实验室生物安全防护课件

实验室生物安全防护第一章生物安全基础概念什么是生物安全防护目标综合体系全员责任预防实验室人员、周围环境及社会公众暴露包括行政管理制度、实验设施设计规范和专从实验室管理者到每一位操作人员都需要承,于潜在的生物危害因子确保操作安全可控业安全设备的系统化综合应用担相应的生物安全责任,生物安全与生物安保的区别生物安全Biosafety生物安保Biosecurity防护重点:防止生物因子被盗用、滥用或恶意释放•关注人为故意造成的安全威胁•通过门禁、监控等措施加强管控•防止生物材料落入不法分子手中•强调人员背景审查和物料追溯生物危害定义Biohazard核心概念主要类型暴露途径生物危害是指具有对人类、动物或植物健病原微生物细菌、病毒、真菌、寄生虫等:康造成实际或潜在危害能力的生物因子这致病性微生物,些因子可能引发疾病、过敏反应或其他不生物毒素由生物体产生的有毒物质如肉毒:,良健康影响杆菌毒素过敏原能够引发过敏反应的生物性物质:重组基因工程产物及转基因生物体DNA:生物危害标志标志特征应用场景规范要求橙色或橙红色三叶形标志国际通用的生物危标识生物危害区域、设备、容器及废弃物提必须在显著位置张贴尺寸、颜色需符合国家,,,害警示符号醒人员注意防护标准生物危害标志是实验室安全的第一道视觉防线所有人员见到该标志必须提高警惕采取相应防护措施,,第二章生物安全等级与风险分组BSL病原体风险分组RG1~RG4RG2-中等个体风险RG1-低风险或无风险典型代表金黄色葡萄球菌、流感病毒:典型代表枯草芽孢杆菌、大肠杆菌株:K-12能引起人类或动物疾病但通常不严重有有效的预防和治疗措施传播,,,不太可能引起人类或动物疾病的生物因子,对实验人员和环境风险极风险有限低RG4-极高风险RG3-高个体风险典型代表埃博拉病毒、马尔堡病毒:典型代表结核分枝杆菌、冠状病毒:SARS通常引起严重疾病可能有严重后果但一般不会在个体间传播存在有,,,效的治疗和预防措施生物安全等级对应关系BSL1~BSL4BSL-1适用风险组:RG1基本实验室标准微生物操作规范无需特殊防护设备,,BSL-2适用风险组:RG2需要生物安全柜、个人防护装备限制人员进入,BSL-3适用风险组:RG3密闭实验室负压通风系统严格门禁控制,,BSL-4适用风险组:RG4最高级别隔离正压防护服独立建筑或隔离区,,等级设施设计要点对比BSL设计要素BSL-1BSL-2BSL-3/4隔离要求无特殊隔离独立实验区完全物理隔离通风系统普通通风定向气流负压过滤+HEPA进入控制普通门禁限制进入气闸室淋浴+防护设备基本生物安全柜正压防护服PPE废弃物处理常规处理灭菌后处理双重灭菌监控系统可选建议配置全面监控必需实验室防护体系BSL-4物理防护个人防护双重气闸门系统正压防护服太空服式••化学淋浴消毒通道独立供氧系统••过滤排风系统通讯设备集成•HEPA•负压梯度控制多层手套防护••密封性结构设计全身淋浴消毒••第三章个人防护装备PPE的种类与功能PPE实验服防护手套口罩与呼吸器隔离皮肤与污染物防止衣物被污染应选择长防止手部直接接触生物危害物质根据操作需求防止吸入气溶胶和飞沫普通医用口罩用于,BSL-袖、合身、可高压灭菌的材质纽扣或拉链应完全选择乳胶、丁腈或其他材质必要时使用双层手以上用于更高风险操作,,2,N95/FFP2闭合套防护眼镜与面罩防护鞋保护眼睛和面部免受飞溅物污染操作可能产生防止脚部受到污染或锐器刺伤应选择防滑、封飞溅的样本时必须佩戴全面罩提供更全面的保闭式、易清洁消毒的鞋款避免穿凉鞋或露趾鞋,,护根据风险评估结果选择合适的组合确保所有暴露途径都得到有效防护PPE,穿戴与脱卸规范PPE穿戴顺序↓脱卸顺序↑0101实验服外层手套进入实验室前首先穿上,确保纽扣或拉链完全闭合首先脱掉手套如双层手套先脱外层,避免接触手套外表面0202口罩/呼吸器防护眼镜佩戴口罩,调整鼻夹和松紧带,确保密合性从后方取下护目镜,避免触碰镜片前表面0303防护眼镜实验服戴上护目镜或面罩,确保视野清晰且密封良好由内向外翻脱实验服,污染面朝内0404防护手套口罩与洗手最后戴手套,手套袖口应覆盖实验服袖口最后摘下口罩仅接触系带,立即彻底洗手选择的影响因素PPE传染途径暴露类型任务性质接触传播重点防护手部选择合适手套皮肤暴露实验服和手套操作时长长时间操作需考虑舒适性:,::飞沫传播需要医用外科口罩和护目镜黏膜暴露护目镜、面罩精细程度精细操作选择灵活性好的手套:::气溶胶传播必须使用以上呼吸器呼吸道暴露口罩或呼吸器:N95/FFP2:环境条件高温环境需透气性好的材质消化道暴露禁止饮食加强手部防护::,血源性传播加强手套、护目镜和防护服化学兼容性同时接触化学品需选择耐化学::腐蚀PPE进行实验前必须完成风险评估明确可能的暴露途径和危害程度据此制定使用方案当存在多种风险时应选择能够提供综合防护的组合,,PPE,PPE穿戴步骤图解PPE正确的穿戴顺序和技术能够确保发挥最大防护效能定期进行穿脱训练和密合性测试是保持防护有效性的重要措施所有实验室人员都应接受标准PPE化的使用培训并通过考核PPE第四章生物安全操作规范标准操作规程是实验室生物安全管理的核心通过建立和严格执行科学的操作规范可以,最大限度地降低实验室感染和环境污染的风险标准操作规程核心要求SOP严禁行为手部卫生人员管理实验室内严禁饮食、吸烟、化妆及使用隐形实验前后、脱手套后、离开实验室前必须彻严格限制非授权人员进入实验区域访客必眼镜不得用嘴吸取液体禁止舔标签或润湿底洗手使用正确的洗手技术持续至少须经过批准、培训并在专人陪同下进入,,20手指翻页秒减少气溶胶产生工作区域清洁样本标识与记录避免剧烈振荡、快速吸取液体、在火焰工作开始前和结束后使用适当消毒剂清所有生物样本必须清晰标识包括内容,附近操作挥发性物质等可能产生气溶胶洁工作台面定期对实验室环境进行深物、日期、操作者等信息建立完整的的行为所有可能产生气溶胶的操作必度清洁和消毒保持整洁有序实验记录和样本追溯体系,须在生物安全柜内进行实验室废弃物管理分类收集灭菌处理最终处置按照废弃物类型分类收集:感染性废弃物、锐器、化学废生物危害废弃物必须经过高压蒸汽灭菌121℃,20分钟以经灭菌处理的废弃物由有资质的医疗废物处置单位进行弃物、放射性废弃物等使用专用容器和颜色标识上或其他有效灭菌方法处理后方可作为普通废弃物处最终处置严格遵守国家和地方法规要求,,置黄色容器红色容器蓝色/黑色容器感染性废弃物接触过病原体的培养皿、试管、移液器尖锐器废弃物针头、刀片、破碎玻璃等使用防刺穿硬质容化学废弃物根据化学性质分类收集单独处理::,:,等器废弃物容器应放置在操作区域便于触及的位置装至满时应及时封口处理容器外表面必须标注生物危害标志和内容物信息,3/4锐器安全使用与处置安全使用原则使用安全针具优先选择带有安全装置的针具,如自动回缩针头、钝头针等,从源头降低针刺伤风险避免重复套盖使用后的针头不应重新套上针帽,除非使用单手勺取法或专用套盖装置传递锐器使用托盘传递锐器,避免手对手直接传递需要传递时应放置在中性区域清晰视野操作始终保持注意力集中,在视线清晰的情况下操作锐器,避免分心锐器废弃物处置•使用专用的防刺穿硬质容器•用后立即投入锐器盒,不得随意放置•锐器盒填充不超过3/4容量•盒满后密封并标识,按感染性废弃物处理•锐器盒应放置在操作台伸手可及的位置针刺伤是实验室最常见的暴露事故之一据统计,严格遵守锐器安全操作规范可以减少80%以上的针刺伤事件生物安全柜使用规范BSC123BSC I级BSC II级BSC III级特点保护人员和环境不保护样品特点保护人员、环境和样品三重保护特点完全密闭最高级别防护:,::,前开口吸入气流保护操作者排风经过最常用类型有、、、等亚型气密性操作箱通过手套进行操作所有气流,HEPA,A1A2B1B2,,滤适用于低风险生物因子操作气流循环排出适用于和经过滤用于和高风险病原体,70%,30%,BSL-2HEPA,BSL-4实验室BSL-3生物安全柜正确操作要点开机后运行至少分钟再开始工作关机前让其继续运行分钟以净化内部空气•5,5-10操作窗口高度调整至规定位置通常前窗开口不得过高或过低•20cm,物品摆放有序清洁物品在上风向污染物品在下风向避免阻挡气流•,,,动作轻柔缓慢避免剧烈动作扰乱气流层•,手臂缓慢进出前窗开口至少等待分钟让气流稳定后再开始操作•,1定期进行检测和认证确保过滤器完整性和气流参数符合标准•,生物安全柜气流原理气流保护机制常见气流干扰因素生物安全柜通过精心设计的气流系统实实验室内部气流紊乱开门、人员走•现三重保护动:操作窗口开度不正确•前窗进风吸入气流防止气溶胶逸出保护:,操作者•安全柜内物品摆放不当垂直层流:HEPA过滤的洁净空气垂直下•手臂频繁快速穿过前窗开口沉保护样品不被污染,过滤器堵塞或损坏•排风过滤:排出气流经HEPA过滤,保护环•安全柜放置位置不当靠近门窗、通境风口气流速度、均匀性和方向的任何改变都可能影响防护效能因此必须按照规范操,作生物安全柜不是万能的它只能在正确使用的前提下提供有效保护错误的操!作方式可能让安全柜的防护效能大打折扣甚至完全失效,第五章实验室设计与环境控制合理的实验室设计和严格的环境控制是生物安全防护的工程基础从实验室选址、布局、通风系统到安全设施配置每一个环节都关系到整体防护效能,实验室布局设计原则分区管理缓冲隔离将实验室划分为清洁区、半污染区和污染区与清洁区之间设置缓冲间作为,污染区不同区域采取相应的防护措施物理屏障和压力梯度过渡防止污染扩,,和管理要求人流物流单向流动散以上必须设置双重门系,BSL-3统负压控制实验室内部保持负压确保气流从低风险区流向高风险区防止病原体通过空气传播,,至外部环境区域压力梯度控制典型的压力梯度设置:走廊0Pa→缓冲间-

12.5Pa→实验室-25Pa→生物安全柜通过压差监测系统实时监控各区域压力确保压力梯度始终处于正常范围-

37.5Pa,实验室设施安全设备配置HEPA高效过滤器高压蒸汽灭菌器洗手设施紧急冲淋装置对

0.3μm颗粒的过滤效率≥

99.97%,用实验室必备的灭菌设备,用于处理污实验室出口处必须设置非手动式洗手包括紧急洗眼器和淋浴器,用于化学于排风系统和生物安全柜是防止病染废弃物和器材以上实验室池肘控、脚踏或感应式配备洗手品或生物材料溅入眼睛或大面积皮肤,BSL-3,原体外泄的关键设备需定期检测和需配置双扉高压灭菌器实现物品的液、消毒剂和一次性擦手纸污染时的紧急处理应定期检查确保,更换单向传递水流畅通其他重要设备设备维护要求备用电源系统发电机建立设备台账和维护记录•UPS/•环境监测系统温湿度、压差、气流制定定期检测和校准计划••通讯系统对讲机、紧急呼叫关键设备配置备用或冗余••视频监控系统故障应急预案和快速响应机制••实验室门禁与安全标识1生物危害警示标志实验室入口处必须张贴明显的生物危害标志标明生物安全等级、负责人联系方式和,应急联系电话2门禁控制系统及以上实验室应安装门禁系统仅授权人员可通过刷卡、密码或生物识别进入BSL-2,,系统记录进出人员和时间3门锁与联锁实验进行时应保持门关闭并上锁高等级实验室的气闸门应具有联锁功能防止两道,门同时开启造成压差失效4可视窗口实验室门应设置观察窗口便于外部人员查看内部情况在紧急情况下及时发现问题并,,提供救援门禁管理不仅是安全管理的需要也是生物安保的重要措施完整的人员进出记录有助于事故调,查和追溯第六章实验室事故应急处理尽管采取了多重防护措施实验室事故仍可能发生建立完善的应急响应机制进行定期,,演练能够在事故发生时快速有效地控制局面最大限度减少危害,,生物泄漏与污染应急处理第一时间响应立即通知在场所有人员停止一切操作保持冷静评估泄漏规模和风险等级小规模泄漏可自行处理大规模泄漏需立即报告并疏散,,,,隔离污染区域关闭实验室所有门窗阻断通风系统如有防止污染扩散在门外张贴警示标志禁止无关人员进入如在生物安全柜内泄漏保持安全柜运行,,,,个人防护升级处理人员应穿戴适当的防护装备根据病原体风险等级选择防护级别可能涉及气溶胶时必须佩戴呼吸器必要时穿着防护服,,消毒清理用吸收材料纸巾、吸液垫覆盖污染区域倒上适当浓度的消毒剂如含氯消毒液作用分钟以上后清理,5000-10000mg/L,30废弃物处理与报告所有清理材料和防护用品作为感染性废弃物处置清理后对环境进行采样监测填写事故报告记录泄漏原因、处理过程及改进措施,消毒剂选择指南含氯消毒剂适用于多数细菌和病毒过氧乙酸用于芽孢乙醇用于表面消毒戊二醛用于器械消毒剂应现配现用作用时间要充分:;

0.5%;75%;2%,实验室暴露与感染应急处理针刺伤/切割伤处理皮肤/黏膜污染处理0101立即处理伤口脱离污染源轻轻挤压伤口,促使血液流出,用流动清水或生理盐水冲洗15分钟以迅速脱下污染的防护用品和衣物,避免污染扩散上0202大量清水冲洗消毒伤口用流动清水冲洗污染部位15-20分钟眼睛溅入时使用洗眼器冲用75%酒精或碘伏消毒伤口周围皮肤,必要时用

0.5%碘伏或75%酒洗,或用生理盐水持续冲洗精浸泡伤口2-3分钟0303医学评估包扎与就医及时就医进行专业评估,根据暴露病原体类型采取相应的预防或治简单包扎伤口,立即前往医院就诊,告知医生暴露病原体种类,进行暴疗措施露后预防PEP暴露后医学管理流程立即报告:向实验室负责人和生物安全管理部门报告暴露事件风险评估:评估暴露的病原体种类、剂量、途径和严重程度启动预案:根据评估结果启动暴露后预防措施,可能包括预防性用药、疫苗接种等健康监测:对暴露人员进行定期健康监测,观察是否出现感染症状,必要时进行实验室检测心理支持:提供心理咨询和支持,帮助暴露人员缓解焦虑事故分析:深入分析事故原因,改进操作流程和防护措施,防止类似事件再次发生筑牢实验室生物安全防线100%24/70全员参与持续监控零事故目标生物安全是每个人的责任从实验室主任到每一位生物安全防护是全天候的工作需要建立完善的监通过系统的培训、严格的管理和持续的改进追求,,,技术员都应严格遵守安全规范测和应急响应体系零感染、零泄漏的安全目标生物安全无小事防范胜于一切补救只有将生物安全意识深植于心将安全规范落实到每一个操作细节才能真正保护实验室人员的健康和公共安全,,,持续改进的生物安全文化定期培训风险评估经验分享新员工岗前培训在职人员年度再培训特殊项目定期开展生物安全风险评估及时识别和控制新建立事故案例库分享经验教训避免重复犯错,,,,,专项培训的风险点让我们共同努力营造安全、健康、负责任的科研环境在保障生物安全的前提下推动科学研究不断进步,,!。