聊城大学农学院《兽医寄生虫学》课件之原虫病

兽医寄生虫学原虫病欢迎来到聊城大学农学院年春季学期《兽医寄生虫学》课程的原虫病专题2025本课程将深入探讨兽医领域中重要的原虫病，帮助学生掌握原虫的基础知识、家畜原虫病的诊断与防治技术原虫作为重要的病原微生物，在畜牧业生产中造成巨大经济损失通过系统学习，您将能够识别常见原虫病，理解其流行特点，掌握诊断方法，并制定有效的防控措施让我们一起踏上探索微观世界的旅程，揭开这些微小但危害巨大的病原体的奥秘课程概述原虫的基本特征与分类常见家畜原虫病的流行特点深入了解原虫的生物学特性、细胞结构、代谢特点以及现代掌握主要家畜原虫病的流行规律、传播途径和影响因素，为分类系统，建立扎实的理论基础防控提供理论依据重要原虫病的诊断与防治新兴和人畜共患原虫病学习现代诊断技术和有效的治疗防控方法，提高实际工作能关注具有公共卫生意义的原虫病，理解其在一健康理念中力的重要性第一部分原虫学基础原虫与宿主互作理解复杂的病原宿主关系-生活史与繁殖掌握原虫的发育周期与生殖方式结构与功能认识原虫的细胞器及特殊构造分类与基本概念学习原虫的定义与分类体系原虫学基础是理解各种原虫病的关键通过系统学习原虫的基本生物学特性，我们能够更好地把握原虫与宿主的互作关系，理解疾病的发生发展规律，为后续的原虫病诊断与防控奠定坚实基础原虫的定义与特征单细胞真核生物原虫是单细胞真核微生物，具有完整的细胞膜、细胞质和细胞核，与细菌等原核生物有本质区别其细胞结构复杂，功能分化明显，能够独立完成生命活动完整的细胞结构原虫具有线粒体、高尔基体、内质网等细胞器，同时还拥有特殊的顶复合体、动基体等结构，这些结构与原虫的侵袭能力和致病性密切相关繁殖方式多样原虫的繁殖方式包括二分裂、多分裂、出芽生殖等无性生殖方式，某些种类还具有有性生殖过程，这种繁殖方式的多样性增加了原虫的适应能力复杂的生活史许多原虫具有多宿主循环的复杂生活史，在不同宿主体内或环境中表现为不同形态，这种特性增加了原虫病防控的难度原虫的基本结构细胞器系统特殊结构原虫作为真核生物，拥有细胞核、线粒体、顶复合体是球虫、疟原虫等顶复体门原虫高尔基体等基本细胞器核仁明显，染色的特征结构，由极环、极管和微线组成，质分布特征可作为鉴别依据线粒体构造与侵入宿主细胞密切相关动基体是运动与功能独特，是药物作用靶点器官的基础结构，与鞭毛、纤毛相连表膜系统运动器官细胞膜及其特化结构构成原虫的表膜系统，鞭毛、伪足和纤毛是原虫的主要运动器官不仅提供保护，还参与营养物质吸收、抗锥虫具有鞭毛，阿米巴使用伪足运动，小原呈递等重要功能某些原虫还具有独特袋虫等通过纤毛运动这些结构形态特征的细胞外被膜或细胞壁结构是原虫分类和鉴别的重要依据原虫的营养与代谢特点异养营养方式原虫主要通过细胞膜直接吸收、吞噬和胞饮等方式获取营养物质不同类型的原虫具有不同的营养摄取策略，这与其寄生部位和生活环境密切相关糖酵解途径的特殊性许多原虫具有独特的糖代谢途径，如球虫含有顶质体，类似于植物的叶绿体，但功能不同这些特殊的代谢途径为靶向药物开发提供了可能能量代谢与药物靶点原虫的能量代谢系统与哺乳动物存在明显差异，这些差异成为抗原虫药物作用的重要靶点例如，某些药物可特异性阻断原虫的呼吸链而不影响宿主细胞蛋白质合成与抗原变异许多原虫具有抗原变异能力，通过改变表面蛋白质结构逃避宿主免疫攻击这种变异机制增加了疫苗研发的难度，也是原虫感染常呈慢性过程的原因之一原虫的生活史特点滋养体与包囊阶段多数原虫具有营养生长的滋养体阶段和抵抗外界环境的包囊阶段滋养体在宿主体内活跃生长繁殖，而包囊则能在外界环境中长期存活，是重要的传染源无性生殖与有性生殖原虫通常通过二分裂或多分裂进行无性繁殖，而某些种类如球虫还具有配子体生殖等有性生殖过程这种复杂的繁殖方式增加了原虫的遗传多样性宿主内外发育某些原虫的生活史完全在宿主体内完成，而另一些则需要在宿主体外完成部分发育了解这些发育特点对于切断传播链至关重要例如，球虫的配子体发育需要在宿主外环境中完成传播媒介与中间宿主许多原虫依赖节肢动物媒介传播，如锥虫需要采血昆虫，疟原虫需要蚊子这些媒介不仅是简单的机械传播者，原虫还在其体内完成生活史的重要阶段原虫的分类系统鞭毛虫类顶复体门纤毛虫类与肉足虫类锥虫科、利什曼原虫等代表这类原虫具最大的原虫类群，包括球虫、疟原虫等重纤毛虫如小袋虫，肉足虫如阿米巴等前有一条或多条鞭毛作为运动器官，常寄生要病原体其特征是具有顶复合体结构，者以纤毛为运动器官，主要寄生于消化道；于血液或组织中锥虫是重要的动物病原能够主动侵入宿主细胞这类原虫多呈胞后者通过伪足运动，多引起消化道或组织体，造成巨大经济损失内寄生，生活史复杂感染代表种类锥虫、利什曼原虫代表种类球虫、疟原虫、弓形虫纤毛虫平衡小袋虫、痢疾小袋虫•••特征具有鞭毛和波状膜特征具有顶复合体结构肉足虫痢疾阿米巴、福氏内阿米巴•••常见疾病锥虫病、利什曼病常见疾病球虫病、疟疾、弓形虫病常见疾病小袋虫病、阿米巴病•••第二部分重要家畜原虫病诊断与鉴别准确识别各类原虫病临床表现与病理掌握典型症状与病变流行特点了解传播规律病原学特性认识重要原虫种类家畜原虫病在畜牧业生产中造成巨大经济损失从这一部分开始，我们将系统学习各种重要的家畜原虫病，包括牛、羊、猪、鸡等主要经济动物的常见原虫病通过深入了解这些疾病的病原特性、流行规律、临床表现以及诊断防控技术，提高学生的实际工作能力牛球虫病种13致病球虫种类牛至少有种艾美耳球虫，其中牛艾美耳球虫致病性最强1395%犊牛感染率集约化饲养条件下，犊牛感染率高达以上95%70%经济损失主要表现为生长迟缓，平均可减少的日增重70%天21孢囊存活期环境中孢囊可存活长达天，成为持续感染源21牛球虫病是一种由艾美耳属球虫引起的寄生虫病，主要侵害犊牛的肠道，造成腹泻、脱水和生长迟缓该病在集约化养牛场普遍存在，特别是在卫生条件较差、饲养密度高的环境中更为常见球虫病的防控重点在于环境卫生管理和预防性给药保持牛舍干燥清洁，避免粪便污染饲料和饮水，对新生犊牛进行预防性用药，都是有效的防控措施牛球虫病的生活史孢囊阶段侵入阶段感染性孢囊随粪便排出环境，需经过孢子具感染性的孢囊被牛摄入后，在肠道中释体发育才具有感染性这一阶段需要适宜放子孢子体子孢子体主动侵入肠上皮细的温度、湿度和氧气条件，大约需要1-5胞，开始细胞内发育不同种类的球虫侵天时间完成完成孢子体发育的孢囊含有入肠道的不同部位，如牛艾美耳球虫主要个孢子囊，每个孢子囊内有个子孢子42侵害小肠和盲肠体有性生殖无性生殖经过数代无性生殖后，部分裂殖子发育为侵入细胞后，子孢子体发育为滋养体，然4雌雄配子体，通过有性生殖形成合子，最后通过多次无性生殖（裂殖体生殖）产生终发育成孢囊孢囊随粪便排出体外，完大量裂殖子每代裂殖体生殖都会破坏大成整个生活史整个发育周期从感染到排量肠上皮细胞，是球虫病致病的主要原因出孢囊约需天17-21羊球虫病猪球虫病病原特性易感动物临床症状猪球虫病主要由猪等孢子球周龄仔猪最为敏感，尤主要表现为腹泻，粪便呈淡1-3虫、猪微球虫等多种球虫引其是刚断奶的仔猪年龄越黄色或灰白色，有时混有血起，其中以猪等孢子球虫最小，感染越重成年猪通常液严重感染可导致脱水、为常见且致病性最强该球为无症状带虫者，成为传染消瘦、生长迟缓甚至死亡虫主要侵害小肠上皮细胞，源集约化饲养条件下，发病死率在未经治疗的病例中导致肠绒毛损伤病率可达以上可达80%20%诊断方法综合流行病学、临床症状和实验室检查粪便检查是重要手段，采用浮游法可检出孢囊病理学检查可见肠黏膜充血、水肿，甚至溃疡形成鸡球虫病全球性重要禽病鸡球虫病是养禽业最重要的寄生虫病之一，全球年经济损失超过亿美元在中国，30几乎所有养鸡场都有不同程度的感染，特别是在密集饲养条件下更为严重七种主要致病球虫鸡球虫病由七种艾美耳属球虫引起，包括盲肠球虫、坏死球虫、柔嫩球虫等不同球虫侵害肠道不同部位，致病力和临床表现各异临床特点与危害主要危害周龄的雏鸡，表现为腹泻、精神沉郁、采食量下降盲肠球虫感染可引3-6起血便，坏死球虫感染可导致高死亡率，柔嫩球虫感染则主要引起生长障碍预防与控制策略综合防控措施包括良好的饲养管理、环境消毒、预防性使用抗球虫药物以及球虫疫苗接种育雏期是防控的关键阶段，应特别加强管理鸡球虫病的病理变化盲肠球虫病变柔嫩球虫病变继发性病变盲肠球虫主要侵害鸡盲肠，引起典型的出柔嫩球虫主要侵害小肠上部，是导致鸡慢球虫感染后，肠道黏膜屏障功能受损，容血性病变感染初期，盲肠壁充血、水肿，性球虫病的主要病原感染后，肠黏膜苍易引发继发性细菌感染，特别是坏死性肠内含血液和纤维素渗出物重度感染时，白，肠壁增厚，肠腔内含有灰白色或淡黄炎梭菌等厌氧菌在受损肠黏膜中大量繁盲肠明显肿大，内含凝血块，形成特征性色的干酪样物质殖，产生毒素，加重病情的血肠组织学检查可见肠绒毛萎缩变短，黏膜上此外，严重的球虫病还可引起肝脏肿大、组织学上可见盲肠黏膜上皮细胞大量坏死皮细胞大量脱落，腺窝变浅虽然不如盲脾脏萎缩等全身性病变长期慢性感染导脱落，固有层出血性炎症，大量球虫发育肠球虫引起的出血性病变那么显著，但柔致营养不良，可见胸肌萎缩、脂肪消耗和阶段散布其中这种病变不仅直接影响消嫩球虫对消化吸收功能的影响更持久，是羽毛光泽度下降等非特异性变化化吸收功能，还可引起继发性细菌感染造成生长迟缓和饲料转化率下降的主要原因鸡球虫病的免疫与疫苗疫苗类型组成成分优点缺点非减毒活疫苗野毒株孢囊免疫效果好可能引起临床症状减毒活疫苗经过减毒的毒株安全性较高成本高，产量有限基因工程疫苗球虫抗原基因安全性最高免疫效果有限，研发中亚单位疫苗球虫抗原蛋白标准化生产保护率较低，成本高鸡感染球虫后可产生有效的免疫保护，这种免疫主要是针对特定球虫种类的，不同种球虫之间基本无交叉免疫免疫机制主要依赖细胞介导的免疫反应，淋巴细胞起关键T作用活球虫疫苗是目前应用最广泛的预防手段，通常包含种致病球虫的孢囊疫苗可通过饮水、饲料或喷雾方式给予雏鸡，接种后球虫在肠道中进行有限繁殖，刺激免疫系统7产生保护性免疫减毒疫苗通过选育对抗球虫药敏感的早熟系减少繁殖次数，降低致病性小反刍兽衣原体病病原学特征小反刍兽衣原体（和）是寄生于羊红细胞内的原虫其形态多样，可T.lestoquardi T.ovis呈圆形、杆状或梨形，大小约为显微镜下可见衣原体呈现蓝色胞质和红色核

0.5-

1.5μm质的特征性结构流行病学衣原体病主要通过硬蜱传播，在中国西北、华北和东北地区较为常见温暖季节是发病高峰期，与媒介蜱活动密切相关幼龄羊和引进羊更易感，本地品种通常具有一定的抵抗力近年来，随着全球气候变化，该病的流行区域有扩大趋势临床症状与病理主要表现为发热（体温可达°以上）、贫血、黄疸和淋巴结肿大急性病例可41C见呼吸困难、血红蛋白尿和神经症状死亡率在未经治疗的病例中可达病理60%变化包括肝脾肿大、肺水肿、淋巴结肿大和出血性肠炎等诊断与防控确诊依靠血涂片检查发现红细胞内衣原体技术和血清学检测可用于亚临床PCR感染的筛查防控措施包括蜱虫防治、预防性用药和避免易感羊群进入流行区药物治疗以双羟萘酸咪唑啉和四环素类药物为主牛泰勒虫病牛泰勒虫病是由牛泰勒虫（）引起的一种重要传染病，通过硬蜱传播在中国主要分布于华北、西北和东北地区，夏秋季是发病高峰期该病主要危害Theileria annulata黄牛、奶牛等改良品种，其临床特征包括持续高热、贫血、黄疸和淋巴结肿大病原体通过蜱虫叮咬进入牛体，首先侵入淋巴细胞进行裂体增殖，然后侵入红细胞形成泰勒体感染率和死亡率均较高，对畜牧业造成严重经济损失早期诊断和及时治疗是控制疾病的关键猪巴贝斯虫病病原体特征猪巴贝斯虫是寄生于猪红细胞内的原虫，主要包括两种大型猪巴贝斯虫（）和小型猪巴贝斯虫（）显微镜下可见其B.trautmanni B.perroncitoi在红细胞内呈梨形、圆形或不规则形，常成对出现，呈双联体状态大型猪巴贝斯虫长，宽•

2.5-

4.5μm

1.5-

2.0μm小型猪巴贝斯虫长，宽•

1.2-

2.0μm

0.5-

1.0μm发病机理巴贝斯虫通过蜱虫叮咬进入血液循环，侵入红细胞内繁殖随着虫体增殖，大量红细胞被破坏，导致溶血性贫血同时，被破坏的红细胞释放血红蛋白，经肝脏代谢产生胆红素，引起黄疸溶血性贫血直接破坏红细胞•免疫介导自身免疫性溶血•毒素释放代谢产物导致全身症状•临床表现猪巴贝斯虫病的临床症状主要包括间歇性高热（°）、进行性贫血、黄疸和血红蛋白尿病猪表现精神沉郁、食欲减退、呼吸加快，严重时可40-42C出现神经症状仔猪症状更为严重，死亡率可达30-50%急性期高热、贫血、黄疸•慢性期生长迟缓、生产性能下降•并发症心力衰竭、肾功能衰竭•诊断方法确诊依靠实验室检查，主要包括血涂片显微镜检查发现红细胞内巴贝斯虫此外，技术和血清学检测（、）可用于确认感染和流行病学PCR ELISAIFA调查需与其他引起贫血和黄疸的疾病如猪瘟、猪链球菌病等鉴别血涂片检查最直接的诊断方法•分子生物学诊断高特异性•血清学检测适用于群体普查•犬猫巴贝斯虫病犬大巴贝斯虫犬小巴贝斯虫猫巴贝斯虫体积较大（），多为单个或成对寄生体积较小（），呈环状、点状或杆状，主要为猫小巴贝斯虫，体积极小（2-5μm1-3μm

0.5-于红细胞内，主要通过德氏钝缘蜱传播感染可通过梵谷钝缘蜱传播，也可通过犬只打斗时），单个或多个寄生于红细胞内猫

1.5μm后症状严重，表现为急性发热、贫血和黄疸，的血液接触直接传播感染后多呈慢性过程，感染后症状通常较轻，但可表现为间歇性发热、若不及时治疗死亡率高达症状较轻，但更难彻底治愈食欲减退和轻度贫血免疫功能低下的猫可出20%现严重症状犬猫巴贝斯虫病的治疗主要使用咪唑啉胺甲酸盐（犬）或阿托品并恶磷酸萘呱（猫），辅以支持治疗如输液、补充铁剂等预防主要依靠定期驱虫和避免蜱虫叮咬对于疑似病例，应及时进行血涂片检查和确诊PCR锥虫病概述形态特征传播媒介锥虫是具有一条鞭毛的原虫，体呈锥形或主要通过采血昆虫如采采蝇、马蝇、蚊子梭形，长特征性结构包括等传播媒介通过叮咬感染动物获取带虫10-30μm单个大动基体、鞭毛及波状膜在染色血血液，锥虫在媒介体内发育增殖，再通过涂片中，可见紫色核和红色动基体，为确叮咬传给新宿主不同锥虫种类依赖特定诊依据媒介传播地理分布宿主范围主要流行于热带和亚热带地区，特别是非各种锥虫具有不同的宿主偏好性布氏锥洲撒哈拉以南地区（因采采蝇分布）在虫主要感染牛，刚果锥虫侵害多种家畜，亚洲，包括中国南方和西北地区也有分布冈比亚锥虫和罗得西锥虫可感染人类某分布规律与特定媒介昆虫的生态习性密切些锥虫具有广泛的哺乳动物宿主范围相关骆驼锥虫病80%流行区感染率中国西北地区骆驼群体中的感染率可高达80%25%急性期死亡率未经治疗的急性感染病例死亡率约为25%℃40发热温度感染初期可出现高热，体温可达℃以上4050%生产力下降慢性感染可导致骆驼生产性能下降50%骆驼锥虫病是由骆驼锥虫（）引起的一种严重传染病，在中国主要分布于新疆、内蒙古、甘肃等西北地区该病主要通过吸Trypanosoma evansi血昆虫如马蝇、蚊子等机械传播，临床上表现为间歇性发热、进行性消瘦、贫血和水肿急性病例可在数周内死亡，而更常见的是慢性病程，表现为长期消瘦、贫血和生产性能下降诊断主要依靠血涂片检查发现锥虫治疗以喹那品类药物和二苯胺类药物为主，防控重点是驱除媒介昆虫和定期检查治疗马锥虫病治疗与预后喹那朋与赛乙苯胺联合使用效果最佳诊断方法2血涂片检查与技术相结合PCR临床症状间歇热、贫血、水肿和神经症状病原特性马锥虫（）主要通过性接触传播T.equiperdum马锥虫病在世界范围内有两种主要类型由骆驼锥虫（）引起的苏拉病，通过吸血昆虫传播；以及由马锥虫（）引起的杜林病，主要通过T.evansi T.equiperdum性接触传播后者是唯一不依赖媒介昆虫传播的锥虫病在中国，马锥虫病主要分布于华北、西北和东北地区，对马、驴等马属动物造成严重危害临床上可分为急性、慢性和隐性三种类型，其中慢性型最为常见特征性症状包括间歇性发热、粘膜皮肤水肿（特别是生殖器部位）、皮肤过敏性丘疹及后期神经症状牛锥虫病猪弓形虫病感染途径猪主要通过摄入含有弓形虫包囊的食物（被污染的饲料、饮水）或孢子囊（猫粪污染）感染垂直传播（经胎盘）在猪中也较为常见，是导致流产和死胎的主要原因2体内发育摄入的包囊或孢子囊在消化道中释放出速殖子，侵入肠上皮细胞和淋巴细胞，通过血液循环播散至全身各器官，特别是脑、心、肝和肌肉组织，形成组织囊包临床表现大多数成年猪感染为无症状，但妊娠母猪感染可导致流产、死胎或产出弱仔幼猪感染可表现为发热、呼吸困难、神经症状、腹泻等慢性感染主要影响生长性能4公共卫生意义猪肉中的弓形虫囊包是人类感染的重要来源食用未煮熟的含囊包猪肉可导致人类感染孕妇初次感染可致胎儿神经系统畸形或流产，免疫功能低下者可发生严重疾病羊弓形虫病易感动物传播途径生殖危害羊对弓形虫特别敏感，尤其是妊羊主要通过摄入被猫科动物粪便妊娠早期（前天）感染通常导30娠母羊不同品种的羊对弓形虫污染的饲料或饮水而感染在集致胚胎死亡和吸收；中期（30-的敏感性有差异，但总体感染率约化养殖场，如果有猫出入，污天）感染引起流产或木乃伊化90较高在中国主要产羊区，羊群染风险显著增加此外，经胎盘胎儿；晚期（天后）感染可导90弓形虫感染率可达，经的垂直传播是引起繁殖障碍的主致死胎、弱羔或带虫羔羊出生15-30%济损失巨大要途径这是羊群经济损失的主要原因防控措施饲养管理中应防止猫接触饲料和饮水，减少污染风险对育种母羊可考虑在配种前进行疫苗接种，提供一定保护力对流行区可采用磺胺乙嘧啶联合用药进行预-防确诊病例应及时治疗犬弓形虫病及其公共卫生意义犬在弓形虫生活史中的角色临床症状与诊断公共卫生意义犬虽然不是弓形虫的终宿主（猫科动物才大多数犬感染为无症状，但幼犬和免疫功尽管犬不直接传播弓形虫给人类，但家养是），但作为中间宿主，犬可被感染并携能低下的犬可出现明显症状急性感染表犬的存在增加了家庭环境中弓形虫存在的带组织囊包犬主要通过摄入含有弓形虫现为发热、淋巴结肿大、肌肉疼痛和呼吸风险犬可将囊包带入人类生活环境，增囊包的生肉或被猫粪污染的食物而感染困难严重感染可引起神经症状，如共济加接触机会此外，犬的毛发可能被猫粪失调、肌肉震颤和癫痫样发作中的孢子囊污染，间接增加人类感染风险感染后，速殖子在体内增殖并形成组织囊包，主要分布在脑、肌肉和内脏器官中诊断主要依靠血清学检测（如、ELISA犬不排出孢子囊，因此不能直接传染给人）和技术治疗以氯霉素、磺胺对于孕妇和免疫功能低下者，与犬密切接IFA PCR-类，但犬的存在增加了环境中弓形虫的循乙嘧啶联合用药为主预防重点是避免犬触时应注意卫生，避免感染风险定期为环风险摄入生肉和被猫粪污染的食物犬驱虫、避免犬摄入生肉、防止猫在犬活动区域排便，都是减少风险的有效措施牛新孢子虫病易感动物传播途径牛新孢子虫主要感染年龄小于天的犊主要通过粪口途径传播孢囊随粪便排30-牛，特别是周龄犊牛最为敏感新生出后可直接感染其他动物，也可污染饮水1-3犊牛感染后发病率高，症状严重成年牛和饲料孢囊具有极强的抵抗力，对常规通常为无症状感染，但可成为传染源，持消毒剂不敏感，在环境中可存活数月水续排出孢囊污染环境源污染是大范围暴发的主要原因人畜共患特点临床表现牛新孢子虫可感染人类，特别是儿童和免主要表现为水样腹泻，粪便呈黄色或绿色，4疫功能低下者人类主要通过接触感染犊有时混有黏液，但很少见血伴随腹泻，牛或饮用被污染的水而感染在农村地区，犊牛出现脱水、电解质紊乱和酸中毒严与牛密切接触的人群感染风险更高免疫重感染可导致死亡，死亡率可达慢50%功能正常者通常为自限性腹泻性感染导致生长迟缓猪隐孢子虫病病原特性猪隐孢子虫（和）是一种小型球形孢子虫，直径约孢囊壁薄，C.suis C.parvum4-6μm内含个裸子孢子，每个子孢子含个子孢子体具有自身感染循环，可在肠道内不断增殖，42导致持续感染流行特点主要影响周龄仔猪，尤其是刚断奶的仔猪最为敏感孢囊随粪便排出，具有极强的环境1-6抵抗力，常规消毒剂难以杀灭在集约化猪场，由于饲养密度高，感染率可高达，成为80%持续性问题临床症状典型症状是持续性水样腹泻，粪便呈黄绿色，有时混有黏液感染仔猪出现食欲减退、脱水和生长迟缓与轮状病毒、大肠杆菌等病原混合感染时，症状更为严重，死亡率可显著增加诊断方法主要通过粪便检查发现孢囊常用方法包括改良抗酸染色法、荧光染色法和免疫荧光技术方法可用于种属鉴定需与其他原因引起的腹泻鉴别，尤其是病毒性腹泻和细菌性腹泻PCR第三部分原虫病的诊断技术传统形态学检查直接镜检、涂片染色等方法免疫学诊断抗原抗体特异性检测技术分子生物学诊断基于核酸检测的高特异性方法临床诊断结合流行病学和临床症状原虫病的准确诊断是有效防控的基础现代兽医诊断技术从传统形态学检查发展到先进的分子生物学方法，大大提高了诊断的准确性和敏感性合理选择和综合应用各种诊断技术，是原虫病诊断的核心原则本部分将详细介绍各种诊断方法的原理、操作步骤、应用范围及其优缺点，帮助学生掌握科学诊断原虫病的技能同时，针对不同类型的原虫病，推荐最适合的诊断路径和技术组合粪便检查技术直接涂片法浮游法特殊染色技术最简单的检查方法，取少量新鲜粪便与生理盐利用饱和盐水或硫酸锌溶液的高密度使寄生虫改良抗酸染色法（）适用于检测隐孢子MZN水混合，直接镜检适用于快速筛查和检测活卵和孢囊浮于上层特别适合检测球虫孢囊、虫和新孢子虫孢囊，碘染色用于阿米巴滋养体动性滋养体优点是操作简单快速，缺点是灵线虫卵等比重较小的寄生虫操作简便，灵敏检测，碘胺银染色适用于微孢子虫检测不同敏度低，仅适合高度感染样本度较高，是球虫病诊断的首选方法染色方法针对不同原虫，提高检出率和特异性定量粪检技术如麦克马斯特计数法可测定每克粪便中的虫卵或孢囊数量（），用于评估感染程度和药物疗效沉淀法适用于检测吸EPG/OPG虫卵等比重较大的寄生虫对于慢性或轻度感染，应连续多次检查以提高检出率血液检查方法薄层血涂片技术厚层血涂片技术集中检查技术薄层血涂片是诊断血液原虫最常用的方法厚层血涂片用于提高检出率取较多血液当血液中原虫数量极少时，可采用集中技取少量抗凝血滴于载玻片一端，用推片快（约滴）置于载玻片上，用玻片角均术提高检出率常用方法包括微量离心3-4速均匀涂开，使血细胞呈单层分布干燥匀搅拌成约直径的圆形，自然干燥管技术，可浓缩白细胞层检查锥虫；滤膜

1.5cm后用甲醇固定，染色后镜检后不经固定直接染色浓缩法，利用特定孔径滤膜截留原虫；离心沉淀法，检查离心后白细胞层和血浆层优点是制作简便，可清晰观察原虫形态特此方法可浓缩较多血液于小面积内，提高之间的界面征和在红细胞内的位置关系，适合种类鉴检出率，适用于低寄生率时的筛查缺点定缺点是灵敏度较低，轻度感染可能漏是血细胞溶解，红细胞形态被破坏，不易此外，还有抗凝血培养技术，可增殖少量检染色方法通常采用姬姆萨染色，可显观察原虫与红细胞的关系对巴贝斯虫等原虫提高检出率对疑似但未检出原虫的示原虫核与胞质结构小型血原虫检出率较低样本，可采用动物接种实验或等分子PCR生物学方法进一步确认生物组织学检查检查方法适用原虫取样部位主要特点组织印片利什曼原虫、弓形虫淋巴结、脾脏快速简便，保留细胞完整性挤压片囊虫、肌胞虫肌肉组织、脑组织可直接观察组织囊包组织切片球虫、疟原虫、弓形虫肠道、肝脏、脑组织可观察病理变化和寄生位置免疫组织化学弓形虫、隐孢子虫各种感染组织高特异性，可检测少量原虫生物组织学检查是诊断组织中原虫感染的重要手段活体取样技术包括针吸活检、切除活检和内窥镜活检，应根据目标组织和动物状况选择合适方法尸检材料应及时固定，通常使用福尔马林溶液10%组织切片染色常规采用苏木精伊红染色，可显示组织结构和基本病变特殊染色如染色适用于检测含糖复合物丰富的原虫，硝酸银染色适用于检测隐孢子虫和新孢子-PAS虫免疫组织化学技术利用特异性抗体标记原虫，灵敏度和特异性较高，适用于难以通过形态识别的原虫免疫学诊断技术免疫层析技术快速现场检测工具免疫荧光检测2高特异性原虫直接检测技术ELISA高通量抗原抗体检测/血清学基本原理抗原抗体特异性结合免疫学诊断技术是近代发展起来的重要原虫病诊断手段，基于抗原抗体特异性反应原理技术是最常用的免疫学方法，可检测血清中的特异性抗体或样本中的原虫抗ELISA原间接主要用于抗体检测，适合流行病学调查；直接和夹心用于抗原检测，适合确诊当前感染ELISA ELISAELISA免疫荧光检测包括直接免疫荧光法（）和间接免疫荧光法（）利用荧光标记的特异性抗体直接检测样本中的原虫，如隐孢子虫检测；用于检测血清中的DFA IFADFA IFA特异性抗体，如弓形虫抗体检测免疫层析技术是基于胶体金标记的快速诊断方法，操作简单，结果直观，适合现场和基层使用，如犬弓形虫、犬巴贝斯虫快速检测等分子生物学诊断技术PCR聚合酶链反应（）是最基础的分子诊断方法通过特异性引物扩增原虫特定PCR DNA片段，实现高灵敏度和特异性检测常规适用于种类鉴定，多重可同时检测PCR PCR多种原虫，巢式提高检出灵敏度PCR实时定量PCR实时定量（）利用荧光信号实时监测扩增过程，不仅可检测原虫存在，还PCR qPCR能定量评估感染程度特别适用于评估治疗效果和感染动态变化荧光探针法特异性更高，适合临床诊断应用基因测序与分型基因测序技术可精确鉴定原虫种类和亚型，有助于追踪传播来源和研究流行病学特征基因多态性分析和系统发育研究对了解原虫种群结构和演化关系具有重要意义技术LAMP环介导等温扩增（）技术是一种在恒温条件下进行的核酸扩增方法，无需昂贵LAMP设备，结果可通过肉眼观察，特别适合现场和基层实验室使用检测速度快，灵敏度高，是新兴的现场快速诊断技术第四部分原虫病的治疗与防控药物治疗了解各类抗原虫药物的作用机制、适应症和使用方法，包括抗球虫药物、抗血原虫药物和抗锥虫药物等，掌握合理用药原则和耐药性管理策略免疫预防掌握原虫病疫苗的类型、研发进展和应用方法，包括活疫苗、灭活疫苗和新型基因工程疫苗，了解免疫防控的关键技术和注意事项生物防治探索生物防治技术在原虫病防控中的应用，包括益生菌拮抗、竞争性排除和中草药提取物等生态友好型防控方法，了解其作用机制和应用前景综合防控掌握原虫病综合防控体系的构建原则和实施方法，包括媒介控制、环境管理、饲养改进和监测预警等多方面措施，形成系统化的防控思路抗球虫药物离子载体类药物喹啉酮类药物嘧啶类与新型药物代表药物包括莫能菌素、盐霉素、拉沙里主要包括地克珠利和罗苯尼特，这类药物二氯拉秦是重要的嘧啶类抗球虫药，通过菌素等这类药物可形成脂溶性复合物，通过抑制原虫线粒体呼吸链中的电子传递，抑制核酸合成干扰球虫繁殖用于饲料添穿透原虫细胞膜，干扰原虫的离子平衡，干扰能量代谢导致原虫死亡对球虫的裂加，剂量为，对肉鸡球虫病有良2-3ppm特别是、和通道功能，导致殖体和配子体均有效好预防效果克林霉素通过抑制蛋白质合Na+K+Ca2+原虫渗透压失调死亡成发挥作用，对多种球虫有效地克珠利是最常用的化学抗球虫药，用于莫能菌素是应用最广泛的抗球虫药，对多饲料添加，剂量为其特点是新型抗球虫药研发主要方向包括）靶

0.5-1ppm1种禽球虫有效主要用于饲料添加，预防有效剂量低，安全范围广，耐热性好缺向球虫特有代谢通路的抑制剂；）基于2剂量为，对发育早期阶段球点是容易产生耐药性，且在环境中降解缓原虫蛋白酶抑制剂的药物；）植物源天90-110ppm3虫效果最佳副作用包括对火鸡的毒性和慢罗苯尼特对耐地克珠利的球虫株仍有然抗球虫活性物质，如花椒素和芦荟大黄与硫胺素类药物的相互作用效，是重要的替代药物素等这些新药有望克服耐药性问题，提供更安全有效的防控选择抗血原虫药物咪唑并嘧啶类药物代表药物为咪唑并嘧啶胺甲酸盐，主要用于巴贝斯虫病的治疗通过抑制原虫合成发挥作用，对红细胞内巴贝斯虫有高度特异性杀灭作用犬用剂DNA量为，肌肉注射，单次给药牛用剂量为，皮下注射

6.6mg/kg1-3mg/kg高效特异对多种巴贝斯虫有效•副作用可能引起注射部位疼痛和短暂发热•注意事项对肾功能不全动物慎用•四环素类抗生素四环素类药物如土霉素、强力霉素等通过抑制原虫蛋白质合成发挥作用，主要用于衣原体病和无浆体病的治疗土霉素剂量为牛羊，肌肉注20mg/kg射，间隔小时重复至临床症状消失48广谱作用对多种原虫有效•联合用药常与咪唑并嘧啶类联用•预防应用可低剂量预防性用药•金刚烷胺类金刚烷胺通过干扰病原体进入宿主细胞的过程发挥作用，对某些衣原体和无浆体有一定效果剂量为，口服，每日两次，连用天10-15mg/kg5-7常与四环素类联合使用，提高治疗效果辅助用药增强四环素类效果•免疫调节具有一定免疫调节作用•适应症主要用于中度感染病例•其他特效药物恶磷酸萘呱酮用于治疗猫巴贝斯虫病，剂量为，皮下注射双羟萘酸咪唑啉用于衣原体病，剂量为，肌肉注射吡咯并嘧啶类药物5mg/kg

2.5mg/kg用于耐药性巴贝斯虫感染，剂量因品种而异特异性针对特定血原虫•耐药性部分药物可克服耐药性•新药研发靶向原虫特异性代谢路径•抗锥虫药物其他抗原虫药物硝基咪唑类药物甲硝唑和替硝唑是主要的硝基咪唑类抗原虫药物，对厌氧原虫如阿米巴、贾第虫等有效这类药物在厌氧条件下被还原为活性代谢物，干扰原虫合成并产生细胞毒性甲硝唑剂量为DNA15-，口服，每日次，连用天在兽医临床中主要用于犬猫阿米巴病和贾第虫病的治疗25mg/kg35-7磺胺类药物磺胺类药物通过竞争性抑制原虫叶酸合成，干扰核酸代谢通常与二氢叶酸还原酶抑制剂（如乙嘧啶）联合使用，发挥协同作用磺胺乙嘧啶联合用药是治疗弓形虫病和隐孢子虫病的常用方案，-剂量为（按磺胺计），口服，每日次，连用天在猪、羊弓形虫病防控中应用广泛15-30mg/kg214-21中草药抗原虫研究近年来，中草药抗原虫研究取得显著进展黄连素对多种原虫有抑制作用；青蒿素及其衍生物对疟原虫和巴贝斯虫有效；苦参碱对锥虫有杀灭作用白头翁提取物在禽球虫病防控中显示良好效果中草药抗原虫机制多样，毒副作用小，耐药性发展慢，是重要的研究方向抗生素在原虫病防治中也有重要应用大环内酯类如阿奇霉素对弓形虫和隐孢子虫有效；林可霉素和克林霉素对球虫和弓形虫有效；氨基糖苷类抗生素对某些纤毛虫有抑制作用合理选择抗生素可有效控制原虫感染和继发细菌感染药物耐药性问题1耐药机制原虫药物耐药主要通过四种机制）药物靶点变异，如锥虫对砷剂类药物的耐药；）药物转运体修饰，如球虫对离子载体类药物的耐药；）药物灭活酶增强，如部分原虫产生特殊酶降123解药物；）药物外排系统增强，如巴贝斯虫糖蛋白介导的多重耐药性基因突变和基因扩增是耐药性发展的分子基础4P-耐药性检测常用的耐药性检测方法包括体外药敏试验，如原虫生长抑制试验；分子标记检测，如耐药相关基因突变分析；临床药效评价，如治疗后原虫清除率和复发率评估鸡球虫敏感性测定（）是评估球虫耐药性的标准方法，通过测定不同药物对球虫的抑制率来确定耐药状况AST防控策略预防耐药性发展的策略包括合理用药，避免长期低剂量使用；轮换用药，减少选择压力；联合用药，协同作用减少耐药机会；综合防控，减少依赖单一药物在球虫病防控中，穿梭程序（药物与疫苗交替使用）和计划免疫（控制感染程序）是有效延缓耐药性发展的方法新药研发针对耐药原虫的新药研发主要集中在靶向原虫特异性代谢通路的新靶点药物；多靶点作用机制的复合药物；基于纳米技术的靶向递送系统，提高药物利用率；生物技术药物，如特异性抗体和干扰技术此外，转变用药策略，如剂量优化和给药时间调整，也可部分克服耐药性问题RNA免疫预防活疫苗是原虫病免疫预防的主要工具，特别是球虫病疫苗活疫苗含有低剂量活球虫卵囊，通过受控感染诱导保护性免疫可分为非减毒株（如）和减毒株（如）Coccivac Paracox两类非减毒活疫苗免疫效果好但安全性较低；减毒活疫苗通过筛选早熟系或药物敏感系降低致病性，安全性提高给药方式包括饮水、饲料添加和喷雾法灭活疫苗在原虫病防控中应用较少，主要用于部分血原虫病如泰勒虫病灭活疫苗制备方法包括化学灭活和物理灭活，通常需要添加佐剂增强免疫原性亚单位疫苗基于原虫关键抗原，如球虫重组抗原和锥虫抗原，具有安全性高、易标准化生产的优势基因工程疫苗如疫苗和载体疫苗是未来研发热点，可通过基因修饰提高免疫原性和安全SAG VSGDNA性生物防治技术益生菌防控竞争性排除植物源抗原虫物质益生菌如乳酸菌、双歧杆菌等通过竞争性排除是利用非致病原虫株先多种植物提取物具有抗原虫活性多种机制抑制原虫生长）产生抑占据生态位，阻止致病株定植的生蒿属植物中的青蒿素对疟原虫、巴1菌物质直接杀伤原虫；）竞争肠道物防控方法如使用减毒球虫株预贝斯虫有效；姜黄素对球虫有抑制2附着位点，阻碍原虫入侵；）增强先感染，占据肠道特定部位，阻止作用；牛至油中的香芹酚对隐孢子3宿主免疫功能；）改善肠道微生态野毒株感染这种方法在球虫病防虫有效；大蒜提取物对多种原虫均4环境在鸡球虫病防控中，添加益控中效果显著，是控制感染免疫策有抑制效果这些天然抗原虫物质生菌制剂可显著减轻症状并提高生略的基础具有低毒、低残留、难产生耐药性长性能等优势生态调控通过调整饲养环境和饲料组成，创造不利于原虫生存繁殖的条件如控制饲养密度、保持垫料干燥、降低氨气浓度等可减少球虫感染；调整饲料酸碱度、添加有机酸或精油类物质可抑制原虫发育；通过轮牧制度减少草场媒介密度，降低血原虫传播风险媒介控制媒介生物学环境管理了解媒介生物的生活史和生态习性是制定有效改变环境条件，破坏媒介生存繁殖的适宜条件控制策略的基础如硬蜱的生活周期包括卵、如清除和改造蜱类栖息地，保持草场植被较低；幼虫、若虫和成虫四个阶段，每个阶段的宿主定期清除和处理采采蝇繁殖场所；消除蚊虫孳偏好性和活动规律各不相同采采蝇主要在河生地，如填平积水洼地、定期更换水槽水等谷地带林木茂密处繁殖，对深色运动物体有趋在西北地区，控制牛羊棚舍周围植被，可有效性蚊子的繁殖需要水体环境，不同种类有不减少蜱类密度同的栖息和叮咬习性生物防治化学防治利用天敌或生物制剂控制媒介密度，减少对化使用化学杀虫剂控制媒介密度常用药物包括学药剂的依赖如使用卵寄生蜂控制蜱卵；释有机磷类、拟除虫菊酯类和氨基甲酸酯类杀虫放昆虫不育技术控制采采蝇种群；使用苏云金剂应用方式有动物体表喷洒、药浴、倒背法、芽孢杆菌控制蚊虫幼虫此外，放养捕食蜱类滴剂、耳标等新型驱避剂如氯硝柳胺对多种的鸟类（如珍珠鸡）在非洲牧场已获成功应用媒介昆虫有效合理使用化学防治剂需考虑残生物防治方法环保、可持续，是未来发展方向留、环境影响和耐药性问题饲养管理与防控密度控制与环境卫生适当的饲养密度是预防原虫病传播的基础过高的饲养密度增加感染机会，加速疾病传播对家禽，推荐密度不超过只平方米；对仔猪，推荐密度不超过头平方米保持环境卫生，定期清除粪便，10/25/保持垫料干燥，降低孢囊和卵囊的存活率使用适当消毒剂处理圈舍设备，氨基磺酸铜对球虫孢囊有较好杀灭效果饲料添加剂在饲料中添加特定添加剂可提高动物抵抗原虫感染的能力维生素和硒增强机体抗氧化能力，减轻E原虫感染的氧化损伤；葡聚糖和甘露寡糖可增强非特异性免疫功能；中草药提取物如芦荟多糖、蒲β-公英提取物等具有免疫调节作用此外，适当调整饲料蛋白质水平和氨基酸组成，也有助于增强抗病能力应激管理应激是诱发原虫病的重要因素，有效的应激管理对预防原虫病至关重要应避免突然的饲料变更、频繁的群体混合以及过度的运输应激维持适宜的环境温度和湿度，避免极端天气条件在易应激时期（如转群、断奶）可适当添加抗应激添加剂如维生素、色氨酸等建立合理的免疫程序，C避免多种疫苗同时接种群体健康管理建立完整的群体健康管理系统，实现原虫病的早期预警和快速干预定期监测关键健康指标如增重率、饲料转化率和死亡率；建立疾病监测系统，定期进行粪便检查和血液检测；实施全进全出管理模式，减少不同批次动物接触；建立完善的生物安全体系，控制人员和车辆进出这种系统化管理方法可显著降低原虫病发生风险第五部分新兴与人畜共患原虫病全球性挑战跨境传播与应对气候变化影响媒介分布与疾病流行水源性威胁隐孢子虫与贾第虫人畜共患原虫4弓形虫与利什曼原虫随着全球化进程加快和气候变化加剧，新兴和人畜共患原虫病对动物健康和公共卫生构成日益严峻的挑战这些疾病不仅威胁畜牧业生产，还可能直接危害人类健康，需要在一健康理念下统筹防控本部分将重点介绍具有公共卫生意义的原虫病，探讨气候变化对原虫病流行的影响，分析水源性原虫病的特点及防控策略，并介绍国内外原虫病综合防控体系的建设经验，为学生提供更广阔的视野和系统性防控思路水源性原虫病隐孢子虫病贾第虫病水源防控隐孢子虫是重要的水源性病原体，其孢囊直径贾第虫是另一种常见的水源性原虫，孢囊呈椭圆形，水源性原虫病的防控重点是保护水源和改进水处理技4-，极度耐受环境压力和氯消毒主要种类包括长在自然水体中广泛存在，可感染多种术应建立水源保护区，防止动物粪便污染饮用水源；6μm8-12μm牛隐孢子虫、猪隐孢子虫和人隐孢子虫，在宿主间存哺乳动物包括人类贾第虫感染主要影响小肠，导致采用多重屏障水处理系统，包括絮凝、沉淀、过滤和在一定的交叉感染能力隐孢子虫污染的水源可同时吸收不良、腹泻和腹痛在农村地区和发展中国家，紫外线消毒等；定期检测水源和处理后饮用水中的原感染人和动物，导致腹泻及其他胃肠道症状美国密特别是卫生条件差的养殖场周围，人畜共患贾第虫病虫孢囊含量在农村地区，可推广简易家用水过滤器尔沃基年暴发的隐孢子虫病疫情影响了多较为常见贾第虫孢囊对环境耐受力强，在低温水中和太阳能消毒技术饮用水安全标准应包括原虫指标，199340万人，是最大规模的水源性疾病暴发之一可存活数月建立水污染预警系统公共卫生防控体系应加强对水源性原虫病的监测和管理，建立多部门协作机制，整合农业、卫生和水利等部门资源在疫情暴发时，应启动应急响应机制，包括临时水源供应、流行病学调查和患者治疗等提高公众对水源性原虫病的认识，普及饮水卫生知识，是防控工作的重要组成部分新兴原虫病与气候变化原虫病的综合防控体系国家层面国家动物疫病防控体系是原虫病防控的顶层设计，包括政策法规制定、技术标准建立、资源投入保障和应急响应机制重点原虫病应纳入国家监测计划，定期收集流行病学数据建立国家参考实验室，负责诊断标准化和技术培训完善兽医服务体系，确保基层防控能力区域协作区域联防联控机制是解决跨行政区域传播问题的关键建立区域疫情信息共享平台，及时通报原虫病疫情变化协调区域内防控措施，避免一刀切和碎片化防控组织区域联合科技攻关，解决共性技术难题对跨境传播的原虫病，应建立国际合作机制，协调防控策略监测与预警科学的监测预警网络是防控体系的眼睛建立多层次监测网络，覆盖养殖场、屠宰场和野生动物栖息地采用风险评估模型，识别高风险地区和时段利用地理信息系统，绘制原虫病风险分布图开发早期预警指标体系，包括环境、媒介和宿主监测指标，实现早期发现和快速响应国际合作加强国际合作是应对全球性原虫病挑战的必由之路参与世界动物卫生组织（）和联合国粮WOAH农组织（）框架下的全球防控计划建立跨国疫情通报机制，共享监测数据和防控经验开展FAO国际联合科研项目，攻克防控技术难题在一带一路沿线国家推广中国成功的防控模式课程总结与研究前景关键科学问题原虫病研究面临许多亟待解决的科学问题原虫与宿主免疫互作机制尚未完全阐明；耐药性发展的分子机制需深入研究；环境因素对原虫传播的影响规律有待揭示；跨种间传播的风险评估方法需完善这些问题的解决将为防控策略提供科学依据技术创新方向分子生物学技术为原虫病研究带来革命性进展基因编辑技术如系统可用于研究原CRISPR/Cas9虫致病基因；单细胞测序技术有助于揭示原虫群体异质性；宏基因组学方法可研究原虫与微生物组的交互作用；代谢组学和蛋白质组学技术有助于发现新的药物靶点疫苗与药物研发新型疫苗是原虫病防控的重要方向疫苗技术可用于开发针对多种原虫的疫苗；嵌合抗原疫RNA苗可同时预防多种原虫病；纳米佐剂可显著增强免疫应答药物研发方面，靶向原虫特异性代谢通路的小分子抑制剂、天然产物筛选、药物新剂型和智能递送系统是主要研究方向可持续防控策略生物安全与可持续防控理念日益重要降低对化学药物的依赖，发展生态友好型防控技术；构建多层次综合防控体系，实现长效防控；建立基于大数据的精准防控决策系统；推广一健康理念，整合人畜环境防控资源这些策略将推动原虫病防控向更加科学、可持续的方向发展。