月季植物组织培养实验报告

月季植物组织培养实验报告姓名张恒玉天津师范大学10生乙10517085摘要月季为蔷薇科蔷薇属木本植物，其花姿优美，花型丰富，花Floribunda roses色齐备，树型易修剪，栽培难度小;其花型大，美丽，幽雅，高贵在鲜花应用中，月季花的地位和比重与日俱增,是世界上著名的四大切花之一植物组织培养主要以绿色植物细胞或组织块为研究主要对象，把植物体上的生活器官、组织块活细胞从整体上离体下来进行人工培养以细胞全能性为理论基础对最适月季培养的培养基、激素、培养基质进行筛选，使离体组织经过脱分化和再分化而发育成新的植物个体为月季的快繁和新品种的选育提供了新的途径，在月季的改良上显示了很大的应用潜力关键词月季组织培养Rose PlantTissue CultureLab ReportName:ZhangHengyuTianjin NormalUniversity collegeof LifeScience,Biological Sciences300387Abstract RoseFloribunda rosesfor thewoody RosaceaeRosa,the beautifulflowerposition,abundant flowers,colors available,easy totrim thetree,planting smalldifficulty;its flowerslarge,beautiful,elegant,noble.Applications in the flowers,the statusandthe proportionrose growingis theworld，s leadingone of the fourcut flowers.Plant TissueCulturemain objectofthegreen plantcells ortissue blocksfor research,Of lifeon theplantorgan,tissue blockliving cellsisolated fromthe wholedown theartificial culture,Cell totipotencytheory basedon theoptimum roseculture medium,hormones,culture mediafilter,Isolated tissueand developinto newindividual plantsafter dedifferentiationandredifferentiation,breeding ofnew varietiesoffer anew way,intherose showa significantimprovementpotential applications.Keywords Rosetissue culture1月季介绍月季为常绿有刺灌木，或呈蔓状与攀援状常绿或落叶灌木，直立，茎为棕色有一点绿，具有钩刺或无刺，但也有几乎无刺的小枝绿色，叶为墨绿色，多数羽状复叶，宽卵形或卵状长圆形，长厘米，先端渐尖，具尖齿，叶缘有锯齿，

2.5-6两面无毛，光滑；托叶与叶柄合生，全缘或具腺齿，顶端分离为耳状花朵常簇生，稀单生，花色甚多，色泽各异，径厘米，多为重瓣也有单瓣者；萼片尾状长尖，4-5边缘有羽状裂片；花柱分离，伸出萼筒口外，与雄蕊等长；每子房胚珠果卵球1形或梨形，长厘米，萼片脱落花期月大多数是完全花，或者是两性花1-24-10有花中皇后的美称现为天津市的市花，还是中国十大名花.月季植物组织培养试验2实验原理

1.1植物的组织培养广义又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织.器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术狭义是指组培指用植物各部分组织，如形成层.薄壁组织.叶肉组织.胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物实验材料及用具

1.2实验材料月季

1.

32.1实验试剂母液酒精氯化汞与

1.

4.2MS70%

0.1mol/L NaOH

0.1mol/L HCIIAA2,4-D实验器具广□瓶棕色瓶锥形瓶剪刀镜子酒精灯紫外灯

1.

5.3实验步骤

2.3培养基的配制

3.

3.1称取琼脂，先用蒸储水置搪瓷杯浸泡小时后充分洗去

2.

3.

1.

16.5g〜12g1000ml2杂质弃去浸液用无离子水再洗次，并加入无离子水在电炉上溶化边1〜2500ml搅拌边溶化，直至完全溶化备用另取蔗糖于上述溶液中搅拌完全溶解备用

2.30g另按培养基用量量取无机大量微量元素及有机成分的母液于一烧杯中，

1.

3.1,3MS并完全倒入

②液中搅拌溶解混匀备用按目的要求用取样器加入各种激素并搅拌混匀，加稀碱或稀释酸调值应比目的

2.pH要求的值稍高定溶pH

0.1〜

0.21000mlo趁热大于分装于培养瓶中，应边搅拌边分装液体，根据要求的量分装一般液60℃体的厚度掌握在左右为宜分装时不得将液体粘落至瓶口上1cm将培养瓶封口塞棉塞、包牛皮纸系线绳另取中的滤纸若干，置

①的培养皿中并用牛皮纸包好准备灭菌5cm9cm另取无离子水若干不得超过瓶内总体积的加棉塞包牛皮纸，灭菌制备无菌水70%,另取清毒瓶包好备用灭菌

2.

3.2检查有无漏电漏水现象，加无离子水的升，将要灭菌的物品平稳地放置高

2.

3.

2.13压锅套桶内盖上锅盖水平拧好螺栓，打开放气阀，接通电源加热，待放气阀处水汽充

2.

3.

2.2分溢出时盖上放气阀，待压力升至时打开放气阀放气至压力回到零位时O.O5Mpa盖上放气阀升压待压力达时，开始计时，使调压器自回调左

2.

3.

2.

30.12〜

0.15Mpa220V170〜180V右维持分钟断电30待压力回降至零位时，打开锅盖错开一缝隙使热蒸汽迅速溢出烘干包纸和

2.

3.

2.4瓶塞趁热取出被灭菌之物，将培养瓶置平稳处使培养瓶中的培养基凝固小

2.

3.

2.523时后查有无细菌，小时后查有无霉菌，如有杂菌应及时处理，无杂菌备用48接种

2.

3.3取材将采集的月季茎段冲洗干净，分装到烧杯中，放入超净工作台;先用

2.

3.

3.1酒精浸没并轻摇进行欲消毒；倒出酒精，加入二氯化汞浸没;倒净二70%15s

0.1%氯化汞用无菌水冲洗次，将废液倒弃备用3解下培养瓶上包头纸的线绳，并将培养瓶整齐地排列在接种台的左侧,然后

2.

3.

3.2用的酒精棉球从内向外擦接种台面70%在酒精灯下用用镜子在消毒瓶内取出材料置于培养皿内的无菌滤纸上吸干

2.

3.

3.3水分，右手持镜子左手拿灭过菌的解剖刀迅速地将茎段切成剪成每段至少有2〜3cm个侧芽，用镶子将外植体迅速地在酒精上接入培养瓶内1头纸，系好线绳，移出净化台或接种箱，写好标签，外植体的名称、种类、接种日期、接种人等，移入培养室进行培养实验结果

2.4cI05/17/201205/17/2012讨论

2.5培养材料采集

2.

1.1要根据培养目的适当选取材料，选择原则易于诱导、带菌少要选取植物组织内部无菌的材料这一方面要从健壮的植株上取材料，不要取有伤口的或有病虫的材料另一方面要在晴天，最好是中午或下午取材料，决不要在雨天、阴天或露水未干时取材料因为健壮的植株和晴天光合呼吸旺盛的组织，有自身消毒作用，这种组织一般是无菌的培养材料的消毒从外界或室内选取的植物材料，都不同程度地带有各种微生物这些污染源一旦带人培养基，便会造成培养基污染因此，植物材料必须经严格的表面灭菌处理，再经无菌操作手续接到培养基上灭菌方法

2.

1.2物理方法

2.

1.

3.1物理灭菌干热、湿热、射线处理、物理除菌、过滤、离心、沉淀等化学方法

2.

5.

2.2消毒剂、抗菌素灭菌培养基灭菌高温高压湿热灭菌法

2.

5.

2.3压力在温度在灭菌

9.8X10—

10.8X10,Pa,121℃,20—30min参考文献3

[1]郭志刚,张伟.月季郭].北京:中国林业出版社

2000.

[2]余树勋-月季余].北京:金盾出版社,

1992.

[3]林玉红.月季试管苗繁殖的研究[J].甘肃农业科技，19941:36-

37.

[4]李美茹，李洪清，孙梓建等.月季组织培养和基因转化研究进展[J].广西植物，2003,233243—

249.

[5]Bressan PHKim YJ,Hyndman SEet al.Factors affectngin vitropropagation ofrose[J].J AmSoc hortSci,1982,107979-990

[6]李青，苏雪痕,李湛东,藤本月季组织培养快繁研究[J].北京林业大学学报，1999,216:17—

21.

[7]于冰沁.微型月季组织培养的研究[J].辽宁农业科学,20054:53-

54.

[8]李海燕，胡国富，胡宝忠,月季组培快繁技术的研究[J].东北农业大学学报,2004,351:84—

88.

[9]吴雪，高成华.月季茎尖离体培养的研究[J].辽宁师专学报自然科学版，20072108—

110.

[10]langford PJ,Wainwright H.Effect ofsueros concentrationOn thephotosynthetic abilityofrose shootsin vitro[J].Ann Bot,1987,60633—

639.

[11]陈正华.小本植物组织培养及其应用[M].北京:高等教育出版社,1986:307—

308.。