《实验室基础操作》课件

实验室基础操作欢迎参加实验室基础操作课程！本课程旨在为初学者与实验室新手提供全面的实验室操作知识和技能培训我们将系统地介绍实验室安全规范、常用器材使用方法、基础操作技巧以及紧急情况处理等内容本课程结构与安排实验室文化与规范科学诚信与职业标准实验室安全个人防护与应急处理基础实验器材量器、天平等使用方法基本操作技能溶液配制、滴定等专项技术与总结微生物操作、案例分析实验室文化与职业规范科学诚信实验人员行为标准科学诚信是实验室工作的基石，要求我们在研究过程中保持诚实验室人员应遵循专业、负责和协作的行为准则这包括认真执实、客观和严谨这包括准确记录实验数据、如实报告研究结行实验方案、细致记录实验过程、妥善维护和使用实验设备，以果、尊重他人的知识产权，以及避免任何形式的数据造假或篡及保持实验室的整洁有序改良好的科学诚信不仅关系到个人的学术声誉，也直接影响到整个科学共同体的信任基础和研究成果的可靠性实验室安全基础化学品危险标识生物危害标识实验室中的化学品标签通常包含生物危害标志通常为黄色或橙色系统的象形图，如腐蚀性、背景的黑色三叶形状，表示存在GHS易燃性、毒性等每种标识都有潜在的生物感染风险不同级别特定含义，实验人员必须熟悉这的生物危害需要相应的防护措施些符号以便正确处理相应物质和处理程序辐射危害标识辐射危害标志为黄色背景上的黑色三叶符号，警示存在电离辐射在有此标志的区域工作需要特殊防护装备和操作许可个人防护装备（）PPE实验服实验服应为长袖设计，材质需耐化学品侵蚀，穿戴时应扣好所有纽扣实验服不应带出实验室，以防将有害物质带到其他区域护目镜护目镜必须能防止液体飞溅和气体渗入，应在任何可能产生飞溅或有害气体的实验中佩戴近视人员可选择能覆盖眼镜的特制护目镜手套不同材质的手套适用于不同类型的化学品乳胶手套适合一般操作，丁腈手套适合有机溶剂，热耐受手套用于高温操作使用后应正确摘除避免交叉污染口罩与呼吸器实验室常见危险源化学危险源生物危险源•强酸强碱造成的腐蚀病原微生物感染••有机溶剂的易燃性生物毒素•重金属和有毒化学品•过敏原暴露•风险识别方法物理危险源使用风险评估矩阵进行系统评估，将危险源•机械设备伤害按照发生概率和危害程度进行分类定期检•电气安全隐患查实验室环境，更新安全数据表，并进行针•高温高压设备对性培训以提高风险意识实验室入门守则进入前准备签到登记实验期间离开程序•穿戴适当的个人防护装备•填写实验室使用记录•严格遵循操作规程清理工作台面••确认实验授权和培训资格•了解当天实验室状况•保持工作区整洁•妥善处理废弃物•放置食品饮料在指定区域•检查所需设备可用性•不可独自进行危险操作•填写使用记录并签出严禁的行为包括在实验室内饮食、吸烟、化妆、佩戴隐形眼镜进行化学实验、穿露趾鞋及使用手机等电子设备这些行为会增加污染和意外风险，违反者可能面临实验室使用权限的暂停紧急情况应对及逃生路线火灾使用相应类型的灭火器，切断气源电源，按指定路线撤离小型火灾可使用灭火毯或灭火器，大型火灾立即疏散并报警化学品泄漏使用泄漏处理包中的吸附材料控制扩散，通风处理挥发性物质，重度泄漏需立即疏散，使用紧急喷淋去除沾染物质人员伤害立即使用急救箱进行初步处理，严重伤害呼叫医疗救援，并确保事故现场安全以防二次伤害逃生撤离沿着标识的紧急出口方向有序撤离，不使用电梯，到达指定集合点并清点人数，等待专业救援人员到达每个实验室的紧急设备位置都有明确标识，包括灭火器、灭火毯、紧急喷淋、洗眼器和急救箱所有实验室人员必须熟记这些设备的位置和使用方法，以便在紧急情况下能够迅速反应定期的应急演练是确保所有人熟悉紧急处理流程的重要手段常用量器量筒与量杯量筒特点量杯特点量筒是测量液体体积的精密量器，通常呈细长圆柱形，带有刻度量杯形状较宽，一般用于粗略测量或临时储存液体测量精度较标记测量精度通常高于量杯，但低于容量瓶和移液管常见容低，主要用于不需要高精度的场合常用于溶液的初步配制或液量规格有、、、等体的临时盛放10mL25mL50mL100mL量筒的材质多为玻璃或塑料，根据实验需求选择玻璃量筒耐腐量杯由于口径较大，更适合倾倒粘稠液体或溶解固体多数量杯蚀性强但易碎，塑料量筒不易破损但可能与某些有机溶剂反应带有倾倒口，方便液体转移而不会沿壁流淌正确读取量器刻度的方法是将视线与液体的凹液面最低点保持水平对于有色液体，应读取液面的水平部分，而非液体爬附在器壁上的部分读数时应避免视差误差，即视线必须与液面垂直，不可倾斜烧杯、锥形瓶、试管使用烧杯适用于溶液配制、加热和搅拌宽口设计便于加入固体试剂和插入搅拌棒烧杯上的刻度仅供参考，不宜用于精确测量加热时应使用垫网或水浴，避免直接加热锥形瓶常用于滴定、溶液混合和临时存放锥形设计使液体旋转搅拌更为有效，减少飞溅狭窄的颈部便于液体摇动混合而不溢出适合需要密封的反应和培养试管用于小量样品反应和观察试管加热时须倾斜并不断转动，避免液体喷出使用试管夹而非直接手持，特别是在加热时试管架必须稳固防止倾倒这些玻璃器皿的正确清洗步骤包括先用水冲洗残留物，然后用洗液（如去污剂或特殊清洗液）浸泡，再用刷子清洗内壁，最后用蒸馏水冲洗数次至无泡沫干燥方法包括自然晾干、烘箱干燥和气流吹干，应根据材质和实验要求选择适当方法玻璃棒与玻璃管的操作搅拌操作1使用玻璃棒搅拌溶液时，应以匀速旋转方式进行，避免剧烈搅动造成溶液飞溅搅拌强酸强碱等腐蚀性液体时，应使用足够长的玻璃棒以保持安全距离倒液技巧2利用玻璃棒导流法倒液可减少液体损失和飞溅将玻璃棒一端靠在倒出容器的边缘，另一端伸入接收容器，液体会沿玻璃棒表面流入，防止液体沿容器外壁流下玻璃管切割3使用专用玻璃刀在需切割处划一圈，然后在划痕处轻轻施加压力使其断开切割后的边缘需使用砂纸打磨或火焰加热使其圆滑，以防划伤皮肤玻璃管弯曲4使用酒精灯加热玻璃管需要弯曲的部位，均匀转动使其受热均匀，当玻璃变软时再进行弯曲操作时必须戴护目镜，并注意避免烫伤滴定管与移液管基础滴定管结构与原理移液管使用技巧滴定管是一种精密的体积测量工具，通常为长玻璃管，带有精细移液管用于精确转移固定体积的液体，常见类型有吸量管和量程刻度和控制阀滴定管顶部开放，底部连接阀门，可精确控制液管使用前先用少量待转移液体润洗次吸取液体时，用2-3体滴加速率最常见的规格是滴定管，刻度精度通常为移液球或吸液器控制，避免用口直接吸取，防止误吸有害物质50mL

0.1mL放液时，应让移液管垂直并接触容器内壁，自然流出液体对于使用前必须检查滴定管是否清洁、无气泡，阀门是否灵活可控刻度式移液管，需精确读取刻度；对于整量吸移管，应完全排空滴定过程中，液面读数应取液体凹面的最低点，视线应与刻度线液体至管尖不再滴液为止保持水平吸量管及其维护方法日常清洗使用去污剂溶液和专用毛刷清洁内壁彻底冲洗用蒸馏水反复冲洗至无泡沫干燥存放立式晾干或使用温和加热设备定期检查观察是否有划痕、裂纹或污渍吸量管的结构包括管身、刻度线、零点标记和排液尖常见类型包括整量吸量管（单一固定体积）和刻度吸量管（可测不同体积）使用吸量管时，应采用专用的吸液球或吸液管辅助器，严禁用口直接吸取液体当吸量管出现漏气问题时，应检查吸液球是否老化或连接处是否密封不良如发生堵塞，可先尝试使用温水浸泡，若无效则使用专用清洗液如铬酸溶液（注意安全防护）严重损坏的吸量管应及时更换，不可继续使用，以免影响实验精度天平与称量操作水平校准调整天平底座的水平螺钉，使气泡位于水平仪中心位置，确保天平处于绝对水平状态归零操作空载状态下进行归零或校准，电子天平按归零键，机械天平调整砝码至指针归零样品称量使用干净的称量纸或容器，避免直接将样品置于天平盘上，称量过程中防止气流干扰清洁维护称量完毕后清除天平盘上残留物，关闭天平门，对于贵重天平应盖上防尘罩机械天平和电子天平的主要区别在于称量原理和操作方式机械天平基于杠杆平衡原理，通过平衡砝码与样品质量实现测量，操作较为复杂但不依赖电源电子天平则利用电磁力平衡原理，将质量转换为电信号，操作简便快捷，精度高但依赖电源且对环境条件（温度、湿度、气流）更为敏感高精度天平（如分析天平）使用时需特别注意环境因素，应避免阳光直射、远离热源和气流，使用前应预热分钟达到温度平衡称量有毒或挥发性物质时应在通风橱中进行，并采取相应防护措施20-30离心机基础离心原理常见类型离心机利用高速旋转产生的离心力使混合实验室常用的离心机主要有微量离心机、物中密度不同的组分分离旋转产生的离台式离心机和超速离心机等类型，适用于心力使密度较大的颗粒向离心管底部移不同样品量和分离需求动，形成沉淀，而密度较小的组分则保持•微量离心机适用于微量样品1-2mL在上层液体中•台式离心机处理中等体10-50mL•离心力大小与转速的平方成正比积样品•分离效率与离心时间、转速和颗粒密•超速离心机可达万转分，用于10/度差有关亚细胞组分分离常见错误使用离心机时最常见的错误包括样品装载不平衡、转速设置不当和操作流程不规范等•未对称放置离心管导致振动和损坏•离心管加液过满造成溢出污染•盖子未关紧就启动造成样品飞溅•在运行过程中打开盖子导致安全事故电炉与酒精灯点燃方法火焰控制酒精灯点燃前检查灯芯露出适当长度通过调整灯芯长度控制火焰大小加热（约），灯体酒精不超过容试管等小型器皿时使用酒精灯外焰（温1cm2/3量使用长火柴或点火器从侧面点燃，度较低部分），大型器皿可使用内焰避免直接从上方操作防止烫伤（温度较高部分）熄灭方法加热注意事项使用专用灯帽覆盖灯芯熄灭火焰，切勿加热液体时应放入玻璃珠或沸石防止爆直接吹灭以防酒精溅出确认完全熄灭沸试管加热时应倾斜度角并不断转45后才能离开，不使用时应盖好灯盖防止动，避免液体突沸不可加热密闭容器酒精挥发防止爆炸电炉与酒精灯相比具有更精确的温度控制和更高的安全性电炉使用时应确保电源连接安全，温度设定合理对于易燃易爆试剂的加热，优先选择水浴加热或电热套等间接加热方式实验结束后必须确认所有加热设备已关闭，并在完全冷却后才能存放通风柜、超净工作台通风柜使用流程超净工作台操作规范实验开始前，先开启通风柜风机分钟，确保充分排气检超净工作台使用前需开紫外灯消毒分钟（无人在场5-1020-30查抽风效果，可用轻质纸片测试气流方向调整前窗高度至标记时），然后开启层流风机预运行分钟使用酒精或10-1570%位置（通常厘米以下），过高会降低排风效率专用消毒液擦拭工作台面和将要放入的所有物品表面30操作时保持身体在玻璃窗外，双手可伸入操作区所有试剂和设操作时手部应经过严格消毒，佩戴无菌手套动作应轻缓，避免备应放置在距离前窗至少厘米处实验产生的废弃物要妥善产生气流扰动所有操作应在视线可及范围内进行，避免手臂过15处理，不可直接倒入柜内水槽使用完毕后，清理工作台面，确度遮挡气流工作结束后，取出所有物品，再次用消毒液擦拭台保无试剂泄漏，继续开风机分钟后关闭面，开启层流分钟后关闭电源1510仪器常规维护报修日常保养•使用后清洁仪器表面，去除污渍和试剂残留•检查电源线和插头是否完好无损•根据使用说明书进行定期润滑和清洁•使用防尘罩保护不常用仪器周期维护•按照厂商建议的周期进行校准与标定•更换过滤器、垫圈等易耗部件•检查仪器参数是否在允许范围内•记录维护日志，便于追踪仪器状态故障识别•及时发现异常噪音、震动或气味•监测读数不稳定或偏差明显的情况•记录错误代码并查阅用户手册•初步判断是操作问题还是硬件故障报修流程•填写仪器故障报修单，详细描述问题•联系实验室管理员或维修部门•配合技术人员进行故障诊断•等待维修完成后进行功能测试液体的量取与转移选择合适量器根据需要的体积和精度选择合适的量器需要高精度时使用吸量管或滴定管，大致体积使用量筒，粗略估计使用量杯量器的量程应接近于所需测量的体积，避免使用过大的量器测量小体积液体正确读数技巧读取刻度时，视线应与液体凹面最低点保持水平对于无色透明液体，应读取凹液面底部；对于有色不透明液体，则读取液面平面部分避免视差误差，即视线必须与液面垂直，不可倾斜液体转移方法转移少量液体可使用滴管，一般液体可直接倾倒或使用量筒，精确转移则需使用吸量管转移易挥发或有毒液体时，应在通风柜中操作并使用密闭容器倾倒液体时可使用玻璃棒引流，防止液体沿容器外壁流下误差修正体积测量存在系统误差和随机误差系统误差可通过校准量器消除，随机误差可通过多次重复测量取平均值减小温度变化会导致液体体积改变，在精密测量时需进行温度校正固体试剂的称量与溶解准备与称量选择合适的天平，准备洁净的称量纸或容器天平应先校准归零，然后小心取用试剂使用药匙取试剂时，切勿将药匙直接插入试剂瓶深处，而应倾斜试剂瓶倒出少量后取用称量有毒或挥发性固体时，应在通风橱中进行并佩戴手套转移与溶解将称量好的固体小心转移至溶剂容器中，避免试剂损失可使用干净的漏斗辅助转移，称量纸应折成形以便倾倒加入适量溶剂（通常低于最终体V积），先少量加入并充分搅拌，再逐渐加至所需体积对于难溶物质，可使用加热、超声或磁力搅拌促进溶解体积调整与储存溶液完全澄清后，将其转入容量瓶中，用溶剂洗涤原容器次，洗液2-3也倒入容量瓶最后用溶剂定容至刻度线，混合均匀配制好的溶液应贴上标签，注明名称、浓度、配制日期和配制人对光敏感的溶液应使用棕色瓶储存，易挥发溶液需严格密封保存滴定操作基本流程滴定前准备选择适当的指示剂，准备好滴定管、锥形瓶和滴定液清洗滴定管，用少量滴定液润洗次将2-3滴定液装入滴定管至零刻度上方，排出气泡，调整液面至零点或记录初始读数样品准备使用容量瓶或吸量管准确量取待测样品，转移至锥形瓶中根据需要加入适量蒸馏水稀释加入2-滴适当的指示剂，轻摇混合均匀放置白纸作为背景以便观察颜色变化3滴定过程开始时可较快滴加，但液体颜色开始变化时应减慢速度滴加过程中不断摇动锥形瓶，确保充分混合接近终点时应一滴一滴地加入，仔细观察颜色变化达到终点时记录读数，计算消耗的滴定液体积结果计算根据滴定反应方程式和消耗的滴定液体积，计算样品中待测物质的含量为提高准确度，通常进行3次平行测定，取平均值作为最终结果计算相对标准偏差以评估测定精密度滴定终点的判别方法主要有三种指示剂法、电位法和分光光度法指示剂法是最常用的方法，根据溶液颜色变化判断终点；电位法利用计或电导率仪等仪器精确测量；分光光度法则通过监测溶液吸光度变化确定终点选择pH何种方法主要取决于滴定类型和所需精度洗涤与干燥普通玻璃器皿清洗特殊污染物清洗干燥方法选择123首先用水冲洗去除大部分杂质，然后使用油脂污染可用丙酮或乙醇预处理；无机盐自然干燥适用于大多数常规玻璃器皿，将实验室专用洗涤剂和刷子清洗内壁对于沉淀可用稀盐酸或稀硝酸溶解；有机物残洗净的器皿倒置在干燥架上，放置在洁净难以去除的污垢，可浸泡在洗涤液中一段留可使用铬酸洗液（注意安全！）或高锰无尘处烘箱干燥适用于需要彻底干燥的时间后再清洗最后用自来水冲洗多次，酸钾溶液处理使用强酸强碱清洗时必须器皿，通常设定温度为℃，时105-110再用蒸馏水冲洗次，确保无洗涤剂残戴防护手套和护目镜，并在通风柜中操间为分钟对于热敏感材料，可2-330-60留作使用干燥剂或真空干燥移液操作详细讲解单道移液枪结构标准操作流程单道移液枪主要由手柄、体积调节装置、推杆、喷嘴和枪头组正确的移液步骤包括设定所需体积；装上合适规格的枪12成手柄设计符合人体工程学，便于长时间持握；体积调节装置头，确保密封良好；垂直持握移液枪，缓慢按下推杆至第一阻3通常为旋钮或数字显示窗，用于精确设定所需体积；推杆系统控力点；将枪头浸入液体中；缓慢释放推杆吸取液42-3mm5制吸液和排液操作；喷嘴与一次性枪头连接，确保样品不会污染体；将枪头移至接收容器上方；平稳按下推杆至第一阻力67移液枪本体点排出液体，继续按至第二阻力点完全排空；移开枪头后释放8推杆，弹出枪头常见规格包括、、

0.5-10μL10-100μL100-1000μL等，应根据所需体积选择合适规格，以获得最佳精度使用前应对于粘稠液体，应采用反向移液技术吸液时按至第二阻力点，确认移液枪已校准，显示的体积与实际吸取体积一致排液时只按至第一阻力点，剩余液体弃去这种方法可防止液体残留在枪头内壁避免交叉污染的关键措施包括严格更换一次性枪头；避免将移液枪放置在实验台面上；避免枪头接触容器内壁；处理不同样品间应清洁工作区；处理有害或污染性样品时应使用带过滤器的枪头；定期检查和清洁移液枪以保持性能如需处理有机溶剂，应确认所用移液枪型号适用于有机溶剂，否则可能导致密封件损坏溶液配制稀释与浓缩稀释计算稀释遵循₁₁₂₂公式，其中₁、₁为原溶液浓度和体积，₂、₂为稀释后溶液浓度和c V=c Vc Vc V体积例如，将溶液稀释至，需要的最终体积为₂₁₁₂100mL2mol/L

0.5mol/L V=c V/c=×，即需要添加溶剂2100/

0.5=400mL300mL分步稀释对于需要大幅度稀释的溶液，应采用分步稀释法避免误差累积例如，将溶液稀释至1mol/L，可先稀释至，再从此溶液稀释至，最后稀释至

0.001mol/L

0.1mol/L

0.01mol/L每步稀释倍，比直接稀释倍更精确

0.001mol/L101000浓缩方法加热蒸发是最常用的浓缩方法，适用于水溶液或沸点高于溶剂的溶质使用水浴加热比直接加热更安全，能避免局部过热旋转蒸发仪通过减压降低溶剂沸点，提高蒸发效率，适用于热敏感物质或有机溶剂的浓缩进行稀释操作时，应遵循酸入水、慢且搅的原则，特别是浓硫酸等强酸的稀释将酸缓慢加入水中并不断搅拌，避免局部过热导致溶液飞溅稀释前后的容器应明确标记，防止混淆对于精确稀释，应使用容量瓶等精密量器，而不是粗略估计浓缩过程中应密切监控，避免干涸导致溶质分解或容器损坏对于易挥发、易氧化或光敏感的物质，应选择相应的保护性浓缩方法，如氮气保护、避光或低温浓缩浓缩完成后及时关闭热源，防止意外干涸或溶液飞溅造成危险加热和冷却操作加热设备及选择冷却方法与设备实验室常用的加热设备包括电热板、恒温水浴锅、油浴、加热套实验室冷却方法主要包括自然冷却、冰水浴、盐冰浴和干冰丙/和酒精灯等选择合适的加热设备应考虑所需温度范围、控温精酮浴等自然冷却速度最慢，适用于不需要快速降温的场合；冰度、加热均匀性以及安全因素对于易燃溶剂，应避免明火加水浴可将温度降至℃左右；盐冰浴（与冰的混合物）可0NaCl热，选择防爆电热设备达℃；干冰与丙酮的混合浴可达℃-20-78电热板适用于需要直接加热且温度不超过℃的场合；水浴冷却操作中应注意温度梯度过大可能导致容器破裂玻璃器皿从350适合℃以下需精确控温的实验；油浴可用于℃高温直接放入冰浴可能因热胀冷缩而破裂，应先自然冷却一段时100100-250的高温加热；加热套则适合圆底烧瓶的均匀加热，特别是回流操间处理低温浴时应戴防冻手套，尤其是使用干冰时作时均匀加热技巧包括使用玻璃珠或沸石防止突沸，使用搅拌器确保液体温度均匀，以及保持适当的加热速率避免局部过热加热易分解物质时，应严格控制温度并避免过度加热回流操作中，冷凝管的冷却水应从下而上流动，以确保高效冷却过滤技术基础重力过滤抽滤特殊过滤重力过滤是利用重力使液体通过滤纸的简单方抽滤利用负压加速过滤过程，适用于需要快速分根据特定需求，可选用不同类型的过滤方法和材法，适用于分离较大颗粒的沉淀或不需要快速过离沉淀或回收结晶产物的情况料滤的场合•需要布氏漏斗、抽滤瓶、真空管和水泵•微孔过滤使用孔径的滤膜

0.22-

0.45μm•需要漏斗、滤纸、接收容器去除细菌和微粒•滤纸直径应小于漏斗孔板•滤纸应紧贴漏斗内壁，液面不超过滤纸边缘•热过滤处理高温易结晶的溶液•开启抽滤前确保系统密封良好•滤液应沿玻璃棒流入，避免冲击滤纸•离心过滤利用离心力加速微量样品过滤•抽滤完成后先关闭真空源再关闭水•过滤速度较慢，但操作简便•超滤使用半透膜分离大分子和小分子滤纸折叠法是确保过滤效率的关键技术最常用的方法是将圆形滤纸对折两次形成四等分，然后打开其中一个折痕，形成圆锥形这种折法使滤纸能紧贴漏斗内壁，防止气泡阻碍液体流动对于需要保留沉淀物的定量分析，应使用无灰定量滤纸，并确保全部沉淀物都转移到滤纸上离心操作与样品分离样品准备与平衡•选择适合的离心管和转子类型•样品体积不超过离心管容量的3/4•使用相同类型的离心管，放置在对称位置•精确称量确保误差小于

0.1g，必要时添加平衡液参数设置•根据样品性质设定转速rpm或离心力×g•设定适当的离心时间，通常在5-30分钟范围•选择合适的加速和减速档位•对温度敏感样品，设定温度控制参数运行操作•确认离心管盖子密封良好•关闭离心机盖，确保锁定机制有效•启动离心机，等待达到设定转速•观察初始运行是否平稳，如有异常立即停机取样与处理•等待离心机完全停止后再打开盖子•小心取出离心管避免沉淀重悬浮•根据实验需要分别收集上清液或沉淀•记录分离结果和样品处理情况刻度仪器读数规范正确读取液体体积的基本原则是确保视线与液体凹面（凹液面）的最低点保持水平这种读数方法适用于所有刻度量器，包括量筒、滴定管、吸量管等对于无色透明溶液，凹液面往往不易辨识，可在量器后放置一张写有黑线的白纸，使凹液面的边界更加清晰防止视差误差是准确读数的关键视差误差指由于视线与刻度线不垂直而产生的读数误差为避免视差，应确保眼睛位置与凹液面最低点在同一水平线上对于高精度读数，可使用读数放大镜辅助观察温度变化会导致液体体积发生改变，因此精密测量时应注意环境温度与量器校准温度（通常为℃）的差异，必要时进行温度校正20不同量器的误差范围不同级容量瓶的误差通常在±，吸量管在±，滴定管在±，而量筒则可能达到A

0.1-

0.2mL

0.01-

0.05mL

0.05-

0.1mL±了解这些误差范围有助于选择合适的量器和评估实验结果的可靠性

0.5-1mL试剂瓶打开和取用标签检查仔细阅读标签信息包括名称、浓度、纯度和危险性瓶盖操作单手握住瓶身，另一手轻转瓶盖，避免用力过猛取用方法使用干净药匙或专用工具，避免交叉污染及时密封取用后立即盖紧瓶盖，防止污染和变质打开试剂瓶时，应先将瓶身标签朝向手掌，这样可防止液体沿瓶身流下损坏标签磨口瓶塞应轻轻旋转取出，不可强行拔出以防损坏塑料旋盖通常逆时针旋转打开，但部分特殊设计的安全瓶盖可能有不同的开启方式，应查阅说明取用固体试剂时，应将试剂瓶倾斜，使少量试剂滑至瓶口，然后用洁净的药匙取用，切勿将药匙伸入瓶内深处取用过量的试剂不应放回原瓶，以避免污染整瓶试剂取用液体试剂时，可轻轻倾倒或使用洁净的滴管，瓶口应紧贴容器边缘以防液体沿瓶壁流下避免在试剂上方呼吸或闻气味，特别是挥发性或有毒试剂易挥发与危险试剂操作℃3-538安全防护层级闪点警戒线操作危险试剂时的多重防护屏障数量低于此温度的有机溶剂需特别谨慎处理

0.5m/s通风柜气流速度有效排除有害气体的最低风速标准处理易挥发和危险试剂时，必须穿戴全套个人防护装备，包括实验服、防化手套、护目镜和必要时的面罩或呼吸器不同类型的危险化学品需要不同材质的手套丁腈手套适合一般有机溶剂，丁基橡胶手套适合酮类和酯类，而氟橡胶手套则适合处理强酸和芳香族化合物通风柜操作规范要求前窗开口高度不超过厘米，以确保足够的面风速所有操作应在距离柜口30至少厘米处进行，避免身体进入通风柜内挥发性试剂的容器应保持关闭，只在需要取用时短15暂开启对于特别危险的化学品，如强致癌物、剧毒品或高活性化合物，应使用手套箱或专用隔离设施操作，并执行特殊的废弃物处理程序天平称量读数实例酸碱（）测量基本操作pH试纸与指示剂计使用规范pH pH试纸是一种快速测定溶液值的简便工具，适用于对精度要计是准确测量溶液值的电化学仪器，由电极和电位计pH pH pH pH pH求不高的场合使用时，用干净的玻璃棒蘸取少量溶液，轻触试组成使用前必须进行校准，通常使用标准缓冲溶液（如pH纸表面，避免将试纸直接浸入溶液中根据试纸变色与标准色卡、和）进行两点或三点校准电极浸入标准缓

4.

017.

0010.01对比，估计值常用指示剂包括石蕊（）、冲液中，待读数稳定后，调整仪器使显示值与标准值一致校准pHpHpH

4.5-

8.3酚酞（）和甲基橙（）等，不同指后，用蒸馏水冲洗电极并轻轻吸干（不可擦拭），再进行样品测pH

8.2-

10.0pH

3.1-

4.4示剂适用于不同范围量pH测量时，电极应浸入溶液中约厘米，避免接触容器底部或2-3广泛试纸的测量范围通常为，精度约为±个单壁面轻轻搅拌后静置，等待读数稳定（通常需秒至分pH0-141pH301位窄范围试纸可将精度提高到±个单位，但测量钟）测量完成后，应用蒸馏水彻底冲洗电极，并存放在电极保

0.2-

0.5pH范围更小指示剂法的优点是简便快捷，但受溶液颜色和某些离存液中（通常为溶液）电极不用时切勿干存，以防电3M KCl子干扰的影响较大极玻璃膜干燥损坏熔点和沸点测定熔点测定原理样品准备熔点是固体物质从固态转变为液态的温度范样品必须充分研磨成细粉，装入毛细管时高围，是判断物质纯度和鉴别物质的重要物理度约装样时可将开口端轻轻插入2-3mm常数纯物质的熔点范围通常不超过

0.5-粉末堆中，然后将管子直立后轻敲或从一定℃，熔点范围过宽表明样品可能含有杂

1.0高度落下，使样品沉至管底质或不纯沸点测定方法加热与观察沸点测定常用微量法或毛细管法微量法仅将装有样品的毛细管与温度计一起固定在加4需几滴液体，适用于贵重或有毒样品；毛细热装置中开始快速升温至预期熔点前℃20管法通过观察气泡从毛细管口连续均匀冒出左右，然后改为慢速升温（每分钟1-时的温度确定沸点精确测定应使用精馏装℃）仔细观察样品状态变化，记录首次2置出现液滴的温度和完全熔化的温度现代实验室通常使用自动熔点仪进行测定，其优点是操作简便、重复性好且可自动记录熔点过程使用自动熔点仪时，应先估计样品的大致熔点范围，设定适当的升温速率，然后按照仪器说明书进行操作无论使用何种方法，测定结果都应与文献值比对，并考虑大气压力对沸点的影响样品标签与记录标签必要信息每个样品标签应包含样品名称或编号、制备日期、制备人、浓度或纯度、危险性警告以及特殊存储要求对于特殊样品，还应标注有效期限、储存条件和处理注意事项标签材料与书写标签材料应与存储环境兼容，如耐水标签用于湿环境，耐低温标签用于冰箱存储书写应使用耐溶剂的永久性记号笔，字迹清晰易辨标签应贴在容器的平滑表面上，避开刻度和观察区域编码系统建立系统性的编码方案有助于样品管理，如项目代码批次号序号日期格式对于大---量样品，可考虑使用条形码或码系统，与电子数据库关联，提高管理效率和准确性QR实验记录本规范实验记录本应使用硬皮笔记本，页码连续且不可撕页每页应记录日期、实验题目、目的、使用的材料和设备、详细操作步骤、原始数据、观察结果和初步结论错误记录应划线，不可擦除或涂黑数据处理与分析基础电化学基础操作简介电极的类型与处理电极校准与测量实验室常用的电极包括参比电极（如饱和甘汞电极、银氯化银电极校准需要至少两种标准缓冲溶液（通常选和/pHpH

4.01电极）、工作电极（如铂电极、玻碳电极、修饰电极）和辅助电或和），测量前浸泡电极至少分钟激

7.00pH

7.

0010.0130极（通常为铂丝或石墨）电极使用前必须进行适当的预处理，活，校准时间间隔通常为每日一次离子选择性电极校准需使用确保表面洁净活性系列标准溶液建立校准曲线，并注意离子强度调节玻碳电极通常需用金相砂纸和氧化铝粉抛光至镜面，再经超声清电化学工作站操作前应确认电极连接正确，设置合适的扫描范围洗；铂电极可用火焰高温灼烧或电化学处理活化；参比电极需检和速率测量前通入氮气除氧分钟（对氧敏感的体10-15查电解液液面和液接界状态，必要时补充电解液或更换液接界系），测量过程中保持溶液静止或恒定搅拌每次测量后应记录温度和电极状态，以便进行必要的修正电解实验的安全要点包括使用隔离变压器或具有良好接地的电源；防止金属物体接触带电部分；避免在易燃溶剂附近进行电解；随时关注电解过程中的气体产生（如氢气可能引起爆炸）；使用适当容器防止溶液溢出导致电气短路对于使用有机溶剂的电化学实验，应特别注意静电防护和火灾安全微量操作技巧微量移液微量滴定微量称量微量移液使用专用移液器，如微量滴定通常使用微量滴定管微量天平通常精度可达、等操或精密注射器，滴定体积可低（），使用时1-10μL

0.5-5μL

0.001mg1μg作需要稳定的手部，采用两段至反应在微型反需特别注意环境因素如气流、

0.001mL式按压法先按至第一阻力点应瓶或微孔板中进行，可使用振动和静电样品应放置在专吸液，再按至第二阻力点完全小型磁力搅拌装置保证混合均用微量称量容器中，静置数秒排空对于高粘度液体，可使匀终点判断可通过高倍放大等待读数稳定后记录操作区用反向移液法移液过程中应镜观察颜色变化，或使用微型域应保持绝对清洁，避免任何保持移液器垂直，避免气泡形电极或光度计直接监测粉尘污染pH成微量实验的关键在于减少样品损失和提高回收率吸附损失是微量操作中常见的问题，尤其对于蛋白质等生物样品为减少吸附，可使用低吸附材质的容器（如特氟龙涂层），或预先用样品溶液润洗容器内壁微量操作过程中的温度和变化对结果影响更显著，应严格控制实验条件，并设置适当的pH对照组微量操作通常需要辅助工具，如解剖显微镜可用于观察微小操作过程，微型离心机适用于微量样品的沉淀分离，微孔板振荡器能确保样品充分混合在进行微量系列稀释时，建议使用自动稀释仪或多通道移液器以提高效率和准确性所有微量操作都应在洁净环境中进行，必要时使用超净工作台或手套箱微生物操作基础无菌操作准备无菌操作前需彻底清洁工作区，使用酒精擦拭台面和设备穿戴适当的个人防护装70%备，包括实验服、手套和必要时的口罩准备无菌操作所需的所有材料和工具，避免操作中途离开打开超净工作台或酒精灯，创建无菌环境铝箔、包装纸和容器口应始终朝下，避免空气中微生物沉降污染接种技术使用接种环或接种针前，需在酒精灯火焰中灼烧至红热，然后冷却至室温取样时应迅速开关培养皿或试管，减少暴露时间接种动作应轻柔准确，避免培养基表面损伤接种完成后再次灼烧接种工具，消灭残留微生物平板划线时，应采用标准的四区划线法以获得单菌落液体培养物的转接应避免气泡产生，防止气溶胶形成培养基制备培养基配制需要精确称量成分，溶解在适量纯水中调整至最适合目标微生pH物生长的范围，通常使用计监测培养基需要在高压灭菌锅中℃灭菌pH121分钟热敏感成分（如抗生素、某些糖类）应单独灭菌，冷却至℃以15-2060下再添加无菌操作倾倒平板，每个平板约培养基，盖子微开放置使20-25mL表面水汽蒸发，凝固后倒置保存以防冷凝水滴落无菌操作环境设计超净工作台分类使用规范超净工作台按气流方向分为水平流和垂直流两超净工作台使用前需通风运行分钟清10-15种水平流工作台气流平行于工作面，从背部除箱内空气工作区域应保持整洁，只放置必向操作者方向流动，适合一般无菌操作；垂直要的物品，保持气流通道畅通操作动作应缓流工作台气流垂直于工作面，从顶部向下流慢平稳，避免快速移动导致气流紊乱动，更适合处理致病菌或细胞培养•双手操作不应阻挡气流•Ⅰ级保护样品和环境，不保护操作者•调整座椅高度，避免直接对着气流呼吸•Ⅱ级同时保护样品、环境和操作者•物品摆放遵循清洁区污染区原则→•Ⅲ级最高防护级别，完全封闭系统•工作结束后继续通风分钟清除污染物10紫外消毒流程紫外灯是超净工作台常用的辅助消毒手段，通常波长为的紫外线对微生物有较强杀灭作

253.7nm用但紫外线仅对表面有效，无法穿透物体•空台照射分钟，人员不得在场30•定期检查紫外灯强度，通常使用小时后更换1000•灯管表面需定期清洁，去除灰尘提高效率•紫外照射后通风分钟消除臭氧5仪器故障排查快速指南仪器类型常见故障代码可能原因初步处理电子天平超载或校准错误移除超重样品，重新校Err01准离心机转子不平衡检查样品分布，重新平E-02衡计电极老化或污染清洗电极，浸泡再生液pH Er3分光光度计灯泡老化或电源问题检查电源，必要时更换Lamp Error灯泡液相色谱色谱柱堵塞或泵故障反冲柱子，检查流路连Pressure High接面对仪器故障，首先应保持冷静，记录故障发生时的操作步骤和仪器状态大多数现代仪器都有自诊断功能，能显示具体的错误代码或提示信息查阅用户手册中的故障排除章节，对照错误代码找到可能的原因和解决方案常见的问题如电源问题、连接松动、操作错误等可由用户自行解决，而复杂的技术故障则需专业技术支持建立仪器使用日志是预防和解决故障的有效方法，记录每次使用情况、参数设置和异常情况定期维护如清洁、校准和更换易损件可大大减少故障发生当仪器出现无法自行解决的问题时，应准确描述故障现象联系制造商或维修服务，提供仪器型号、序列号和购买时间等信息，以便获得更精准的支持化学品泄漏紧急处理化学品泄漏是实验室常见的紧急情况，应根据泄漏物质的性质、数量和位置采取相应措施小型泄漏（小于）通常可由经过培训的实100mL验室人员处理，而大型泄漏或高危险性化学品泄漏则需要专业应急团队介入实验室应配备泄漏处理套件，包括吸收材料（如吸收垫、吸收粉）、中和剂、个人防护装备、收集工具和废物容器等处理泄漏的一般流程是首先评估风险，确认泄漏物质的危险特性；采取适当防护措施，穿戴手套、护目镜和防护服；控制泄漏源，关闭阀门或扶正容器；使用合适的材料吸收或中和泄漏物（酸性物质可用碳酸氢钠中和，碱性物质可用柠檬酸中和）；将污染物收集到专用废物容器中；彻底清洁受影响区域；最后正确处置废物并记录泄漏事件对于特殊化学品，如汞、氢氟酸或强氧化剂，应遵循特定处理程序烧伤、割伤等事故处理热烧伤立即用冷水冲洗受伤部位分钟，去除烫热源附近的衣物但不要强行移除黏附皮肤的衣物不可使用冰块15-20直接接触烧伤区域，不可涂抹油脂、牙膏等民间偏方化学烧伤2迅速脱去被污染的衣物，用大量流动水冲洗至少分钟特殊化学品如氢氟酸需使用专用解毒剂（如葡萄15-30糖酸钙凝胶）冲洗后用干净绷带覆盖，立即就医割伤出血使用无菌纱布直接压迫伤口止血，抬高受伤部位高于心脏水平伤口较大或深度超过应立即就医缝合密5mm切观察是否有玻璃或其他异物嵌入伤口中眼部伤害化学品溅入眼睛时，立即使用洗眼器冲洗至少分钟冲洗时保持眼睑张开，转动眼球确保全面冲洗使15-20用专用眼罩保护，不要揉搓眼睛，立即就医检查实验室意外事故的报告流程通常包括向实验室主管或安全负责人报告；填写事故报告表，详细记录事故发生的时间、地点、过程、原因和处理措施；保存相关证据如照片、视频或物证；参与事故调查并提供真实信息；根据调查结果制定和实施预防措施，避免类似事故再次发生事故发生后的心理护理同样重要，尤其是严重事故可能导致创伤后应激障碍鼓励受伤人员和目击者表达感受，必要时寻求专业心理咨询通过团队讨论总结经验教训，将事故转化为改进安全文化的机会定期开展救护技能培训，确保所有实验室人员掌握基本急救知识和技能火灾、电击等重大事故应急火灾应急•发现小火立即使用合适的灭火器，对准火源根部•A类火灾（普通可燃物）水基灭火器•B类火灾（易燃液体）泡沫、干粉或二氧化碳灭火器•C类火灾（带电设备）二氧化碳灭火器•D类火灾（金属火灾）专用金属火灾灭火器•火势无法控制时，立即启动火灾报警，组织疏散电击救援•首先切断电源，使用绝缘物体移开电线•不要直接用手触碰带电设备或触电者•检查伤者呼吸和脉搏，必要时进行心肺复苏•即使伤者表面无碍，也需医疗观察（电击可能造成内部伤害）人员疏散•熟悉实验室紧急出口和疏散路线图•疏散时保持冷静，有序撤离，不拥挤不奔跑•关闭实验设备、气源和电源（如安全允许）•到达集合点后清点人数，向应急人员报告情况紧急切断电源的要点包括明确掌握实验室电源总开关和分区开关的位置；在安全情况下，使用绝缘手柄的开关断电，避免站在潮湿地面上操作电器；对于高压设备，必须使用专用绝缘工具进行操作；如无法安全接近配电箱，应联系专业电工或紧急服务人员实验室的配电盘应明确标记各开关控制的区域和设备，便于紧急情况下快速定位实验室安全常见误区剖析错误认识熟练人员可以省略防护错误认识临时存放不需标签错误认识实验区可短暂饮食许多资深实验人员认为自己经验丰富，可以省略某部分实验人员认为临时使用或存放的化学品可以不部分人员为了节省时间，会在实验台旁边短暂进食些防护措施实际上，意外事故往往发生在最不经贴标签，因为自己知道是什么这种做法极其危或饮水即使看似干净的实验台面也可能存在肉眼意的时刻，即使是最熟练的操作者也可能遇到意外险，可能导致误用、混用或在紧急情况下无法识别不可见的化学或生物污染物，通过手、食物或容器情况安全规程不应因经验水平而有所区别，个人物质无论存放时间长短，所有容器都必须贴有清传递到口中实验区与生活区必须严格分开，任何防护装备的使用必须始终如一晰的标签，标明内容物名称、浓度、制备日期和危食品和饮料都不应带入或存放在实验室区域险性通过典型案例的分析，我们可以看到许多实验室事故本可避免一个常见案例是使用易燃溶剂时靠近明火或热源，导致火灾或爆炸改进建议包括建立溶剂使用安全区域，与热源保持足够距离，使用无火花设备，以及在通风橱中操作大量易燃溶剂另一个常见误区是忽视慢性危害，如长期小剂量接触某些化学品或辐射可能导致的健康问题，应通过定期健康检查和暴露监测加以防范课堂小测试安全与操作知识1015测试题目数量答题时间分钟涵盖理论知识与操作规范限时测试检验实际掌握程度80%及格分数线安全知识要求较高通过标准测试内容广泛涵盖已学知识点，包括但不限于个人防护装备的正确使用；化学品安全标识的识别与理解；实验室常见设备的使用规范；紧急情况的处理流程；以及基础操作技能如量器使用、溶液配制等测试形式多样，既有选择题检验基础知识，也有简答题评估理解深度，还有情境题测试应用能力互动答题环节采用现代教学技术，学生使用手机或平板电脑登录答题系统，题目在大屏幕上展示，所有人同时作答系统实时统计答题情况，展示正确率分布，针对普遍错误的问题进行即时讲解这种方式不仅提高了学生参与度，还能让教师迅速掌握学生的知识掌握情况，有针对性地调整后续教学内容和方法测试结果将作为实验操作资格评定的重要参考学生常见操作错误与纠正误区识别通过实际操作录像，展示学生在实验中常犯的典型错误，如移液管直接口吸、不正确阅读凹液面、天平不归零直接称量等每个误区都配有详细分析，解释这些错误操作可能导致的后果，如实验数据不准确、设备损坏或安全风险等录像中特意标注关键时间点，便于教师和学生精确定位问题所在原因分析深入探讨产生这些操作错误的根本原因，包括对原理理解不透彻、操作技能训练不足、安全意识淡薄、实验前准备不充分等通过案例分析，帮助学生认识到许多错误并非个例，而是有共性的认知或技能缺陷这一环节强调错误的形成机制，而非简单指出对错，有助于学生从根本上改变实验习惯规范示范针对每个常见错误，提供标准化的正确操作示范，由有经验的教师或技术人员演示示范过程中突出关键步骤和注意事项，解释每一步操作的科学原理和重要性同时提供操作要点的文字总结，便于学生记忆和参考部分重要或复杂的操作提供多角度、慢动作展示，确保学生能够清晰观察到每个细节综合实验操作流程梳理操作执行实验准备遵循标准操作规程；精确测量与记录；注意关键步骤控制；定期检查实验进展；及时处理异常情2阅读实验方案，理解原理与目的；准备所需试况剂、器材与防护用品；检查设备状态；预估时间安排；记录实验前状态观察记录客观记录所有观察结果；详细描述实验现象；记录环境条件变化；拍照或绘图辅助记录；保持数据原始性清理收尾妥善处理废弃物；清洗并归还器材；整理工作台数据处理面；关闭所有设备；完成实验记录整理原始数据；进行必要计算与统计；绘制图表；分析误差来源；与理论值比对完整的实验流程图展示了从准备到收尾的所有环节及其逻辑关系每个阶段都有明确的质量控制点和决策节点，指导实验者何时可以进入下一步骤，何时需要返回修正或重复流程图中还标注了各环节的时间估计、所需资源和可能的风险点，有助于实验者进行全局规划和风险预防特别值得注意的是实验过程中的文档管理，包括实验记录本的规范填写、数据的备份存储、以及实验报告的撰写要求良好的文档习惯不仅有助于后续的数据分析和实验重复，也是科学研究规范性和可追溯性的重要保障实验者应培养一次把事情做对的态度，而非依赖事后补救课程重点与心得总结科学精神与职业素养严谨、诚实、负责的科学态度安全防护与应急处理预防为主，应对有方的安全文化基础技能与规范操作精准、可靠的实验基本功原理理解与创新思维融会贯通，举一反三的科学思维本课程覆盖的核心知识点包括实验室安全规范、基础操作技能、仪器使用方法、数据处理技术以及紧急情况处理等多个维度通过系统学习，学生应掌握实验室工作的安全第一原则，建立规范操作的肌肉记忆，养成严谨记录的良好习惯，以及发展观察分析的科学能力这些基础能力是未来深入科研或进入相关行业的重要支撑在实验室技术不断发展的今天，自动化设备和智能系统正在改变传统实验方式，但基础操作技能的重要性并未减弱恰恰相反，掌握基本原理和操作规范的实验者能更好地理解和驾驭先进设备，发现潜在问题并创造性地解决随着生命科学、材料科学、环境科学等领域的蓬勃发展，实验室技术人员将面临更广阔的职业前景，本课程所培养的能力将成为适应未来职场变化的坚实基础课程答疑与互动常见疑问解答小组讨论与示范延伸资源获取针对学生在学习过程中遇到的典型问题，课程设置了小组讨论环节，学生可以分享为满足不同学生的学习需求，我们提供了我们整理了常见疑问及其解答这些问题各自的疑惑和心得教师会针对共性问题丰富的延伸学习资源，包括推荐教材、在涵盖了从基础操作技巧到复杂实验设计的进行现场示范和解释，帮助学生从不同角线视频教程、实验技术手册和专业期刊文各个方面，包括如何解决滴定终点判断困度理解操作要点这种互动式学习模式有献等这些资源按难度和专业方向分类，难、如何提高微量操作精度、以及如何处助于激发学习兴趣，加深对知识点的理学生可以根据自身情况选择适合的材料进理意外实验结果等实际问题解，同时培养团队协作和科学交流能力行深入学习，拓展课堂知识的广度和深度。