《实验室培养基制备设备操作指南》课件

实验室培养基制备设备操作指南本指南旨在为实验室人员提供实验室培养基制备设备的操作方法，帮助他们安全、高效地制备高质量的培养基，确保实验的顺利进行课程目标与内容概述课程目标内容概述掌握实验室培养基制备设备的操作方法和安全规范，了解培养基本课程将涵盖培养基制备所需设备的介绍、操作步骤、故障排除制备的原理和流程、维护保养、安全操作、质量控制以及相关管理制度等内容安全须知和个人防护要求操作前需认真阅读设备说明书，了解安全操作规范操作过程中，应佩戴实验服、防护眼镜、手套等个人防护用品避免接触高温、高压设备，注意防烫伤和防爆使用化学试剂时，应注意标签信息，避免误操作培养基制备的基本原理营养物质物理状态培养基类型培养基中提供微生物生长所需的碳源、根据微生物的生长需求，培养基可分为培养基可分为基础培养基、选择培养基氮源、无机盐等营养物质固体、半固体和液体培养基、鉴别培养基等，不同的培养基适用于不同的微生物种类常见培养基类型介绍1牛肉膏蛋白胨培养基广泛用于细2麦康凯培养基用于选择性培养革3沙氏葡萄糖琼脂培养基用于培养菌的培养兰氏阴性细菌真菌培养基制备所需设备清单电子天平计磁力搅拌器pH高压蒸汽灭菌锅超纯水系统滤膜过滤装置真空泵无菌操作台培养基分装器天平使用注意事项天平应放置在水平、稳定的工称量前应预热天平，确保其处称量时应轻拿轻放，避免对天称量过程中，应注意观察天平作台上于稳定状态平造成损害显示的读数，避免误差电子天平的校准方法选择合适的砝码，确保砝码的准确性和清洁将砝码放置在天平的称量盘上，记录天平显示的读数根据天平的校准功能，输入砝码的实际重量天平会自动校准，完成校准后，即可进行称量操作天平称量操作步骤将称量皿或称量瓶放置在天平的称量盘上，待天平显示稳定轻轻加入待称量物质，直至达到所需的重量记录天平显示的读数，并进行必要的换算称量完毕后，将称量皿或称量瓶从称量盘上取下，清扫称量盘计的工作原理pH玻璃电极的电势与溶液的值呈线性关系pH2计利用玻璃电极测量溶液的氢离子浓pH1度3计将电势转化为值，并显示在仪器上pH pH计校准方法详解pH1选择标准缓冲溶液，确保溶液的准确性和有效期2将pH计的电极浸入标准缓冲溶液中，待读数稳定3根据pH计的校准功能，输入标准缓冲溶液的pH值4重复步骤2-3，使用不同的标准缓冲溶液进行校准值测量注意事项pH1电极应定期清洗，确保其清洁和灵敏度2测量前应确保溶液的温度稳定3测量过程中，应避免电极接触容器壁或搅拌器4测量结束后，应及时将电极浸泡在合适的保存液中磁力搅拌器的结构组成搅拌器主体搅拌子搅拌速度调节器包含电机、控制电路、显示屏、搅拌器由磁性材料制成，放置在溶液中，通过用于调节搅拌子的转速，可根据溶液的底座等磁力旋转，实现溶液的搅拌粘度和搅拌需求进行调整磁力搅拌器操作要点选择合适的搅拌子，确保其大小适合容器将搅拌子放置在容器底部，并将容器放置在搅拌器底座上开启搅拌器，缓慢调节转速，直至溶液充分搅拌搅拌结束后，关闭搅拌器，取出搅拌子，清洗容器和搅拌子高压蒸汽灭菌锅结构介绍锅体承受高压蒸汽，加热系统通过加热水安全阀用于控制压力内部有灭菌室和控制系或蒸汽产生高压蒸汽，防止压力过高而发生统爆炸计时器用于控制灭菌时间，确保灭菌效果灭菌锅使用前检查事项1检查灭菌锅的电源、水位、安全阀是否正常2检查灭菌室的密封性，确保没有漏气现象3检查灭菌物是否已正确放置，避免堵塞排气管4检查灭菌温度和时间的设定是否正确灭菌温度和时间设定℃121标准灭菌用于大多数培养基和器械的灭菌，时间为分钟15-20℃115低温灭菌适用于对热敏感物质的灭菌，时间为分钟30-45常见灭菌程序选择温度时间超纯水系统组成部分预处理1去除水中大颗粒杂质和悬浮物反渗透2去除水中大部分溶解性盐类和有机物超纯化3通过离子交换、膜过滤等技术去除水中微量杂质超纯水制备流程1原水经过预处理去除大颗粒杂质和悬浮物2预处理后的水进入反渗透系统，去除大部分溶解性盐类和有机物3反渗透后的水进入超纯化系统，进一步去除水中微量杂质4超纯化后的水经过水质监测，确保其符合要求水质监测指标说明电阻率水中离子浓度的指标，数值越高，水越纯净水中总有机碳的含量，数值越低TOC，水越纯净细菌总数水中细菌数量的指标，数值越低，水越干净滤膜过滤装置组装将待过滤溶液倒入滤膜过滤装将滤膜过滤装置连接到真空泵置中，进行过滤操作将滤膜放置在滤膜过滤装置的或抽滤瓶上，并确保连接牢固选择合适的滤膜，确保其孔径滤膜座上，并固定好和材质符合要求真空泵使用方法检查真空泵的电源、油位、排气管是否正常开启真空泵，等待真空度稳定连接滤膜过滤装置，进行过滤操作过滤结束后，关闭真空泵，并及时清理真空泵的排气管无菌操作基本要求操作前应彻底清洁双手和工作台面，并进行消毒使用灭菌过的器皿、试剂和培养基操作过程中应避免咳嗽、喷嚏，减少空气中的污染物操作应迅速、准确，避免长时间暴露于空气中无菌操作台使用规范操作前应开启紫外灯进操作前应使用酒精操作过程中，应使用酒75%行照射消毒，时间不少擦拭手和工作台面精灯对器械进行火焰灭于分钟菌30操作过程中应佩戴无菌手套，避免手部污染培养基配制计算方法浓度换算配制比例最终体积根据所需培养基的浓度，换算出所需物根据培养基配方，计算出各种成分的比根据所需培养基的体积，计算出所需水质的质量或体积例，并进行称量或量取的体积，并进行加水称量误差的控制1使用精度较高的电子天平进行称量，确保称量结果的准确性2称量前应预热天平，并进行校准，确保天平处于稳定状态3称量过程中应轻拿轻放，避免对天平造成损害4称量完毕后应及时清扫天平的称量盘，避免残留物影响下次称量溶解过程的注意事项1将待溶解物质缓缓加入水中，避免出现结块或沉淀2使用磁力搅拌器搅拌溶液，加速溶解过程，并确保溶液均匀3溶解过程中应注意温度变化，避免溶液温度过高，导致营养物质分解4溶解完毕后，应静置冷却至室温，再进行后续操作值调节技巧pH使用合适的酸碱溶液进行值调节，如盐酸、氢氧化钠等pH用计监测溶液的值，并根据需要进行微调pH pH调节值时应缓慢进行，避免出现剧烈变化，导致培养基成分pH发生改变调节完毕后，应再次确认值是否符合要求pH培养基分装方法灭菌完毕后，将培养基冷却至将分装好的培养基放入高压蒸室温，并进行质量控制检测将配制好的培养基分装到灭菌汽灭菌锅中进行灭菌处理选择合适的容器，如培养皿、容器中，并根据需要加入指示试管、三角瓶等，并进行灭菌剂或添加剂处理玻璃器皿的清洗要求使用前，应先将玻璃器皿浸泡在洗涤剂溶液中，去除残留的污染物用刷子刷洗玻璃器皿，确保所有部位都被清洗干净用清水冲洗玻璃器皿，直至洗涤剂残留物完全去除将清洗后的玻璃器皿放置在烘箱中烘干，或用蒸汽灭菌器进行灭菌处理常见故障及排除方法1天平故障检查天平是否处于水平状态、是否预热充分、称量盘是否清洁2计故障检查电极是否连接良好、是否浸泡在合适的保存液中、是pH否已校准3灭菌锅故障检查电源是否正常、安全阀是否畅通、排水管是否堵塞4超纯水系统故障检查进水水质、过滤器是否堵塞、泵是否正常运行天平故障排除校准清洁1检查天平是否已校准，必要时进行校准检查称量盘是否清洁，必要时进行清洗2电源水平4检查天平的电源是否正常，必要时更换3检查天平是否处于水平状态，必要时进电源线行调整计故障处理pH电极连接1检查电极是否连接良好，必要时重新连接保存液2检查电极是否浸泡在合适的保存液中，必要时更换保存液校准3检查计是否已校准，必要时进行校准pH清洗4检查电极是否清洁，必要时进行清洗灭菌锅故障解决12电源安全阀检查电源是否正常，必要时更换电源检查安全阀是否畅通，必要时清洁或线更换安全阀3排水管检查排水管是否堵塞，必要时疏通排水管超纯水系统维护定期清洗更换滤芯设备保养定期清洗超纯水系统的过滤器，确保其正定期更换超纯水系统的滤芯，确保水质符定期检查超纯水系统的运行状态，并进行常工作合要求必要的维护保养设备日常保养要点1定期清洁设备，确保其清洁卫生2检查设备的电源线、插头、开关等是否完好3定期检查设备的运行状态，并进行必要的维护保养4记录设备的使用情况，并及时进行故障排除清洁和消毒程序清洁程序消毒程序使用合适的清洁剂清洁设备，并用清水冲洗干净使用酒精或其他消毒剂对设备进行消毒，并确保消毒时间足75%够设备使用记录规范设备名使用日使用人使用时操作内备注称期间容试剂和耗材管理试剂和耗材应贴上标签建立试剂和耗材的库存将试剂和耗材存放在合，注明名称、规格、批管理制度，定期盘点，适的储存环境中，确保号、有效期等信息确保库存充足其质量废弃物处理流程1将废弃物分类收集，并贴上标签，注明类型和日期2将分类收集的废弃物运送到指定的废弃物处理区域3根据废弃物的类型进行处理，如焚烧、掩埋等4做好废弃物处理记录，确保安全环保质量控制要点1定期进行无菌检测，确保培养2定期进行培养基性能测试，确基无菌保培养基能够满足微生物生长需求3建立培养基质量控制记录，确保培养基质量可追溯无菌检测方法培养法显微镜观察法将培养基置于培养箱中培养，观察是否有细菌生长使用显微镜观察培养基，查看是否有细菌或真菌存在培养基性能测试选择合适的微生物菌株，进行培养基性能测试观察微生物在培养基上的生长情况，如生长速度、菌落形态等根据测试结果，评估培养基的性能是否符合要求培养基储存条件培养基应存放在阴凉、干燥、通风良培养基应避免阳光直射，防止光照导培养基应密封保存，避免空气中的污好的地方致培养基变质染物进入有效期管理根据培养基的类型和储存条件，确定培养基的有效期过期培养基应及时处理，避免使用过期培养基进行实验123在培养基的标签上注明有效期，并定期检查有效期标签制作规范标签应注明培养基的名标签的字体应清晰易懂标签的颜色应与培养基称、配制日期、有效期，大小适宜，方便阅读颜色区分开来，避免混、配制人等信息淆实验室安全管理制度1建立完善的实验室安全管理制度，制定安全操作规程2定期进行安全培训，提高实验室人员的安全意识3配备必要的安全防护用品，如实验服、手套、防护眼镜等4制定实验室安全事故应急预案，并定期进行演练应急预案及处理流程火灾事故化学品泄漏事故人员受伤事故立即拨打报警，疏散人员，关闭电源立即疏散人员，戴好防护用品，根据泄立即拨打急救电话，并根据伤情进行119120，使用灭火器进行灭火漏的化学品类型进行处理处理设备操作考核标准掌握设备的操作步骤和安全规范能够独立完成设备的操作，并确保操作安全了解设备的常见故障及排除方法能够正确填写设备使用记录，并进行必要的维护保养操作技能评估方法理论考试1测试操作人员对设备操作理论知识的掌握程度实际操作考核2评估操作人员实际操作设备的能力，如称量、调节值、灭菌等pH案例分析3评估操作人员对设备故障的分析和处理能力常见问题解答1培养基为什么需要灭菌？2如何选择合适的培养基？3如何判断培养基是否合格？Q1:Q2:Q3:灭菌是为了杀死培养基中的微应根据待培养微生物的种类和通过无菌检测和培养基性能测A1:A2:A3:生物，防止污染，确保培养基的无生长需求选择合适的培养基试，可以判断培养基是否合格菌性培养基制备工作流程培养基配制根据配方计算、称量、溶解、调节值pH12培养基分装将配制好的培养基分装到灭菌容器中培养基灭菌将分装好的培养基放入高压蒸汽灭菌锅中3进行灭菌4培养基冷却将灭菌后的培养基冷却至室温，并进行质量控制检测培养基储存将合格的培养基存放在合适的储存环境中5设备使用注意事项汇总天平1使用前应预热，并进行校准，称量过程中应轻拿轻放pH计2电极应定期清洗，测量前应确保溶液的温度稳定磁力搅拌器3选择合适的搅拌子，搅拌过程中应注意搅拌速度和溶液温度高压蒸汽灭菌锅4使用前应检查安全阀、密封性、灭菌温度和时间设定超纯水系统5定期清洗过滤器，更换滤芯，检查设备运行状态，确保水质符合要求质量控制检查表检查项目标准检测结果合格不合备注/格操作规程文件管理建立操作规程文件库，定期更新操作规程，确将操作规程分发给相关并将操作规程进行编号保其与实际操作相符人员，并确保每个人都管理能够熟练掌握设备维护保养计划安全操作要点总结1操作前需仔细阅读设备说明书，了解安全操作规范2操作过程中应佩戴个人防护用品，避免接触高温、高压设备3使用化学试剂时应注意标签信息，避免误操作4操作结束后应及时清理工作台面，并做好设备维护保养工作培训考核要求培训内容考核方式包括设备操作方法、安全规范、故障排除、维护保养、质量控制通过理论考试、实际操作考核、案例分析等方式进行考核评估等内容结业考核内容结业考核内容包括培养基制备的理论知识、设备操作技能、常见故障的处理、安全操作规范、质量控制方法等。