全院生物安全培训课件

全院生物安全培训课件第一章生物安全基础概念什么是生物安全？生物安全是指为防止潜在的生物危害物质暴露或意外释放而采取的综合性原则、技术和措施这些措施构成了保护实验室工作人员、社区和环境免受潜在感染性微生物和生物毒素危害的防线生物安全体系包括•实验室物理设施与安全设备•标准操作程序与实验规范•个人防护装备与使用培训•废弃物处理与消毒程序生物危害定义生物危害的本质常见生物危害物质危害传播途径生物危害是指能够引起人类、动物或植物细菌如结核杆菌、炭疽杆菌、沙门氏菌疾病的任何微生物、病毒、毒素或其他生物源性物质，它们可能对健康构成直接或病毒如艾滋病毒、乙肝病毒、冠状病毒间接威胁真菌如曲霉菌、新型隐球菌寄生虫如疟原虫、利什曼原虫生物毒素如肉毒杆菌毒素、黄曲霉毒素生物安全等级（）简介BSL生物安全等级是根据所处理微生物的危险程度，对实验室采取相应的防护和安全措施而制定的分级系统BSL-2（中等风险）BSL-1（基础等级）适用于能引起人类疾病但通常不严重的病原体，需要限制进入，使适用于已知不会引起健康成年人疾病的微生物，基础实验室设施，用生物安全柜处理可能产生飞沫的操作标准微生物操作规程BSL-4（最高风险）BSL-3（高风险）适用于通过呼吸途径传播且可能导致严重疾病的病原体，需要特殊工程控制，负压系统，HEPA过滤排气生物安全等级对应防护措施随着生物安全等级的提高，实验室设计、设备要求、个人防护和操作规程都会相应增强BSL-4实验室是世界上防护等级最高的实验室，采用最严格的防护措施处理最危险的病原体第二章生物危害风险分组与评估科学的风险评估是生物安全工作的基础通过系统评估微生物的危害特性，我们可以确定相应的生物安全等级和防护措施，有效预防实验室感染事件风险分组（）NIH RG1-RG4美国国立卫生研究院（NIH）制定的风险分组系统被广泛采用，它根据病原体对个体和社区的潜在危害将微生物分为四组RG1（无或极低风险）RG2（中等风险）不会导致健康成年人疾病的微生物可引起人类疾病但严重性有限，预防和治疗方法有效•大肠杆菌K12菌株•流感病毒•酿酒酵母•沙门氏菌•非致病性乳酸菌•乙型肝炎病毒RG3（高风险）RG4（极高风险）可引起严重疾病，存在传播风险，但通常有预防和治疗方法引起严重或致命疾病，高传播风险，无有效预防或治疗方法•结核分枝杆菌•埃博拉病毒•SARS冠状病毒•马尔堡病毒•西尼罗病毒评估因素病原性传播途径微生物引起疾病的能力及疾病的严重程度例如，埃博拉病毒的致病原体如何从一个宿主传播到另一个宿主，包括空气传播、直接接死率可高达90%，而普通感冒病毒通常仅导致轻微症状触、飞沫传播、媒介传播等空气传播的病原体通常具有更高的传播风险感染剂量宿主范围引起感染所需的微生物数量如沙门氏菌需要1000个菌体才可能引能够感染的生物种类宿主范围广的病原体可能具有更大的传播潜起感染，而志贺氏菌只需10个菌体即可致病力和环境风险人畜共患病原体尤其值得关注预防与治疗环境稳定性是否存在有效疫苗或治疗方法无有效预防和治疗手段的病原体风险更高，需要更严格的防护措施案例分享流感病毒的风险评估与防控H1N1病毒特性防控措施•RNA病毒，属于正粘病毒科•使用II级生物安全柜进行可能产生气溶胶的操作•通过飞沫和接触传播•佩戴合适的PPE（实验服、手套、护目镜）•感染剂量相对较低•实施严格的手部卫生和表面消毒程序•在人群中传播迅速•建立详细的标准操作程序（SOP）风险评估结果•对所有操作人员进行充分培训根据传播能力、致病性和治疗可能性，被分类为RG2病原体，需要在BSL-2实验室中操作第三章生物安全实验室设计与设施安全的实验室环境是进行生物研究的基础保障根据不同的生物安全等级，实验室在设计、建造和装备方面有着特定的要求，以确保对人员、环境和实验材料的保护实验室的一级至四级设计要点BSL-1设计BSL-2设计•可清洁表面（实验台、地板、墙壁）包含BSL-1所有要求，并增加•洗手设施•自动关闭的实验室门•标准实验室通风•生物安全柜（BSC）•可上锁的门•洗眼设施•废弃物高压灭菌设备BSL-3设计BSL-4设计包含BSL-2所有要求，并增加包含BSL-3所有要求，并增加•物理隔离区域•完全独立建筑或隔离区•气闸室或前室•专用空气和废水处理系统•定向气流和HEPA过滤排气•双重HEPA过滤排气•封闭管道和防溢漏设计主要防护设施生物安全柜（BSC）其他关键防护设备生物安全柜是实验室最重要的一级防护设备，通过控制气流和HEPA过滤系统保护人员、环境和样品密闭离心机防止气溶胶在离心过程中扩散安全培养器用于病原体培养的密闭系统BSC分类废弃物容器防漏、防穿刺的生物危害废弃物收集装置高压灭菌器通过高温高压灭活微生物I类保护操作者和环境，不保护样品手部消毒站确保离开实验区域前进行手部消毒II类（A

1、A

2、B

1、B2）保护操作者、环境和样品III类完全封闭手套箱，最高级别防护每种类型的BSC有特定的气流模式和使用限制，必须根据操作的材料选择合适的类型实验室内部结构示意图BSL-2BSL-2实验室是医学和生物研究机构中最常见的生物安全实验室类型，适用于处理中等风险的病原体标准BSL-2实验室设计包括明确的工作区域划分、单向工作流程、多重安全措施和清晰的标识系统第四章个人防护装备（）PPE个人防护装备（PPE）是生物安全防护体系中最后但最重要的一道防线，直接保护操作人员免受生物危害物质的伤害种类及选择原则PPE手套实验服/防护服类型乳胶、丁腈、乙烯等类型标准实验服、一次性防护服、正压服选择原则考虑材料相容性、防护性能和灵活度选择原则根据风险等级和实验类型适用情况处理所有生物材料、化学品适用情况BSL-1至BSL-4，要求逐级提高特殊注意双层手套增强防护，定期更换特殊注意实验服不应穿出实验区域呼吸防护眼面部防护类型外科口罩、N95/KN95口罩、PAPR类型安全眼镜、护目镜、面罩选择原则依据传播途径和气溶胶风险选择原则飞溅风险和气溶胶产生可能适用情况可能产生气溶胶的操作适用情况所有可能接触眼部的操作特殊注意确保密合度，进行密合度测试特殊注意考虑与呼吸防护的兼容性PPE正确穿戴与脱卸步骤穿戴顺序脱卸顺序

1.清洁或消毒手部

1.脱外层手套（如穿双层）

2.穿戴实验服/防护服

2.脱防护服/实验服

3.戴口罩或呼吸防护装置

3.洗手或使用消毒液

4.戴护目镜或面罩

4.取下面罩/护目镜

5.戴帽子（如需要）

5.取下口罩/呼吸防护装置

6.戴手套，确保覆盖实验服袖口

6.取下帽子（如有）

7.脱内层手套穿戴过程中应避免触摸面部，确保各装备之间无空隙，特别是面部防护与呼吸防护之间的密合

8.再次彻底洗手使用注意事项及常见错误PPE使用前检查每次使用前应检查PPE的完整性，包括手套是否有破洞、实验服是否有损坏、呼吸防护装置是否完好任何损坏的防护装备都应立即更换，不得使用使用中注意事项•戴手套后避免触摸面部、头发、门把手等公共区域•定期更换长时间使用的手套，特别是接触化学品后•避免在工作区外穿戴实验室PPE•不要将手机等个人物品带入防护区域常见错误错误穿戴实验服未扣紧、手套未覆盖袖口、护目镜松动错误脱卸直接用手触摸外表面、不按正确顺序脱卸维护不当重复使用一次性装备、不清洗可重复使用的PPE第五章实验操作规范与安全实践良好的实验室实践（GLP）和标准操作程序（SOP）是确保生物安全的基础即使是最先进的设施和最完善的防护装备，如果没有规范的操作习惯，也无法有效保障安全标准操作规程（SOP）实验室准入与行为规范•限制未经授权人员进入•必须完成相应培训才能独立操作•禁止在实验区域内饮食、吸烟、化妆•不得在实验区存放食品和个人物品•长发必须束起，不得佩戴悬垂饰品手部卫生与个人防护•进入实验室前戴好个人防护装备•离开前摘除手套并彻底洗手•使用肥皂和流动水洗手不少于20秒•手部有伤口必须使用防水创可贴•定期进行手部消毒，特别是接触风险材料后工作区管理•保持工作台清洁整洁•实验结束后使用适当消毒剂擦拭表面•定期清洁和消毒实验设备•遵循清洁区与污染区的分区原则•每日检查安全设备的正常运行材料标记与存储•所有容器必须清晰标记内容物•标签应包含名称、浓度、日期、责任人•危险物质必须按类别分开存储•病原体样本必须存放在专用容器和区域特殊操作注意事项气溶胶防护废弃物处理气溶胶是实验室感染的主要途径之一，应采取措施防止其产生和扩散生物废弃物必须经过适当处理以防止环境污染•可能产生气溶胶的操作必须在生物安全柜内进行•固体废弃物放入生物危害袋，高压灭菌后处理•离心前检查管子是否密封，使用密闭转子或安全杯•液体废弃物添加合适消毒剂或高压灭菌处理•避免剧烈摇晃、快速吸放移液器•锐器废弃物收集在防刺穿容器中•使用塑料器皿代替玻璃减少破碎风险•所有废弃物容器必须清晰标识•离心后静置10分钟再开盖，让气溶胶沉降•不同类型废弃物按规定分类处理锐器安全•尽量使用钝头工具替代锐利器具•禁止徒手回套针头•使用带锁定装置的安全注射器•锐器必须直接丢入专用防穿刺容器生物安全柜内操作技巧与注意事项使用前准备•开启BSC5-10分钟，让气流稳定•清洁工作面（70%酒精或其他合适消毒剂）•检查气流指示器确认运行正常•准备好所有需要的材料再开始工作•关闭BSC附近的气流干扰源（窗户、风扇等）正确工作姿势•面板玻璃调整到正确高度（通常为25-30cm）•身体不要挡住前部进气栅格•手臂尽量不要频繁进出工作区•操作在工作区中央，远离进风口•物品放置不要阻碍空气流通操作技巧•遵循清洁区到污染区的工作流•动作缓慢，避免快速移动产生气流扰动•使用异手操作法减少交叉污染•防止液体流向前栅格或后壁开口•双手保持在视线范围内操作使用后清洁•移除所有物品，按污染程度分类处理•彻底擦拭工作表面和内壁•继续运行10-15分钟清除残留气溶胶•对高风险操作，可使用紫外灯照射20-30分钟第六章事故应急处理与暴露响应尽管采取了预防措施，生物安全事故仍有可能发生快速、正确的应急响应可以最大限度地减少事故造成的伤害和影响生物危害暴露的类型与风险皮肤穿刺/锐器伤害皮肤/粘膜接触风险描述针刺、割伤等直接将病原体引入血液循环，是最危险的暴露形式风险描述病原体通过破损皮肤或眼、鼻、口等粘膜进入体内高风险场景溅洒事故、PPE失效、触摸污染表面后触摸面部高风险场景重新盖针头、处理被污染的锐器、不当处置废弃锐器主要病原体多种细菌、病毒、真菌，特别是具有传染性的病原体主要病原体血源性病原体（如HIV、HBV、HCV）、高危病毒和细菌吸入摄入风险描述气溶胶中的病原体通过呼吸道进入肺部或其他器官风险描述病原体通过口腔进入消化系统，可能引起胃肠道感染或全身性疾病高风险场景BSC外操作产气溶胶步骤、离心管破裂、移液过程中气泡形成高风险场景实验室内饮食、用口吸取液体、手部污染后触摸食物主要病原体呼吸道病原体（如结核菌）、高传染性病毒、芽孢事故发生后的应急步骤皮肤穿刺/割伤气溶胶释放

1.立即挤压伤口使其轻微出血

1.立即离开污染区域，通知同区域人员撤离

2.用肥皂和流动水彻底冲洗15分钟

2.关闭门窗，减少气溶胶扩散

3.使用合适的消毒剂（如70%酒精）处理伤口

3.在门上张贴警告标志

4.包扎伤口防止继发感染

4.等待30-60分钟让气溶胶沉降

5.立即向主管和生物安全官报告

5.穿戴合适PPE返回清理（可能需要更高级别防护）

6.填写事故报告表，详细记录事故情况

6.使用合适消毒剂处理受污染区域

7.尽快就医进行评估和可能的预防性治疗

7.所有暴露人员应进行医学观察皮肤/粘膜接触液体溢洒

1.皮肤立即用大量肥皂和水冲洗至少15分钟

1.小型溢洒用消毒剂浸泡的纸巾覆盖

2.眼睛在洗眼站用水冲洗至少15分钟

2.大型溢洒使用专用溢洒处理套件

3.鼻/口用大量清水反复冲洗

3.从外向内清理，防止污染扩散

4.脱去可能被污染的PPE和衣物

4.所有清理材料作为生物危害废弃物处理

5.报告事故并寻求医疗评估案例分析实验室暴露事件及处理经验案例一针刺伤暴露案例二离心机气溶胶释放案例三眼部暴露事件描述研究人员在处理含HIV病毒样事件描述BSL-2实验室离心机内样本管事件描述研究人员未佩戴护目镜，移液本后，尝试回套针头时发生针刺伤破裂，含沙门氏菌样本形成气溶胶，离心过程中样本飞溅到眼睛机未配备安全杯应对措施立即冲洗伤口，报告事故，在应对措施立即在洗眼站冲洗15分钟，2小时内开始接受抗逆转录病毒药物预防应对措施人员撤离，关闭区域30分报告事故并就医评估性治疗钟，穿戴N95口罩和全套PPE进行清理，结果未发生感染，但出现短期结膜炎症所有可能暴露人员进行医学监测结果经过4周药物治疗和6个月随访监状测，未发生感染结果两名在场人员出现轻微肠胃症状，经验教训处理所有生物样本时必须佩戴经抗生素治疗后康复经验教训严禁徒手回套针头，必须使用护目镜；移液时应小心控制速度和角度；机械装置或单手技术；所有锐器操作必经验教训处理病原体时必须使用安全离洗眼站必须保持功能完好随时可用须高度专注，不得分心心杯或密封转子；平衡管重量减少破裂风险；制定详细的气溶胶应急程序第七章机构生物安全委员会（）职责IBC机构生物安全委员会（IBC）是确保研究机构内生物安全合规性的关键组织它审查涉及重组DNA、合成核酸和生物危害物质的研究活动，确保这些活动符合国家法规和机构政策的组成与职能IBC委员会组成项目审查•至少5名成员，包括机构内外专家•评估研究方案的生物安全风险•生物安全官（BSO）•确认实验室设施与风险等级匹配•微生物学和感染病专家•审核实验操作程序的安全性•实验室管理人员•批准、修改或拒绝研究申请•社区代表•要求补充风险缓解措施•动物安全专家（如涉及动物实验）培训与监督政策制定•确保实验人员接受适当培训•制定机构生物安全手册•监督生物安全措施的执行•建立生物安全事故报告系统•定期检查实验室设施•提供生物安全政策解释•调查生物安全事故•根据监管变化更新规定•协调不同部门的安全要求研究者的责任与合规要求申请与审批流程培训义务

1.提交详细的研究方案，包括•所有实验人员必须完成基础生物安全培训•生物因子信息与风险级别•高风险操作需完成专项培训•实验操作步骤与风险点分析•定期参加复训和更新课程•设施、设备与防护措施描述•新技术或程序引入前进行特殊培训•参与人员资质与培训情况•保存所有培训记录以备审查

2.参加IBC会议回答问题（如需要）违规后果

3.根据审查意见修改研究方案违反生物安全规定可能导致严重后果

4.获得正式批准后才能开始研究

5.重大变更需重新申请审批•研究项目暂停或终止持续合规责任•实验室使用权限限制•机构内部处分•严格按照批准的方案进行研究•严重违规可能导致罚款或法律责任•保持详细的实验记录•定期向IBC提交进度报告•及时报告任何安全事故或近似事故•确保实验室成员了解并遵守安全规定结语共筑安全防线，守护生命健康生物安全，人人有责严格执行，防微杜渐生物安全不仅是规章制度，更是一种责任意识和行为习惯每位实验室工作人员都是再小的疏忽也可能导致严重后果严格遵守操作规程，不因习惯或便利而放松警惕，生物安全防线的重要组成部分，您的每一个安全操作都在保护自己、同事和社区将安全意识融入每一个实验步骤共筑安全文化持续学习，与时俱进生物安全知识和技术不断发展，保持学习心态，及时更新知识，适应新挑战定期参加培训，与同行交流经验，共同提高安全水平。