生物安全实验室培训课件

生物安全实验室培训课件第一章生物安全基础概念与重要性什么是生物安全？核心定义核心目标生物安全是一套科学的管理体系，旨在防止病原微生物、有害生•保护实验室工作人员免受职业暴露物因子的泄漏、扩散和意外释放，避免实验室工作人员、相关人•防止病原体向实验室外扩散员、社区及环境遭受不必要的危害•保护周边环境和公众健康它涵盖了从实验室设计、设备配置、操作规程到人员培训的全方•确保生物材料的安全管理位安全管理措施生物安全等级简介（至）BSL-1BSL-4基础水平BSL-1适用于已知对健康成人无致病作用的微生物采用标准微生物操作，无需特殊防护设备，开放式实验台即可操作代表微生物大肠杆菌K-12株中等风险BSL-2适用于对人或环境有中等潜在危害的病原体需要生物安全柜、个人防护装备，限制人员进入代表病原体金黄色葡萄球菌、乙型肝炎病毒高风险BSL-3适用于可通过呼吸途径传播、可能导致严重甚至致死性疾病的病原体需要负压实验室、HEPA过滤、严格准入控制代表病原体结核分枝杆菌、SARS冠状病毒最高防护BSL-4生物安全等级视觉对比生物安全的重要性真实案例警示警示疏忽大意和操作不当可能导致严重后果，每一起实验室事故都是血的教训年实验室泄漏12003SARS中国、新加坡等地发生多起因实验室管理不善导致的SARS病毒泄漏事件，造成实验室工作人员及其接触者感染，引发社区传播风险该事件促使全球加强实验室生2年美国炭疽事件2014CDC物安全监管美国疾病控制与预防中心（CDC）因炭疽样本处理不当，导致84名工作人员可能暴露于活性炭疽杆菌事件暴露全球数据统计3出即使是顶级机构也可能存在操作流程漏洞生物安全法律法规框架国家层面国际标准机构内部《中华人民共和国生物安全法》WHO《实验室生物安全手册》各科研机构、高校、医疗单位应根据国家法规和国际标准，制定符合自身特点的内2021年4月15日起施行，是我国生物安全第四版（2024年最新版）是全球公认的生部管理制度，包括领域的基础性、综合性、系统性法律物安全权威指南，提供了详细的技术规范和操作建议•实验室准入管理制度《病原微生物实验室生物安全管理条例》•标准操作规程（SOP）国际标准化组织（ISO）相关标准国务院颁布，明确实验室分级管理、审批•应急预案与演练制度制度、监督检查等具体要求ISO35001等标准为实验室生物风险管理提供框架第二章实验室管理与操作规范实验室设计与布局原则0102功能分区设计空气流向控制清洁区办公、更衣、储物等非污染采用负压梯度设计，确保空气从清洁区域；缓冲区准备间、淋浴间等过区流向污染区，防止病原体逆向扩渡空间；高风险区病原体操作的核散BSL-3及以上实验室需维持至少-心实验区各区域之间设置物理屏障30Pa的负压差，并配备报警系统和气闸室关键设施设备个人防护装备（）详解PPE常用防护配置正压防护服系统BSL-3BSL-4呼吸防护N95或更高级别的呼吸器，必要时使用动力送风过滤BSL-4实验室使用的正压防护服是最高级别的个人防护系统，包式呼吸器（PAPR）括身体防护连体防护服或手术衣加防护罩衣，背后开口以减少污•全封闭一体式正压防护服染风险•独立供气系统，持续提供过滤空气手部防护双层手套，外层定期更换，操作尖锐器械时加用防割•通讯设备，确保与外界联系手套•化学淋浴消毒系统眼面防护全面屏或护目镜加面罩，防止气溶胶和飞溅物接触足部防护防水防滑的专用实验室鞋或鞋套穿戴流程需要搭档协助，严格遵循20余个步骤，平均耗时15-20分钟脱卸时须经过多级化学消毒淋浴，整个过程需30分钟以上正确穿戴演示PPE个人防护装备的正确穿戴和脱卸是防止职业暴露的关键每一步都必须严格按照标准操作规程执行，穿戴前检查装备完整性，脱卸时避免污染区域接触皮肤生物材料的安全管理病原体分类与标识采集、运输与储存废弃物处理流程按照危害程度将病原体分为四类所有采集使用专用器具，避免污染运分类收集于专用容器，使用黄色医疗废生物材料必须使用国际通用的生物危害输采用三层包装（主容器、防漏二级物袋和利器盒高压蒸汽灭菌（121℃，标识，明确标注病原体名称、危险等容器、外包装），符合UN2814/UN2900标30分钟）或化学消毒后，按医疗废物规级、操作日期和责任人信息容器必须准储存专用冰箱/冻存设备，温度监范处置液体废弃物经消毒池处理达标密封，标签防水耐腐蚀控，双人双锁管理，建立电子台账后排放详细记录处理过程实验室操作规程（）SOP的制定原则交叉污染防控SOP标准操作规程必须详细、明确、可操实施严格的分区管理，不同实验项目作每个关键操作都应有对应的SOP使用专用设备和器材操作台面定期文件，包括目的、适用范围、操作步消毒，实验前后彻底清洁人员和物骤、注意事项、应急措施等要素品单向流动，避免清洁区与污染区的SOP应定期审核更新，版本受控管交叉生物安全柜内不同样本分开操理作，使用一次性耗材设备维护与校准建立设备管理档案，记录购置、使用、维护、校准和报废全过程生物安全柜每年现场检测，HEPA过滤器定期更换高压灭菌器每次使用记录温度、压力和时间，使用生物指示剂验证灭菌效果仪器故障立即停用并报告生物安全风险评估与控制风险识别要素风险控制策略病原体特性传染性、致病性、传播途径、环境稳工程控制优先选择，如生物安全柜、负压系统、密闭设备定性管理控制制定SOP、限制人员进入、培训考核、健康监测操作过程是否产生气溶胶、是否涉及尖锐器械、操作量和频次个人防护最后防线，正确使用PPE人员因素培训水平、健康状况、操作熟练度案例分析某BSL-3实验室风险评估报告显示，结核杆菌培养操作风险等级为高设施条件防护设备状态、实验室等级匹配性，采取了强化生物安全柜使用、缩短暴露时间、增加呼吸防护级别等措施，将环境因素通风系统、温湿度、废弃物处理能力风险降至中等可接受水平第三章高级防护与应急处理高级生物安全实验室的运行需要经过严格培训的专业人员本章重点介绍高等级实验室的人员培训体系、应急预案制定与执行、职业暴露处理流程，以及新兴技术带来的生物安全挑战高级生物安全实验室（）人员培训体系ABSL-3/4培训前评估理论培训对候选人员进行全面评估，包括健康体系统学习生物安全法律法规、病原体知检（排除免疫缺陷等禁忌症）、心理测识、实验室设计原理、应急处理等理论评（承压能力、责任意识）、基础技能知识课时不少于40小时，通过闭卷考测试（微生物学知识、无菌操作技试（≥85分）方可进入下一阶段术）考核与授权实操训练通过理论和实操综合考核后，获得实验在BSL-2实验室进行基础操作训练，然后室准入资格首次独立操作需有经验丰在导师指导下进入BSL-3/4实验室模拟操富的人员陪同定期再培训（每年不少作，包括PPE穿脱、生物安全柜使用、应于16学时）和考核，确保能力持续达急处置等累计实操时间不少于80小标时线上+线下混合培训新模式利用虚拟现实（VR）技术进行沉浸式训练，模拟各种应急场景；开发在线学习平台，提供随时可访问的学习资源和考核系统，提高培训效率和覆盖面实验室事故应急预案病原体泄漏事件处理立即响应疏散非相关人员，关闭实验室，启动负压系统污染控制使用适当消毒剂（如含氯消毒液）覆盖泄漏区域，静置30分钟后清理后续措施环境采样检测，确认消毒效果，评估暴露风险，必要时对相关人员进行医学观察人员暴露事件处理现场急救立即脱离污染区域，皮肤暴露用肥皂水冲洗15分钟，眼睛暴露用生理盐水冲洗医学处理联系指定医疗机构，提供详细的病原体信息，根据需要进行预防性治疗（如疫苗、抗生素）跟踪监测按照病原体潜伏期进行健康监测，记录体温、症状等感染事件应急管理隔离治疗确诊或疑似感染者立即隔离，转送至指定医疗机构流行病学调查追踪密切接触者，评估传播风险信息报告按规定时限向卫生行政部门和生物安全管理部门报告恢复运行事故调查完成、整改措施落实后方可恢复实验室运行职业暴露防护与处理常见暴露途径现场应急处理医学观察与支持呼吸道暴露吸入含病原体的气溶胶，操针刺/切割伤医学观察根据病原体种类，进行为期数作产气溶胶环节（离心、混匀、开盖）风天至数周的健康监测，记录体温、症状，

1.立即从近心端向远心端挤压伤口，排出险最高预防措施在生物安全柜内操定期采血检查抗体或病原体核酸血液作，使用密闭离心杯，佩戴呼吸防护装预防性治疗如暴露于HIV、乙肝等，及备

2.用肥皂水和流动清水冲洗15分钟时使用预防性药物

3.用75%酒精或碘伏消毒皮肤/黏膜暴露针刺伤、切割伤、溅

4.包扎伤口，保持干燥心理支持暴露事件可能造成焦虑、恐惧洒预防禁止回套针头，使用安全型器等心理压力，提供心理咨询和支持服务，械，戴护目镜和面屏

5.报告主管，启动暴露后评估流程帮助员工恢复经口暴露用嘴吸液、在实验区饮食预皮肤/眼睛溅洒立即用大量清水或生理盐防严禁上述行为水持续冲洗15分钟以上，不要揉搓实战演练，保障安全定期开展应急演练是检验预案可行性、提升人员应急能力的重要手段通过模拟真实事故场景，让每位实验室人员熟悉应急流程，做到遇事不慌、处置有序实验室生物安全委员会的职责监督管理与审核风险评估与管理生物安全委员会负责审核实验室生物安全等级、审批高风险实验项组织开展实验室生物安全风险评估，识别潜在危险因素，制定风险目、监督实验室运行状态定期组织生物安全检查，对发现的问题控制措施对新开展的实验项目进行风险评审，确保其符合相应的提出整改要求并跟踪落实审核实验室资质申请和续期生物安全要求建立风险管理档案，动态更新风险清单培训与考核制度持续改进与文化制定并实施全员生物安全培训计划，包括岗前培训、在岗培训、专收集和分析实验室运行数据、事故事件报告，识别管理短板和改进项培训等建立培训档案，记录每位人员的培训经历和考核成绩机会组织经验交流和案例分享，推广最佳实践营造安全第一组织定期考核，不合格者不得从事相关工作推动生物安全文化建的文化氛围，鼓励员工报告安全隐患，奖励安全创新和改进建议设新兴技术与生物安全挑战基因编辑与合成生物学信息安全与网络生物安全CRISPR等基因编辑技术和合成生基因序列数据的数字化存储和网物学的快速发展，使得改造甚至络传播带来新的风险恶意行为创造病原体成为可能双重用者可能通过网络获取敏感生物信途研究（DURC）可能被恶意利息，利用商业化的基因合成服务用，如增强病原体毒力、逃避检制造危险病原体需要建立生物测或疫苗需要建立严格的伦理信息安全管理制度，对敏感序列审查和监管机制，加强研究人员数据进行管控，对基因合成订单的生物安全和伦理意识培训进行安全审查人工智能辅助监控AI技术可用于实时监测实验室环境参数、识别异常操作行为、预测设备故障等，提升生物安全管理的智能化水平机器学习算法可以分析海量生物安全数据，识别潜在风险模式但AI系统本身的安全性和可靠性也需要保障，防止误报或被攻击国际生物安全合作与标准全球生物安全指导WHO世界卫生组织（WHO）发布的《实验室生物安全手册》是国际公认的权威指南，提供了从实验室设计、设备选择到操作规程的全面技术指导WHO还通过全球实验室网络，协调各国在生物安全标准、培训、应急响应等方面的合作国际认证体系ISO35001《生物风险管理体系》等国际标准为实验室建立系统的生物风险管理提供了框架许多国家和地区建立了实验室认证认可制度，如美国的CDC/NIH注册制度、欧盟的实验室资质认证等，确保实验室达到国际标准培训总结与知识测评010203核心知识点回顾互动问答环节考核方式说明生物安全四大支柱实验室设计与设备、标讲师将提出典型案例或假设情景，学员分组理论测试闭卷考试，100分制，涵盖法律准操作规程、人员培训与健康、应急响应讨论并提出解决方案通过互动交流，加深法规、基础理论、操作规范等内容，≥85分生物安全等级与病原体匹配、PPE正确使对知识点的理解，分享实践经验，发现知识为合格实操考核现场演示PPE穿脱、生用、风险评估与控制、应急处置流程是必须盲区鼓励学员提出工作中遇到的实际问物安全柜使用、应急处置等关键操作，由考掌握的核心内容题，共同探讨解决方案核员评分综合评定理论和实操均合格者颁发培训合格证书，作为实验室准入的必要条件附录一常用生物安全术语解释生物安全柜（）BSC一种负压过滤排风柜,用于保护操作人员、实验室环境和实验材料,防止操作过程中可能产生的气溶胶和溅出物的扩散过滤器HEPA高效空气过滤器（High EfficiencyParticulate AirFilter）,对

0.3微米颗粒的过滤效率≥

99.97%,是生物安全实验室空气净化的核心设备气溶胶悬浮在空气中的微小液滴或固体颗粒,粒径通常100微米许多病原体可通过气溶胶传播,是实验室生物安全控制的重点负压实验室室内气压低于室外气压的实验室,确保空气只能从外向内流动,防止病原体向外扩散BSL-3及以上实验室的基本要求职业暴露实验室工作人员在工作过程中意外接触病原体或有害生物因子,包括针刺伤、溅洒、吸入气溶胶等情况标准操作规程（）SOP详细描述某项操作或实验的标准化步骤、注意事项、安全措施等的文件,是实验室操作的重要依据双重用途研究（）DURC本意用于有益目的但可能被误用或恶意使用而对公共健康和安全构成威胁的生命科学研究需要特殊的伦理审查和管理附录二实验室常用安全设备介绍级型生物高压蒸汽灭菌器紧急洗眼器和淋传递窗II A2安全柜浴器用于在不同洁净最常用的生物安利用高温高压蒸用于应急冲洗被度区域之间传递全柜类型,前窗开汽杀灭微生物,是化学品或生物材物品,防止交叉污口向内吸气,工作实验室最常用的料污染的眼睛和染通常具有互区下沉气流和上灭菌设备标准身体应安装在锁功能,两侧门不升气流经HEPA过灭菌条件为距离风险区域不能同时打开内滤后70%再循环、121℃、

0.1MPa、超过10秒步行距置紫外灯,用于物30%排出适用于30分钟双扉式离的位置,水流温品表面消毒传BSL-2和BSL-3实验高压灭菌器用于度15-37℃,冲洗时递完成后需进行室操作非挥发性隔离污染区和清间至少15分钟消毒再打开另一化学品和放射性洁区,防止交叉污定期检查功能侧核素染附录三生物安全相关法律法规汇编国家法律法规国际标准指南•《中华人民共和国生物安全法》（2021年）•WHO《实验室生物安全手册》第四版

（2024）•《病原微生物实验室生物安全管理条例》（国务院令第424号）•WHO《实验室生物安保指南》•《人间传染的病原微生物名录》•ISO35001《生物风险管理体系-实验室和其他相关组织的要求》•《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管•CDC/NIH《微生物和生物医学实验室生物安全》（BMBL）第6版理规定》•欧盟《生物制剂指令》（Directive2000/54/EC）•《实验室生物安全通用要求》（GB19489）•《生物武器公约》（BWC）•《生物安全实验室建筑技术规范》（GB50346）获取渠道国家卫健委官网、WHO官网、ISO官网、各机构生物安•《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》（WS233）全办公室附录四推荐阅读与学习资源权威手册与教材WHO《实验室生物安全手册》（第四版）生物安全领域的圣经,提供全面的技术指导和最佳实践,免费下载于WHO官网《实验室生物安全与生物安保》中国疾病预防控制中心编写,系统介绍中国生物安全管理体系CDC/NIH BMBL美国疾控中心发布的生物安全实验室操作手册,详细描述各种病原体的操作要求在线课程与培训CDC生物安全在线培训免费课程涵盖基础理论、实操技能、应急响应等,提供证书Coursera/edX生物安全课程约翰霍普金斯大学等名校开设的专业课程中国疾控中心培训平台面向国内实验室人员的中文培训资源WHO OpenWHO平台多语言在线学习课程,包括生物安全、应急准备等主题专业组织与网络美国生物安全协会（ABSA International）全球最大的生物安全专业组织,提供认证、会议、期刊等资源亚太生物安全协会（A-PBA）促进亚太地区生物安全交流与合作中国实验动物学会实验动物生物安全专业委员会国内生物安全领域的专业平台守护生命安全，共筑生物防线生物安全工作需要每一位实验室人员的共同努力让我们牢记使命，严守规范，用专业和责任心筑起保护人类健康和环境安全的坚固防线未来展望构建智能化生物安全实验室自动化监控系统物联网（IoT）技术实现实验室环境参数（温度、湿度、压差、空气质量）的实时监测和远程管理智能传感器网络自动报警异常情况,区块链技术确保数据不可篡改,为追溯和审计提供可靠依据自动化降低人为疏忽风险大数据与风险预测AI机器学习算法分析海量历史数据,识别事故模式和风险因素,预测潜在安全隐患AI视觉系统监控人员操作行为,识别违规操作并及时提醒预测性维护技术提前发现设备故障征兆,避免突发故障导致的安全事故持续提升人员素养虽然技术不断进步,但人始终是生物安全的核心持续教育培训、营造安全文化、鼓励报告和学习、关注员工身心健康,是实验室长期安全运行的根本保障技术是工具,人的安全意识和专业能力才是最终防线未来的生物安全实验室将是人机协同、智能高效、持续改进的综合体系,为人类健康和科学进步提供更加安全可靠的保障谢谢聆听！欢迎提问与交流感谢各位参加本次生物安全实验室培训生物安全是一项系统工程,需要我们在日常工作中不断学习、实践和改进如果您有任何疑问或希望分享您的经验,欢迎随时与我们交流讨论联系方式请联系您所在机构的生物安全办公室或培训负责人获取更多信息和支持请务必参加培训后的考核测评,合格后方可获得实验室准入资格祝各位工作顺利、安全！。