pda培养基的配制方法

水分的蒸发，所以正确地制备棉塞是培养基制备中重要的一环正确的棉塞是形状、大小，松紧应与试管口（或三角烧瓶）完全适合过紧则妨碍空气流通，操作不便；过松时，空气会毫无障碍地进入试管（或三角烧瓶）中，达不到灭菌的目的棉塞过小往往易掉进试管内，因此棉塞质量的优劣对实训的结果有很大的影响正确的棉塞头较大，加塞时，应使棉塞长度的1/3留在试管口外，2/3在试管口内（见实训图6-4）目前，有条件的实训室已使用坚固的塑料试管帽、金属试管帽、硅胶泡沫塞替代棉塞，制作棉塞要选纤维较长的棉花，一般不选用脱脂棉因为它容易吸水变湿，造成污染，而且价格也贵棉塞制作方法见图6-5实图6-5棉塞的制作方法实图6-4棉塞

（三）斜面与平板培养基的制作斜面与平面培养基是常用的琼脂固体培养基将熬制好的琼脂培养基趁热装入试管灭菌后摆鞋面，凝固后即成斜面培养基斜面培养基常用于菌种培养、菌种保藏等工作将灭菌后的琼脂培养基倾注于无菌培养皿中，凝固后即成平板培养基平板培养基常用于分离菌种、菌落计数、菌落形态观察及菌种鉴定等斜面与平板培养基的制作过程大致为溶解原料、融化琼脂、调PH、分装、灭菌和制斜面或平板

1、溶解原料为加速原料的溶解，最好用热水先将原料依次加入到占配制量一半的水中，待全部溶解后在加足水量如配方中有马铃薯、款皮、胡罗卜、豆芽等天然原料，需将其熬制约30min,取出定量滤液，在将所需的其他原料加入滤液中

2、融化琼脂琼脂的用量可灵活掌握用作保藏菌种的培养基，琼脂用量可提高至

2.5%,以增加持水性冬季的气温低，琼脂用量可适当减少琼脂用前可剪成小段，以利于融化待溶液煮沸是再加入，不断搅拌至完全无琼脂块状物时再停止加热

3、调整PH用洁净干燥的玻璃棒沾一点培养基滴在试纸上，立即与比色板比较一般用10%Na0H或HC1调节

4、分装将培养基趁热倒入垫有纱布的漏斗中，使培养基直接滤至试管或三角瓶中，试管装量一般为管高的1/4左右，三角瓶的装量约为其容量的一半勿使培养基玷污容器口部口部塞有棉塞，试管每7或9支扎一捆，棉塞外面包牛皮纸，以防在灭菌过程中被水汽打湿

5、灭菌分装后的培养基应随即灭菌除特殊情况外，一般培养基均用高压蒸汽灭菌，在104kPa压力下,灭菌20-30min

6、制作斜面或平板将灭菌后的试管趁热斜置于棍条上，倾斜度以试管中的培养基约占试管长度的1/2为宜，凝固后即成斜面培养基待灭菌后三角瓶内的培养基冷却至

45、50时，以无菌操作法向2蒸汽进口。