核酸检测技能考试试题及答案

核酸检测技能考试试题及答案

一、单选题

1.核酸检测过程中，样本采集时错误的做法是（）（1分）A.佩戴口罩和手套B.严格按照无菌操作原则C.使用一次性采样器头D.在非清洁环境中进行采样【答案】D【解析】样本采集应在清洁环境中进行，以避免污染

2.核酸检测中，试剂的保存条件通常要求（）（1分）A.室温保存B.避光冷藏C.直接暴露在阳光下D.高温干燥【答案】B【解析】试剂通常需避光冷藏保存以保持活性

3.核酸提取过程中，常用的提取方法不包括（）（1分）A.离心法B.涡旋振荡法C.超声波破碎法D.直接溶解法【答案】D【解析】直接溶解法不属于常见的核酸提取方法

4.核酸扩增过程中，PCR反应体系通常包含（）（1分）A.DNA聚合酶B.RNA聚合酶C.脱氧核苷三磷酸D.以上都是【答案】D【解析】PCR反应体系包含DNA聚合酶、脱氧核苷三磷酸等

5.核酸检测结果的判读标准通常依据（）（1分）A.Ct值B.阴阳性报告C.吸光度值D.以上都是【答案】D【解析】结果判读依据Ct值、阴阳性报告和吸光度值

6.核酸检测过程中，样本处理的关键步骤是（）（1分）A.混匀B.消毒C.稀释D.以上都是【答案】D【解析】样本处理包括混匀、消毒和稀释

7.核酸检测设备的日常维护通常包括（）（1分）A.清洁B.校准C.消毒D.以上都是【答案】D【解析】设备维护包括清洁、校准和消毒

8.核酸检测过程中，防止交叉污染的措施包括（）（1分）A.使用一次性耗材B.严格区分阳性阴性区域C.定期消毒工作台面D.以上都是【答案】D【解析】防止交叉污染需使用一次性耗材、区分区域和定期消毒

9.核酸检测的室内质控通常使用（）（1分）A.阴性对照B.阳性对照C.内对照D.以上都是【答案】D【解析】室内质控包括阴性对照、阳性对照和内对照

10.核酸检测报告的审核通常由（）（1分）A.检验医师B.技术人员C.管理人员D.以上都是【答案】D【解析】报告审核由检验医师、技术人员和管理人员共同进行

二、多选题（每题4分，共20分）

1.核酸检测的样本类型通常包括（）（4分）A.口咽拭子B.鼻咽拭子C.血液样本D.咳嗽痰液E.尿液样本【答案】A、B、D【解析】样本类型通常包括口咽拭子、鼻咽拭子和咳嗽痰液

2.核酸提取的常用试剂包括（）（4分）A.蛋白酶KB.高盐缓冲液C.氯仿D.异丙醇E.无水乙醇【答案】A、B、D、E【解析】常用试剂包括蛋白酶K、高盐缓冲液、异丙醇和无水乙醇

3.核酸扩增的引物设计原则包括（）（4分）A.特异性B.稳定性C.互补性D.长度适中E.GC含量合适【答案】A、B、C、D、E【解析】引物设计需考虑特异性、稳定性、互补性、长度和GC含量

4.核酸检测的室内质控指标通常包括（）（4分）A.阴性对照结果B.阳性对照结果C.Ct值重复性D.吸光度值稳定性E.灵敏度检测【答案】A、B、C、D【解析】室内质控指标包括阴性对照、阳性对照、Ct值重复性和吸光度值稳定性

5.核酸检测的样本保存条件通常要求（）（4分）A.低温B.避光C.干燥D.密闭E.高湿度【答案】A、B、C、D【解析】样本保存需低温、避光、干燥和密闭

三、填空题

1.核酸检测过程中，样本采集应使用______和______，以防止污染（4分）【答案】一次性采样器头；无菌采样棉签

2.PCR反应体系通常包含______、______和______等关键成分（4分）【答案】DNA聚合酶；脱氧核苷三磷酸；引物

3.核酸检测结果的判读通常依据______值和______报告（4分）【答案】Ct值；阴阳性

4.核酸检测设备的日常维护应包括______、______和______（4分）【答案】清洁；校准；消毒

5.核酸检测的室内质控通常使用______、______和______（4分）【答案】阴性对照；阳性对照；内对照

四、判断题

1.核酸检测过程中，样本采集时无需佩戴口罩（）（2分）【答案】（×）【解析】样本采集时必须佩戴口罩以防止污染

2.PCR反应体系中的引物可以重复使用（）（2分）【答案】（×）【解析】引物应一次性使用，不可重复使用

3.核酸检测结果的判读仅依据阴阳性报告（）（2分）【答案】（×）【解析】判读结果需依据Ct值和阴阳性报告

4.核酸检测设备的日常维护只需清洁即可（）（2分）【答案】（×）【解析】设备维护包括清洁、校准和消毒

5.核酸检测的室内质控仅使用阳性对照（）（2分）【答案】（×）【解析】室内质控使用阴性对照、阳性对照和内对照

五、简答题

1.简述核酸检测样本采集的注意事项（5分）【答案】核酸检测样本采集时，应注意以下事项

（1）佩戴口罩和手套，防止污染

（2）严格按照无菌操作原则进行采样

（3）使用一次性采样器头，避免交叉污染

（4）在清洁环境中进行采样，避免外界污染

（5）确保样本采集充分，以提高检测灵敏度

2.简述PCR反应体系的组成及其作用（5分）【答案】PCR反应体系通常包含以下成分及其作用

（1）DNA聚合酶负责扩增DNA片段

（2）脱氧核苷三磷酸（dNTPs）提供合成DNA的原料

（3）引物特异性结合目标DNA片段，起始扩增

（4）缓冲液提供适宜的pH和离子环境

（5）镁离子作为DNA聚合酶的辅因子

3.简述核酸检测室内质控的必要性（5分）【答案】核酸检测室内质控的必要性包括

（1）确保检测结果的准确性和可靠性

（2）及时发现实验过程中的问题，如试剂失效或设备故障

（3）满足实验室质量管理体系的要求

（4）提高检测的灵敏度和特异性

（5）确保检测结果的合规性和可比性

六、分析题

1.分析核酸检测过程中可能出现的误差及其来源（10分）【答案】核酸检测过程中可能出现的误差及其来源包括

（1）样本采集误差如采样不规范、样本处理不当等

（2）试剂误差如试剂失效、储存不当等

（3）设备误差如设备未校准、操作不当等

（4）操作误差如加样错误、混匀不充分等

（5）环境误差如实验室污染、温湿度控制不当等

（6）结果判读误差如判读标准不明确、主观判断等

2.分析核酸检测在公共卫生中的重要作用（15分）【答案】核酸检测在公共卫生中的重要作用包括

（1）早期发现和诊断传染病，如COVID-19

（2）快速筛查和隔离感染者，防止疫情扩散

（3）监测病原体的变异，为防控策略提供依据

（4）评估防控措施的效果，优化防控策略

（5）提高公众的健康意识，促进健康行为

（6）为疫苗接种和免疫策略提供支持

（7）推动公共卫生体系建设，提高应急响应能力

七、综合应用题

1.某实验室进行核酸检测，发现部分样本结果不稳定，请分析可能的原因并提出改进措施（25分）【答案】样本结果不稳定可能的原因及改进措施

（1）样本采集不规范如采样方法不统

一、样本处理不当等改进措施加强采样人员培训，规范采样流程，确保样本采集质量

（2）试剂质量问题如试剂失效、储存不当等改进措施使用合格试剂，规范试剂储存和使用，定期检查试剂效期

（3）设备故障如设备未校准、性能不稳定等改进措施定期校准和维护设备，确保设备性能稳定

（4）操作误差如加样错误、混匀不充分等改进措施加强操作人员培训，规范操作流程，减少人为误差

（5）环境污染如实验室清洁不彻底、交叉污染等改进措施加强实验室清洁和消毒，规范实验区域划分，防止交叉污染

（6）结果判读标准不明确如判读标准不统

一、主观判断等改进措施制定明确的判读标准，减少主观判断，提高结果判读的一致性通过以上分析和改进措施，可以有效提高核酸检测结果的稳定性和可靠性，确保检测结果的准确性和有效性。