萤光抗体试题及答案

萤光抗体试题及答案

一、单项选择题（共30题，每题1分）萤光抗体技术的核心原理是利用萤光物质与（）的特异性结合，实现对抗原或抗体的定位检测A.抗原B.抗体C.酶D.受体以下哪种物质不属于常用的萤光标记物？（）A.异硫氰酸萤光素（FITC）B.四甲基异硫氰酸罗丹明（TRITC）C.辣根过氧化物酶（HRP）D.藻红蛋白（PE）直接法萤光抗体技术中，需要使用（）A.萤光标记的特异性抗体B.未标记的特异性抗体+萤光标记的二抗C.萤光标记的抗原D.未标记的抗原+萤光标记的抗体间接法萤光抗体技术相比直接法，主要优势在于（）A.操作更简单B.敏感性更高C.特异性更强D.成本更低双标记萤光抗体技术可实现（）A.检测两种不同抗原B.提高检测速度C.降低背景干扰D.缩短反应时间萤光抗体技术中，影响萤光信号强度的关键因素是（）A.抗原浓度B.反应温度C.萤光标记效率D.洗涤次数以下哪种样本不适用于萤光抗体技术检测？（）A.细胞涂片B.组织切片C.血清D.纯培养的细菌萤光显微镜观察时，激发光与发射光的波长关系是（）A.激发光波长发射光波长B.激发光波长发射光波长C.激发光波长=发射光波长D.无固定关系萤光淬灭现象是指（）A.萤光物质在激发光照射下分解第1页共8页B.萤光信号随时间逐渐减弱C.非特异性结合导致背景过高D.萤光标记抗体与无关抗原结合用于标记抗体的萤光素应具备的特性不包括（）A.萤光量子产率高B.对pH敏感C.光稳定性好D.与抗体结合后活性不变直接法检测细胞表面抗原时，萤光标记物应与（）结合A.针对该抗原的特异性抗体B.针对二抗的抗体C.针对抗原的单克隆抗体D.针对抗原的多克隆抗体间接法中，若待检样本中无目标抗原，萤光信号会（）A.强B.弱C.无D.不确定萤光抗体技术的“三明治法”属于（）A.直接法B.间接法C.双抗体夹心法D.补体结合法以下哪种技术可用于检测抗体？（）A.直接法B.间接法C.双标记法D.流式细胞术萤光抗体技术在临床诊断中最常用于（）A.检测病原体B.检测肿瘤标志物C.自身抗体检测D.以上都是影响间接法萤光抗体技术敏感性的主要因素是（）A.一抗浓度B.二抗浓度C.洗涤次数D.反应时间萤光抗体的保存条件通常为（）A.4℃避光保存B.-20℃避光保存C.室温保存D.37℃保存下列哪种不是萤光抗体技术的应用领域？（）A.免疫组化B.流式细胞术C.酶联免疫吸附试验D.免疫电镜第2页共8页直接法的缺点是（）A.敏感性低B.操作繁琐C.成本高D.需多种萤光抗体间接法中，二抗的选择应针对（）A.待检抗原B.特异性一抗C.萤光标记物D.无关抗体萤光抗体技术中，“背景染色”通常指（）A.非特异性萤光结合B.特异性抗原分布不均C.萤光信号过强D.样本污染用于标记的萤光素FITC的最大激发波长约为（）A.495nm B.525nm C.550nm D.633nm双标记技术中，若使用FITC（绿色萤光）和TRITC（红色萤光），在显微镜下可观察到（）A.单一颜色萤光B.两种颜色共定位C.随机分布D.无规律分布以下哪种因素会导致非特异性萤光背景升高？（）A.抗体浓度过高B.反应温度过高C.洗涤不充分D.萤光素稳定性差萤光抗体技术与酶联免疫吸附试验（ELISA）相比，主要优势在于（）A.可定量检测B.可定性定位C.操作更简单D.成本更低检测细胞内抗原时，常用的固定剂是（）A.丙酮B.甲醛C.乙醇D.以上都是间接法中，若样本中存在目标抗原，最终萤光信号来源于（）A.特异性一抗B.萤光标记的二抗C.特异性一抗+萤光标记的二抗D.无关抗体萤光抗体技术中，“滴加”样本或试剂时，正确操作是（）A.直接滴在载玻片中央B.覆盖整个样本区域第3页共8页C.避免产生气泡D.以上都是流式细胞术使用的萤光抗体技术属于（）A.直接法B.间接法C.双标记法D.以上都可能以下哪种情况可能导致萤光抗体技术假阴性结果？（）A.洗涤不彻底B.抗原已被降解C.萤光标记效率低D.以上都是

二、多项选择题（共20题，每题2分）萤光抗体技术的基本类型包括（）A.直接法B.间接法C.双抗体夹心法D.补体结合法常用的萤光标记物有（）A.萤光素类B.量子点C.镧系元素D.同位素间接法萤光抗体技术的特点包括（）A.敏感性高B.一种二抗可检测多种一抗C.操作步骤少D.易受非特异性反应干扰影响萤光抗体反应的因素有（）A.温度B.pH值C.离子强度D.反应时间萤光抗体技术的应用包括（）A.医学诊断B.生物学研究C.环境监测D.食品检验直接法的优点有（）A.特异性高B.操作简单C.无需标记二抗D.敏感性高导致萤光背景过高的原因有（）A.抗体浓度过大B.洗涤不充分C.样本固定不当D.萤光素未标记双标记技术的优势在于（）A.可检测两种抗原B.提高检测效率第4页共8页C.便于共定位分析D.降低假阳性流式细胞术常用的萤光标记物有（）A.PE B.APC C.FITC D.Cy5用于固定样本的试剂有（）A.10%中性甲醛B.丙酮C.乙醇D.二甲苯萤光抗体保存时应注意（）A.避免反复冻融B.4℃避光保存C.-20℃以下保存D.加入保护剂间接法中，一抗的选择可以是（）A.多克隆抗体B.单克隆抗体C.多特异性抗体D.无关抗体萤光显微镜的关键部件包括（）A.激发光源B.激发滤光片C.双色镜D.发射滤光片检测细胞表面抗原时，常用的技术有（）A.直接法B.间接法C.补体结合法D.免疫金银染色导致萤光信号过弱的原因有（）A.萤光标记效率低B.反应时间不足C.洗涤过度D.抗体失活双抗体夹心法的步骤包括（）A.包被捕获抗体B.加入样本与捕获抗体结合C.加入检测抗体D.加入萤光标记的二抗萤光抗体技术的局限性有（）A.萤光淬灭B.背景干扰C.成本较高D.操作复杂检测自身抗体时常用的方法是（）A.间接法B.双标记法C.补体结合法D.直接法量子点作为萤光标记物的优势有（）第5页共8页A.萤光强度高B.光稳定性好C.发射光谱窄D.可多次激发实验中“封闭”的目的是（）A.减少非特异性结合B.提高抗体特异性C.增强萤光信号D.保护样本结构

三、判断题（共20题，每题1分）萤光抗体技术仅能检测抗原，不能检测抗体（）直接法中，一种萤光抗体可检测多种不同的抗原（）间接法的敏感性通常低于直接法（）FITC在495nm波长激发下发射525nm波长的绿色萤光（）流式细胞术可对单个细胞进行多参数分析（）萤光抗体技术中，样本固定后可直接进行抗体标记（）洗涤步骤的目的是去除未结合的抗体和非特异性结合物（）双标记技术中，两种萤光标记物的激发和发射光谱应重叠（）萤光淬灭与温度无关（）间接法中，二抗需与待检样本中的抗原结合（）检测细胞内抗原时，通常使用直接法（）萤光素与抗体结合后，其萤光特性会发生改变（）免疫组化中常用萤光抗体技术定位组织中的抗原（）萤光抗体的工作浓度通常通过预实验确定（）直接法的缺点是需要针对不同抗原标记不同的萤光抗体（）间接法中，若样本中无目标抗原，萤光信号会较强（）量子点的萤光信号可在长时间激发下保持稳定（）萤光显微镜的分辨率高于普通光学显微镜（）洗涤不充分会导致背景萤光升高（）萤光抗体技术可用于检测病原体的存在（）第6页共8页

四、简答题（共2题，每题5分）简述直接法萤光抗体技术的操作流程及优缺点简述间接法萤光抗体技术的原理，并说明其在临床检测中的应用萤光抗体技术试题答案

一、单项选择题答案1-5A CA B D6-10C DA B B11-15A CC BD16-20BBBDB21-25A AB CB26-30D DC DD

二、多项选择题答案ABCD

2.ABC

3.AB

4.ABCD

5.ABCDABC

7.ABC

8.AC

9.ABCD

10.ABCABCD

12.AB

13.ABCD

14.AB

15.ABCDABCD

17.AB

18.A

19.ABCD

20.AB

三、判断题答案×

2.×

3.×

4.√

5.√×

7.√

8.×

9.×

10.××

12.√

13.√

14.√

15.√×

17.√

18.√

19.√

20.√

四、简答题答案直接法操作流程

①将萤光标记的特异性抗体直接滴加在待检样本（如细胞涂片、组织切片）上，室温反应一定时间；第7页共8页

②用缓冲液充分洗涤，去除未结合的萤光抗体；

③在萤光显微镜下观察萤光，判断抗原是否存在优点操作简单，特异性高，无需二抗；缺点一种萤光抗体仅能检测一种抗原，敏感性较低间接法原理

①待检样本（含抗原）与未标记的特异性一抗反应，形成抗原-抗体复合物；

②洗涤后加入萤光标记的二抗（针对一抗的抗体），二抗与复合物结合；

③洗涤后观察萤光信号，通过二抗放大信号临床应用常用于检测自身抗体（如抗核抗体）、病毒抗体，或细胞内抗原的定位检测，可提高检测敏感性第8页共8页。