敏原检测和免疫耐受评估免疫基因和蛋白表达分析兽医免疫学检查是评估动物免疫系统功能状态的重要手段,包括先天性和获得性免疫功能检查液体免疫检测主要包括抗体滴度测定、免疫球蛋白水平测定等,用于传染病诊断、疫苗接种效果评估和自身免疫性疾病诊断细胞免疫检测用于评估T细胞、B细胞功能及数量,对免疫缺陷疾病和某些感染性疾病的诊断有重要价值自身免疫性疾病的实验室诊断免疫介导性溶血性贫血IMHA•直接Coombs试验检测红细胞表面的抗体或补体•球形红细胞计数IMHA特征性改变•自身凝集试验肉眼可见红细胞凝集•流式细胞术检测红细胞表面抗体免疫介导性血小板减少症ITP•抗血小板抗体检测ELISA或流式细胞术•巨核细胞增多的骨髓像•排除其他血小板减少原因•对免疫抑制治疗的反应全身性红斑狼疮SLE•抗核抗体ANA SLE的标志性指标•LE细胞检测特异性但敏感性低•抗DNA抗体、抗Sm抗体等特异抗体•补体水平测定常见低补体血症自身免疫性皮肤病•直接免疫荧光组织中免疫复合物沉积•间接免疫荧光血清中循环抗体•皮肤活检特征性病理变化•ELISA检测特异抗体如天疱疮和类天疱疮传染病血清学诊断传染病血清学诊断是通过检测血清中的特异性抗体或抗原,确定动物是否感染特定病原体的方法常用的血清学技术包括酶联免疫吸附试验ELISA、免疫荧光试验IFA、免疫层析技术IC、凝集试验、补体结合试验和西方印迹试验等这些方法各有优缺点,选择时应考虑灵敏度、特异性、成本和操作复杂性等因素肿瘤标志物检查及其临床应用1淋巴瘤标志物血清胸苷激酶1TK1是细胞周期相关酶,在淋巴瘤患犬中显著升高,可作为筛查、预后评估和复发监测的标志物C-反应蛋白CRP虽非特异性,但在淋巴瘤患犬中水平升高,可用于治疗反应监测流式细胞术检测循环肿瘤细胞和免疫表型对淋巴瘤分类和预后评估有重要价值2肥大细胞瘤标志物血清肥大细胞脱颗粒产物如组胺和肥大细胞酶Tryptase在肥大细胞瘤患犬中水平升高C-KIT基因突变检测有助于预测肿瘤行为和对酪氨酸激酶抑制剂的反应肥大细胞瘤分级和增殖指标如Ki-67是重要的预后因素,高Ki-67表达提示预后不良3骨肉瘤标志物血清碱性磷酸酶ALP在骨肉瘤患犬中常升高,且水平与肿瘤负荷和预后相关骨钙蛋白OC和I型胶原C-末端肽CTx等骨代谢标志物可反映骨转换和骨吸收状态循环肿瘤DNA和循环肿瘤细胞检测为早期诊断和微转移灶检测提供了新方法4其他肿瘤标志物甲胎蛋白AFP和癌胚抗原CEA在某些犬猫肝癌和消化道肿瘤中升高前列腺特异抗原PSA和前列腺酸性磷酸酶PAP可用于犬前列腺癌的辅助诊断胰腺癌标志物CA19-9和CA125在某些犬胰腺和卵巢肿瘤中有表达这些标志物在兽医肿瘤学中的临床应用仍在探索中细胞流式技术在兽医临床中的应用淋巴瘤免疫表型分析血液系统疾病诊断输血医学和免疫功能评估流式细胞术是淋巴瘤免疫表型分析的金标准,流式细胞术可用于慢性淋巴细胞白血病、多发流式细胞术可进行交叉配血试验,检测供受体可区分B细胞性CD21+,CD79a+和T细胞性性骨髓瘤和骨髓增生异常综合征等血液系统疾血液相容性,减少输血反应风险通过检测TCD3+,CD4+/CD8+淋巴瘤表型结果直接病的诊断通过检测克隆性增殖、异常细胞群细胞亚群CD4+/CD8+比值、NK细胞活性和影响治疗方案选择和预后判断,通常B细胞淋体和表面标志物异常表达,提供准确诊断此细胞因子产生,评估免疫功能状态在免疫缺巴瘤预后优于T细胞淋巴瘤通过检测细胞表外,对于血细胞减少症的病因分析,如免疫介陷疾病诊断、移植后监测和免疫治疗反应评估面标志物如CD34还可鉴别急性白血病,为分导性疾病中的抗体检测,也具有重要价值中发挥重要作用,为精准治疗提供依据类和治疗提供依据分子生物学技术在兽医临床病理中的应用聚合酶链反应技术核酸测序技术分子杂交技术PCRPCR是最常用的分子诊断技术,通过特异Sanger测序是传统的DNA测序方法,用原位杂交ISH可在组织切片上直接检测特性引物扩增目标核酸序列,用于病原体检于已知基因的突变检测和鉴定定核酸序列,提供病原体定位和基因表达测、基因突变分析和遗传病诊断的空间信息高通量测序NGS可同时分析大量DNA片实时定量PCRqPCR不仅可检测目标序段,用于全基因组测序、宏基因组分析和荧光原位杂交FISH通过荧光标记探针直列存在,还能定量分析,用于病毒载量测新病原体发现观显示细胞或组织中的特定基因,用于染定、基因表达分析和微小残留病变监测色体异常和病原体检测16S rDNA测序用于微生物群落分析,特别是难以培养的细菌,有助于揭示感染性疾芯片技术整合杂交原理,实现大规模基因多重PCR同时检测多个靶标,提高检测效病的病原学谱表达谱分析,用于疾病机制研究和分子分率;巢式PCR提高灵敏度,适合检测低浓型度样本技术在疾病诊断中的应用PCR疾病类别应用实例PCR类型样本类型优势病毒感染犬细小病毒、猫白实时PCR血液、粪便、组织潜伏期早期检测、血病病毒、猫冠状高灵敏度病毒细菌感染布鲁氏菌、结核分常规PCR、多重血液、组织、分泌快速、可检测难培枝杆菌、沙门氏菌PCR物养细菌真菌感染皮肤癣菌、隐球菌、巢式PCR毛发、皮肤、分泌高特异性、避免培曲霉菌物养延迟寄生虫病巴贝斯虫、利什曼实时PCR血液、组织、粪便可检测低寄生虫血原虫、弓形虫症遗传病进行性视网膜萎缩、等位基因特异性血液、口腔拭子产前诊断、携带者von Willebrand病PCR筛查肿瘤学淋巴瘤克隆性检测、逆转录PCRRT-肿瘤组织、血液肿瘤分类、靶向治c-KIT突变PCR疗指导临床病理实验室质量控制实验室认证与标准符合国际标准化组织要求质量控制程序2内部质控与外部质评相结合仪器维护与校准定期检查和标准化操作人员培训与资质专业技能与标准操作流程质量控制是保证兽医临床病理检验结果准确可靠的关键环节完善的质量控制体系包括实验前、实验中和实验后三个阶段的管理实验前控制包括样本采集、标识、运输和保存;实验中控制包括标准操作程序执行、质控品测定和结果验证;实验后控制包括结果审核、报告发放和异常结果处理实验室生物安全管理风险评估根据操作的病原体类型、传播途径和潜在危害进行分级管理临床病理实验室常处理含有多种病原体的样本,应根据样本来源、处理方式和检测项目综合评估风险等级防护措施个人防护装备PPE包括实验室专用工作服、手套、口罩、护目镜等实验室设施应配备生物安全柜、通风系统、洗眼器、消毒设备等高风险操作如气溶胶产生程序必须在生物安全柜内进行废弃物处理生物废弃物必须按规定分类、灭活和处置锐器废弃物需放入专用容器;感染性废液需消毒处理;动物组织和尸体需特殊处理所有废弃物处理需符合当地环境保护法规人员培训所有实验室人员须接受生物安全培训,掌握防护知识、紧急处理程序和意外事件报告流程定期开展安全演练,确保人员能够正确应对实验室意外事件如样本泄漏、人员暴露等情况临床病理报告的撰写和解释1报告基本结构2结果表达与标记标准的临床病理报告应包含基本信息部分(动物信息、样本信息、检查日期检查结果应使用标准单位表示,异常值应有明显标记(如高值↑、低值↓或等)、检查结果部分(按系统或检查类型分类列出各项指标及其参考范围)、颜色标注)结果应附有适当的参考范围,注明参考范围的来源和适用条件解释说明部分(对异常结果的分析和临床意义阐述)和建议部分(后续检查对于特殊检查项目,应提供方法学说明重要的危急值应有醒目提示,并确或治疗建议)报告格式应规范统一,便于临床医生快速获取关键信息保及时通知临床医生3结果解释原则4沟通与临床联系解释应客观准确,基于科学依据而非个人推测应考虑动物种类、年龄、性复杂或重要病例的报告应由病理学家与临床医生直接沟通讨论,确保结果得别和生理状态等因素对参考值的影响结果分析需结合临床病史和症状,避到正确理解和应用病理学家需了解临床背景信息,才能提供更有针对性的免孤立看待单个指标对于疑难结果,应提供可能的诊断方向和鉴别诊断,解释对于连续监测的指标,应进行趋势分析,评估病情变化和治疗效果而非给出确定诊断临床病理诊断思路与方法问题定位根据临床症状和体格检查结果,确定受累器官系统或可能的病理生理异常例如,对于出现多饮多尿的动物,应重点考虑肾脏、肝脏、内分泌系统异常;对于虚弱和苍白的动物,应首先评估血液系统准确的问题定位有助于选择恰当的实验室检查项目合理选择检查根据问题定位选择最合适的检查项目,遵循从简到繁原则首先进行基础筛查性检查如血常规、尿常规、基础生化等,再根据初步结果决定是否需要更专业的检查如内分泌测定、免疫学检查等考虑检查的敏感性、特异性、价值和成本效益,避免过度检查结果整合分析将各项检查结果进行综合分析而非孤立解读识别结果之间的相互关系和一致性,如贫血与网织红细胞计数的关系可判断贫血类型;ALT与ALP的不同程度升高可提示肝病类型注意识别结果模式,如某些疾病有特征性的实验室表现建立鉴别诊断基于整合分析列出可能的鉴别诊断,并按照可能性大小排序评估各种诊断假设与临床表现和实验室检查的符合程度确定需要额外检查以确认或排除某些诊断的项目保持思维开放性,愿意根据新证据调整诊断方向动态监测与评估对重要参数进行连续监测,评估疾病进展和治疗效果根据疾病特点确定合理的复查间隔和项目通过结果趋势分析预测疾病转归,及时调整治疗方案复查结果与基线值比较更有意义,有助于评估个体化的治疗反应综合病例分析
(一)多系统疾病病例资料进一步检查诊断思路患者12岁雄性金毛犬,未去势血液生化ALT320U/L↑,ALP580基于多饮多尿和高血糖,首先考虑糖尿病U/L↑,总胆红素
2.1mg/dL↑,BUN45尿比重低于预期提示肾功能异常肝酶和主诉多饮多尿3周,近期出现食欲减退、mg/dL↑,肌酐
1.8mg/dL↑胆红素升高提示肝胆系统疾病需要鉴别呕吐、体重减轻是原发性肝病并发糖尿病,还是糖尿病酮尿常规尿蛋白++,尿胆红素+,沉渣中症导致的继发性肝损伤体检轻度脱水,腹部触痛,肝脏肿大,见少量颗粒管型心率增快进一步检查发现胰岛素水平低下,确认为腹部超声肝脏增大,回声增强,胆囊扩糖尿病;肾功能指标升高提示肾损伤;超初步检查PCV48%(偏高),总蛋白张,双肾轻度增大声结果支持肝胆疾病诊断综合分析认为
6.0g/dL(正常),血糖360mg/dL(显是糖尿病引起的多器官并发症,包括脂肪著升高),尿比重
1.015(偏低),尿糖内分泌检查果糖胺升高,胰岛素水平低肝、胆汁淤积和早期糖尿病肾病++++下综合病例分析
(二)急危重症病例资料4岁雌性家猫,绝育,室内饲养主人发现猫咪突然精神沉郁,拒食24小时,呕吐3次猫近期接触过百合花体检发现口腔黏膜苍白,轻度脱水,肾脏触诊轻度肿大初步检查结果2血常规轻度非再生性贫血PCV28%,白细胞轻度升高18×10^9/L,中性粒细胞比例升高血液生化BUN120mg/dL↑↑,肌酐
8.5mg/dL↑↑,磷
6.8mg/dL↑,钾
5.8mEq/L↑紧急处理3尿液检查尿比重
1.012(固定性低比重),尿蛋白++,沉渣见大量肾小管上皮细胞和颗立即进行液体复苏治疗,纠正脱水和电解质紊乱考虑到接触百合花的病史和典型的实验粒管型室表现,高度怀疑百合中毒导致的急性肾损伤启动紧急血液净化治疗(血液透析),并进行对症支持治疗监测与预后每日监测肾功能指标、电解质、酸碱平衡和尿量治疗3天后,BUN降至70mg/dL,肌酐降至
4.2mg/dL,尿量逐渐恢复预后取决于肾小管损伤的可逆程度,早期积极治疗的病例预后较好,但可能遗留慢性肾病兽医临床病理学的发展前景和挑战技术革新精准医学国际协作新一代测序技术、液体活检、人工智个体化诊断和治疗成为兽医临床病理全球兽医临床病理领域的合作日益加能辅助诊断等先进技术正逐步应用于的重要发展方向通过基因组学、蛋强,包括参考值标准化、检验方法统兽医临床病理领域这些技术提高了白组学等多组学技术,实现对疾病的一和质量控制体系共享等方面国际诊断精确性,扩展了检测范围,缩短精准诊断和分型药物基因组学研究动物健康监测网络的建立有助于新发了诊断时间未来,微流控芯片、便有助于预测药物反应和不良反应,指传染病的早期发现和控制跨学科合携式诊断设备和即时检测技术将使兽导个体化用药方案这一领域将为慢作,特别是与人类医学的交流,将促医诊断更加便捷高效性疾病和复杂病例的管理带来革命性进同一健康理念的实践和发展变化教育与标准兽医临床病理学专业人才培养体系不断完善,临床病理专科医师认证制度逐步建立实验室标准化和认证要求日益提高,确保诊断质量临床病理学知识的普及和应用也越来越受到临床兽医的重视,成为提升诊疗水平的关键因素。
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