生物安全培训课件及试题

生物安全培训课件及试题第一章生物安全基础知识概述什么是生物安全？核心定义生物安全是指采取一系列科学管理和技术措施，保护实验室人员、环境和公众免受病原微生物及生物制品的潜在危害它是实验室管理的生命线，贯穿于实验操作的每一个环节主要内容实验室科学管理与制度建设•标准化操作规范与流程控制•风险评估与应急处置机制•我国病原微生物分类管理根据病原微生物的传染性、致病性以及对个人和社会的危害程度，我国将病原微生物分为四类进行科学管理，不同类别对应不同的防控级别和操作要求第一类第二类极高致病性高致病性天花病毒、埃博拉病毒、拉萨热病毒等，能引起严重疾病甚至死亡，艾滋病毒、炭疽芽孢杆菌、鼠疫杆菌等，可导致严重疾病，具有较强传播迅速且缺乏有效防治手段传染性但有一定防治措施第三类第四类中低致病性无致病性肠道病毒、麻疹病毒、流感病毒等，可引起疾病但通常有有效的预防和治疗方法病原微生物风险等级分类第一类极高风险1第二类2高风险第三类3中低风险第四类4相关法规与标准我国已建立完善的生物安全法律法规体系，为实验室生物安全管理提供了强有力的法律保障和技术支撑年12004《病原微生物实验室生物安全管理条例》颁布实施，首次系统规范了实验室生物安全管理要求2年月日2021415《中华人民共和国生物安全法》正式施行，标志着我国生物安全进入法治化新阶段持续更新3生物安全等级简介基础实验室BSL-1低风险操作适用于已知对健康成人无致病作用的微生物，仅需基本实验室防护措施，如标准微生物操作台和基本个人防护装备基础实验室BSL-2中等风险操作适用于对人体有中等危害的病原体，必须配备生物安全柜，实验人员需接受专业培训，进行气溶胶产生操作时需在安全柜内进行防护实验室BSL-3高风险操作适用于可通过呼吸道传播、致病性强的病原体，实验室需采用负压设计，严格控制人员进出，配备高效过滤排风系统最高防护实验室BSL-4极高风险操作第二章实验室生物安全操作规范个人防护装备（）PPE防护装备类型穿戴与脱卸要点正确的穿戴与脱卸顺序至关重要穿戴前检查装备完整性

1.防护手套按照由内到外的顺序穿戴

2.选择合适材质，避免化学腐蚀和病原穿透确保所有接口处密封严密

3.脱卸时避免接触污染表面

4.按照由外到内的顺序小心脱卸

5.脱卸后立即进行手部消毒

6.口罩防护根据风险等级选用医用或口罩N95防护服全覆盖式设计，防止皮肤接触污染护目镜保护眼睛免受飞溅和气溶胶伤害生物安全柜的正确使用生物安全柜是实验室最重要的防护设备之一，正确使用能有效防止病原微生物扩散和实验人员感染启动准备操作规范维护消毒工作前开启安全柜运行分钟，确保气流手臂缓慢进出操作窗口，避免快速动作破坏操作后开启分钟净化，用乙醇擦拭工作5-10575%稳定，柜内环境达到洁净状态气流屏障，所有操作在柜内中后部进行台面，定期更换高效过滤器并进行检测认证实验室常用消毒方法高压蒸汽灭菌化学消毒紫外线照射最可靠的灭菌方法表面与液体消毒空气与表面消毒温度℃乙醇快速消毒波长•121•75%•254nm时间分钟甲醛气体熏蒸照射时间分钟•15-30••30-60适用于耐高温物品漂白粉大面积消毒定期更换灯管•••选择合适的消毒方法需要综合考虑病原体类型、物品材质、消毒效果和成本等多方面因素不同方法可以联合使用以达到更好的消毒效果高压灭菌操作流程0102安全提示物品准备装载摆放高压灭菌器属于特种设备，操作人员必须经过检查待灭菌物品，确保包装适当，不超过物品摆放不宜过密，保证蒸汽充分接触，专业培训并持证上岗严禁在未完全泄压的情容器容量的留出循环空间2/3况下开启柜门，避免蒸汽喷出造成烫伤0304参数设置运行监控设定温度℃，时间分钟，根据观察压力表和温度计，确保达到设定参数12115-30负载量调整并维持稳定05冷却取出待压力降至零后开启，物品冷却后取出，检查灭菌指示卡病原微生物样本处理流程样本处理是实验室工作的核心环节，规范的流程能有效降低感染风险和环境污染样本采集1使用专用采集器具，佩戴完整防护装备，避免污染和交叉感染，详细记录采集信息2安全运输使用三层包装系统，内层密封、中层防漏、外层标识，保持低温链，附带运输文件规范储存3根据样本类型选择适当温度，℃或液氮保存，专用冰箱分类存放，定期检-80查记录4操作处理在生物安全柜内开启容器，匀浆搅拌后静置，小心吸取上清，避免气溶胶产生废弃处置5分类收集感染性废物，高压灭菌后统一处理，详细记录处置过程和时间关键提示匀浆、搅拌等操作极易产生气溶胶，必须在生物安全柜内进行，开启容器前需静置分钟使气溶胶沉降3-5离心机使用注意事项安全操作要点对称平衡离心管必须对称放置，质量差异不超过克，使用平衡管确保转子平衡

0.5盖紧盖子离心管盖必须拧紧，防止高速旋转时液体溢出，产生危险气溶胶液体容量液体不超过离心管容量的，避免因离心力过大导致液体溢出或管体破裂2/3使用后清洁及时清洁腔体，擦拭转子，检查是否有液体渗漏或异常，定期保养维护重要处理病原微生物样本时，应使用密封离心管和密闭转子，离心结束后在安全柜内开启实验动物生物安全动物来源管理人畜共患病防控实验动物必须来自具有《实验动物生严格防范人畜共患病传播，如流行性产许可证》的合法供应单位，附有健出血热、猴病毒、狂犬病等实验B康证明和质量检验报告动物入所前人员必须接种相关疫苗，佩戴完整防需进行隔离检疫，确认健康状态后方护装备动物咬伤抓伤后立即清洗消可用于实验毒，必要时注射免疫球蛋白感染动物处理感染病原体的实验动物尸体属于高度危险的感染性废物，必须先进行高压蒸汽灭菌处理（℃，分钟以12130上），然后统一收集焚烧动物垫料、饲料等也需灭菌后处理实验动物设施应根据研究病原体的危险等级，建设相应级别的屏障环境或隔离设施，配备独立的通风系统和废物处理系统第三章生物安全应急与考核试题尽管采取了严格的防护措施实验室事故仍可能发生本章将介绍应急处理流程、典型事故案例分析并提供全面的考核试题帮助强化生物安全意识和,,,应急处置能力实验室事故应急处理建立完善的应急响应机制是将事故危害降到最低的关键一旦发生生物安全事故，必须迅速、有序地采取应急措施

①启动预案

②事故报告立即启动实验室生物安全应急预案，通知应急小组成员，隔离事故现按规定时限向上级主管部门报告，详细说明事故类型、涉及病原体、场，停止相关实验活动人员暴露情况等关键信息

③现场处置

④人员救治划定隔离区域，设置警示标识，使用适当消毒剂进行全面消毒，收集受伤或暴露人员立即脱离现场，进行紧急医学处理，必要时隔离观察，污染物品进行无害化处理实施预防性治疗或疫苗接种黄金时间事故发生后的前分钟是应急处置的关键期，快速正确的响应能显著降低感染风险和扩散范围30常见生物安全事故案例分析某高校实验室气溶胶泄漏事件事故经过研究生在操作高浓度病毒样本时，离心管未盖紧导致高速离心时液体泄漏，形成大量感染性气溶胶实验室未配备生物安全柜，导致多名在场人员暴露1处理措施立即疏散人员，关闭实验室通风系统，启动应急预案对暴露人员进行医学观察和预防性治疗，对实验室进行全面消毒，停止相关实验活动经验教训必须配备符合要求的生物安全柜；离心操作前检查容器密封性；加强人员培训和操作规范意识病原体误操作导致感染事件事故经过某疾控中心工作人员在处理高致病性细菌样本时，未严格按照操作规程在安全柜外进行样本处理，针头刺伤手指导致直接暴露感染2处理措施立即用流动水和消毒液冲洗伤口，紧急就医并进行抗生素预防治疗对接触人员进行排查和医学观察，开展事故调查改进措施强化标准操作规程培训；所有涉及病原体的操作必须在安全柜内进行；加强个人防护和操作技能考核；建立操作监督检查机制生物安全培训考核题精选（单选题）第题第题13《中华人民共和国生物安全法》的正式施行日期是？涉及实验动物的生物安全实验应在哪个级别及以上的实验室进行？年月日•A.20201017•A.BSL-1年月日✓•B.202111B.BSL-2年月日✓C.2021415•C.BSL-3年月日•D.202211•D.BSL-4解析动物实验可能产生气溶胶和人畜共患病风险，需要至少级别的BSL-2防护措施第题2病原微生物分类中，危害程度最高的是哪一类？第题4第一类✓A.高压蒸汽灭菌的标准温度和时间是？第二类•B.•C.第三类•A.100℃，10分钟•D.第四类•B.115℃，20分钟℃，分钟✓解析第一类病原微生物具有极高致病性，如天花病毒、埃博拉病毒等，能引C.12115-30起严重疾病甚至死亡℃，分钟•D.1343生物安全培训考核题精选（判断题）判断题判断题判断题123生物安全柜能有效防止实验室工作人员接所有微生物实验室都必须使用生物安全柜高压灭菌是实验室最常用且最可靠的消毒触病原微生物方法✓正确✗错误✓正确解析生物安全柜通过气流控制和高效过解析只有在操作可能产生气溶胶的病原解析高压蒸汽灭菌能够杀灭包括芽孢在滤系统，在操作病原微生物时为人员提供微生物时才必须使用生物安全柜内的所有微生物，是实验室最常用和最可BSL-有效防护，是实验室最重要的防护设备之级别的低风险实验可以在开放实验台上靠的灭菌方法，适用于耐高温物品1一进行生物安全培训考核题精选（多选题）第题1微生物实验室生物安全管理的基本原则包括哪些？（多选）严格分区管理个体防护到位清洁区、半污染区、污染区明确划分，人流物流合理设计根据风险等级配备相应的个人防护装备，正确穿戴使用定期消毒灭菌检测监控评估建立日常消毒制度，定期对实验室环境和设备进行消毒定期进行生物安全检测，风险评估，持续改进管理措施第题2个人防护措施包括以下哪些内容？（多选）✓佩戴防护手套✓使用生物安全柜操作••✓佩戴口罩或呼吸器✓严格执行无菌操作技术••✓穿着防护服或实验服•生物安全培训考核题精选（操作题）操作题生物安全柜的正确操作1问题请详细描述生物安全柜操作前后应如何处理？参考答案操作前开启安全柜风机运行5-10分钟，使柜内空气循环达到洁净状态；用75%乙醇擦拭工作台面；打开紫外灯消毒30分钟（如配备）；将所需物品有序摆放在柜内，避免阻挡气流操作中手臂缓慢进出操作窗口，避免破坏气流屏障；所有操作在柜内中后部区域进行；不在安全柜内存放物品操作后清理柜内物品；用消毒液擦拭工作台面和内壁；继续运行风机5-10分钟进行净化；关闭风机并记录使用情况操作题离心机的安全使用2问题离心机使用时应注意哪些安全细节？参考答案

1.使用前检查转子和离心管是否完好，无裂纹

2.离心管必须对称平衡放置，质量差异≤

0.5克，使用平衡管

3.离心管盖必须拧紧，液体不超过容量的2/

34.盖好离心机盖子并锁紧，设置适当的转速和时间

5.运行过程中不得打开盖子，发现异常立即停机

6.停机后等待转子完全停止再开盖，在安全柜内取出样本

7.使用后清洁腔体和转子，检查是否有液体泄漏操作题实验动物尸体的安全处理3问题感染病原体的实验动物尸体应如何安全处理？参考答案

1.动物处死后立即装入专用的生物危害标识袋中，双层包装

2.在生物安全柜内操作，避免直接接触尸体

3.将密封好的尸体袋放入高压灭菌容器

4.进行高压蒸汽灭菌，121℃，至少30分钟

5.灭菌后的尸体转移至专用医疗废物容器

6.联系有资质的医疗废物处置单位进行焚烧处理

7.全程记录处理时间、方法和负责人，填写废物处置记录表废弃物处理规范010203分类收集安全包装灭菌处理将感染性废弃物按照固体、液体、锐器分类收集，使用双层医疗废物袋包装，封口严密不得泄漏固体废物高压灭菌℃，分钟以上；液体12130使用带有生物危害标识的专用容器，标明废弃物锐器类废物使用专用防刺穿容器，填充至时废物化学消毒处理后排放；含病原体的废物必须3/4类型、产生日期和负责人即应封闭确保灭菌彻底0405暂存管理最终处置设立专用医疗废物暂存间，防渗漏、防鼠虫，定期消毒废物暂存时间不委托具有医疗废物处置资质的单位进行焚烧或其他无害化处置，保存处置超过小时，做好交接记录记录至少三年48重要提示一次性手套、防护服等污染的个人防护用品也属于感染性废物，必须按照规范流程处理，不得混入生活垃圾实验室常用消毒剂及其适用范围乙醇甲醛溶液含氯消毒剂（漂白粉75%/次氯酸钠）适用范围手部消毒、工作适用范围实验室空间熏蒸台面、仪器设备表面、生物消毒、不耐高温物品消毒、适用范围大面积地面消毒、安全柜内表面消毒生物安全柜定期消毒污水处理、溢洒污染物应急处理、物体表面消毒作用机制使蛋白质变性凝作用机制烷基化作用，能固，快速杀灭细菌繁殖体和杀灭包括芽孢在内的所有微作用机制强氧化作用破坏部分病毒生物菌体蛋白，广谱高效杀菌使用方法擦拭或喷洒，作使用方法密闭空间内加热使用方法配制500-用分钟，挥发性强，适挥发或加高锰酸钾催化，消溶液，擦拭或3-51000mg/L合日常消毒毒小时后通风浸泡分钟，腐蚀性强需6-1230注意防护注意事项不同消毒剂不可混合使用，如含氯消毒剂与酸性物质混合会产生有毒气体使用前需了解消毒对象的特性，选择合适的消毒剂和浓度生物安全柜类型及适用范围生物安全柜根据气流模式和防护级别分为不同类型，实验室应根据操作的病原体危险等级和实验性质选择合适的安全柜11Ⅰ级生物安全柜Ⅲ级生物安全柜防护对象人员和环境防护对象最高级别全面防护适用范围和级别的低风险实验，不保护实验样本适用范围级别的极高风险病原体操作BSL-1BSL-2BSL-4气流从前窗开口吸入，经过过滤后排出，无循环气流完全密闭，操作者通过连接的橡胶手套进行操作，气流排出并经双层HEPA100%过滤HEPA2选择原则Ⅱ级型安全柜气流外排，适合使用挥发性化学品B2100%Ⅱ级生物安全柜或放射性物质的实验一般微生物实验使用Ⅱ级型即可满足要求A2防护对象人员、环境和样本适用范围和级别的中高风险实验，最常用类型BSL-2BSL-3气流循环，排出，操作区形成负压，全面防护70%30%生物安全柜结构与工作原理主要组成部分气流工作原理前窗操作口气流屏障，防止污染生物安全柜通过精确控制的气流系统实现防物溢出护工作台面不锈钢材质，易清洁消外部空气从前窗开口被吸入柜内，形成气•毒流屏障过滤器高效过滤微生物和HEPA柜内空气向下流动经过工作区域•颗粒物部分空气经过滤后循环回柜内•HEPA风机系统维持稳定的气流模式部分空气经过滤后排出实验室•HEPA紫外灯非工作时间消毒（可选配）操作区形成负压，防止污染物外泄•照明系统提供充足的工作照明关键参数入口风速，下降

0.5-

0.6m/s气流速度，过滤效率

0.25-

0.4m/s≥

99.99%实验室通风与环境控制气压梯度控制通风系统设计高等级实验室应采用负压设计，保持洁净区半污染区污染区的气压梯度，防止污染实验室应配备独立的通风系统，保持良好的→→空气向外扩散，压差维持在至空气流通通风量根据实验室面积和操作类-10-30Pa型计算，一般换气次数为次小时8-12/排风系统独立生物安全实验室的排风系统必须与建筑物其他区域分开，排出空气经高效过滤后才能排放，避免污染环境和其他区域过滤系统维护环境参数监控过滤器定期检测更换，一般使用寿命HEPA年更换时需专业人员操作，旧过滤器1-3定期检测室内温度℃、湿度18-2730-按感染性废物处理，确保过滤效率达标、照度等参数，安装压差计70%≥300lux和空气质量监测装置，实时监控环境状态实验室安全文化建设定期培训与考核事故案例分享与警示鼓励安全隐患主动报告建立完善的培训体系，新进人员上岗前必须完成定期组织安全警示教育活动，分析国内外典型生建立开放的安全沟通机制，鼓励实验人员主动报生物安全培训并通过考核每年至少组织一次全物安全事故案例，深入剖析事故原因和教训通告发现的安全隐患和近失事件设立隐患报告奖员培训和考核，确保人员持续掌握最新的安全知过案例学习增强人员的风险意识和责任感，避免励制度，对主动报告隐患的行为给予表彰营造识和操作技能培训内容包括法律法规、操作规类似事故重复发生建立事故案例数据库供学习安全第

一、预防为主的文化氛围，让每个人都范、应急处置等参考成为安全监督员文化理念生物安全不仅是技术问题，更是文化问题只有将安全理念内化为每个人的自觉行动才能真正实现实验室的长期安全运行,结语生物安全人人有责保障实验人员健康维护公共卫生安全生物安全措施的首要目标是保护实验室实验室生物安全关系到社区乃至全球的工作人员免受病原微生物侵害，让每个公共卫生安全，防止病原体向环境扩散人都能在安全的环境中工作是我们的社会责任推动科研安全可持续发展只有在安全的基础上，科学研究才能持续健康发展，为人类健康和社会进步做出更大贡献安全是科研的生命线，责任重于泰山让我们共同努力，将生物安全理念贯穿于日常工作的每一个细节中谢谢聆听！欢迎提问与交流感谢各位参加本次生物安全培训生物安全工作需要我们每个人的共同努力和持续学习如果您有任何疑问或想要深入讨论的话题，欢迎随时提出让我们一起为建设更安全的实验室环境而努力！联系方式如有进一步的问题或需要额外的培训资料，请联系实验室安全管理部门我们将持续提供支持，确保每位实验人员都能安全、规范地开展工作。