《临床生物化学分析版》课件

《临床生物化学分析经典版》欢迎学习《临床生物化学分析经典版》课程本课程将系统介绍临床生物化学分析的基础理论、方法技术及临床应用，帮助您掌握临床生物化学检验的核心知识与实践技能通过本课程的学习，您将全面了解从样本采集到结果解释的完整分析流程，为您的临床诊断和科研工作奠定坚实基础生物化学分析是现代医学诊断的重要支柱，通过对人体内各种生物分子的定性与定量分析，能够反映人体健康状况与疾病变化本课程将引导您探索这一精彩的科学领域，解锁人体内部的奥秘课程介绍课程目标学习内容概述通过系统学习，使学生掌握包括个章节，涵盖临床生19临床生物化学分析的基本理物化学基础理论、各类生化论、操作技术和结果判读能指标的检测方法、质量控制力，培养学生独立开展临床以及新技术应用等核心内容，生化检验的专业素养与实践同时结合临床案例进行综合能力分析与讨论考核方式采用平时成绩（）与期末考试（）相结合的方式平时成30%70%绩包括出勤、课堂表现和实验报告；期末考试以闭卷笔试为主，重点考察基本概念和临床应用第一章临床生物化学分析概述定义和范围发展历史临床生物化学分析是运用化学、生物学和物理学原理，对人临床生物化学分析起源于世纪，随着分析化学技术的发展19体样本中的生物分子进行定性和定量分析的学科主要研究而迅速进步从早期的简单比色分析到现代的自动化仪器分对象包括糖类、蛋白质、脂类、核酸、酶、电解质等生物分析，经历了几个重要发展阶段子世纪中叶，放射免疫分析技术的应用使激素等微量物质的20其研究范围不仅包括各种生物分子的浓度测定，还包括酶活检测成为可能；世纪末，生物传感器和分子生物学技术的20性、代谢产物以及各种生理功能的评估，为临床诊断、治疗引入，进一步提高了分析的特异性和灵敏度；世纪，质谱21监测和预后评估提供科学依据技术和组学技术的发展，使临床生物化学分析进入精准医学时代临床生物化学分析的重要性在医学诊断中的作用临床生物化学分析为疾病诊断提供客观依据，约的医疗决策依赖实验室检查70%结果通过测定特定生物标志物，可辅助医生确认疾病类型、评估疾病严重程度例如，心肌标志物对心肌梗死的诊断、肝酶对肝病的识别以及肿瘤标志物对恶性肿瘤的筛查都具有重要价值有时生化指标的异常变化可能早于临床症状出现，有助于疾病的早期发现在疾病监测中的应用生物化学指标对疾病进程的动态监测和治疗效果的评价具有不可替代的作用通过连续监测特定指标的变化，可及时调整治疗方案，提高治疗效果例如，通过监测血糖和糖化血红蛋白水平来评估糖尿病控制情况；通过监测肾功能指标来评估肾病患者的治疗效果；通过监测心肌酶谱来判断心肌梗死患者的恢复情况这些应用极大地提高了疾病管理的精准度临床生物化学分析的基本原理分析方法概述临床生物化学分析方法包括化学分析、免疫分析、分子生物学分析等多种技术常用方法有光度法、电化学法、色谱法、质谱法和免疫化学法等不同方法有各自的适用范围和优缺点常用仪器设备介绍现代生化分析主要依靠自动化仪器完成，包括生化分析仪、免疫分析仪、电解质分析仪等专用设备这些仪器通过精密的光学、电子和机械系统实现样本的自动处理和分析数据处理系统现代实验室信息系统负责数据采集、处理和报告生成，提高分LIS析效率和准确性这些系统还能进行质量控制监测和异常结果警示，保证检测质量第二章样本采集与处理质量评估评价样本是否适合分析样本处理离心、分装等预处理步骤血液样本采集静脉血、动脉血和毛细血管血的采集方法样本采集是临床生物化学分析的第一步，也是保证分析质量的关键环节血液样本采集需注意患者准备、采集时间、抗凝剂选择等因素静脉血通常用于大多数生化检测，需选择合适的采血管和抗凝剂动脉血主要用于血气分析，采集过程要特别注意无菌操作和气泡防止采集后的样本需及时进行预处理，包括凝血、离心和分装等步骤整个过程必须严格按照标准操作规程进行，以确保样本质量和分析结果的准确可靠样本保存与运输样本采集完成采集后立即标记样本信息，包括患者基本信息、采集时间和样本类型等，确保样本可追溯性短期保存大多数生化项目的样本可在2-8°C保存24小时某些不稳定物质（如钾离子、葡萄糖）需在2小时内完成检测或进行特殊处理长期保存需要长期保存的样本应分装后置于-20°C或-80°C冰箱中避免反复冻融，每次冻融会导致某些生物分子活性降低10-15%样本运输运输过程保持合适温度，使用专业样本运输箱，避免剧烈震荡和极端温度环境运输时间超过2小时需使用冰袋或干冰样本前处理技术离心分离血清血浆与细胞成分/提取分离目标物质浓缩增加目标物质浓度样本前处理是确保分析准确性的重要环节离心是最常用的前处理方法，通常采用转分钟的速度离心分钟，有效分离血清血浆与3000-4000/10-15/细胞成分对于某些特殊检测项目，可能需要更高速的离心转分钟10000/提取技术包括液液萃取、固相萃取等，主要用于分离特定的分析物质例如，激素分析前常需进行有机溶剂萃取以去除干扰物质浓缩技术则用-于提高低浓度物质的检测灵敏度，常见方法有蒸发浓缩、冷冻干燥和膜浓缩等不同的分析项目可能需要不同的前处理策略，应根据检测要求选择合适的方法第三章蛋白质分析基因转录与翻译蛋白质合成与修饰DNA信息转化为蛋白质肽链合成与翻译后修饰2功能发挥结构形成催化、运输、调节等生物学功能

一、

二、

三、四级结构的形成蛋白质是由氨基酸通过肽键连接而成的生物大分子，是生命活动的主要承担者蛋白质的空间结构决定其功能，从简单的一级结构到复杂的四级结构，每一层次都对蛋白质功能有重要影响在临床意义上，血清蛋白质水平反映机体合成能力和营养状态，如白蛋白低下提示肝功能不全或营养不良特异性蛋白质则可作为疾病标志物，如C反应蛋白升高提示炎症反应，肌钙蛋白升高提示心肌损伤蛋白质检测在疾病诊断、预后评估和治疗监测中具有重要价值蛋白质定量方法样本准备血清稀释或预处理，去除干扰物质，确保样本均质性和稳定性标准曲线制备使用标准蛋白质（如牛血清白蛋白）制备不同浓度的标准系列，作为定量参考测定采用比色法或免疫比浊法进行测定，比色法测定吸光度，免疫比浊法测定散射光强度结果计算根据标准曲线和样本信号，计算样本中蛋白质的实际浓度，考虑稀释因素电泳技术在蛋白质分析中的应用聚丙烯酰胺凝胶电泳基于蛋白质分子量大小的分离技术，常用于复杂混合物的分析SDS-PAGE使蛋白质变性并带负电荷，主要根据分子量进行分离Native-PAGE保持蛋白质天然构象，同时考虑电荷和形状的影响PAGE具有高分辨率，可分离分子量相差5%的蛋白质，是蛋白质纯度检测和分子量测定的重要手段临床上常用于血清蛋白电泳，检测单克隆免疫球蛋白病等电聚焦电泳基于蛋白质等电点不同进行分离的技术在pH梯度凝胶中，蛋白质迁移至其等电点位置后电荷中和，停止移动，从而实现高分辨率分离等电聚焦技术可分辨等电点相差

0.01个pH单位的蛋白质，常与SDS-PAGE结合形成二维电泳，实现蛋白质组的高分辨率分析临床上用于脑脊液蛋白质图谱分析，辅助诊断多发性硬化等神经系统疾病第四章酶学分析酶的基本概念酶的作用机制酶活性测定原理酶是一类具有催化功酶与底物形成特异性通过测量单位时间内能的生物大分子，主结合，降低反应活化底物减少量或产物生要为蛋白质结构，少能，加速反应进行成量来反映酶活性数为酶能显著提其催化过程符合锁钥酶活性单位定义为在RNA高生化反应速率，具模型或诱导契合模特定条件下，每分钟有高效率和高特异性型，反映了酶与底物转化底物所需的1μmol的特点之间的精确匹配关系酶量常见酶活性测定方法动力学法终点法连续监测反应过程中底物消耗或产物生成的变化率，计算初在反应达到一定时间后，一次性测量底物消耗或产物累积的速率来确定酶活性该方法可获得较为准确的酶活性信息，总量，计算平均反应速率该方法操作简便，但精确度低于适用于反应速度较快的酶动力学法连续监测通常采用光度法，如通过测量在处的吸终点法常用于反应速度较慢或无法建立连续监测系统的情况NADH340nm光度变化来监测脱氢酶活性动力学法需要控制反应条件，测定时需设定合适的反应时间，确保反应既充分又不超出线确保在酶浓度与反应速率呈线性关系的范围内进行测定性范围临床上常用的胆碱酯酶、脂肪酶等活性测定多采用此法临床常用酶学指标临床常用酶学指标主要包括转氨酶（），主要分布于肝细胞内，是评估肝细胞损伤的敏感指标；乳酸脱氢酶（），ALT/AST LDH广泛分布于心、肝、肾、肌肉等组织，其同工酶谱变化对疾病定位有重要价值；碱性磷酸酶（），主要分布于骨骼、肝胆系ALP统，对胆道梗阻和骨代谢疾病具有诊断意义此外，谷氨酰转肽酶（）是肝胆系统疾病的敏感指标；淀粉酶和脂肪酶主要用于胰腺炎的诊断；肌酸激酶（）及其同工γ-GGT CK酶则是心肌损伤的重要标志物这些酶学指标联合应用，可提高疾病诊断的特异性和敏感性CK-MB第五章糖代谢分析糖的吸收糖酵解食物中的碳水化合物被消化为单糖，主要是葡萄糖分解为丙酮酸，产生少量和ATP NADH葡萄糖，通过小肠吸收进入血液循环三羧酸循环电子传递链丙酮酸进一步氧化，产生更多和还原当ATP还原当量通过电子传递链最终生成大量ATP量糖代谢是机体能量供应的主要途径，包括糖酵解、三羧酸循环和电子传递链等过程血糖水平由胰岛素、胰高血糖素等多种激素精密调控，正常空腹血糖维持在范围内

3.9-

6.1mmol/L血糖测定在糖尿病诊断和监测中具有核心地位根据美国糖尿病协会标准，空腹血糖或随机血糖可诊断为糖≥

7.0mmol/L≥

11.1mmol/L尿病血糖水平异常还与多种代谢性疾病相关，如低血糖危象、妊娠糖尿病等，因此血糖监测在临床实践中具有广泛应用血糖测定方法糖化血红蛋白测定4-6%≥

6.5%正常参考值糖尿病诊断值健康人群糖化血红蛋白范围诊断糖尿病的临界水平7%控制目标糖尿病患者理想控制水平糖化血红蛋白HbA1c是葡萄糖与血红蛋白分子中氨基酸残基非酶促结合形成的产物由于红细胞寿命约120天，HbA1c反映近2-3个月的平均血糖水平，不受短期血糖波动影响，是评估糖尿病长期血糖控制状况的金标准HbA1c测定常用方法包括离子交换色谱法、亲和层析法和免疫比浊法离子交换HPLC是参考方法，具有高精度和准确性临床上，HbA1c不仅用于监测糖尿病控制效果，还可评估糖尿病并发症风险，每降低1%的HbA1c，微血管并发症风险可减少约30%第六章脂代谢分析脂质摄入与吸收膳食脂肪经胆汁乳化、胰脂肪酶水解后，以胆固醇、甘油三酯、脂肪酸等形式被肠道吸收脂蛋白转运脂质通过与载脂蛋白结合形成脂蛋白，包括乳糜微粒、极低密度脂蛋白VLDL、低密度脂蛋白LDL和高密度脂蛋白HDL等肝脏代谢肝脏是脂质代谢的中心器官，参与脂肪酸合成、脂蛋白组装和胆固醇合成组织利用外周组织通过脂蛋白脂酶水解脂蛋白中甘油三酯，释放脂肪酸用于能量产生或储存胆固醇测定总胆固醇高密度脂蛋白胆固醇总胆固醇测定采用胆固醇酯测定常采用选择性沉淀法或TC HDL-C酶胆固醇氧化酶法，先用胆固醇均相法沉淀法先用磷钨酸镁沉-酯酶水解胆固醇酯，释放游离胆淀非脂蛋白，上清液中测定HDL固醇，再用胆固醇氧化酶催化生均相法利用特异性试剂选HDL-C成过氧化氢，最后通过显色反应择性测定正常值男性HDL-C定量正常值范围为，女性，

3.1-

1.0mmol/L

1.3mmol/L，提示高低是冠心病独立危险因素

5.7mmol/L TC

6.2mmol/L HDL-C胆固醇血症低密度脂蛋白胆固醇传统上用公式计算，仅适用于LDL-C FriedewaldLDL-C=TC-HDL-C+TG/

2.2现多采用直接法测定，基于特定试剂选择性测量正常TG

4.5mmol/L LDL-C值，提示高危风险，是动脉粥样硬化的主要危险

3.4mmol/L LDL-C

4.1mmol/L因素甘油三酯测定结果判读显色反应正常参考范围为

0.56-

1.7mmol/L，酶法原理过氧化氢在过氧化物酶作用下与4-

1.7mmol/L为高甘油三酯血症轻样本处理GPO-PAP法是最常用的酶法，包括氨基安替比林和对氯酚反应生成红度

1.7-

2.3mmol/L、中度

2.3-血清或血浆样本需避免溶血，空腹三个酶促反应脂肪酶水解甘油三色醌亚胺染料，其颜色强度与甘油

5.6mmol/L和重度

5.6mmol/L高甘12小时采集以消除膳食影响冷藏酯生成甘油和脂肪酸；甘油激酶催三酯浓度成正比油三酯血症具有不同的临床意义和保存可维持稳定48小时，长期保存化甘油生成甘油-3-磷酸；甘油磷酸治疗策略需-20℃冷冻氧化酶催化生成双羟丙酮磷酸和过氧化氢第七章电解质与微量元素分析钠、钾、氯离子测定离子选择电极法火焰光度法离子选择电极法是临床常用的电解质测定方法，基于特火焰光度法是传统的钠钾测定方法，基于金属离子在火焰中ISE定离子通过选择性膜产生电位差的原理根据样本处理方式被激发后发射特征波长光谱的原理样本被雾化后进入火焰，分为直接法和间接法钠和钾离子发射的光强度与其浓度成正比直接法不稀释样本，直接测量血浆中离子活度，适用于即时该方法准确度高，但需专用设备，操作复杂，已逐渐被法ISE检测和危急值分析间接法将样本稀释后测定，测量的是离替代目前主要用作参考方法和校准标准火焰光度法不能子浓度而非活度，是实验室常规方法两种方法结果可能有测定氯离子，氯离子传统上使用汞滴定法测定，现多采用ISE所差异，特别是在蛋白质或脂质异常时法或库仑滴定法钙、磷、镁离子测定钙离子测定常用邻甲酚酞络合酮比色法，钙与在碱性条件下形成紫色复合物，在处有最大吸收或用砷唑法，特异o-CPC o-CPC570nm III性好但价格较高离子钙可用法直接测定，反映生理活性钙水平正常总钙范围，范围iCa ISE

2.1-

2.6mmol/L iCa

1.1-

1.3mmol/L磷主要以无机磷酸盐形式存在，常用磷钼酸盐法测定，无机磷与钼酸铵在酸性条件下形成磷钼酸络合物，通过还原剂形成钼蓝，在660nm处测定吸光度正常范围镁测定常用偶氮胂法，镁与偶氮胂形成红色复合物，正常范围

0.8-

1.6mmol/L IIIIII

0.7-

1.1mmol/L微量元素分析铁锌铜铁主要参与氧运输和电子传递，是血红蛋白、锌是300多种酶的辅助因子，参与核酸、蛋白质铜是多种氧化还原酶的重要组成部分，参与造肌红蛋白和多种酶的重要组成部分铁测定常代谢和免疫功能调节锌测定常用双硫腙比色血、胶原代谢和神经功能铜测定常用二乙基用亚铁嗪法，二价铁与亚铁嗪形成紫色络合物，法或原子吸收光谱法，后者灵敏度和特异性更二硫代氨基甲酸钠显色法或原子吸收光谱法通过测定562nm吸光度确定铁浓度高血清铜正常值为11-22μmol/L铜代谢紊乱与临床上常结合测定血清铁蛋白、转铁蛋白饱和血清锌正常值为

11.5-

18.5μmol/L锌缺乏可导致Wilson病肝豆状核变性和Menkes病密切相关度等指标，全面评估铁代谢状态正常值范围生长发育迟缓、免疫功能下降和皮肤损害等表肝豆状核变性表现为血清铜和铜蓝蛋白降低，男性11-29μmol/L，女性7-26μmol/L临床意义现慢性病、肝硬化、肾病综合征等疾病可导尿铜增高；而炎症、妊娠可导致血清铜浓度升包括铁缺乏性贫血、血色病和溶血性疾病等诊致锌缺乏，需及时干预高断第八章酸碱平衡分析生理学平衡状态酸碱平衡的动态维持缓冲系统碳酸氢盐、磷酸盐、蛋白质和血红蛋白缓冲系统器官调节肺脏、肾脏和肝脏的调节作用酸碱平衡是指机体维持体液氢离子浓度稳定的生理过程正常动脉血值范围为，由多重机制精密调控碳酸氢盐系统是最重要的缓冲pH

7.35-

7.45系统，通过比例调节值，并与呼吸系统协同工作CO2/HCO3-pH肺脏通过调节呼吸频率和深度控制排出，可在几分钟内响应变化；肾脏则通过调节碳酸氢盐重吸收和氢离子排泄，在数小时至数天内发挥CO2pH更持久的调节作用酸碱平衡紊乱可分为代谢性和呼吸性酸中毒或碱中毒，常见于多种急危重症，如糖尿病酮症酸中毒、严重呼吸衰竭等血气分析

7.35-

7.45正常值pH反映血液酸碱状态35-45mmHgPaCO2反映呼吸功能状态80-100mmHgPaO2反映氧合状态22-26mmol/LHCO3-反映代谢状态血气分析是评估呼吸和代谢功能的重要检查，通常使用动脉血样本主要测定指标包括pH值、二氧化碳分压PaCO

2、氧分压PaO

2、碳酸氢根浓度HCO3-、碱剩余BE以及氧饱和度SaO2等现代血气分析仪采用电化学传感器进行测定，pH和气体分压由特定电极直接测量，而HCO3-和BE由仪器根据Henderson-Hasselbalch方程计算得出血气分析对呼吸衰竭、酸碱平衡紊乱和组织缺氧的诊断至关重要，同时在危重症监测、机械通气参数调整以及治疗效果评估中发挥重要作用酸碱平衡紊乱的实验室诊断检查血气指标分析pH、PaCO

2、HCO3-和BE值识别原发紊乱区分代谢性与呼吸性紊乱评估代偿情况判断有无代偿及代偿程度计算阴离子间隙AG=[Na+]-[Cl-]+[HCO3-]代谢性酸中毒表现为pH

7.35，HCO3-22mmol/L，呼吸代偿表现为PaCO2下降根据阴离子间隙AG，可分为高AG代谢性酸中毒（如糖尿病酮症酸中毒、乳酸酸中毒）和正常AG代谢性酸中毒（如腹泻、肾小管酸中毒）诊断关键是找出具体病因，如测定血乳酸、酮体、肾功能等呼吸性碱中毒表现为pH

7.45，PaCO235mmHg，常见于过度通气、高原低氧、早期肺炎等肾脏代偿表现为HCO3-降低，但代偿不完全诊断需结合临床症状和病史，如焦虑、呼吸急促、手足搐搦等表现治疗主要针对原发病因，严重时可考虑药物干预或控制通气第九章激素分析中枢调控激素分泌下丘脑-垂体轴控制内分泌腺体释放激素反馈调节靶器官响应激素水平通过反馈机制自我调节靶细胞接受信号并响应激素是由内分泌腺或分散的内分泌细胞分泌，通过血液运输到靶器官发挥作用的化学信使按化学结构可分为蛋白质/多肽类激素、类固醇激素和氨基酸衍生物激素激素调控几乎所有生理过程，包括生长发育、代谢、生殖和应激反应等激素检测在内分泌疾病诊断中具有核心地位由于多数激素浓度极低（皮摩尔至纳摩尔范围），需采用高灵敏度分析方法常用技术包括放射免疫分析RIA、酶联免疫吸附测定ELISA、化学发光免疫分析CLIA和液相色谱-质谱联用法LC-MS/MS等临床应用时需考虑激素分泌的昼夜节律和搏动性，选择合适的采样时间和策略甲状腺功能检查甲状腺激素甲状腺激素包括四碘甲状腺原氨酸和三碘甲状腺原氨酸，主要以蛋白T4T3结合形式存在于血液中，仅少部分以游离形式和发挥生物活性主FT4FT3T4要由甲状腺分泌，而约的由外周组织脱碘转化而来80%T3T4促甲状腺激素促甲状腺激素由垂体前叶分泌，调控甲状腺激素的合成和分泌与TSH TSH甲状腺激素之间存在负反馈调节关系，是甲状腺功能评估的最敏感指标甲状腺功能减退时升高，甲状腺功能亢进时抑制TSH TSH检测方法甲状腺功能检查主要采用免疫分析法，包括化学发光免疫分析、电化学CLIA发光免疫分析和酶联免疫分析等现代自动化分析系统可同时ECLIA ELISA测定多项甲状腺功能指标，提供全面评估性激素检测雌激素孕激素睾酮雌激素主要包括雌二醇、雌酮孕酮是主要的孕激素，由卵巢黄体、胎睾酮是主要的雄激素，男性主要由睾丸E2E1和雌三醇，在女性中主要由卵巢产盘和少量由肾上腺产生孕酮检测常用产生，女性主要由卵巢和肾上腺产生E3生，男性中主要由睾酮转化而来雌二化学发光免疫分析法，正常值卵泡期总睾酮包括蛋白结合和游离形式，游离醇是最主要的雌激素，对女性生殖发育，黄体期，睾酮是生物活性形式

3.18nmol/L

15.9-

63.6nmol/L和性周期至关重要妊娠期随周数增加而升高睾酮检测方法包括免疫分析和质谱法，雌二醇检测采用化学发光免疫分析或质后者特异性更高正常范围男性

8.4-谱法，需考虑月经周期变化正常范围孕酮检测用于评估排卵功能、黄体功能，女性睾酮

28.7nmol/L

0.35-

2.6nmol/L卵泡期，排卵期不全、先兆流产风险，以及辅助生殖技检测用于性早熟、性发育迟缓、多囊卵73-367pmol/L550-，黄体期术中的黄体支持监测同时也用于某些巢综合征、雄激素缺乏症和前列腺癌治1835pmol/L367-1101pmol/L临床应用于月经紊乱、闭经、不孕不育先天性肾上腺皮质增生症的诊断疗监测等和激素依赖性肿瘤等疾病诊断其他激素检测皮质醇生长激素胰岛素和肽C皮质醇是肾上腺皮质分泌的主要糖皮质激素，生长激素由垂体前叶分泌，主要通过促胰岛素是由胰腺细胞分泌的降糖激素，肽GHβC参与糖、脂肪和蛋白质代谢调控，具有重要进胰岛素样生长因子的产生来调控生是胰岛素原转化为胰岛素的副产物两者常1IGF-1的应激反应功能皮质醇分泌具有明显的昼长和代谢分泌具有脉冲性特点，受多种被联合检测，评估胰岛素分泌功能胰岛素GH夜节律，早晨高晚上低检测方法主要采用因素影响，单次测定临床意义有限刺激测定用于糖尿病分型、胰岛素抵抗评估和低GH免疫分析和质谱法，后者特异性更高，可避试验和抑制试验是评估分泌功能的重要手血糖病因鉴别肽较胰岛素半衰期长，不受GH C免与合成激素的交叉反应段，而测定则可反映的整体作用外源性胰岛素干扰，是评估内源性胰岛素分IGF-1GH泌的良好指标第十章肝功能检查肝脏是人体最大的实质性器官，具有合成代谢、解毒转化、分泌排泄和储存等多种功能肝功能检查通过测定血清中特定生化指标来评估肝脏的功能状态，主要包括肝细胞损伤指标、肝脏合成能力指标、胆汁淤积指标和肝纤维化指标等肝功能检查在肝病诊断、病情评估、药物性肝损伤监测和预后判断中具有重要应用价值肝功能指标异常可见于各种肝脏疾病，如病毒性肝炎、酒精性肝病、非酒精性脂肪性肝病、肝硬化和肝癌等同时，许多全身性疾病如心力衰竭、感染性疾病和自身免疫性疾病等也可引起肝功能指标异常血清蛋白测定胆红素测定总胆红素直接胆红素总胆红素是直接胆红素和间直接胆红素是指与葡萄糖醛TBIL DBIL接胆红素的总和，正常值为酸结合的胆红素，可直接在水中

3.4-测定方法主要包括重溶解，能被肾脏排泄正常值为

20.5μmol/L氮法和氧化法，现代自动化仪器直接胆红素升高多0-

6.8μmol/L多采用重氮法胆红素升高可导见于肝内或肝外胆汁淤积性疾病，致黄疸，表现为皮肤、巩膜和黏如病毒性肝炎、原发性胆汁性胆膜黄染，轻度黄疸需总胆红素管炎、胆管结石或胰头癌等导致才能被肉眼观察到的梗阻性黄疸

34.2μmol/L间接胆红素间接胆红素是未与葡萄糖醛酸结合的胆红素，不溶于水，与白蛋白结合IBIL在血液中运输，不能被肾脏排泄间接胆红素通过计算得出IBIL=TBIL-DBIL间接胆红素升高见于溶血性疾病、综合征等，新生儿高胆红素血症主要Gilbert为间接胆红素升高，可导致核黄疸第十一章肾功能检查肾小球滤过肾小管重吸收血液中水分和小分子物质的滤过有用物质的选择性回收浓缩稀释肾小管分泌调节尿液浓度和体液平衡代谢废物和药物的主动排泄肾功能检查是评估肾脏健康状况的重要手段，主要包括肾小球滤过功能、肾小管功能和肾脏内分泌功能的检测肾小球滤过功能主要通过血清肌酐、尿素氮和肾小球滤过率GFR评估；肾小管功能可通过尿浓缩稀释试验、β2-微球蛋白和N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶NAG等指标评估肾功能检查在肾脏疾病诊断、病情监测和药物剂量调整中具有重要意义肾功能损害可见于原发性肾脏疾病如慢性肾小球肾炎、肾病综合征等，也可见于系统性疾病导致的继发性肾损害如糖尿病肾病、高血压肾损害等早期发现肾功能异常有助于及时干预，延缓疾病进展血尿素氮测定生化基础测定原理尿素是蛋白质代谢的终产物，主要BUN测定主要采用酶法，包括尿素在肝脏合成，通过肾脏排泄血尿酶-谷氨酸脱氢酶法和尿素酶-水杨素氮BUN是反映血液中尿素浓度酸盐法尿素酶-谷氨酸脱氢酶法是的指标，代表尿素分子中的氮含量，常用方法，原理是尿素在尿素酶作约占尿素分子量的28%BUN与尿用下水解为氨和二氧化碳，氨与α-素的换算公式为尿素酮戊二酸在谷氨酸脱氢酶催化下生mmol/L=BUNmmol/L×

2.14成谷氨酸，同时NADH氧化为NAD+，通过测定NADH的减少量计算尿素浓度临床意义BUN正常参考范围为

2.9-

8.2mmol/LBUN升高可见于肾前性、肾性和肾后性因素导致的肾功能不全肾前性因素如低血容量、心力衰竭、大量蛋白质摄入等；肾性因素如急慢性肾炎、肾病综合征等；肾后性因素如尿路梗阻BUN降低少见，可能与重度肝功能不全、低蛋白饮食或妊娠等有关肌酐测定法酶法Jaffe法是传统的肌酐测定方法，基于肌酐与碱性苦味酸反应酶法是更为特异的肌酐测定方法，主要包括肌酐氨基水解酶Jaffe生成橙红色络合物的原理该方法操作简便，成本低，但特法和肌酐脱氨酶法酶法利用特异性酶催化肌酐水解，产生异性较差，易受胆红素、葡萄糖、蛋白质、抗坏血酸和酮体的中间产物或最终产物通过显色反应进行定量等干扰酶法受干扰物质影响小，特异性高，精确度好，是目前推荐为减少干扰，现代改良法采用动力学测定，在反应特定的测定方法但酶法成本较高，且对样本稳定性要求更高Jaffe时间点测量吸光度变化，显著提高了特异性该方法仍是许现代全自动生化分析仪多配备肌酐酶法试剂，提高了检测效多临床实验室采用的常规方法，但需注意结果解释时考虑可率和准确性能的干扰因素肌酐是肌酸在体内代谢的终产物，每日产生量相对恒定，主要通过肾小球滤过排泄血清肌酐是反映肾小球滤过功能的重要指标，正常参考范围为男性，女性肌酐水平与肌肉量相关，因此在解释结果时需考虑性别、年龄和肌肉状况53-106μmol/L44-97μmol/L等因素尿酸测定尿酸来源尿酸是嘌呤核苷酸代谢的终产物，约20%来自食物中的嘌呤，80%来自体内核酸代谢嘌呤在黄嘌呤氧化酶作用下最终生成尿酸人体缺乏尿酸酶，不能将尿酸进一步分解为更易溶的尿囊素测定原理尿酸测定常用尿酸酶法，尿酸在尿酸酶作用下生成过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶作用下与发色剂反应生成有色化合物通过测量吸光度变化计算尿酸浓度该方法特异性高，受干扰少，是临床常用方法参考范围血清尿酸正常参考范围为男性208-428μmol/L，女性155-357μmol/L性别差异主要与雌激素促进尿酸排泄有关尿酸水平还受年龄、饮食、肥胖程度和药物等因素影响临床意义高尿酸血症是痛风的生化基础，尿酸420μmol/L时可在关节、肾脏等处沉积形成尿酸盐结晶，导致痛风性关节炎和尿酸性肾病高尿酸血症还与代谢综合征、心血管疾病风险增加相关低尿酸血症少见，可见于某些遗传性疾病和范可尼综合征等第十二章心肌标志物分析肌酸激酶同工酶CK-MB在心肌损伤后4-6小时开始升高，24-36小时达峰值，3-4天恢复正常特异性一般，可被骨骼肌损伤干扰心肌肌钙蛋白肌钙蛋白cTnI/cTnT在心肌损伤后3-4小时开始升高，24-48小时达峰值，可持续升高7-14天特异性极高，是诊断心肌梗死的金标准心型脂肪酸结合蛋白H-FABP在心肌损伤后1-3小时即可升高，6-8小时达峰值，24-30小时恢复正常升高迅速但特异性较低，适合超早期筛查肌红蛋白肌红蛋白是最早升高的标志物，损伤后1-2小时即可检测到，6-9小时达峰值，24小时恢复正常敏感度高但特异性差，主要用于排除诊断肌钙蛋白测定肌酸激酶同工酶测定生物化学基础肌酸激酶CK是一种催化肌酸与ATP之间磷酸基团转移的重要酶，在能量代谢中发挥关键作用CK有三种同工酶CK-MM骨骼肌型、CK-MB心肌型和CK-BB脑型健康人血清中主要为CK-MM95%，CK-MB占总CK的0-3%，CK-BB几乎检测不到心肌中CK-MB含量丰富，约占总CK的15-40%，因此CK-MB升高是心肌损伤的相对特异性指标但骨骼肌中也含少量CK-MB，严重骨骼肌损伤也可导致CK-MB升高测定方法CK-MB测定方法包括酶活性法和质量法酶活性法测定CK-MB的催化活性，单位为U/L，基于免疫抑制原理，先用抗体抑制CK-M亚基，剩余活性乘以2计算CK-MB活性质量法直接测定CK-MB蛋白质量浓度，单位为ng/mL或μg/L，常用免疫分析技术如化学发光法质量法特异性和灵敏度优于活性法，是目前临床推荐方法但两种方法参考范围不同，不能互相替代现代高敏肌钙蛋白检测的普及使CK-MB在急性心肌梗死诊断中的地位有所下降第十三章肿瘤标志物分析70%88%早期检出率提升复发监测准确性肿瘤标志物可提高部分癌症早期诊断率标志物动态变化可预测肿瘤复发65%治疗效果评估标志物下降幅度与治疗效果相关肿瘤标志物是肿瘤细胞产生或机体对肿瘤反应而产生的物质，可在血液、体液或组织中检测到理想的肿瘤标志物应具有高灵敏度和特异性，能在肿瘤早期阶段检测到，并且水平变化与肿瘤负荷相关根据化学性质，肿瘤标志物可分为蛋白类如CEA、AFP、CA系列、酶类如PSA、NSE、激素类如HCG、降钙素和基因类如BRCA1/2等肿瘤标志物在临床上主要用于辅助诊断，尤其是鉴别诊断；疗效监测，评估手术、放化疗等治疗效果；预后评估，标志物水平与预后密切相关；复发监测，标志物升高可早于影像学检查提示复发需要注意的是，大多数肿瘤标志物特异性有限，单一标志物对肿瘤诊断价值有限，临床应用需结合病史、体检和影像学检查，必要时联合多种标志物检测常见肿瘤标志物检测甲胎蛋白癌胚抗原AFP CEAAFP是胎儿期肝细胞产生的主要蛋白，CEA是胎儿期肠道产生的糖蛋白，应出生后迅速下降至极低水平AFP升用最广泛的肿瘤标志物之一CEA主高是原发性肝细胞癌的重要标志，灵要用于结直肠癌的监测和预后评估，敏度70-80%AFP400μg/L，结合影对早期诊断价值有限其他消化道肿像学阳性可诊断肝癌；AFP1000μg/L瘤如胰腺癌、胃癌，以及乳腺癌、肺高度提示肝癌部分生殖细胞肿瘤如癌等也可导致CEA升高良性疾病如睾丸癌、卵巢癌也可导致AFP升高，炎症性肠病、肝硬化、胰腺炎以及吸慢性肝炎和肝硬化患者可轻度升高烟也可导致轻度升高CA125CA125是一种高分子量糖蛋白，主要用于卵巢癌的诊断和监测卵巢上皮性癌约80%患者CA125升高CA125对早期卵巢癌敏感性低，但联合阴道超声和家族史可提高筛查效率CA125升高也见于子宫内膜癌、胰腺癌等，以及子宫内膜异位症、盆腔炎等良性疾病密切监测CA125动态变化对评估卵巢癌治疗效果和复发监测具有重要价值第十四章免疫学检验体液免疫细胞免疫免疫学检验意义体液免疫以淋巴细胞细胞免疫以淋巴细胞免疫学检验在感染性B T和浆细胞产生的抗体为主要效应细胞，主疾病、自身免疫性疾为主要效应分子，主要针对病毒感染细胞、病、过敏性疾病、肿要针对细菌、病毒等肿瘤细胞和移植物等瘤免疫和器官移植等胞外病原体抗体通细胞通过直接杀伤和领域具有重要诊断价T过中和、激活补体和分泌细胞因子两种方值通过检测特异性促进吞噬等机制发挥式发挥作用抗体、自身抗体、免保护作用疫复合物和细胞免疫功能，可辅助诊断多种疾病免疫球蛋白测定补体测定补体系统概述与测定C3C4补体系统是由多种血浆蛋白和细胞膜受体组成的复杂蛋白是补体系统中含量最丰富、功能最重要的组分，参与三条30C3酶系统，是先天性免疫的重要组成部分，在抗感染、免疫调激活途径主要参与经典途径和凝集素途径和测定C4C3C4节和清除免疫复合物等过程中发挥关键作用通常采用免疫比浊法，基于抗原抗体反应形成的混浊度与浓度成正比的原理补体激活有三条途径经典途径由抗原抗体复合物激活、-替代途径直接被微生物表面激活和凝集素途径由甘露糖结正常参考范围为，为和降低C

30.9-

1.8g/L C

40.1-

0.4g/L C3C4合凝集素激活三条途径最终形成相同的膜攻击复合物，见于活动性系统性红斑狼疮、膜增生性肾小球肾炎和某MAC SLE导致靶细胞裂解些补体缺陷病活动性患者和水平与疾病活动度呈负SLE C3C4相关，可作为监测疾病活动性和疗效评估的重要指标第十五章临床生物化学分析质量控制结果可靠性确保检测结果准确可靠标准化流程建立规范的操作程序系统监控全程监控分析过程质量控制是保证实验室检测结果准确性和可靠性的系统性措施，对于临床决策和患者安全至关重要良好的质量控制体系应贯穿检验前、检验中和检验后三个阶段，包括人员培训、设备维护、试剂管理、操作规范、结果审核等多个环节质量控制的基本概念包括准确度测定值与真值的符合程度、精密度重复测定结果的一致性、线性范围保持良好线性关系的浓度范围、检测限能可靠检测的最低浓度、回收率已知量分析物的回收程度等这些参数共同反映检测方法的性能特点，是评价分析质量的重要指标实验室应建立完善的质量管理体系，定期评估和持续改进，确保检测结果满足临床需求内部质量控制内部质量控制是实验室日常开展的质量监控活动，通过分析质控品评估检测系统的稳定性和可靠性的核心是控制图，最常用的IQC IQC是莱维詹宁斯控制图，将质控结果与目标值和允许偏差范围进行比较，通过图形直观反映分析过程的变异情况-Levey-Jennings西格玛多规则是判断质控结果是否失控的标准系统，包括单点超出平均值、连续两点超出同侧平均值、两点之差超13s±3SD22s±2SD R4s过、连续四点超出同侧平均值和连续十点位于均值同一侧等规则不同规则的组合使用可平衡检出率和假报警率，提4SD41s±1SD10x高质控效率当发现质控失控时，应立即停止检测，查找原因并采取纠正措施，确保患者结果可靠外部质量评价质评样品接收从质量评价组织获取未知浓度的质评样品，按要求保存并在规定时间内完成测定质评样品应当与患者样本采用相同的分析流程，由常规操作人员完成检测结果上报将质评样品的检测结果按照规定格式上报至质量评价组织，包括测定值、检测方法、仪器型号和试剂信息等上报必须在截止日期前完成，确保数据纳入统计分析评价报告分析接收并分析质量评价报告，了解本实验室结果与靶值的偏差、在同类实验室中的排名位置以及主要问题所在通常使用Z-score或偏移百分比评价结果的可接受性改进措施实施针对质评中发现的问题制定并实施改进措施，如方法学调整、仪器校准、操作培训或试剂更换等改进效果应通过后续质评或内部质控进行验证和跟踪第十六章临床生物化学分析仪器电化学分析仪器分离分析仪器包括电极系统、电位计、电包括色谱仪、电泳系统、质光学分析仪器流计等，利用电化学原理测谱仪等，用于复杂样品的组定电解质和某些代谢物分分离和定量分析自动化分析系统包括分光光度计、荧光计、化学发光仪等，基于物质对全自动生化分析仪、免疫分特定波长光的吸收、发射或析仪和流水线系统，实现高散射特性进行分析通量、多参数的集成化分析31分光光度计光源产生连续光谱的光源单色器分离特定波长光样品室光与样品相互作用检测器将光信号转换为电信号分光光度计是临床生物化学分析中最基础和应用最广泛的仪器，基于朗伯-比尔定律，通过测量物质对特定波长光的吸收来确定其浓度现代分光光度计主要分为可见光区380-780nm和紫外-可见光区190-780nm两种，后者可用于核酸和某些蛋白质的直接测定分光光度计的主要性能指标包括波长准确度、波长重现性、光度准确度、光度线性范围、杂散光和基线稳定性等现代分光光度计多采用计算机控制，具有自动设置波长、自动调零、多波长扫描和数据处理等功能在临床生化分析中，分光光度计主要用于酶活性测定、底物浓度测定和蛋白质定量等，是实验室的基本设备电解质分析仪离子选择电极测量原理电解质分析仪的核心部件是离子电解质分析仪基于能斯特方程原选择电极，由离子敏感膜、理，测量离子选择电极与参比电ISE内参比电极和外参比电极组成极之间的电位差，电位差与离子离子敏感膜对特定离子具有选择活度的对数成正比通过标准溶性响应，产生与离子活度相关的液校准建立电位浓度校准曲线，-电位差常用电极包括钠电极、进而计算样本中离子浓度分析钾电极、氯电极、钙电极等，每仪可采用直接法不稀释样本或间种电极含有特异性的离子载体或接法稀释样本，两者结果可能存交换剂在差异临床应用电解质分析仪广泛应用于钠、钾、氯、钙、锂等电解质的测定，是临床实验室的常规设备现代电解质分析仪多与血气分析仪集成，可同时测定、血pH气和电解质参数电解质分析对急危重症患者的监测和治疗调整具有重要意义，如心律失常、酸碱平衡紊乱和脱水等状态的评估全自动生化分析仪样本处理系统负责样本的识别、混匀、吸取和分配现代分析仪多采用条形码识别系统，自动识别样本信息，减少手工录入错误样本针采用液面感应技术，确保准确吸取，并设有防交叉污染装置试剂系统管理和分配各种分析试剂包括试剂冷藏保存装置、试剂识别系统和试剂分配装置大型分析仪可同时装载50-100种试剂，支持多项目同时检测试剂针采用液面感应和清洗技术，确保试剂准确加入和避免交叉污染反应系统提供反应所需的环境条件，控制反应进程包括反应杯、恒温装置、混合装置和光度测量系统反应温度通常保持在37±

0.1°C，确保酶反应在最佳条件下进行反应混合采用超声波或机械搅拌，确保反应均匀测量系统检测反应产物的信号并转换为浓度值多采用多波长分光光度法，可同时测量多个波长，实现多种分析方法现代分析仪采用固态探测器或光电二极管阵列，提高测量精度和速度系统定期进行自动校准，确保测量准确性第十七章临床生物化学分析结果解释参考值范围参考值范围是特定人群在健康状态下生化指标的分布区间，通常采用95%置信区间中央95%分布作为参考范围参考值范围受多种因素影响，包括人群特征年龄、性别、种族、地理环境、采样条件和分析方法等参考值范围不等同于正常值或临界值检测结果超出参考范围并不一定代表疾病状态，同样，在参考范围内的结果也不能完全排除疾病可能结果解释需结合临床背景和变化趋势综合判断影响因素分析生化指标受多种非疾病因素影响，如生理变异昼夜节律、月经周期、生活习惯饮食、运动、吸烟、药物干扰和分析前变异采样、运输、保存等结果解释时必须考虑这些因素的影响例如，空腹和非空腹血糖有明显差异；肌酸激酶在剧烈运动后可显著升高；某些药物可干扰特定检测方法了解和控制这些影响因素，是准确解释结果的前提常见异常结果分析高血糖1空腹血糖或随机血糖提示糖尿病可能原因包

7.0mmol/L

11.1mmol/L括胰岛素分泌不足型糖尿病、胰岛素抵抗型糖尿病、胰岛素拮抗12激素增加应激状态和药物作用糖皮质激素等低蛋白血症2血清白蛋白为低白蛋白血症可见于蛋白质合成减少肝功能不35g/L全、营养不良、蛋白质丢失增加肾病综合征、蛋白质丢失性肠病和体液稀释大量输液等情况电解质紊乱3钠、钾、氯、钙、磷等电解质异常见于多种疾病状态如低钠血症见于肾脏钠丢失、稀释性低钠和抗利尿激素分泌异常等；135mmol/L高钾血症见于肾功能不全、酸中毒和组织损伤等

5.5mmol/L结果报告的书写规范的检验报告是临床医生做出正确诊断和治疗决策的基础标准报告格式应包括患者基本信息姓名、性别、年龄、住院号、样本信息样本类型、采集时间、接收时间、检测项目、结果值、参考区间、单位和结果标识高低于参考范围等对关键性异常结果应有明显标/记，引起临床重视现代实验室信息系统可提供历史结果对比、变化趋势图和异常值自动报警等功能，帮助临床更直观地理解结果变化结果报告应注明LIS检测方法和仪器信息，必要时提供方法学说明，便于不同实验室结果比较对特殊情况如溶血、黄疸、脂血等影响结果的因素，应在报告中注明，提示结果解释时的注意事项第十八章新技术在临床生物化学分析中的应用质谱技术基因芯片技术生物传感器技术质谱技术是基于分子质荷比分离的高特异性基因芯片技术是将大量已知序列的寡核苷酸生物传感器是将生物敏感元件与物理化学换分析技术，在临床生化分析中日益重要液或探针固定在固体基质上，通过杂交反能器相结合的分析装置，可将生物分子特异cDNA相色谱质谱联用技术结合了色谱应检测样本中特定核酸序列的方法这种高性识别信号转换为可测量的电信号微流控-LC-MS/MS分离和质谱检测的优势，具有高特异性、高通量技术可同时分析数千至数万个基因的表芯片和纳米材料的应用极大提高了生物传感灵敏度和多组分同时分析的能力，被视为色达情况，在疾病诊断、药物筛选和个体化医器的灵敏度和特异性，使即时检测成POCT谱科学的金标准疗中具有广阔应用前景为可能，为患者床旁检测和家庭自测提供了技术支持第十九章临床案例分析糖尿病案例肝功能异常案例患者，男，岁，因多饮、多尿、体重减轻个月就诊体患者，女，岁，体检发现肝功能异常无特殊不适既往45235检，实验室检查空腹血糖，餐后无肝病史体检无黄疸，肝脾未触及实验室检查BMI27kg/m²

11.2mmol/L2ALT小时血糖，糖化血红蛋白，尿常规尿糖，，，，总胆红素

15.6mmol/L

8.5%86U/L AST65U/L ALP125U/L GGT92U/L，白蛋白，，，+++21μmol/L38g/L HBsAg+HBeAg+HBV DNA

5.2×10⁴IU/mL生化分析解读空腹血糖，餐后小时血糖

7.0mmol/L2，符合糖尿病诊断标准糖化血红蛋白提示生化分析解读转氨酶轻度升高，以为主，提示肝细胞损

11.1mmol/L

8.5%ALT近个月血糖控制不佳尿糖阳性表明血糖已超过肾糖阈，出伤；和轻度升高，提示胆汁淤积成分；白蛋白正常，3ALP GGT现糖尿指数显示超重，提示可能为型糖尿病建议进表明肝脏合成功能尚未受损；血清学检查显示乙肝表面抗原BMI2一步检测胰岛素、肽水平评估胰岛功能和抗原阳性，结合病毒载量，考虑为乙型肝炎病毒活动复制C e期临床诊断倾向于慢性乙型肝炎建议进一步完善抗病毒治疗前评估课程总结基础理论掌握掌握临床生物化学分析的基本原理、方法学特点和质量控制要点，夯实专业理论基础技能培养培养样本处理、仪器操作和结果判读能力，提高实验操作技能和问题解决能力临床思维形成学会将生化指标与疾病病理生理变化联系，形成初步的临床思维和综合分析能力创新意识培养了解学科发展前沿和新技术应用，培养科研创新意识和终身学习能力参考文献与推荐阅读教材推荐期刊文献网络资源《临床生物化学检验》，陈启明主编，《中国临床检验杂志》，中华医学会临中华医学会临床检验分会官网提供临人民卫生出版社，最新版床检验分会主办床检验最新指南和专家共识《临床生物化学与分子生物学检验》，《临床检验杂志》，中国医师协会临床中国医师协会临床检验医师分会网站李金明主编，北京大学医学出版社，最检验医师分会主办提供继续教育和学术交流资源新版《》，美国临床化学国家卫健委临床检验中心网站提供行Clinical Chemistry《现代临床生物化学》，王毓

三、徐克协会AACC主办业标准和质量控制相关资源前主编，人民卫生出版社，最新版。