摇瓶培养实践试题与答案解析

摇瓶培养实践试题与答案解析

一、单选题（每题1分，共10分）

1.摇瓶培养中，摇床的转速通常用哪个单位表示？（）A.m/sB.rpmC.HzD.rad/s【答案】B【解析】摇床的转速通常用每分钟转数（rpm）表示

2.在摇瓶培养中，一般用于培养细菌的液体培养基pH值范围是？（）A.

5.0-

6.0B.

6.0-

7.0C.

7.0-

8.0D.

8.0-

9.0【答案】C【解析】细菌适宜的培养基pH值范围一般在

7.0-

8.0之间

3.摇瓶培养时，常用的摇瓶材质是？（）A.玻璃B.塑料C.金属D.陶瓷【答案】A【解析】摇瓶培养常用玻璃材质，因为玻璃耐腐蚀且透光性好

4.摇瓶培养中，通气方式一般采用？（）A.真空泵通气B.活塞泵通气C.空气泵通气D.气压泵通气【答案】C【解析】摇瓶培养通常采用空气泵通气，以保证氧气供应

5.摇瓶培养时，摇瓶的装液量一般控制在多少？（）A.10%B.30%C.50%D.70%【答案】C【解析】摇瓶装液量一般控制在50%，以保证培养效果

6.摇瓶培养时，摇床的振荡频率一般设置在？（）A.60-120rpmB.120-180rpmC.180-240rpmD.240-300rpm【答案】B【解析】摇瓶培养的振荡频率一般设置在120-180rpm

7.摇瓶培养中，常用的接种量一般是多少？（）A.1%B.5%C.10%D.20%【答案】C【解析】摇瓶培养常用的接种量一般是10%

8.摇瓶培养时，培养温度一般控制在多少？（）A.20-25℃B.25-30℃C.30-37℃D.37-40℃【答案】C【解析】摇瓶培养的温度一般控制在30-37℃

9.摇瓶培养时，培养时间一般持续多久？（）A.12小时B.24小时C.48小时D.72小时【答案】B【解析】摇瓶培养的时间一般持续24小时

10.摇瓶培养结束后，一般采用什么方法收集菌体？（）A.离心B.过滤C.蒸馏D.吸附【答案】A【解析】摇瓶培养结束后，一般采用离心方法收集菌体

二、多选题（每题4分，共20分）

1.摇瓶培养中，影响培养效果的因素有哪些？（）A.pH值B.温度C.振荡频率D.通气方式E.接种量【答案】A、B、C、D、E【解析】摇瓶培养效果受pH值、温度、振荡频率、通气方式和接种量等多种因素影响

2.摇瓶培养中，常用的培养基有哪些？（）A.LB培养基B.YPD培养基C.MRS培养基D.TSA培养基E.RBC培养基【答案】A、B、C、D【解析】摇瓶培养常用的培养基包括LB培养基、YPD培养基、MRS培养基和TSA培养基

3.摇瓶培养中，摇床的类型有哪些？（）A.水平摇床B.垂直摇床C.立式摇床D.混合摇床E.气浴摇床【答案】A、B、E【解析】摇瓶培养常用的摇床类型包括水平摇床、垂直摇床和气浴摇床

4.摇瓶培养中，摇瓶的材质有哪些优缺点？（）A.玻璃材质的优点是透光性好，缺点是易碎B.塑料材质的优点是耐腐蚀，缺点是透光性差【答案】A、B【解析】摇瓶材质的优缺点包括玻璃材质透光性好但易碎，塑料材质耐腐蚀但透光性差

5.摇瓶培养中，常见的接种方法有哪些？（）A.划线接种B.斑点接种C.涂布接种D.液体接种E.空气接种【答案】A、B、C、D【解析】摇瓶培养常见的接种方法包括划线接种、斑点接种、涂布接种和液体接种

三、填空题（每题2分，共16分）

1.摇瓶培养中，摇床的振荡频率一般设置在_________【答案】120-180rpm

2.摇瓶培养时，常用的接种量一般控制在_________【答案】10%

3.摇瓶培养中，培养温度一般控制在_________【答案】30-37℃

4.摇瓶培养结束后，一般采用_________方法收集菌体【答案】离心

5.摇瓶培养中，常用的培养基包括_________、_________和_________【答案】LB培养基、YPD培养基、MRS培养基

6.摇瓶培养中，摇床的类型包括_________、_________和_________【答案】水平摇床、垂直摇床、气浴摇床

7.摇瓶培养时，摇瓶的装液量一般控制在_________【答案】50%

8.摇瓶培养中，常见的接种方法包括_________、_________和_________【答案】划线接种、斑点接种、涂布接种

四、判断题（每题2分，共10分）

1.摇瓶培养中，摇床的转速越高，培养效果越好（）【答案】（×）【解析】摇床转速过高会导致菌体损伤，一般设置在120-180rpm

2.摇瓶培养时，装液量越多越好（）【答案】（×）【解析】摇瓶装液量一般控制在50%，过多会影响培养效果

3.摇瓶培养中，接种量越大越好（）【答案】（×）【解析】接种量一般控制在10%，过多会导致污染

4.摇瓶培养时，培养温度越高越好（）【答案】（×）【解析】培养温度一般控制在30-37℃，过高会导致菌体死亡

5.摇瓶培养结束后，一般采用过滤方法收集菌体（）【答案】（×）【解析】摇瓶培养结束后，一般采用离心方法收集菌体

五、简答题（每题4分，共20分）

1.简述摇瓶培养的基本步骤【答案】摇瓶培养的基本步骤包括

（1）准备培养基并灭菌；

（2）准备摇瓶并灭菌；

（3）制备菌种悬液；

（4）接种菌种；

（5）置于摇床进行培养；

（6）培养结束后收集菌体

2.简述摇瓶培养中影响培养效果的主要因素【答案】摇瓶培养中影响培养效果的主要因素包括

（1）pH值细菌适宜的pH值范围一般在

7.0-

8.0；

（2）温度培养温度一般控制在30-37℃；

（3）振荡频率振荡频率一般设置在120-180rpm；

（4）通气方式一般采用空气泵通气；

（5）接种量接种量一般控制在10%

3.简述摇瓶培养中常用的培养基种类及其用途【答案】摇瓶培养中常用的培养基种类及其用途包括

（1）LB培养基主要用于大肠杆菌的培养；

（2）YPD培养基主要用于酵母菌的培养；

（3）MRS培养基主要用于乳酸菌的培养；

（4）TSA培养基主要用于金黄色葡萄球菌的培养

4.简述摇瓶培养中摇床的类型及其特点【答案】摇瓶培养中摇床的类型及其特点包括

（1）水平摇床振荡方向水平，适用于一般细菌的培养；

（2）垂直摇床振荡方向垂直，适用于特殊菌种的培养；

（3）气浴摇床通过气浴方式进行培养，适用于需氧菌的培养

5.简述摇瓶培养中常见的接种方法及其特点【答案】摇瓶培养中常见的接种方法及其特点包括

（1）划线接种适用于单菌落分离；

（2）斑点接种适用于菌种鉴定；

（3）涂布接种适用于菌种计数；

（4）液体接种适用于大量培养

六、分析题（每题10分，共20分）

1.分析摇瓶培养中，如何通过优化培养条件提高培养效果？【答案】摇瓶培养中，通过优化培养条件可以提高培养效果

（1）pH值控制调整培养基pH值在适宜范围，一般控制在

7.0-

8.0；

（2）温度控制保持培养温度在30-37℃，过高或过低都会影响培养效果；

（3）振荡频率振荡频率设置在120-180rpm，过高会导致菌体损伤；

（4）通气方式采用空气泵通气，保证氧气供应；

（5）接种量接种量控制在10%，过多会导致污染；

（6）摇瓶材质选择透光性好且耐腐蚀的玻璃材质；

（7）装液量装液量控制在50%，过多会影响培养效果

2.分析摇瓶培养中，常见的故障及解决方法【答案】摇瓶培养中，常见的故障及解决方法包括

（1）菌体生长缓慢检查培养基成分是否正确，调整pH值和温度；

（2）菌体污染检查接种过程是否无菌，调整通气方式和接种量；

（3）菌体死亡检查培养条件是否适宜，调整振荡频率和温度；

（4）摇瓶破裂选择耐腐蚀的摇瓶材质，避免剧烈振荡；

（5）培养液浑浊检查培养基是否变质，调整培养时间和接种量

七、综合应用题（每题25分，共50分）

1.设计一套摇瓶培养大肠杆菌的实验方案，包括培养基配方、培养条件、接种方法等【答案】摇瓶培养大肠杆菌的实验方案设计如下

（1）培养基配方-蛋白胨10g/L-酵母提取物5g/L-氯化钠5g/L-pH值

7.0-

7.2

（2）培养条件-温度37℃-振荡频率150rpm-通气方式空气泵通气-培养时间24小时

（3）接种方法-划线接种取单菌落划线接种于LB培养基平板上，培养过夜；-液体接种取培养过夜的菌液，用无菌水稀释至10倍，接种量为10%；-摇瓶培养将接种后的摇瓶置于摇床上进行培养

2.设计一套摇瓶培养酵母菌的实验方案，包括培养基配方、培养条件、接种方法等【答案】摇瓶培养酵母菌的实验方案设计如下

（1）培养基配方-蛋白胨3g/L-酵母提取物3g/L-葡萄糖10g/L-pH值

6.0-

6.5

（2）培养条件-温度30℃-振荡频率120rpm-通气方式空气泵通气-培养时间48小时

（3）接种方法-划线接种取单菌落划线接种于YPD培养基平板上，培养过夜；-液体接种取培养过夜的菌液，用无菌水稀释至10倍，接种量为10%；-摇瓶培养将接种后的摇瓶置于摇床上进行培养---完整标准答案已附在试卷末尾，请核对。