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媒介生物监测培训课件第一章什么是媒介生物监测?监测对传进观媒介生物是指能够播疾病的生物体(如蚊子、蜱虫等)行系统性察与研究过这的程一工作包括:监测传态数节播疾病的媒介生物种群动变化,包括量、季性分布和繁殖情况评带态数库估媒介生物密度、地理分布及其病原体携情况,建立生学据媒介生物监测的重要性预警传染病暴发风险指导媒介控制策略制定保障公共卫生安全过监测带监测数针对为卫通媒介密度和病原携率,可提前发基于据制定有性的控制措施,如政府部门提供科学决策依据,制定公共现传时预喷杀剂时传别染病暴发的潜在风险,及采取防措确定洒虫的最佳机、地点和方法,生政策,降低疾病播风险,特是在疫当现带资费环区施例如,发蚊虫密度突然增加且携提高防控效率,减少源浪和境影响、自然灾害后和气候变化影响下的高风险热时进区区登革病毒,可提前行域防控地主要媒介生物种类按蚊属库蚊属伊蚊属蜱虫硬蜱与软蜱Anopheles CulexAedes传疟静传脑丝静时传热主要播疾,具有特征性息姿播乙型炎、虫病等,息播登革、寨卡病毒等,体表有势乡纹应(腹部与停靠表面呈30-45度身体与表面平行广泛分布于城黑白相间条适性强,在小型翘环欢角),尾端上在中国主要分布境,尤其喜在污水中繁殖,夜容器中繁殖,白天活跃,主要分布区频热带热带区于南方地,活动高峰在夜间间吸血活动繁于和亚地各类媒介生物高清图示第二章采样方法概览1室内外诱捕法为诱饵获诱利用光源、二氧化碳、人工气味或动物气味作,吸引并捕媒介生物如灯法适诱对合夜间活动的蚊种,二氧化碳捕多种吸血昆虫有效2人工采集环调使用抓捕网、吸虫器等工具直接采集媒介生物适用于特定境中的快速查,如草地拖诱评网法采集蜱虫,或人法估蚊虫叮咬率3卵筒监测法监测过计数数评放置特制容器收集蚊虫卵,尤其适用于伊蚊通卵量估种群密度,并可孵鉴化定种类诱捕器类型及使用123轻型诱蚊灯诱蚊器蜱虫拖网法CDC BG-Sentinel将热专为获计兰绒利用光源和二氧化碳吸引蚊虫,风扇蚊虫模拟人体气味和量,捕伊蚊设利用白色法布在植被上拖拽,蜱虫附着围监测别环监简单监测标吸入收集袋适用于大范,特是夜具有便携式、高效率特点,适合城市境于布上被采集有效,是蜱虫的时测项间活动的蚊种使用需注意使用要点准方法操作注意事为为阴积应标•放置高度通常
1.5米•最佳放置位置凉处•拖网面准化(通常1m²)诱饵换•距离地面水体或植被30-100米•需定期更•拖拽速度保持一致监测检•避免强光干扰•白天效果最佳•定期查布面并收集蜱虫采样时间与频率高峰活动时段选择季节性监测安排春季媒介初始活动期,每月1-2次夏季高发期,每周1-2次秋季活动减少,每月1-2次监测场冬季低活动期,重点越冬所黄昏18:00-20:00数库开多蚊种活动高峰,如伊蚊、蚊始吸血活动样本处理与保存标本分类与鉴定现场态进级
1.初步分类按形特征行属分类将
2.低温保存活体样本置于4°C冷藏或干冰中运输验细显镜进级鉴时进鉴
3.实室精分类使用微行种定,必要行分子生物学定病原检测样本采集
1.RNA样本使用RNA保存液,避免RNase污染专
2.DNA样本95%酒精保存或用DNA保存液养
3.活体病原分离特殊培基保存,4°C运输标标记记录详细时环
4.本采集信息(间、地点、境条件)实验室安全与防护措施验
1.个人防护实服、手套、口罩必不可少
2.操作台清洁75%酒精擦拭,紫外灯消毒废弃压灭专
3.物处理高菌或业处理针应预
4.意外处理刺或污染急案标对监测数质关应严规验员样本处理的准化流程确保据量至重要格遵循生物安全范,防止交叉污染和实人感染诱捕器布设现场示范1正确放置高度诱应悬诱则CDC蚊灯挂在距地面
1.5-
1.8米处,BG-Sentinel蚊器放置在地面挡上,确保气流不受阻2位置选择开区选择过缘避强光源和强风域,媒介生物可能栖息或通的地点,如植被边、水区体附近或人类活动域3操作细节稳诱饵鲜记录标监确保电源定、新、收集袋正确安装,并精确的GPS坐以便长期测数对据比第三章显微镜与实验室技术基础显微镜基础知识显微镜类型显微镜维护与保养镜镜专镜纸复合显微镜•使用前后清洁物和目(用头)•避免阳光直射光学部件数毕尘放大倍40-1000x•使用完盖上防罩专养观细结鉴•定期业保(每年至少一次)适用病原体察、微构定镜观细级别结•油使用后立即清除特点高分辨率,可察胞构体视显微镜(解剖镜)数放大倍5-50x适用媒介生物分类、解剖特点立体成像,操作空间大标本制片与染色技术制作载玻片基本步骤载
1.准备清洁玻片和盖玻片
2.取适量样本放置中央剂
3.滴加固定液或封片轻
4.放盖玻片,避免气泡标记
5.样本信息常用染色方法兰区细革氏染色分菌类型萨显细细质结吉姆染色示胞核和胞构观瑞氏染色察血液寄生虫蓝观结乳酸酚棉染色察真菌构活体与固定标本观察差异标鲜活体本保持自然运动特性,色彩明,但不易长期保存标稳观态固定本定性好,便于长期察和保存,但可能改变部分形特征标术态鉴础观应选掌握准化制片技是媒介生物形学定的基不同染色方法适用于不同察目的,根据研究需求择术合适的染色技病原体检测技术简介技术免疫荧光检测病原分离培养PCR标记过荧显镜观利用特异性抗体病原体,通光微察标记•直接法一步病原•间接法提高灵敏度链应术检测内聚合酶式反技可快速、特异性地媒介生物中的•可视化病原在媒介体分布病原体核酸规•常PCR确定是否存在特定病原时测载•实定量PCR定病原量将内养时检测病原从媒介体分离并在适宜条件下培增殖•多重PCR同多种病原细养•胞培病毒分离选择养细•性培基菌分离验证•动物接种某些病原这术综应获术为检测些技各有优缺点,在实际工作中往往需要合用才能得全面准确的病原学信息分子生物学技因其高敏感性和特异性,已成媒介病原的主流方法显微镜下媒介生物及病原体图像蚊虫头部结构()蜱虫口器()40x100x观结区软结显察口器构是分不同属蚊虫的硬蜱和蜱的口器构差异明关键过态软特征雌雄蚊可通触角形硬蜱口器外露,蜱口器位于体腹区状观这进分雄蚊触角呈羽毛,雌蚊触面下方察一特征可快速行较为细角长初步分类病原体检出()1000x镜疟下可见各类病原体,如原虫在内阶蚊体的卵囊发育段、里克次体内细在蜱体的分布,以及病毒在胞结中的包涵体等特征性构第四章数据管理与分析监测数据的收集与录入标准化数据表设计电子数据采集工具数据质量控制要点数应现监测数关键科学的据表包含以下要素代媒介常用以下电子工具提高效率确保据准确可靠的措施标应现场录数标规•基本信息采样日期、地点(GPS坐)、采•移动用程序直接入据•准操作流程(SOP)统一采集范员软为错误样人•电子表格件Excel、Google Sheets等•双人复核机制减少人环湿专数库数库测•境信息温度、度、风速、植被类型•业据系统Access、SQL据•定期校准设备确保量准确诱时诱饵储现数时数验证规则围•采样方法捕器类型、放置长、类型•云存平台实据实共享与备份•据设置合理值域范称数别码维码标签训员专•样本信息物种名、量、性比例、生理•条形/二样本追踪系统•培与考核提升人业能力状态检测检测•病原方法、阳性率、病原种类数据分析基础种群密度计算方法空间分布分析术标称计场利用地理信息系统GIS技指名算公式适用景绘热图•制媒介分布力数数检数监测房屋指HI阳性房屋/查房屋×100%伊蚊识别区•高风险域图数数检数传布雷指BI阳性容器/查房屋×100伊蚊繁殖地•分析播风险影响因素预测传趋势•疾病播获数诱数监测成蚊密度捕蚊/捕器/夜成蚊数积监测蜱虫密度采集蜱/拖网面m²蜱虫趋势变化监测时观节环关预阈当过阈时利用间序列分析察媒介密度的季性变化、年际变化及与境因素的相性设置警值,密度超值应应启动急响数计归现数规关现监测来赖数术数进综据分析需要统学方法支持,如回分析、聚类分析等,以发据背后的律和联代媒介越越依大据技,整合多源据行合分析监测结果的解读与应用评估媒介控制效果对预1比干前后媒介密度变化预测疾病传播风险2结带环合媒介密度、病原携率和境因素构建风险模型支持公共卫生决策3为导资政府部门提供科学依据,指源分配和防控策略监测数应将数转为监测终标数专读报将杂据的价值在于用据化可理解、可行动的信息,是媒介生物工作的最目有效的据可视化和业的解告,能够复监测数转为议的据化明确的防控建监测结应简报关汇报现应时报应时监测数评在实际工作中,果定期以形式向相部门,重大发及通并启动响机制同,据也是估控制措施有效性的重要依调据,可用于整和优化防控策略地图示例媒介生物分布GIS图区热图红区区上展示了某域蚊虫密度分布力,色域表示高密度,需优先实施控制措过术观规识别区为施通GIS技,可以直展示媒介生物的空间分布律,高风险域,精准防控提供依据这图结数监测数环类地通常合多种据源,包括实地据、境因素(如植被覆盖度、水体分过术现环关布)、人口密度等通空间分析技,可以发媒介分布与境因素之间的联,建预测导资立模型,指防控源的优化配置第五章典型案例分享案例一登革热媒介蚊监测与控制广东省某市伊蚊监测实践背景(年月)120196该现热市出登革本地病例,迫切需要了解伊导蚊分布情况,指精准防控2监测方法诱•布设200个BG-Sentinel蚊器和500个卵筒监测乡环结果分析3•划分50个点,覆盖城各类境连续监测•每周采样一次,3个月现区结术检测带•发5个伊蚊高密度,与首发病例地•合PCR技病毒携情况理分布高度吻合检为•病毒出率
3.8%,主要集中在城中4控制措施及成效关键验区经村地过现废旧监测础对区喷灭•通GIS分析,发轮胎堆放处是
1.精准是有效控制的基•高风险域实施定向洒蚊药物结监测重要孳生地组区积
2.多方法合提高敏感性•织社清理水容器,消除孳生地术识别区开识
3.GIS技有助于高风险•展健康教育,提高居民防护意区关键继现
4.社参与是成功的因素•疫情得到有效控制,无发病例出案例二莱姆病蜱虫监测美国东北部蜱虫监测计划莱传过传莱区创姆病是由伯氏疏螺旋体引起的染病,通蜱虫叮咬播美国东北部是姆病高发,自2015年起实施了新的监测项蜱虫目监测技术创新自动化拖网装置减少人力需求,提高效率报公民科学家参与普通民众使用手机APP上蜱虫信息监测预测扩宿主动物跟踪鹿群活动蜱虫散卫遥术评关星感技估植被覆盖与蜱虫分布系公众健康影响该项显对莱认识监测数预当过阈目著提高了公众姆病的,降低了高风险人群感染率据直接用于警系统,蜱虫密度超值时预,向公众发布警信息案例三新兴媒介生物监测挑战新物种入侵抗药性问题欧扩对杀剂案例亚洲虎蚊在洲的散案例非洲按蚊拟除虫菊酯类虫的抗性产过贸传欧报对杀剂产严疟亚洲虎蚊(伊蚊属)原于亚洲,通国际易入非洲多国告按蚊常用虫生抗性,重影响现扩区洲自1990年代首次在阿尔巴尼亚发后,已散至20疾控制效果某些地抗性比例高达80%以上欧监测战多个洲国家挑监测战杂检测挑•抗性机制复,需分子水平区识别验现区•新入侵地缺乏经•抗性分布呈地差异性扩径杂难监杀剂态•散路复,以全面控•抗性随虫使用动变化应传监测应对监测络开标记术•适性强,统方法效果有限策略建立抗性网,发分子技,实应对预监测换策略建立早期警系统,在入境口岸设置施轮用药策略数点,加强国际合作共享据监测技术升级需求监测应案例无人机在媒介生物中的用传监测难远区积区术带进红识别统方法以覆盖偏地或大面域无人机技可携特殊设备行空中采样或外成像媒介栖息地监测战挑术•设备成本高,技要求高数专•据处理量大,需业分析规应•法限制可能影响用应对开术数规策略发低成本技,建立据处理平台,制定范化操作流程第六章未来发展与培训总结媒介生物监测技术新趋势智能诱捕系统分子生物学技术诱时计数获自动化捕器可实、分类捕的媒介生远数传识别结测术时检测物,程控制和据输,智能系统合AI新一代序技NGS可同多种病原体,进鉴开检测单细测算法行物种定发基于CRISPR的快速系统,胞序术大数据分析技研究媒介-病原相互作用数遥整合多源据(气象、感、人口流动习预测开等),利用机器学算法构建模型,监测数现移动应用与公众参与发媒介大据平台实信息共享遥感技术开应记录发公民科学家参与平台,手机用程序媒数辅监测卫遥术识别热介分布,社交媒体据挖掘助疫情,提高星和无人机感技适宜栖息地,成像术测区结预测传公众参与度技探媒介聚集,合GIS分析疾病播风险来监测将络监测为卫时未媒介生物向智能化、自动化、网化方向发展,提高效率和准确性,公共生决策提供更及、全面的科学依据培训总结与行动指南关键知识点回顾实践操作建议1媒介生物基础知识标监测频•制定准化方案,包括点位设置、率选择安排和方法态数数质掌握主要媒介生物的分类、形特征和生态习传•建立完整的据管理系统,确保据量和性,了解其在疾病播中的角色可追溯性开质评验证监测结•定期展量控制估,果准确2监测方法与技术性协诱•加强部门作,形成信息共享和联防联控机熟悉各类采样方法、捕器使用和样本处术标选择监测制理技,能够根据目合适的方严规案•注重安全防护,格遵守生物安全操作范持续学习路径3实验室检测技能专训课术议•参加业培程和学会显镜标检测掌握微使用、本制作和病原基关进术术鉴•注行业最新研究展和技发展本技,确保准确定媒介和病原践项积战验•参与实目,累实经专络验问题4数据管理与分析•建立业交流网,分享经与数了解据收集、处理和分析方法,能够正读监测结议确解果并提出防控建谢谢聆听30+63媒介监测方法培训章节实际案例课监测术讲监测论础践应过鉴践验本程涵盖了30多种媒介生物的实用技和方法系统解媒介的理基和实用通真实案例分析,提供可借的实经欢迎提问与交流联系方式与后续支持们励员积问问题讨课训资载我鼓学极提,分享工作中遇到的实际,共同探解决方案程培料下www.vectortraining.cn/resources结欢过继续习术束后,迎通以下方式交流学技咨询邮箱vector_support@cdc.cn习扫侧维码•微信学群描右二加入续进阶训举办专题术训•后培每季度技培。
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