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《临床检验基础》课程介绍欢迎学习《临床检验基础》课程!本课程是医学检验专业的核心基础课程,旨在帮助学生掌握临床检验的基本理论、基本知识和基本技能通过系统学习,您将了解各种临床标本的采集、处理和检测方法,掌握常见检验项目的操作技术,并能够正确解读检验结果,为疾病的诊断和治疗提供可靠的实验室依据课程目标和学习要求知识目标能力目标素质目标掌握临床检验的基本理论和知识体能够熟练进行常规临床标本的采集培养严谨的工作态度和科学的工作系,理解各种检验方法的原理,熟与处理,掌握基本检验技术的操作作风,具备团队协作精神和持续学悉临床常见疾病的实验室检查指标方法,具备仪器使用与维护的基本习的意识,树立为患者健康服务的变化技能职业道德第一章绪论本章概述学习目标本章作为临床检验基础的入门部理解临床检验在现代医学中的地分,主要介绍临床检验的基本概位和作用,掌握临床检验的基本念、历史发展、现代特点以及质概念和特点,了解质量控制的重量控制体系要性重点内容临床检验的定义与分类,历史发展过程中的重大突破,现代临床检验的特点,以及质量控制的基本原则和方法临床检验的定义和重要性定义临床检验是指对来自人体的各种标本(如血液、尿液、体液等)进行物理、化学和生物学检测,并对结果进行分析和解释的医学技术临床诊断价值为疾病的早期发现、明确诊断、病情监测和预后评估提供客观依据,约70%的临床诊断决策依赖实验室检查结果治疗指导价值帮助医生选择合适的治疗方案,调整药物剂量,评估治疗效果,预防和减少药物不良反应预防医学价值临床检验的发展历史早期萌芽阶段自动化时代公元前400年,希波克拉底开始对尿液进行简单观察17世纪,20世纪50年代开始,自动分析仪器逐渐投入使用,大大提高了检显微镜的发明促进了微观检验的发展验效率和准确性70年代,酶免疫分析等新技术出现1234基础发展阶段分子生物学时代19世纪,化学分析方法应用于临床,尿糖检测、血液计数等技术20世纪80年代至今,PCR技术、基因芯片、质谱分析等分子生物相继出现20世纪初,血液生化检验开始应用于临床学和信息技术与临床检验深度融合,开启精准医学新纪元现代临床检验的特点信息化自动化检验信息系统(LIS)实现了从申请到报告的全流程管理,提高了工作效率,减少了错先进的自动分析仪器取代了大部分手工操误,便于数据存储和分析作,提高检验效率和准确性,一台现代自动分子化化仪器每小时可分析数百至数千个标本分子生物学技术广泛应用于临床检验,使疾病的诊断从宏观表现深入到分子水平,提高一体化了诊断的准确性和早期性即时化实验室整合了生化、免疫、血液学等多专业,形成统一的检验医学体系,为临床提供POCT(即时检验)技术使检验走出实验全面、系统的检验服务室,在患者旁边即可完成,缩短了检验周期,为急危重症患者提供及时诊断依据临床检验的质量控制内部质量控制在日常工作中使用质控品进行监测,确保检验结果的准确性和精密性外部质量评价参与区域或国家组织的室间质评,与其他实验室比对结果实验室认证按照ISO15189等标准进行实验室管理,提高整体质量水平质量控制是临床检验的生命线,贯穿于检验前、检验中和检验后的全过程好的质量控制体系能够确保检验结果的准确可靠,为临床医生提供有价值的决策依据临床检验实验室应当建立完善的质量管理体系,包括标准操作程序(SOP)、仪器设备管理、试剂管理、人员培训等多个方面第二章血液标本采集和处理本章总览血液标本采集与处理是临床检验的基础环节血液组成了解血液的基本组成和特性采集方法掌握静脉血和毛细血管血的采集技术处理流程标本的保存、运输和处理方法质量控制确保采集过程的规范和标本质量血液标本的采集和处理是临床检验的第一道关口,也是保证检验质量的关键环节据统计,约70%的实验室错误发生在分析前阶段,其中血液标本采集不当是主要原因之一正确掌握血液标本采集和处理技术,对于确保检验结果的准确性具有重要意义血液的组成全血组成有形成分血液由有形成分(约45%)和主要包括红细胞(
4.0-血浆(约55%)组成成年人
5.5×10¹²/L)、白细胞(
4.0-⁹血液总量约占体重的7-8%,男
10.0×10/L)和血小板(100-⁹性约5000ml,女性约4500ml300×10/L),其中红细胞占有形成分的99%以上血浆成分血浆由水(约92%)和溶质(约8%)组成,溶质包括蛋白质(白蛋白、球蛋白、纤维蛋白原)、电解质、代谢物、激素等上百种物质血液作为人体重要的运输系统,承担着运输氧气和营养物质、排除代谢废物、维持内环境稳定、参与免疫防御等多种功能了解血液的组成及各成分的功能,是理解血液学检验的基础,也有助于我们解释异常检验结果背后的病理生理机制血液标本的类型全血血清血浆含有血浆和所有有形成分的血液,常用全血凝固后分离出的淡黄色液体,不含全血经抗凝处理后,通过离心分离出的于血细胞计数、血型鉴定等项目采集有形成分和凝血因子常用于生化、免淡黄色液体,不含有形成分但含有凝血后通常加入抗凝剂如EDTA、肝素或枸橼疫、血清学检验采集时通常使用无添因子常用于凝血功能、D-二聚体等检酸钠,防止凝固加剂或含促凝剂的真空管测血液标本的选择取决于检验项目的要求不同的检验项目对血液标本类型有特定要求,使用不当可能导致检验结果错误例如,有些生化指标在血清和血浆中的结果存在差异,临床医生在解读结果时需要考虑这一因素采集时使用的真空管颜色编码系统有助于区分不同类型的血液标本静脉血采集技术采集前准备•核对患者信息•准备采血工具(真空采血管、采血针、持针器等)•佩戴手套,遵循标准防护原则穿刺部位选择与准备•优先选择前臂肘部的贵要静脉或正中静脉•使用70%酒精消毒穿刺部位,由内向外螺旋式擦拭•等待酒精完全干燥(约30秒)静脉穿刺与采血•绑扎止血带于肘部上方3-4cm处•固定静脉,针头与皮肤呈15-30°角穿刺•按照检验要求顺序更换采血管采血后处理•松开止血带,轻柔拔出针头•用干棉球按压穿刺点3-5分钟•轻轻混匀含抗凝剂的采血管(禁止剧烈震荡)毛细血管血采集技术适用情况适用于婴幼儿、静脉难以穿刺的患者、需要多次少量采血的场合以及某些特定检验项目(如血糖监测)采集部位准备成人常用指尖(无名指或中指),儿童常用脚跟外侧用温毛巾热敷穿刺部位30秒,促进血液循环穿刺与采血使用70%酒精消毒后,用采血针垂直穿刺,穿刺深度成人为
2.0-
2.5mm,婴儿为
1.0-
1.5mm擦去第一滴血,轻轻挤压采集后续血滴采血后处理采集足够量血液后,用干净棉球按压止血,指导患者抬高穿刺部位,必要时使用创可贴保护穿刺点毛细血管血采集简便快捷,痛感较轻,但注意采集的血液是毛细血管、静脉和组织液的混合物,其成分与静脉血略有差异过度挤压可能导致组织液稀释血液,影响检验结果准确性血液标本的处理和保存标本类型处理方法保存条件稳定时间全血轻轻混匀即可室温或4℃保存EDTA抗凝,血常规4小时内检测血清血液凝固后30分2-8℃保存大多数生化指标钟内离心稳定24小时(3000rpm,10分钟)血浆采集后立即轻轻2-8℃保存凝血指标4小时混匀,30分钟内内检测离心血液标本处理不当可能导致溶血、细胞变形或代谢继续,影响检验结果准确性对于特殊项目如血气分析,需要立即检测或使用冰水混合物保存;某些激素和药物需要冷冻保存;血细胞形态学检查需要尽快制备血涂片长期保存标本应考虑-20℃或-80℃冷冻保存,但某些项目可能因冻融过程受到影响血液标本采集的质量控制患者准备采集过程控制••明确患者身份信息(至少两项识别标正确选择采血管和采血顺序•志)确保血液与抗凝剂比例适当••告知患者采血前注意事项(如空腹要避免溶血、凝血和污染求)•了解影响检验结果的因素(如药物、运动等)标本传送与保存•及时传送标本到实验室(30分钟内)•运输过程中避免剧烈震荡•根据检验项目选择合适的保存条件血液标本采集的质量控制是保证检验结果准确可靠的前提据统计,约46-68%的检验错误发生在分析前阶段,其中标本采集和处理不当是主要原因建立标准操作程序,加强人员培训,落实责任制,是提高血液标本质量的关键措施采血人员应当熟练掌握采血技术,了解不同检验项目对标本的特殊要求第三章血液一般检验红细胞系检查血涂片检查2红细胞计数、血红蛋白、红细胞比容等参数测定包括涂片制备、染色和显微镜观察,可1评估血细胞形态白细胞系检查3白细胞计数及分类计数,评估免疫和炎症状态特殊检查5血小板检查4包括网织红细胞计数、红细胞沉降率等血小板计数和形态观察,反映凝血功能血液一般检验是临床最常用的基础检查之一,可以迅速获得反映患者血液状况的重要信息这些检查对于贫血、感染、白血病、出血性疾病等多种疾病的诊断和监测具有重要价值本章将系统介绍血液一般检验的基本方法和技术,为学习现代血液分析仪检验奠定基础血涂片的制备材料准备清洁载玻片和推片,EDTA抗凝全血(采集2小时内)滴血将小滴血液(约2mm直径)滴于载玻片距一端1cm处推片推片与载玻片成30-45°角,向后接触血滴,让血液沿接触边缘散开拖推匀速向前推动,形成长约3cm的均匀血膜,末端呈现羽毛状边缘干燥室温下自然晾干,避免加热或吹风制备高质量的血涂片是观察血细胞形态的关键理想的血涂片应当厚薄适中,从头到尾逐渐变薄,末端有羽毛状边缘涂片过厚会导致细胞重叠难以观察,过薄则可能造成细胞变形注意推片速度要均匀,过快会使涂片过短过薄,过慢则涂片过厚新鲜血液最适合制备涂片,存放过久可能出现细胞形态改变血涂片的染色技术13瑞特染色姬姆萨染色最常用的血涂片染色方法,也称Wright染色特别适合显示血液寄生虫,如疟原虫也可由伊红Y和美蓝组成,可显示血细胞的细胞质与瑞特染色联合使用,形成瑞-姬染色法和核结构5过氧化物酶染色用于鉴别髓系和淋巴系细胞,是白血病分型的重要染色方法瑞特染色是最常用的血涂片染色方法,其原理是利用酸性和碱性染料的不同亲和力,使细胞各结构呈现不同颜色正确的染色可显示红细胞呈粉红色至橘红色,中性粒细胞核呈紫色,细胞质内颗粒呈淡紫色至紫红色,嗜酸性粒细胞颗粒呈橘红色,嗜碱性粒细胞颗粒呈深蓝色至紫黑色,淋巴细胞核呈紫色,细胞质呈淡蓝色,血小板呈淡蓝色或紫红色血细胞计数板的结构和使用计数板结构使用方法常用的改良型Neubauer计数板由中央计数区和四周凹槽组成计数板使用前必须彻底清洁和干燥将盖玻片放置在计数板上,计数区由大小不等的方格组成,用于不同血细胞的计数使其紧贴计数区两侧的支持台•中央大方格(1mm²)分为25个中方格
1.用微量吸管吸取稀释后的血液样本•每个中方格又分为16个小方格
2.将吸管尖端紧靠盖玻片边缘,让液体缓慢流入计数室•四角大方格(每个1mm²)用于白细胞计数
3.避免气泡形成和溢出•中央大方格的5个中方格(常选择四角和中央)用于红细胞计
4.放置2-3分钟让细胞沉降数
5.在显微镜下低倍镜观察细胞分布是否均匀
6.转换到高倍镜进行细胞计数红细胞计数方法计算公式加样计数样本准备红细胞计数(/L)=计数的细胞总数×稀释倍数⁶将稀释后的血液加入计数板,选择中央大方格内×10÷计数面积mm²÷血室深度mm使用红细胞稀释液(生理盐水或Hayem液)将血的5个中方格(四角和中央)进行计数计数例如5个中方格计数共500个细胞,则红细胞计液稀释200倍取全血
0.02ml加入4ml稀释液时,位于左上和右下边线上的细胞计入,位于右⁶数=500×200×10÷
0.2÷
0.1=5×10¹²/L中,充分混匀上和左下边线上的细胞不计手工红细胞计数虽已逐渐被自动血液分析仪取代,但掌握其基本原理和方法仍有重要意义计数过程中应注意避免的主要误差来源包括稀释不准确、计数板清洁度不够、加样技术不当、计数规则不统一等正常参考范围男性
4.5-
5.5×10¹²/L,女性
4.0-
4.5×10¹²/L血红蛋白测定氰化高铁血红蛋白法最常用的方法,血红蛋白与氰化钾和亚铁氰化钾反应生成稳定的氰化高铁血红蛋白,在540nm波长处测定吸光度具有准确度高、稳定性好的特点酸性亚铁血红蛋白法血红蛋白在酸性条件下与亚铁试剂反应生成酸性亚铁血红蛋白,测定560nm波长处吸光度操作简便,但稳定性不如氰化高铁法比色法血液与稀盐酸混合形成酸性高铁血红蛋白,与标准比色液比较适用于基层医疗机构,但准确度低于分光光度法血红蛋白是红细胞中的主要蛋白质,负责氧气运输血红蛋白测定是贫血诊断的重要指标,也是评估红细胞生成和破坏的基础参数正常参考范围男性130-175g/L,女性115-150g/L影响因素包括年龄、性别、高原居住、妊娠等血红蛋白浓度与海拔高度呈正相关,每上升1000米,血红蛋白增加约4g/L红细胞比容测定微量离心法法Wintrobe最常用的方法,采用抗凝全血装入毛细管至约3/4处,一端封使用特制的Wintrobe管,加入抗凝全血,3000rpm离心30分闭,放入微量离心机离心5分钟(10000-12000rpm)离心后钟,读取红细胞柱高度用专用读数板测定红细胞柱高度占总高度的百分比特点特点•经典方法,历史悠久••操作简便,结果可靠需要样本量大(1ml左右)••样本量少,适用于儿科处理过程较为繁琐•可同时处理多个样本正常参考范围男性
0.40-
0.54,女性
0.37-
0.47红细胞比容(HCT)反映红细胞在全血中所占的体积比例,是评估贫血严重程度和监测治疗效果的重要指标HCT与血红蛋白水平密切相关,二者比值(HCT/Hb)约为3:1影响因素包括脱水(导致HCT假性升高)和过度水化(导致HCT假性降低)自动血液分析仪通常通过计算得出HCT值HCT=RBC×MCV/10红细胞平均指数计算指数名称计算公式参考范围临床意义平均红细胞体积HCTL/L÷80-100fL贫血分类的重要MCV RBC×10¹²/L×指标⁵10¹平均红细胞血红Hbg/L÷27-34pg反映单个红细胞蛋白含量MCH RBC×10¹²/L×携氧能力10¹²平均红细胞血红Hbg/L÷320-360g/L评估红细胞血红蛋白浓度MCHC HCTL/L蛋白饱和度红细胞体积分布红细胞体积大小
11.5-
14.5%反映红细胞大小宽度RDW变异系数不均一性红细胞平均指数是根据红细胞计数、血红蛋白和红细胞比容计算得出的参数,可以帮助判断贫血的类型和病因如MCV<80fL为小细胞贫血,常见于缺铁性贫血;MCV>100fL为大细胞贫血,常见于维生素B12或叶酸缺乏;RDW增高提示红细胞大小不均,常见于混合性贫血这些指数在现代血液分析仪中都能直接测得网织红细胞计数临床意义染色方法网织红细胞是未完全成熟的红细胞,常用超活性染料如新美蓝、亮亮蓝含有残存的核糖核蛋白(RNA)等,这些染料能与细胞内RNA结合网织红细胞计数反映骨髓造血功能形成蓝色颗粒或网状结构经典的和红细胞生成速率,是评估贫血恢方法是将等量血液与染料混合,复情况的敏感指标37℃孵育15-30分钟,制备涂片观察计数与计算在1000倍油镜下计数1000个红细胞中网织红细胞的数量,以百分比表示正常参考范围为
0.5%-
1.5%考虑到贫血患者红细胞减少,临床上常计算网织红细胞绝对值或校正网织红细胞计数网织红细胞在外周血中循环1-2天后成熟为成熟红细胞网织红细胞计数增高(>2%)提示骨髓红系增生活跃,见于溶血性贫血、急性失血后恢复期、有效治疗缺铁性贫血等;计数减低(<
0.5%)提示骨髓造血功能抑制,见于再生障碍性贫血、恶性肿瘤骨髓侵犯等现代血液分析仪可采用荧光染料标记RNA进行自动计数,更加准确便捷红细胞沉降率测定原理红细胞在静止不流动的血液中因重力作用而下沉,其下沉速度称为红细胞沉降率(ESR)当血浆中纤维蛋白原、球蛋白等增多时,会增强红细胞的聚集性,加快沉降速度法Westergren国际标准方法,取枸橼酸钠抗凝全血,加入专用管中,垂直放置1小时,测定红细胞柱顶端下降的距离(mm)正常参考范围男性0-15mm/h,女性0-20mm/h影响因素生理因素年龄(年龄增加ESR升高)、性别(女性高于男性)、妊娠(妊娠晚期升高)技术因素温度、管子倾斜度、血液抗凝比例不当等都会影响结果准确性临床应用ESR是反映机体炎症反应的非特异性指标,在感染、自身免疫性疾病、恶性肿瘤等多种疾病中升高特别适用于类风湿关节炎、颞动脉炎等疾病的活动性监测白细胞计数方法临床意义1反映机体感染、炎症和免疫状态手工计数法2使用白细胞稀释液和血细胞计数板操作步骤3稀释、加样、镜检计数、结果计算注意事项4避免常见误差,确保结果准确白细胞计数是临床最常用的实验室检查之一,对感染性疾病、白血病等疾病的诊断和监测具有重要价值手工法中,常用的白细胞稀释液有2%醋酸溶液,它可以溶解红细胞而保留白细胞,并可加入龙胆紫等染料使细胞核着色便于计数计数时使用计数板的四个角落大方格(各1mm²),计算公⁶⁹式为WBC/L=计数细胞数×稀释倍数÷计数面积mm²÷血室深度mm×10正常参考范围为
4.0-
10.0×10/L白细胞分类计数血小板计数方法直接法间接法使用相差显微镜和特制计数板直接计数血小板操作较复杂,但在染色血涂片上计数每1000个红细胞中血小板的数量,根据红可靠性高细胞计数推算血小板数••1%草酸铵稀释全血(稀释20倍)制备瑞特染色的血涂片••相差显微镜下观察计数油镜下计数血小板与红细胞比例••计算公式与红细胞计数相似PLT=血小板数/红细胞数×RBC⁹血小板是血液中最小的有形成分,直径2-4μm,无核,由骨髓巨核细胞胞质断裂形成正常人外周血血小板计数为100-300×10/L血小板在凝血过程中起关键作用,计数减少可导致出血倾向,计数过高则增加血栓风险影响血小板计数准确性的因素包括EDTA诱导的血小板聚集、血小板卫星现象(血小板附着在中性粒细胞周围)、巨大血小板(可被误认为是白细胞)等第四章血液分析仪检验本章概述学习目标随着科技发展,自动血液分析仪已成理解自动血液分析仪的基本原理,掌为血液学检验的主要工具本章将详握常见参数的临床意义,能够正确解细介绍血液分析仪的工作原理、主要读分析结果,并实施有效的质量控制参数、结果解读及质量控制方法主要内容电阻抗法和光散射法原理,血液分析仪参数解读,常见异常情况的处理,质量控制流程和方法自动血液分析仪极大地提高了血液检验的效率和准确性,目前已全面替代传统手工方法成为临床实验室的标准配置现代血液分析仪不仅能提供常规参数,还能检测更复杂的参数如网织红细胞、有核红细胞、未成熟粒细胞等,为临床诊断提供更全面的信息本章将帮助学生了解这一重要设备的工作原理和应用血液分析仪的工作原理电阻抗法光散射法比色法基于Coulter原理,血细胞通过激光照射血细胞时产生散射光,用于血红蛋白测定,将血液与带有电极的微孔时,会产生电前向散射反映细胞大小,侧向溶血剂混合后,血红蛋白转化阻变化,变化幅度与细胞体积散射反映细胞内部结构和颗粒为特定化合物,通过测量特定成正比,计数脉冲数即为细胞度,可用于白细胞分类结合波长的吸光度来计算血红蛋白数量适用于红细胞、白细胞细胞化学染色和特异性染料,浓度常用氰化高铁血红蛋白和血小板计数,并可测定细胞可进一步细分不同类型的白细法或无氰比色法体积胞荧光流式法新一代分析仪采用荧光染料标记细胞内RNA和DNA,结合流式细胞术技术,可更精确地进行白细胞分类和识别异常细胞,如未成熟粒细胞、异常淋巴细胞等血液分析仪的主要参数参数类别具体参数临床意义红细胞系RBC,Hb,HCT,MCV,评估贫血类型和严重程度MCH,MCHC,RDW白细胞系WBC,Neu%,Lym%,评估感染、炎症和免疫状Mon%,Eos%,Bas%及态其绝对值血小板系PLT,MPV,PDW,PCT评估止血功能和血小板生成其他参数RET%,NRBC,IG%,IPF评估骨髓功能和疾病特征现代血液分析仪可提供20-50种参数,除基本参数外,许多高端分析仪还提供研究参数,如网织红细胞血红蛋白含量CHr、血小板大细胞比率P-LCR、未成熟血小板比例IPF等这些参数对于早期疾病诊断和疗效监测具有重要价值例如,CHr是铁缺乏早期的敏感指标,IPF可早期反映血小板生成变化参数的参考范围可能因分析仪器型号、测定方法和实验室而异,应以本实验室建立的参考范围为准血液分析仪结果的解读12异常标志识别散点图评估熟悉仪器的异常标志系统,如星号*、感叹号!分析白细胞、红细胞和血小板的散点图或直方图,等,它们通常表示结果超出参考范围或存在分析异识别异常分布模式例如,白细胞散点图中异常区常某些仪器还会给出具体提示词,如Blast提域的细胞群可能提示存在异常细胞;血小板直方图示可能存在原始细胞的异常峰可能提示血小板聚集3参数关联分析综合分析相关参数,如贫血时需同时评估Hb、RBC、MCV、MCH、MCHC等,白细胞异常时需结合白细胞分类和形态学特征许多疾病有特征性的参数变化模式血液分析仪结果解读需要结合临床情况进行综合判断对于有异常标志的结果,特别是首次出现的严重异常,应进行镜检复核某些情况如严重溶血、高脂血症、寒冷球蛋白血症等可干扰仪器分析,导致假性结果应警惕delta检查异常(与患者既往结果相比变化过大),可能提示标本问题或病情急剧变化现代检验系统通常设有自动复检和人工复检规则,以确保结果可靠血液分析仪的质量控制质控品检测仪器维护每日运行高、中、低三个水平的质控品,监测仪器性能按照厂商建议进行日常、周期性和预防性维护,包括清洗、校准和功能检查质控图分析利用Levey-Jennings图监测质控结果,应用Westgard多规则判断系统性错误镜检复核5室间质评对异常结果进行镜检复核,验证仪器结果的准确性定期参加区域或国家组织的室间质量评价,与其他实验室比对血液分析仪质量控制是保证检验结果准确可靠的关键通过系统性的质控措施,可以及时发现仪器故障、试剂问题和操作错误质控品应与患者样本同样处理,质控结果应记录在质控图上,并根据Westgard规则判断是否超出控制范围当发现质控失控时,应立即采取纠正措施,并评估对患者结果的影响良好的质量控制体系还应包括定期的能力验证和操作人员培训第五章尿液检验本章概述学习要点•尿液检验是临床实验室最常见的检查之一,通过分析尿液的理化了解尿液生成的生理过程•特性和成分,可以获取肾脏和泌尿系统疾病的重要信息,同时反掌握不同尿液采集方法的适用情况映全身多种疾病的状态•熟悉尿液理学检查项目的操作技术•本章将系统介绍尿液的生成机制、标本采集方法、保存处理技理解尿液化学检查的原理和临床意义•术,以及各种尿液检查项目的原理、方法和临床意义掌握尿沉渣镜检的方法和结果解读•了解尿液分析仪的工作原理和应用尿液检验作为无创、简便、经济的检查方法,对肾脏疾病、泌尿系统感染、代谢性疾病等具有重要的诊断价值正确的标本采集和处理是获得可靠结果的基础,标准化的检查流程是保证结果一致性的关键尿液的生成机制肾小球滤过血液中的水分和小分子物质(如电解质、葡萄糖、氨基酸)通过肾小球滤过膜滤入肾小囊,形成原尿每天约180L原尿,含有与血浆相似的成分,但不含大分子蛋白和血细胞肾小管重吸收⁺⁻⁺近端小管重吸收约65%滤过物,包括水、Na、Cl、Ca²、葡萄糖、氨基酸等;亨利氏环⁺⁻⁺主要重吸收Na、Cl和Ca²;远端小管和集合管在抗利尿激素作用下重吸收水分肾小管分泌⁺⁺⁺小管细胞主动将某些物质从血液分泌到小管腔,包括H、K、NH4及某些药物和代谢产物此过程对维持酸碱平衡和排除代谢废物至关重要终尿形成经过上述过程,最终形成约
1.5L终尿,浓缩了约120倍终尿含有机体需要排出的代谢废物、过量的水和电解质以及某些药物代谢产物尿液生成过程受多种因素调节,包括肾血流量、肾小球滤过率、抗利尿激素、醛固酮和心房钠尿肽等了解尿液生成机制有助于理解各种尿液检查结果的生理和病理基础例如,血糖升高超过肾阈值(约10mmol/L)时出现尿糖;肾小球基底膜损伤可导致蛋白尿;肾小管功能障碍可影响电解质重吸收和分泌尿液标本的采集方法随机尿随时采集的尿液样本,适用于常规尿液分析、妊娠试验等采集方便但受饮食、活动等因素影响较大晨尿(清晨第一次排尿)浓度较高,可提高异常成分的检出率中段尿排尿开始后丢弃初段尿液,采集中间部分,再丢弃末段此法可减少尿道口污染,是常规尿液检查的首选方法采集前应清洁外生殖器,女性应分开大阴唇避免阴道分泌物污染定时尿在规定时间内(如2小时、12小时)收集全部尿液,用于某些特殊检测如葡萄糖耐量试验期间的尿糖监测开始前应排空膀胱并记录时间,期间所有尿液都要收集小时尿24连续24小时收集全部尿液,用于定量分析如尿蛋白、尿肌酐、尿钙等从早晨第一次排尿开始(丢弃),至第二天同一时间的排尿(收集)结束应保持低温并添加适当防腐剂特殊情况下,可能需要导管采尿或耻骨上膀胱穿刺采尿导管采尿适用于无法自行排尿的患者,但有引入感染的风险;膀胱穿刺适用于需无菌尿样的婴儿或特殊情况,应由专业医师操作采集后的尿液应及时送检,如无法立即检测,可在2-8℃保存不超过8小时,或加入防腐剂(如甲醛、甲苯或硼砂)延长保存时间尿液标本的保存和处理容器选择使用干净、无污染的专用容器,一般采用广口、透明、带盖的塑料容器保存条件尿液应在采集后2小时内检测,如需延迟,应在2-8℃冷藏保存防腐处理长时间保存可添加适当防腐剂,但注意不同防腐剂对检测项目的影响尿液标本在室温下不稳定,细菌繁殖可导致尿素分解为氨,使pH升高;红细胞可溶解消失;白细胞可发生自溶;管型可溶解变形不同检查项目对标本处理有特殊要求尿沉渣检查应使用新鲜尿液;尿蛋白定量需酸化防止蛋白分解;尿钙测定需添加盐酸防止沉淀;尿胆原素检测应避光保存;细菌培养需无菌采集和保存24小时尿收集是临床常用的特殊采集方法,适用于肾功能评估和代谢物定量,全程需冷藏并添加适当防腐剂尿液理学检查检查项目正常表现异常表现及临床意义尿量成人24小时1000-2000ml多尿2500ml/d:糖尿病、尿崩症;少尿400ml/d:急性肾损伤颜色淡黄色至琥珀色红色:血尿、血红蛋白尿;深黄:胆红素增多;乳白:脓尿、乳糜尿透明度清亮透明浑浊:含大量细胞、细菌、结晶、蛋白质等气味轻微氨味氨味强烈:细菌分解尿素;水果味:酮症;腐臭味:某些代谢病比重
1.010-
1.025增高
1.030:脱水、糖尿病;固定低比重
1.010:肾浓缩功能减退尿液理学检查是尿液分析的第一步,通过肉眼观察和简单仪器测定,可获取尿液的基本物理特性尿比重反映肾脏浓缩和稀释功能,可用尿比重计或折射仪测定现代尿液分析仪通常使用折射法自动测定比重比重测定受多种因素影响,如室温(温度升高,比重降低)、蛋白质(存在大量蛋白质时比重升高)、葡萄糖(高血糖时尿比重升高)等理学检查虽然简单,但往往可提供疾病的初步线索,指导后续检查方向尿液化学检查项目
(一)尿值尿蛋白pH正常范围
4.5-
8.0,平均
6.0正常阴性(<
0.15g/24h)检测方法pH试纸或尿试纸条检测方法试纸法、磺柳酸法、定量测定临床意义临床意义••酸性尿pH<
5.5高蛋白饮食、酮症、痛风、发热生理性蛋白尿剧烈运动、发热、寒冷刺激、体位性••碱性尿pH>
7.0素食、尿路感染、碱性药物、代谢性碱中毒病理性蛋白尿肾小球疾病、肾小管疾病、多发性骨髓瘤注意事项尿液放置时间过长,细菌分解尿素产生氨,使pH升高试纸法主要检测白蛋白,对球蛋白和轻链敏感性低尿液化学检查是尿液分析的重要组成部分,通常使用干化学试纸条进行半定量检测试纸条含有多个反应区,分别对应不同的检测项目,通过颜色变化判断结果现代尿液分析仪可自动读取试纸条颜色变化,减少主观判读误差影响尿化学检查准确性的因素包括检测时间(尿液应在2小时内检测)、药物干扰(某些药物可影响特定项目的检测)、检测方法(不同方法灵敏度和特异性不同)尿蛋白定量通常采用24小时尿收集,更准确反映肾脏损伤程度尿液化学检查项目
(二)尿糖尿酮体尿隐血尿胆红素和尿胆原正常阴性葡萄糖肾阈值约正常阴性碳水化合物利用正常阴性试纸法基于过氧正常尿胆红素阴性,尿胆原10mmol/L,超过则出现尿障碍时,脂肪分解增加产生酮化物酶活性,可检测完整红细<17μmol/d胆红素增高见糖常见于糖尿病、肾小管功体见于糖尿病酮症酸中毒、胞、游离血红蛋白和肌红蛋于肝胆疾病;尿胆原增高见于能障碍、妊娠检测方法包括饥饿、剧烈运动、高脂低碳水白阳性见于肾炎、泌尿系结溶血性疾病、肝细胞损伤;尿试纸法(葡萄糖氧化酶法)和化合物饮食检测使用石、肿瘤、外伤等假阳性可胆原减少或消失见于胆道完全Benedict试验Rothera试验或试纸法见于强氧化剂、微生物过氧化阻塞检测使用Ehrlich反应或物酶试纸法尿液化学检查对多种疾病具有重要诊断价值尿糖检测是糖尿病筛查和监测的简便方法,但受多种因素影响,如肾阈值个体差异、其他还原物质干扰等尿酮体检测对糖尿病酮症酸中毒的早期发现和监测至关重要尿隐血是泌尿系统疾病的重要筛查指标,阳性结果应结合尿沉渣镜检进一步明确出血来源尿中胆红素和尿胆原变化有助于黄疸的鉴别诊断,尿胆红素阳性提示肝胆疾病,而溶血性疾病中尿胆红素通常阴性但尿胆原增高尿沉渣镜检尿沉渣镜检是观察尿液中有形成分的重要方法,可检测红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、结晶等标准操作为取10ml新鲜尿液,离心5分钟(1500-2000rpm),弃去上清液,保留约
0.5ml沉渣,轻轻混匀后取一滴于载玻片,盖上盖玻片,先用低倍镜扫描,再用高倍镜观察细节结果可用半定量方式报告,如每高倍视野5-8个红细胞红细胞形态对判断出血部位有帮助,变形红细胞提示肾小球来源;管型是肾小管腔内形成的蛋白质凝固物,不同类型的管型反映不同的肾脏病理变化尿液分析仪的使用样本准备确保尿液充分混匀,避免气泡和杂质仪器检查开机自检,确认试纸条和试剂充足质控操作运行质控液验证仪器性能样本检测按操作指南加载样本,启动检测程序结果解读分析报告,注意异常项目和提示现代尿液分析仪通常包含两部分功能干化学分析和尿沉渣分析干化学分析使用反射光度法自动读取试纸条颜色变化,比人工判读更精确一致;尿沉渣分析使用流动细胞术、图像识别技术自动计数和分类有形成分全自动尿液分析仪可在几分钟内完成全面尿液检查,大大提高了工作效率和结果准确性然而,某些复杂或异常情况仍需人工镜检确认,如异常细胞、特殊结晶等仪器使用过程中应注意定期维护和质量控制,包括日常维护、质控品检测、定期校准和室间质评等第六章粪便检验章节概述学习目标粪便检验是评估消化系统功能和掌握粪便标本的正确采集和处理疾病的重要方法,通过检查粪便方法,熟悉粪便常规检查的内容的性状、成分和寄生虫等,可获和技术,了解粪便隐血试验和寄取消化道疾病的有价值信息生虫检查的临床应用主要内容本章将详细介绍粪便标本采集技术、常规检查方法、隐血试验原理和操作,以及常见寄生虫卵和虫体的形态特征及检查方法粪便检验在消化系统疾病诊断中具有重要价值,特别是消化道出血、感染、吸收不良和寄生虫病的诊断虽然近年来内镜和影像学检查发展迅速,但粪便检验因其简便、无创和经济的特点,仍是基层医疗机构和常规体检的重要项目规范的检验流程和标准化的判读标准对于提高结果准确性至关重要粪便标本的采集和处理采集容器准备1使用干净、无菌、带盖的专用粪便采集容器避免使用含有防腐剂或消毒剂的容器,防止影响检测结果采集时机选择2一般选择晨起第一次排便,避免在服用泻药、钡餐检查或月经期间采集寄生虫检查应连续采集3次以提高检出率标本采集方法3指导患者排便于清洁容器中,使用专用勺采集粪便不同部位(特别是有粘液、脓血部分)的样本,总量约花生米大小(3-5g)避免与尿液、厕纸和消毒剂混合标本保存和传送4采集后立即送检,如无法立即检测,可在2-8℃冷藏保存,但不宜超过12小时某些特殊检查(如脂肪、淀粉)需使用新鲜标本粪便标本采集和处理的质量直接影响检验结果对于特殊检查项目,需采取相应措施隐血试验前3天应避免红肉、动物血制品和含维生素C食物,停用阿司匹林等药物;寄生虫检查应避免使用泻药和抗寄生虫药物;脂肪检查前应进行高脂饮食;难以取到的标本(如无法自行排便的住院患者)可采用肛门指检取样标本信息标签应清楚标明患者姓名、ID、采集时间和特殊要求等信息粪便常规检查肉眼观察显微镜检查检查粪便的性状、颜色、气味、黏液、脓血、虫体等观察粪便中的消化与非消化成分、细胞和微生物等••性状正常为成形软便;稀水样见于腹泻;硬球状见于便秘红细胞5个/HP提示消化道出血,需鉴别来源••颜色正常为黄褐色;黑色提示上消化道出血;白陶土色提白细胞大量提示肠道感染性炎症,特别是细菌性•示胆道阻塞脂肪球大量提示脂肪消化吸收不良••气味腥臭味见于蛋白质腐败;酸臭味见于碳水化合物发酵肌纤维大量提示蛋白质消化不良••黏液大量黏液提示结肠炎或肠易激综合征淀粉颗粒大量提示碳水化合物消化不良••脓血见于细菌性痢疾、溃疡性结肠炎等真菌大量念珠菌可见于抗生素使用后粪便常规检查是评估消化系统功能的基础检查,可提供消化道炎症、出血、消化吸收功能和微生物平衡等信息显微镜检查时,通常取少量粪便与生理盐水混合制备湿片,或使用碘液染色观察淀粉颗粒,苏丹III染色观察脂肪正常情况下,粪便中不应含有或仅含少量未消化食物残渣,大量出现提示消化功能障碍;大量白细胞(特别是中性粒细胞)提示感染性腹泻,细菌性痢疾尤为明显粪便隐血试验化学法免疫法基于血红蛋白过氧化物酶样活性,包括愈基于抗原抗体反应,特异性检测人血红蛋2创木脂试验、邻联甲苯胺试验白,包括金胶体法、乳胶凝集法结果判断显微镜法43结合临床症状、饮食情况和检测方法综合直接观察红细胞,只适用于新鲜粪便和下分析消化道出血粪便隐血试验是检测肉眼不可见的消化道出血的重要方法,广泛用于消化道肿瘤的筛查化学法灵敏度高但特异性较低,易受饮食(红肉、动物血制品)、药物(阿司匹林、铁剂)和过氧化物酶(蔬菜、细菌)影响,需严格控制饮食;免疫法特异性高,只对人血红蛋白有反应,不受饮食影响,但不能检测上消化道出血(血红蛋白在消化道中降解)临床上,化学法多用于初筛,阳性结果再进行免疫法确认,必要时结合内镜检查明确出血部位对于结肠癌高危人群,建议每年进行粪便隐血筛查粪便寄生虫检查蛔虫卵钩虫卵贾第鞭毛虫椭圆形,棕黄色,外层蛋白膜呈疣状凸起椭圆形,无色透明,卵壳薄,内含4-8个卵裂梨形,有4对鞭毛,形如笑脸常引起腹中国常见肠道寄生虫,主要通过污染的蔬菜球通过皮肤接触受污染的土壤感染,可导泻、腹痛和吸收不良,在儿童中尤为常见水果传播致缺铁性贫血粪便寄生虫检查是诊断肠道寄生虫病的重要方法常用的检查方法包括直接涂片法(简便但检出率低)、集卵法(浮聚法和沉淀法,提高检出率)、培养法(钩虫幼虫培养)和免疫学方法(抗原检测和血清学)影响检出率的主要因素有粪便新鲜度、检查次数(建议连续3次)、检查方法选择和检验者经验对于特殊寄生虫,需采用相应检查方法阿米巴原虫需观察活动滋养体;鞭毛虫需制备碘液染色片;绦虫需寻找节片和头节;血吸虫需特别寻找虫卵随着生活条件改善和公共卫生水平提高,中国肠道寄生虫感染率显著下降,但在农村地区和特定人群中仍需重视第七章体液检验胸腔积液腹水鉴别渗出液与漏出液的重要诊断依据肝硬化、肿瘤等多种疾病的检查指标脑脊液关节液中枢神经系统疾病的重要检查材料关节疾病诊断的特殊检验材料2314体液检验是指对人体除血液和尿液外的其他体液进行的实验室检查,包括浆膜腔积液(胸腔积液、腹水、心包积液)、脑脊液、关节液、羊水等这些体液在正常生理状态下分泌量有限,但在特定疾病时增多体液检验对许多疾病的诊断、鉴别诊断和治疗监测具有独特价值与其他标本相比,体液标本具有采集难度大、数量有限、不可重复获取、成分复杂且易变质等特点,因此需要特别重视标本的正确采集、保存和及时检测脑脊液检查检查项目正常值临床意义外观无色透明混浊细胞增多;血性蛛网膜下腔出血;黄色黄疸或蛋白增高₂压力80-180mmH O增高颅内压增高(脑肿瘤、脑膜炎);降低脑脊液漏、脱水细胞计数≤5个/μL,全为淋巴细胞细胞增多炎症、感染、肿瘤;中性粒细胞增多细菌性脑膜炎;淋巴细胞增多病毒性脑膜炎蛋白质
0.15-
0.45g/L增高血脑屏障破坏(感染、肿瘤);降低脑脊液分泌过多葡萄糖
2.5-
4.5mmol/L(血糖的60-80%)降低细菌性脑膜炎、结核性脑膜炎、某些肿瘤;增高高血糖氯化物120-130mmol/L降低结核性脑膜炎(典型);增高尿毒症脑脊液检查是神经系统疾病诊断的重要手段,通常通过腰椎穿刺获取标本应立即检测,细胞计数采用专用计数板,可使用瑞特染色鉴别细胞类型特殊检查项目包括墨汁染色(隐球菌性脑膜炎)、抗酸染色(结核性脑膜炎)、细菌培养和药敏试验脑脊液分析可根据细胞学和生化特点将脑膜炎分为化脓性(细菌性)、结核性、病毒性和真菌性,对治疗选择有重要指导意义近年来,脑脊液特异性蛋白如β淀粉样蛋白、tau蛋白的检测对神经退行性疾病诊断有重要价值胸腔积液检查渗出液与漏出液鉴别特殊检查项目Light标准(符合任一条即为渗出液)糖降低见于结核、类风湿性胸膜炎和恶性肿瘤•胸腔积液/血清蛋白比值
0.5细胞学检查恶性细胞阳性为肿瘤诊断的金标准•胸腔积液/血清LDH比值
0.6腺苷脱氨酶ADA45U/L高度提示结核性胸膜炎•胸腔积液LDH血清LDH正常上限的2/3肿瘤标志物CEA、CA125等增高提示恶性胸腔积液其他辅助指标pH值
7.30提示复杂性积液,需胸腔引流•胆固醇
1.55mmol/L提示渗出液•胸腔积液/血清白蛋白梯度
1.2g/dL提示渗出液胸腔积液/血清胆固醇比值
0.3提示渗出液胸腔积液检查对胸膜疾病的诊断和鉴别诊断有重要价值漏出液常见于心力衰竭、肝硬化、肾病综合征等,主要是由于静水压力或胶体渗透压改变;渗出液常见于炎症、肿瘤、结核等,是由于胸膜通透性增加细胞学检查对鉴别病因有重要意义中性粒细胞为主提示急性感染;淋巴细胞为主提示结核或肿瘤;嗜酸性粒细胞增多提示过敏或寄生虫感染;间皮细胞减少提示胸膜受累对于诊断不明的胸腔积液,可考虑胸腔镜检查和胸膜活检以明确病因腹水检查外观检查清亮淡黄漏出液;浑浊感染;乳糜状乳糜腹水;血性肿瘤或结核常规检验2比重、蛋白质、细胞计数分类、LDH、葡萄糖、碱性磷酸酶测定特殊检验细菌培养、肿瘤细胞检查、结核菌检查、淀粉酶测定鉴别诊断4渗出液vs漏出液;感染性vs无菌性;恶性vs良性腹水是腹腔内异常积聚的液体,常见于肝硬化、肿瘤、结核性腹膜炎等疾病与胸腔积液类似,腹水也分为渗出液和漏出液,鉴别标准基本相同肝硬化腹水的特点是蛋白含量低(25g/L),血清-腹水白蛋白梯度(SAAG)>11g/L,细胞数少且以淋巴细胞为主;腹腔感染时细胞数增多,中性粒细胞>250/mm³,可见细菌;恶性腹水常呈血性或乳糜样,细胞学检查可见恶性细胞;胰腺炎引起的腹水淀粉酶明显升高对于病因不明的腹水,可行腹腔镜检查和腹膜活检以明确诊断关节液检查外观分析正常关节液为无色透明或淡黄色透明,黏稠度高炎症时变为浑浊,黏稠度降低;感染时可呈脓性;创伤性关节炎可见血性细胞学检查正常关节液白细胞计数<200/μL,以单核细胞为主非炎症性关节病<2000/μL;炎症性关节炎2000-50000/μL,以中性粒细胞为主;感染性关节炎>50000/μL,中性粒细胞>90%晶体检查偏振光显微镜下尿酸盐晶体呈针状,强负双折光性;焦磷酸钙晶体呈菱形,弱正双折光性前者见于痛风,后者见于假痛风生化检查葡萄糖降低(<40mg/dL)提示感染;蛋白质增高(>3g/dL)提示炎症;乳酸脱氢酶和补体升高见于类风湿关节炎关节液检查是关节疾病诊断的重要手段,采集后应立即检测或适当保存根据检查结果,可将关节液分为非炎症性(Ⅰ型)、炎症性(Ⅱ型)、化脓性(Ⅲ型)和出血性(Ⅳ型)四种类型Ⅰ型见于骨关节炎、创伤性关节炎;Ⅱ型见于类风湿关节炎、痛风、假痛风;Ⅲ型见于感染性关节炎;Ⅳ型见于外伤或出血性疾病细菌培养对感染性关节炎的诊断至关重要,应在无菌条件下采集标本并立即接种培养基近年来,关节液中细胞因子、自身抗体和分子生物学检测为关节疾病的研究提供了新方法第八章生殖道分泌物检验男性生殖道分泌物女性生殖道分泌物检验方法主要包括精液和前列腺液检查,主要包括阴道分泌物检查,用于包括常规检查(显微镜、理化检用于评估男性生育能力和诊断生诊断阴道炎、宫颈炎和性传播疾查)、微生物学检查(涂片染殖系统感染与炎症病等色、培养)和其他特殊检查(细胞学、分子生物学方法)临床应用对不孕不育、生殖道感染和某些性传播疾病的诊断与监测具有重要价值生殖道分泌物检验是评估生殖系统健康状况和诊断相关疾病的重要手段这些检查对于生殖道感染、不孕不育和性传播疾病的诊断和治疗监测具有独特价值生殖道分泌物标本的采集需要特别注意无菌操作和避免污染,标本保存条件和时间也直接影响检测结果的准确性随着分子生物学技术的发展,PCR、基因芯片等新技术在生殖道病原体检测中的应用越来越广泛,大大提高了检测的敏感性和特异性精液检查检查项目参考值(WHO第5版标准)临床意义外观灰白色,黏稠黄色感染;红色血精液化时间≤60分钟延长提示前列腺或精囊功能异常pH值
7.2-
8.0<
7.2提示精囊功能不全精液量≥
1.5ml过低可能影响生育⁶⁶精子浓度≥15×10/ml<15×10/ml为少精子症⁶总精子数≥39×10/次射精低于参考值可影响生育能力前向运动精子比例≥32%降低影响精子穿透能力正常形态精子比例≥4%异常形态增多影响受精能力活率≥58%低活率提示精子质量下降精液检查是评估男性生育能力的基本方法,通常采用手淫法采集标本,要求禁欲2-7天标本应在采集后60分钟内完成常规检查,精子活力可用计算机辅助精子分析系统CASA客观评估除常规分析外,特殊检查还包括精子功能测试(顶体反应、透明质酸结合试验)、抗精子抗体测定、精子DNA完整性评估等异常结果解释需结合临床情况,单次检查阳性不一定代表不育,通常需要2-3次检查结果异常才能确诊精液分析结果受多种因素影响,包括禁欲时间、采集方法、环境温度和检验者经验等前列腺液检查采集方法通常由医师进行直肠前列腺按摩(DRE)获取患者排空膀胱后,医师用手指通过直肠按摩前列腺,使前列腺液从尿道口排出,用无菌容器收集常规检查正常前列腺液为乳白色半透明,pH值
6.5-
7.0,镜检见卵磷脂小体(卵圆形半透明颗粒)较多,白细胞≤10个/HP炎症时液体混浊,白细胞增多,卵磷脂小体减少微生物学检查革兰染色观察细菌类型和数量,必要时进行细菌培养和药敏试验常见病原体包括大肠埃希菌、肠球菌、铜绿假单胞菌等,非特异性病原体如衣原体、支原体也应考虑生化检查锌、果糖、酸性磷酸酶等指标可反映前列腺分泌功能慢性前列腺炎时锌含量降低,果糖含量可变,酸性磷酸酶活性可能降低前列腺液检查是诊断前列腺炎和评估前列腺功能的重要方法前列腺炎按NIH分类可分为急性细菌性、慢性细菌性、慢性非细菌性和无症状性前列腺炎细菌性前列腺炎诊断标准为前列腺液中白细胞10个/HP且细菌培养阳性非细菌性前列腺炎表现为白细胞增多但无病原体检出,可能与免疫因素、尿液返流和盆底肌功能障碍有关前列腺液检查结果的解释需结合临床症状和其他检查如尿液分析、超声检查等综合判断阴道分泌物检查标本采集显微镜检查使用无菌拭子从阴道后穹窿或病变部位采集分泌物采集前避免阴道湿片法可观察到阴道上皮细胞、白细胞和微生物正常见少量阴道冲洗、使用药物或性生活,月经期间不宜采集多采集3份标本用上皮细胞和乳酸杆菌;滴虫性阴道炎见活动的阴道毛滴虫;霉菌性阴于直接镜检、pH值测定和胺试验、微生物培养道炎见菌丝和芽孢常规检查革兰染色细菌性阴道病见线索细胞(被革兰阴性杆菌覆盖的上皮细胞);淋球菌见胞内革兰阴性双球菌观察分泌物的量、色、质、气味等正常阴道分泌物呈白色稀薄黏液特殊检查状,无异味;滴虫性阴道炎呈黄绿色泡沫状;霉菌性阴道炎呈白色豆腐渣样;细菌性阴道病呈灰白色均质鱼腥味pH值正常<
4.5;滴虫性阴道炎和细菌性阴道病>
4.5胺试验10%KOH可释放鱼腥味,阳性提示细菌性阴道病阴道分泌物检查是诊断阴道炎和宫颈炎的重要方法根据常见病原体,阴道炎可分为细菌性阴道病(加德纳菌为主)、霉菌性阴道炎(主要为白色念珠菌)和滴虫性阴道炎(阴道毛滴虫)诊断通常结合临床表现和实验室检查细菌性阴道病诊断标准(Amsel标准)为符合以下4项中3项
①均匀灰白色分泌物;
②阴道pH值>
4.5;
③胺试验阳性;
④显微镜下见线索细胞性传播疾病如淋病、衣原体感染需进行特殊检测,如核酸扩增试验NAAT,敏感性和特异性更高第九章临床细胞学检验章节概述学习目标临床细胞学检验是通过对脱落细胞和穿理解细胞学检查的基本原理和应用范刺获取的细胞进行形态学检查,为疾病围,掌握标本采集和制备的基本技术,诊断提供证据的技术本章将介绍细胞熟悉常见细胞学检查项目的临床意义和学检验的基本原理、标本制备方法和常结果解读见检查项目主要内容细胞学检查的基本原理和分类,标本的采集、处理和染色技术,常见检查项目如宫颈细胞学检查、痰液细胞学检查、体液细胞学检查和穿刺细胞学检查等临床细胞学检验在肿瘤早期诊断和筛查中具有重要价值与组织病理学相比,细胞学检查创伤小、操作简便、结果快速,特别适合大规模筛查和难以获取组织标本的情况细胞学检查的局限性在于无法观察组织结构,某些情况下诊断准确性较低,常需与组织病理学检查互补随着液基细胞学、免疫细胞化学和分子生物学技术的引入,现代细胞学检验的准确性和应用范围不断扩大细胞学检查的基本原理形态学原理细胞病理学基础通过观察细胞的大小、形态、染色特疾病状态下,细胞形态会发生特征性性、核质比和排列方式等特征,判断变化炎症时可见炎性细胞浸润和上细胞的正常与异常正常细胞具有规皮细胞反应性改变;癌前病变表现为则的形态和均匀的染色性,而肿瘤细不典型增生;恶性肿瘤细胞具有明显胞通常表现为核增大、核质比增高、的异型性和多形性这些变化是细胞染色质粗糙等异常特征学诊断的基础检查类型根据标本来源可分为脱落细胞学检查(如宫颈细胞学、痰液细胞学)和穿刺细胞学检查(如细针穿刺、刷检)前者主要用于筛查,后者用于诊断根据处理方法可分为常规涂片和液基细胞学技术细胞学检查是基于细胞形态学变化进行疾病诊断的方法不同于组织病理学检查需要完整的组织结构,细胞学检查主要观察单个细胞及小细胞团的特征正常细胞向恶性细胞的转变通常经历多个阶段,包括反应性改变、不典型增生和原位癌等熟练的细胞学检验人员需要能够识别这些形态学特征,并结合临床信息做出准确判断现代细胞学检查已不局限于形态学观察,还结合免疫细胞化学、流式细胞术和分子生物学等技术,提高诊断的敏感性和特异性细胞学标本的制备和染色标本采集根据检查部位选择合适的工具和方法宫颈细胞学采用宫颈刷或刮板;痰液为自然咳出或诱导咳痰;穿刺细胞学使用细针穿刺抽吸;体液标本通过抽取或引流获得采集时应避免污染和细胞变性标本处理传统涂片法将获取的细胞直接涂于载玻片上,立即固定(95%酒精或喷雾固定剂)以防细胞变形液基细胞学将标本放入保存液中,通过特殊处理去除血液、黏液等干扰物质,制备单层细胞涂片,减少重叠和背景干扰染色方法Papanicolaou染色最常用的细胞学染色方法,可显示细胞核和细胞质的精细结构,细胞核呈蓝色至紫色,细胞质根据细胞成熟度呈现不同颜色瑞特-姬姆萨染色常用于血液和骨髓细胞学检查免疫细胞化学染色用于特殊标记,如鉴别肿瘤类型质量控制标本制备的质量直接影响诊断准确性良好标本应具备足够数量的目标细胞,细胞保存完好无变形,染色适当且背景清晰每个实验室应建立标准化的操作流程和质量控制体系,包括技术培训、双重阅片和定期能力评估液基细胞学技术是传统涂片的改进,能提供更清晰的细胞形态,减少不满意标本率,并可用剩余标本进行HPV检测等分子生物学检查但成本较高,需要特殊设备和试剂染色过程中,酸性染料(如伊红)与碱性细胞质成分结合呈红色,碱性染料(如苏木精)与酸性核成分结合呈蓝色,这种双重染色使细胞各组成部分区分明显标本制备中常见问题包括固定不当导致细胞变形、涂片过厚造成细胞重叠、染色不均匀等,这些都会影响诊断准确性常见细胞学检查项目宫颈细胞学检查痰液细胞学检查穿刺细胞学检查主要用于宫颈癌筛查,可检出宫颈上皮内瘤变和早用于肺癌筛查和诊断,特别是中央型肺癌连续3通过细针穿刺获取细胞样本,常用于乳腺、甲状腺、期浸润癌结果通常采用Bethesda系统报告,包天清晨深部咳痰可提高检出率肺癌细胞表现为核淋巴结和软组织肿块等检查是术前诊断的重要方括上皮细胞异常(ASC-US、LSIL、HSIL、鳞状细大、染色质粗糙、核仁明显等特征敏感性受肿瘤法,能区分良恶性病变并指导治疗方案准确性依胞癌)和腺细胞异常与HPV检测联合使用可提高位置、分化程度和标本质量影响赖穿刺技术和细胞学解读经验筛查敏感性体液细胞学检查包括胸腔积液、腹水、脑脊液等,对恶性肿瘤转移诊断具有重要价值胸腔积液和腹水中的恶性细胞常形成细胞团块,具有典型的异型性特征尿液细胞学检查主要用于尿路上皮癌的筛查和监测,特别是膀胱癌膀胱冲洗液细胞学比自然排尿的检出率更高随着分子生物学技术发展,细胞学检查已扩展到基因和蛋白质水平,如荧光原位杂交FISH检测染色体异常,免疫细胞化学检测特异性标志物等,进一步提高了诊断的特异性和敏感性课程总结与展望质量意识知识体系建立全面质量管理理念,确保检验结果准系统掌握临床检验的基本理论和操作技能确可靠发展方向临床思维把握自动化、信息化和精准医学的发展趋培养结合临床解读检验结果的能力势《临床检验基础》课程已系统介绍了从血液、尿液到各种体液和分泌物检验的基本理论和技术临床检验是现代医学的重要支柱,随着科技发展不断创新未来趋势包括检验自动化和智能化程度提高,减少人工干预;大数据和人工智能技术助力检验结果解读和辅助诊断;分子诊断和基因检测在精准医疗中发挥更大作用;即时检验(POCT)技术使检验走向床旁,更好服务临床作为医学检验人员,应持续学习新知识和技术,保持严谨科学态度,为患者健康和医疗决策提供可靠的实验室依据。
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