核酸检验试题及答案

核酸检验试题及答案

一、单项选择题（共30题，每题1分，共30分）核酸检验的核心原理是基于（）A.抗原抗体反应B.核酸分子杂交C.酶联免疫吸附D.电泳分离下列哪种样本不适用于核酸检验（）A.咽拭子B.血液C.粪便D.尿液核酸检验中，常用的样本保存液作用是（）A.加速核酸降解B.防止样本污染C.维持核酸稳定性D.提高检测灵敏度聚合酶链反应（PCR）的基本步骤不包括（）A.变性B.退火C.延伸D.离心核酸提取过程中，使用蛋白酶K的主要目的是（）A.溶解核酸B.去除蛋白质杂质第1页共13页C.沉淀核酸D.扩增核酸片段实时荧光定量PCR与普通PCR的主要区别在于（）A.无需引物B.可实时监测扩增产物C.不需要DNA聚合酶D.反应温度恒定核酸检验中，阴性结果的含义是（）A.样本中未检测到目标核酸B.检测仪器故障C.试剂失效D.结果存在假阳性下列哪种因素可能导致核酸检验假阴性（）A.样本采集量不足B.检测时温度过高C.引物浓度过高D.反应时间过短核酸检验前，实验室环境要求达到（）级洁净度A.百级B.千级C.万级D.十万级引物设计时，Tm值一般设置在（）℃A.50-55B.55-60第2页共13页C.60-65D.65-70核酸检验中，“Ct值”指的是（）A.引物与模板结合的温度B.扩增产物达到阈值的循环数C.样本浓度的绝对值D.反应体系的pH值下列哪种情况属于核酸检验的“污染控制”范畴（）A.使用无酶吸头B.增加引物浓度C.提高退火温度D.缩短延伸时间核酸检验中，内参基因的作用是（）A.提高检测灵敏度B.验证样本有效性C.增加扩增效率D.降低背景干扰咽拭子样本采集时，正确的操作是（）A.用力擦拭扁桃体及咽后壁B.采样后立即放入含保存液的试管C.采样前30分钟进食D.样本可在室温放置2小时后检测核酸提取试剂盒中，洗涤液的主要作用是（）A.溶解核酸B.去除盐离子杂质第3页共13页C.激活DNA聚合酶D.增强荧光信号普通PCR反应中，退火温度主要影响（）A.引物与模板的结合特异性B.DNA聚合酶的活性C.dNTP的稳定性D.扩增产物的长度核酸检验中，“假阳性”结果可能由以下哪种原因导致（）A.样本被环境污染B.内参基因未扩增C.引物二聚体形成D.退火温度过高核酸检验报告中，“检测限”指的是（）A.样本中目标核酸的最大浓度B.仪器可检测到的最低目标核酸浓度C.反应体系的最大容量D.试剂的保存期限核酸检验中，“无模板对照（NTC）”的作用是（）A.验证样本浓度B.检测环境污染C.提高反应效率D.优化引物浓度下列哪种核酸提取方法是核酸检验中最常用的（）A.酚-氯仿法B.磁珠法第4页共13页C.柱提法D.密度梯度离心法实时荧光定量PCR中，SYBR GreenI的作用是（）A.特异性结合引物B.特异性结合扩增产物C.增强DNA聚合酶活性D.作为内参物质核酸检验前，设备校准不包括（）A.移液器量程校准B.离心机转速校准C.荧光定量仪温度均一性校准D.样本冷藏温度校准样本采集后，正确的保存条件是（）A.2-8℃冷藏B.-20℃冷冻C.-70℃以下冷冻D.室温放置核酸检验中，“Ct值”与样本浓度的关系是（）A.Ct值越大，浓度越高B.Ct值越小，浓度越高C.Ct值与浓度无关D.浓度超过检测限时Ct值为0下列哪种情况需要重新进行核酸检验（）A.检测结果为“弱阳”B.内参基因未扩增第5页共13页C.样本量不足D.试剂开封超过保质期核酸检验中，“引物二聚体”指的是（）A.引物与模板结合形成的结构B.两个引物互补结合形成的二聚体C.DNA聚合酶的错误延伸产物D.内参基因的扩增产物核酸检验的质量控制指标不包括（）A.检测限B.精密度C.灵敏度D.样本采集量下列哪种样本类型最易受核酸酶污染（）A.血液B.尿液C.唾液D.痰液核酸检验中，“多重PCR”的特点是（）A.一次反应检测多种目标核酸B.提高单个目标核酸的扩增效率C.降低引物与模板的非特异性结合D.缩短反应时间咽拭子样本运输时，正确的包装要求是（）A.常温运输即可B.4℃冷藏运输第6页共13页C.干冰冷冻运输D.无需特殊包装

二、多项选择题（共20题，每题2分，共40分）核酸检验常用的技术有（）A.PCRB.基因测序C.免疫层析D.核酸杂交样本采集的关键注意事项包括（）A.采样部位准确B.避免样本被污染C.采样后及时处理D.样本量充足核酸检验中，可能导致假阴性的因素有（）A.样本采集不当B.核酸降解C.引物设计不合理D.反应体系体积过大核酸提取的基本步骤包括（）A.裂解细胞B.去除蛋白质杂质C.沉淀核酸D.溶解核酸实时荧光定量PCR的优势有（）A.定量准确第7页共13页B.可避免污染C.操作时间短D.可实时监测扩增核酸检验的“污染控制”措施包括（）A.分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区）B.使用带滤芯吸头C.定期进行环境消毒D.增加阴性对照引物设计时需考虑的因素有（）A.引物长度（18-25bp）B.引物GC含量（40%-60%）C.引物二聚体形成D.引物Tm值一致性核酸检验报告的基本内容包括（）A.样本信息B.检测方法C.Ct值D.结果判定标准可能影响核酸稳定性的因素有（）A.温度B.pH值C.核酸酶D.光照多重PCR的应用场景包括（）A.病原体分型检测第8页共13页B.多个基因检测C.快速诊断多种疾病D.提高检测效率核酸检验中，“内参基因”的选择标准有（）A.在不同样本中表达稳定B.序列保守C.扩增效率与目标基因接近D.必须是管家基因样本保存液的作用包括（）A.抑制核酸酶活性B.维持样本pH稳定C.保护核酸结构D.促进细胞裂解核酸检验“质量控制”的内容有（）A.设备日常校准B.试剂性能验证C.操作人员资质审核D.结果重复性检测咽拭子样本采集的错误操作有（）A.采样时用力过猛导致黏膜损伤B.采样后将拭子在保存液中反复挤压C.采样前让被采集者漱口D.采样后立即放入-20℃冰箱实时荧光定量PCR的反应体系组成包括（）A.模板DNA第9页共13页B.引物和探针C.DNA聚合酶D.dNTP和Mg²⁺核酸检验中，“无反转录对照（NRC）”的作用是（）A.验证RNA样本是否被DNA污染B.检测反转录酶活性C.优化反转录温度D.确认目标核酸类型可能导致核酸检验“假阳性”的原因有（）A.环境DNA污染B.试剂开封后未及时使用C.扩增区操作不当D.内参基因未成功扩增核酸检验的“检测限”受哪些因素影响（）A.样本处理效率B.试剂灵敏度C.仪器检测阈值D.操作人员经验核酸杂交技术包括（）A.Southern blotB.Northern blotC.Western blotD.荧光原位杂交（FISH）核酸检验的“精密度”评价指标有（）A.批内CV值第10页共13页B.批间CV值C.携带污染率D.方法比对偏差

三、判断题（共20题，每题1分，共20分，对的打“√”，错的打“×”）核酸检验只能检测DNA，不能检测RNA（）实时荧光定量PCR的结果可直接用于样本浓度计算（）核酸提取时，离心速度过高可能导致核酸损失（）采样后样本在室温放置超过2小时，对检验结果无影响（）引物与模板结合的温度称为退火温度（）核酸检验中，NTC（无模板对照）用于验证反应体系是否污染（）磁珠法核酸提取的核心原理是磁珠与核酸的特异性结合（）假阴性结果一定意味着样本中无目标核酸（）核酸检验报告中的“阳性”指样本中存在目标核酸（）核酸检验中，dNTP浓度过高会导致非特异性扩增（）咽拭子样本采集时，需深入鼻腔至少5cm（）实时荧光定量PCR的Ct值越小，说明样本中目标核酸浓度越高（）核酸检验设备需定期进行生物安全检测（）酚-氯仿法提取核酸时，酚的作用是溶解蛋白质（）多重PCR反应中，不同引物对的Tm值应尽量一致（）核酸检验的“检测限”越低，试剂灵敏度越高（）样本采集后，应在2-8℃条件下保存不超过4小时（）核酸检验中，“引物二聚体”是特异性扩增产物（）核酸稳定性不受pH影响，在任何条件下均可长期保存（）第11页共13页核酸检验报告需注明检测方法依据的行业标准（）

四、简答题（共2题，每题5分，共10分）简述核酸检验中“质量控制”的核心要点简述咽拭子样本采集过程中的关键注意事项附标准答案

一、单项选择题（共30题，每题1分）B

2.D

3.C

4.D

5.B

6.B

7.A

8.A

9.A

10.CB

12.A

13.B

14.B

15.B

16.A

17.A

18.B

19.B

20.CB

22.D

23.C

24.B

25.B

26.B

27.D

28.C

29.A

30.B

二、多项选择题（共20题，每题2分）ABD

2.ABCD

3.ABC

4.ABCD

5.AD

6.ABCD

7.ABCD

8.ABCD

9.ABC

10.ABCDABC

12.ABC

13.ABCD

14.ACD

15.ABCD

16.A

17.AC

18.ABC

19.ABD

20.AB

三、判断题（共20题，每题1分）×

2.√

3.√

4.×

5.√

6.√

7.√

8.×

9.√

10.√×

12.√

13.√

14.√

15.√

16.√

17.×

18.×

19.×

20.√

四、简答题（共2题，每题5分）核酸检验质量控制的核心要点包括设备与环境定期校准设备（如定量仪、离心机），保持实验室分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区），控制环境洁净度；第12页共13页试剂与样本验证试剂性能（灵敏度、特异性），样本采集后及时规范保存（抑制核酸酶活性），避免样本污染；操作规范操作人员需培训合格，严格按SOP执行（如移液、温度控制），关键步骤双人核对；结果验证设置阴性/阳性对照，检测结果重复性（CV值），确保数据可靠咽拭子样本采集关键注意事项采样部位深入鼻腔或咽喉，擦拭扁桃体及咽后壁3-5次，避免仅擦拭黏膜表面；操作轻柔避免用力过猛损伤黏膜，减少出血或细胞脱落不足；样本处理采样后立即将拭子头部浸入保存液，反复挤压管壁后折断拭子杆，盖紧瓶盖；环境配合采样前告知被采集者放松，避免紧张导致呕吐，采样后30分钟内送检或-70℃以下保存文档说明本文试题涵盖核酸检验基础理论、操作规范、质量控制等核心内容，适用于医学检验学生、实验室技术人员及相关从业者学习参考答案基于行业标准及实践经验整理，可根据实际需求调整使用第13页共13页。