2023年直接凝集反应实验报告

免疫学-直接凝集反应试验汇报试验一玻片凝集试验

1.试验原理颗粒性抗原（细菌、红细胞等）与对应的抗体结合，在适量电解质（一般是

0.85%NaCl）存在的条件下出现凝集现象，称为凝集反应凝集反应的措施有两种

①直接法；

②间接法颗粒性抗原（如完整的细菌或细胞）与对应抗体在体外直接结合而出现的凝集反应，称为直接凝集反应如玻片凝集反应和试管凝集反应将可溶性抗原预先吸附于一种与免疫无关的颗粒性载体表面，然后与对应的抗体结合，出现凝集现象，称为间接凝集反应如RF因子检测玻片凝集试验是使用已知抗体与未知颗粒性抗原在玻片上直接结合而出现时凝集反应此类反应较简朴迅速，常用于抗原或抗体的定性检测本次试验使用玻片凝集试验的原理进行人类AB0血型的J鉴定AB0血型系统是按照血液中红细胞表面的I抗原分子来命名的人类ABO血型抗原有两种A抗原和B抗原A型血红细胞表面具有A型抗原，血液中具有抗B抗体；B型血红细胞表面具有B型抗原，血液中具有抗A抗体；AB型血红细胞表面具有A抗原和B抗原，血液中不具有抗A、B抗体；型血红细胞表面不具有A、B抗体，但血液中具有抗A、B抗体若用已知的抗A血清和抗B血清与受试者红细胞上时对应抗原结合，即可引起红细胞凝集，根据凝集反应成果便可判断出受试者时血型

2.试验措施1取洁净载玻片一张，用马克笔分为两格并注明A、B分区2倒置原则抗血清试剂瓶，悬空轻挤出抗A血清一滴，滴在A区内；同法在B区内滴加抗B血清一滴3使用消毒液对左手无名指进行消毒，待消毒液自然干燥后，使用无菌三棱采血针迅速刺破手指4用木棒日勺两端取血，分别在抗A血清和抗B血清中搅拌均匀5用无菌棉棒压迫手指止血6静置玻片数分钟后，观测红细胞凝集反应成果

3.试验成果

4.成果分析试验二试管凝集试验

1.试验原理试管凝集反应是在试管内将待检血清对倍稀释后，加入等量的已知颗粒性抗原与待检血清混合，然后观测试管内有无凝集快出现如出现凝集块者为阳性反应混合后仍均匀浑浊，无凝集块出现者为阴性反应根据血清凝集效价鉴定待检血清中对应抗体的含量即在试管内用已知颗粒性抗原检测未知抗体口勺相对含量日勺半定量试验本次试验是以定量日勺伤寒杆菌为抗原，根据与否发生凝集反应来检测血清中与否具有对应的抗体；根据各试管凝集程度时不一样，来判断抗体的I效价

2.试验措施1取试管6支，用马克笔进行标识，依次放入试管架中2在第一支试管中加入生理盐水

0.9ml,其他各管加生理盐水

0.5ml然后在第一只试管中加入伤寒免疫血清

0.1ml,用吸管将它与生理盐水吹打混匀后，取出

0.5ml加入第二支试管中；再将第二只试管的液体吹打混匀，取出

0.5ml加入到第三支试管中，其他各管依次按照上述环节将血清对倍稀释至第五支试管时，将试剂混匀后，取出

0.5ml弃之不用是第六支试管不含伤寒免疫血清，作为试验时阴性对照管最终在各管中都加入

0.5ml伤寒杆菌菌液3轻摇试管架，混匀试管内液体，56℃水浴1小时后，观测试验成果

3.试验成果1对照组即第六支试管，上清液浑浊，管底可有沉淀的I细菌，轻摇后分散呈均匀浑浊2试验组按1-5管依次观测阳性者管底出现不规则凝集物，较松散阴性者与对照组相似3凝集程度++++液体澄清透明，细菌所有凝集于管底，轻摇可见大的J凝集块+++液体稍浑，细菌大多数凝集于管底，摇动后凝块较前者小++:液体中等混浊，液体中有明显的I凝集物，凝集块较小+:液体混浊，仔细观测可以看见液体中有很小的凝集颗粒与对照管相似4凝集效价出现明显可见凝集物++时的血清最高稀释度为血清效价。