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核酸检测面试热门题目与答案分析
一、单选题
1.核酸检测中,样本保存温度通常保持在()(1分)A.4℃B.-20℃C.25℃D.37℃【答案】B【解析】核酸检测样本保存需要在低温条件下进行,通常保持在-20℃以抑制样本中的酶活性,防止降解
2.以下哪种试剂不属于PCR核酸检测的必需试剂?()(1分)A.Taq酶B.引物C.dNTPsD.洗脱液【答案】D【解析】PCR核酸检测必需试剂包括Taq酶、引物和dNTPs,洗脱液并非必需
3.核酸检测中,Ct值代表什么含义?()(1分)A.检测灵敏度B.检测特异性C.目标核酸拷贝数D.循环阈值【答案】D【解析】Ct值(CycleThreshold)表示扩增信号达到设定阈值所需的循环数,是衡量核酸拷贝数的指标
4.核酸检测中,内对照的主要作用是?()(1分)A.提高检测灵敏度B.监测反应效率C.增强检测特异性D.降低假阳性率【答案】B【解析】内对照用于监测反应体系是否正常工作,确保样本处理和扩增过程的有效性
5.核酸检测报告中的阴性结果表示?()(1分)A.未检测到目标核酸B.检测到目标核酸C.操作失误D.设备故障【答案】A【解析】阴性结果表示未检测到目标核酸,通常Ct值较高
6.核酸检测中,样本采集时最需要注意的事项是?()(1分)A.样本量大小B.样本保存方式C.采集部位选择D.采集人员手部消毒【答案】C【解析】采集部位选择直接影响样本质量,是关键环节
7.核酸检测中,假阳性结果可能由以下哪种原因导致?()(1分)A.样本处理不当B.操作人员污染C.试剂质量问题D.以上都是【答案】D【解析】假阳性可能由样本处理不当、操作人员污染或试剂质量问题导致
8.核酸检测中,假阴性结果可能由以下哪种原因导致?()(1分)A.样本量不足B.样本保存不当C.检测灵敏度低D.以上都是【答案】D【解析】假阴性可能由样本量不足、保存不当或检测灵敏度低导致
9.核酸检测中,扩增效率应控制在多少范围内?()(1分)A.80%-100%B.90%-110%C.85%-115%D.70%-130%【答案】B【解析】扩增效率应控制在90%-110%范围内,过高或过低都会影响结果准确性
10.核酸检测中,以下哪种方法不属于快速检测技术?()(1分)A.LAMPB.RT-PCRC.CRISPRD.抗原检测【答案】B【解析】RT-PCR属于实验室检测技术,而LAMP、CRISPR和抗原检测属于快速检测技术
二、多选题(每题4分,共20分)
1.核酸检测样本采集时需要注意哪些事项?()A.采集部位选择B.样本量大小C.采集工具清洁D.采集人员手部消毒E.样本保存方式【答案】A、B、C、D、E【解析】样本采集时需注意采集部位选择、样本量大小、采集工具清洁、采集人员手部消毒和样本保存方式
2.核酸检测中,影响检测结果的因素有哪些?()A.样本处理B.试剂质量C.设备性能D.操作规范E.扩增效率【答案】A、B、C、D、E【解析】影响检测结果的因素包括样本处理、试剂质量、设备性能、操作规范和扩增效率
3.核酸检测中,内对照的作用有哪些?()A.监测反应效率B.提高检测特异性C.降低假阴性率D.防止操作污染E.增强检测灵敏度【答案】A、C、D【解析】内对照主要监测反应效率、降低假阴性率和防止操作污染
4.核酸检测中,假阳性和假阴性可能由哪些原因导致?()A.样本处理不当B.操作人员污染C.试剂质量问题D.样本保存不当E.扩增效率异常【答案】A、B、C、D、E【解析】假阳性和假阴性可能由样本处理不当、操作人员污染、试剂质量问题、样本保存不当和扩增效率异常导致
5.核酸检测中,快速检测技术有哪些?()A.LAMPB.RT-PCRC.CRISPRD.抗原检测E.基因芯片【答案】A、C、D【解析】快速检测技术包括LAMP、CRISPR和抗原检测
三、填空题
1.核酸检测样本采集时,应使用______和______进行消毒【答案】75%酒精;生理盐水(4分)
2.核酸检测报告中的阳性结果表示______,通常Ct值______【答案】检测到目标核酸;较低(4分)
3.核酸检测中,扩增效率应控制在______范围内【答案】90%-110%(4分)
4.核酸检测样本保存需要在______条件下进行【答案】低温(4分)
5.核酸检测中,内对照用于______【答案】监测反应效率(4分)
四、判断题
1.核酸检测中,样本保存温度越高越好()(2分)【答案】(×)【解析】样本保存温度过高会导致酶活性增强,影响检测结果
2.核酸检测报告中的阴性结果表示未检测到目标核酸()(2分)【答案】(√)【解析】阴性结果表示未检测到目标核酸
3.核酸检测中,扩增效率越高越好()(2分)【答案】(×)【解析】扩增效率过高可能导致非特异性扩增,影响结果准确性
4.核酸检测中,假阳性结果可能由操作人员污染导致()(2分)【答案】(√)【解析】操作人员污染可能导致假阳性结果
5.核酸检测中,快速检测技术比实验室检测技术更准确()(2分)【答案】(×)【解析】快速检测技术通常灵敏度较低,实验室检测技术更准确
五、简答题
1.简述核酸检测样本采集的注意事项【答案】核酸检测样本采集时需要注意以下事项
(1)采集部位选择根据检测目的选择合适的采集部位,如鼻咽拭子、唾液等
(2)样本量大小确保样本量足够,以获得可靠的检测结果
(3)采集工具清洁使用无菌、清洁的采集工具,防止污染
(4)采集人员手部消毒采集前需进行手部消毒,防止交叉污染
(5)样本保存方式采集后立即放入专用保存液中,并在规定温度下保存
2.简述核酸检测中假阳性和假阴性的可能原因【答案】核酸检测中假阳性和假阴性的可能原因包括
(1)假阳性-样本处理不当如样本被污染-操作人员污染如采集工具或环境污染-试剂质量问题如试剂失效或特异性不足-样本保存不当如保存温度不当导致酶活性增强-扩增效率异常如扩增效率过高导致非特异性扩增
(2)假阴性-样本量不足如采集的样本量不够-样本保存不当如保存温度不当导致核酸降解-检测灵敏度低如检测方法灵敏度不足-试剂质量问题如试剂失效或特异性不足
六、分析题
1.分析核酸检测样本采集和保存的重要性【答案】核酸检测样本采集和保存的重要性体现在以下方面
(1)样本采集-采集部位选择确保采集到含有目标核酸的部位,提高检测灵敏度-样本量大小样本量足够可以减少假阴性结果-采集工具清洁防止污染导致假阳性结果-采集人员手部消毒防止交叉污染-快速采集减少样本在体外暴露时间,降低降解风险
(2)样本保存-低温保存抑制酶活性,防止核酸降解-专用保存液提供缓冲环境,保护核酸稳定性-规定保存时间确保样本在有效期内检测样本采集和保存不当会导致假阳性和假阴性结果,影响检测准确性,进而影响临床诊断和防控措施
七、综合应用题
1.假设你是一名核酸检测实验室的技术人员,某日接到一批样本,发现部分样本Ct值异常高,分析可能的原因并提出改进措施【答案】假设接到一批样本,发现部分样本Ct值异常高,可能的原因及改进措施如下可能原因
(1)样本采集不当如样本量不足或采集部位选择不当
(2)样本保存不当如保存温度过高导致核酸降解
(3)试剂质量问题如试剂失效或特异性不足
(4)操作不规范如样本处理过程中污染
(5)扩增效率异常如扩增效率过低导致检测灵敏度不足改进措施
(1)加强培训对采集人员进行培训,确保采集部位选择和样本量控制
(2)规范保存确保样本在低温条件下保存,并规定保存时间
(3)试剂检测定期检测试剂质量,确保试剂有效性
(4)操作规范严格操作规范,防止样本污染
(5)优化反应条件调整PCR反应条件,提高扩增效率通过以上措施,可以有效降低Ct值异常高的发生,提高检测准确性---完整标准答案
一、单选题
1.B
2.D
3.D
4.B
5.A
6.C
7.D
8.D
9.B
10.B
二、多选题
1.A、B、C、D、E
2.A、B、C、D、E
3.A、C、D
4.A、B、C、D、E
5.A、C、D
三、填空题
1.75%酒精;生理盐水
2.检测到目标核酸;较低
3.90%-110%
4.低温
5.监测反应效率
四、判断题
1.(×)
2.(√)
3.(×)
4.(√)
5.(×)
五、简答题
1.见简答题部分答案
2.见简答题部分答案
六、分析题见分析题部分答案
七、综合应用题见综合应用题部分答案。
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