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实验室生物安全免费课件第一章生物安全基础与法规概述什么是实验室生物安全核心定义主要目标实验室生物安全是指通过一系列科学的管理措施和防护技术,保护实验预防实验室获得性感染事件的发生•人员、周边环境以及社会公众免受病原微生物和生物毒素等生物因子的防止病原微生物向环境的意外释放•危害,确保实验活动在可控和安全的条件下进行避免生物材料的不当使用和扩散•生物安全的重要性现实警示安全基石公共责任近年来全球范围内发生多起实验室感染事生物安全是科研与临床工作的基础保障,没故,造成人员伤亡和社会恐慌,凸显生物安有安全就没有科研成果,更谈不上社会效益全管理的紧迫性相关法律法规框架《中华人民共和国生物安全法》实验室生物安全手册GB19489-2008WHO年月日正式实施,是我国生物安《实验室生物安全通用要求》国家强制性第三版(中文版)是国际公认的权威指2021415全领域的基础性、综合性、系统性法律,标准,规定了不同生物安全等级实验室的南,提供了全面的生物安全操作规范和风明确了实验室生物安全管理的法律责任和技术要求、管理要求和人员防护要求险评估方法监管要求法规护航,安全先行完善的法律法规体系为实验室生物安全提供了制度保障和行动指南生物安全分级体系(二级)BSL-2(一级)BSL-1适用于对人体具有中等危害的病原体,如金黄色葡萄球菌、流感病毒适用于对健康成人无致病作用的微生物,如教学用的非病原性大肠杆等需要使用生物安全柜和个人防护装备菌基本防护即可,无需特殊隔离设备(四级)BSL-4(三级)BSL-3适用于高危险性、无有效治疗手段的病原体,如埃博拉病毒需要最适用于可通过气溶胶传播、致病性强的病原体,如结核分枝杆菌、高级别的物理隔离和全身正压防护服病毒等需要负压实验室和严格的进出管控SARS典型生物安全事故案例回顾年实验室感染事件年某高校实验室泄漏事件2004SARS2019中国某疾控中心和某医学院附属医院先后发生病毒实验室感染事某高校兽医研究所在布鲁氏菌疫苗生产过程中,因消毒灭菌不彻底导致SARS件,造成多人感染和数百人隔离观察调查发现主要原因包括含菌废气排放,造成多人感染布鲁氏菌病事故暴露的问题200实验室管理不规范生产设备老化失修••操作人员未严格遵守安全规程消毒程序执行不到位••生物安全柜未正确使用风险评估机制缺失••应急响应机制不完善监督检查流于形式••这些事故教训深刻,警示我们必须时刻保持警惕,严格遵守生物安全规范生物安全管理体系建设1建立安全责任制2成立生物安全委员会3完善监督机制实验室主任为第一责任人,明确各级人由多学科专家组成,负责审查实验方建立定期检查、随机抽查、专项督查相员的安全职责,层层落实责任,确保安案、评估生物安全风险、监督安全措施结合的监督体系,发现问题及时整改,全管理无死角落实、处理安全事故持续改进安全管理水平第二章实验室生物安全防护技术与设备掌握正确的防护技术和设备使用方法,是保障实验室生物安全的核心要素个人防护装备详解PPE防护服手套口罩与呼吸防护防护眼镜与面罩根据实验室等级选择相应防护服选择合适材质的手套(乳胶、丁根据气溶胶风险选择医用外科口防止飞溅物进入眼睛,选择密封性一次性实验服、连体防护服或全身腈、等)高风险操作建议双罩、口罩或动力送风过滤式呼好的护目镜或全面罩与口罩配合PVC N95正压防护服确保完全覆盖皮肤,层手套,注意及时更换,避免交叉吸器确保密合性良好使用,避免起雾影响视线PAPR定期检查破损污染穿戴顺序先穿防护服戴口罩戴护目镜戴手套脱卸顺序相反,避免污染→→→生物安全柜的类型与使用级生物安全柜级生物安全柜级生物安全柜I IIIII防护对象人员和环境防护对象人员、环境防护对象最高级别全面和样品防护特点开放式前窗,气流向内,排出空气经特点垂直层流,特点完全密闭,负压操HEPA70%过滤气流循环,排出,作,配备手套箱30%型A1/A2/B1/B2适用级实验室适用级实验室高BSL-1/2BSL-4低风险操作适用级实验危病原体BSL-2/3室,最常用类型正确操作要点使用前开启紫外灯消毒分钟,运行风机分钟•305-10操作区域只放必需物品,避免阻挡气流•动作缓慢轻柔,减少空气扰动•每次使用后清洁消毒,定期更换过滤器•HEPA实验室通风与空气净化系统新风系统负压控制引入经过初效、中效过滤的室外新鲜空气,保证实验室氧气供应和空气通过调节送风与排风量,使实验室气压低于外界,防止病原体外泄质量过滤排风处理HEPA高效颗粒空气过滤器可去除以上颗粒,是最后防线排出空气经过滤或其他灭活处理后方可排入大气,避免环境污染
99.97%
0.3μm HEPA负压实验室设计原理通过梯度负压设计,确保气流从清洁区半污染区污染区单向流动典型压差清洁走廊()缓冲间()实验室()生物安→→0Pa→-10Pa→-20Pa→全柜()-30Pa消毒与灭菌技术常用消毒剂种类与适用范围高压蒸汽灭菌规范温度121℃消毒剂有效成分适用范围压力
103.4kPa乙醇酒精皮肤、物体表面、小型75%时间分钟15-30器械适用耐高温高压的器械、培养基、污染废弃物注意装载量不超过,留出蒸汽循环空间含氯消毒剂次氯酸钠物体表面、地面、污水2/3处理验证使用生物指示剂验证灭菌效果过氧乙酸过氧化物空间消毒、器械消毒戊二醛醛类精密仪器、内镜消毒碘伏碘皮肤黏膜消毒选择消毒方法时要考虑病原体类型、物品材质、消毒对象等因素,必要时咨询专业人员实验室废弃物处理01源头分类按照废弃物类型分为感染性废物、损伤性废物、病理性废物、化学性废物、药物性废物等,使用不同颜色标识的专用容器收集02灭活处理病原体污染的废弃物必须先经高压蒸汽灭菌或化学消毒处理,确保病原体完全灭活后方可进入下一环节03包装转运使用双层包装,外层贴上生物危害标识和相关信息标签,按规定路线和时间转运至暂存点,避免泄漏和扩散04最终处置委托有资质的医疗废物处置单位,通过焚烧或其他安全方式进行最终处置,全程记录可追溯防止二次污染的关键废弃物容器应防渗漏、防锐器穿透、密闭性好;转运人员需佩戴防护装备;转运工具定期消毒;暂存点远离人员活动区域防护到位,安全无忧正确使用个人防护装备和生物安全设备,是每位实验室工作者的基本功第三章实验操作规范与应急管理规范的操作流程和完善的应急预案是预防事故发生和减少损失的关键实验室操作规程标准操作程序制定与执行病原微生物实验操作注意事项SOP标准操作程序是实验室质量管理的核心文件,应包括实验前详细阅读,准备好所需物品
1.SOP严禁在实验区域饮食、化妆、接触隐形眼镜
2.目的与适用范围明确的用途和适用条件SOP操作时集中注意力,禁止接听电话或闲聊
3.职责分工规定各岗位人员的具体职责尽量使用封闭式容器,减少气溶胶产生
4.操作步骤详细描述每个操作环节,配图说明移液时使用移液器,严禁口吸
5.注意事项列出关键控制点和常见错误针头等锐器使用后立即放入专用容器
6.应急处置说明异常情况的处理方法实验结束后彻底清洁工作台面和设备
7.记录要求明确需要记录的内容和格式离开实验室前脱下防护装备,洗手消毒
8.应定期审查更新,所有人员必须培训考核合格后方可上岗SOP样本采集与运输安全采集准备1评估样本生物安全风险等级,准备相应防护装备和采集工具,确保采样人员经过培训2安全采集严格执行无菌操作,防止交叉污染,采集后立即将样本放入密封容器,表面消毒规范包装3三层包装主容器(样本管)防水吸附材料二级包装(防漏→→容器)外包装(硬质材料)→4标识标签贴上生物危害标识、样本信息、收发单位、联系方式、日期等,确保可追溯安全运输5使用专用运输箱,保持适当温度,选择有资质的运输单位,填写运输文件,全程监控实验室人员培训与安全意识培养岗前培训定期培训专项培训新员工进入实验室前必须完成系统的生物安每季度或半年组织一次全员培训,更新法规针对新设备、新技术、新病原体开展专项培全培训,包括理论学习、操作演示、实践考知识、分享事故案例、强化安全意识,保持训,确保人员掌握最新的安全操作要求核,合格后方可独立工作警惕性案例教学模拟演练通过分析真实事故案例,让员工深刻理解违规操作的严重后果,从他定期组织泄漏、暴露、火灾等应急演练,提高员工的应急反应能力和人教训中汲取经验团队协作水平培养安全文化比传授知识更重要,让安全第一成为每个人的自觉行动实验室事故应急预案病原体泄漏人员暴露疑似感染立即停止操作,疏散无关人员立即脱离污染源自我隔离,避免接触他人
1.
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2.通知负责人,封锁现场
2.皮肤黏膜暴露流水冲洗15分钟
2.报告实验室负责人穿戴防护装备,用消毒剂覆盖污染区吸入暴露转移至新鲜空气处尽快就医,告知暴露史
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3.
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4.30分钟后清理,废弃物灭菌处理
4.摄入暴露漱口,催吐或洗胃
4.配合流行病学调查对污染区域进行终末消毒就医治疗,遵医嘱用药追踪密切接触者
5.
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5.填写事故报告,分析原因医学观察,定期检查按传染病管理规定上报
6.
6.
6.详细记录暴露经过总结教训,改进措施
7.
7.报告机制建立分级报告制度一般事故由实验室负责人处理并报所在单位;较大事故报当地卫生行政部门;重大事故立即报国家卫健委报告时限紧急事故2小时内,一般事故小时内24实验室安全文化建设安全优先团队协作安全始终是第一位的,任何实验成果都不能以牺安全是团队的共同责任,相互提醒,共同进步牲安全为代价学习成长持续改进持续学习新知识新技能,适应安全管理的新不断总结经验教训,优化管理措施,提升安要求全水平鼓励报告责任担当营造开放透明的氛围,鼓励报告隐患和差错,而每个人都是安全的守护者,勇于承担责任非惩罚安全文化的核心是将安全理念内化于心、外化于行,让每个人都成为安全文化的践行者和传播者未雨绸缪,防患未然定期开展应急演练,提升团队应对突发事件的能力和信心附录一常见病原微生物简介细菌基本特性单细胞原核生物,有细胞壁,可独立代谢和繁殖1代表性病原体结核分枝杆菌(引起肺结核)、炭疽芽孢杆菌(引起炭疽病)、鼠疫耶尔森菌(引起鼠疫)危害特点部分细菌产生内毒素和外毒素,致病性强;芽孢形式抵抗力极强病毒基本特性非细胞生物,需寄生于宿主细胞内复制,体外存活时间有限2代表性病原体埃博拉病毒、拉沙病毒、SARS冠状病毒、高致病性禽流感病毒H5N1危害特点传播速度快,致死率高,多数缺乏特效治疗药物真菌基本特性真核生物,有细胞壁,以孢子繁殖,部分形成菌丝3代表性病原体荚膜组织胞浆菌、粗球孢子菌(引起球孢子菌病)危害特点主要引起慢性感染,免疫低下者易感;孢子可通过空气传播附录二生物安全相关标准与参考书目权威书籍参考资源《实验室生物安全》叶冬青主编人民卫浙江省病原微生物实验室生物安全质量生出版社系统介绍生物安全理论与实践管理中心提供培训、技术指导、检查评估等服务《实验室生物安全手册》第三版中中国疾病预防控制中心发布生物安全技WHO文版世界卫生组织编国际通用的权威指术规范和指南南国家卫生健康委员会官网查询最新法规政策和标准《病原微生物实验室生物安全管理条中国生物安全学会学术交流和专业培训例》国务院令第号我国实验室生物424平台安全法规依据附录三实验室安全承诺与责任书范本实验室生物安全承诺书本人郑重承诺
1.认真学习并严格遵守《中华人民共和国生物安全法》等法律法规,以及实验室各项生物安全管理制度和操作规程
2.服从实验室安全管理,接受监督检查,参加安全培训和考核,不断提高安全意识和操作技能
3.规范开展实验活动,正确使用防护装备和安全设施,不违规操作,不冒险蛮干
4.发现安全隐患及时报告,发生安全事故如实汇报,不隐瞒、不拖延
5.对因本人违规操作导致的安全事故承担相应责任,愿意接受相应的处理本人深知实验室生物安全关系自身健康、同事安全和公众利益,将以高度的责任感履行安全义务,为维护实验室安全和公共卫生安全贡献力量承诺人签字___________日期___________责任落实与监督机制签署承诺书后,建立个人安全档案,记录培训、考核、违规等情况;定期组织安全承诺履行情况检查;对履行承诺好的给予表彰,对违反承诺的依规处理互动环节生物安全知识问答选择题示例BSL-2实验室中,以下哪项操作是不允许的?A.在生物安全柜内操作病原体B.佩戴N95口罩进行实验C.用嘴吸移液管D.实验结束后洗手消毒答案C生物安全柜的HEPA过滤器可以去除多少直径的颗粒?A.
0.1μmB.
0.3μmC.1μmD.10μm答案B(
99.97%以上)案例分析题情境某研究人员在BSL-2实验室进行细菌培养时,不慎将含菌培养皿打翻在工作台上,部分液体溅到手套和实验服上请问应如何处理?参考答案立即停止操作;用消毒剂(如75%乙醇或含氯消毒剂)覆盖污染区域;通知实验室负责人;在原地脱下污染的手套和实验服,放入生物危害废弃物袋;充分洗手消毒;等待30分钟后清理污染物,进行终末消毒;填写事故报告课程总结34100%三大章节四级防护零事故目标系统学习生物安全基础、防护技术、操作规范掌握BSL-1至BSL-4实验室的分级防护要求严格遵守规范,追求实验室安全零事故核心要点回顾生物安全是科研与公共健康的基石,没有安全就没有一切完善的法规体系和管理制度为实验室安全提供保障正确使用防护装备和安全设施是防护的第一道防线规范的操作流程和应急预案可有效预防和应对安全事故持续的培训和安全文化建设是长效机制的关键希望通过本课程的学习,各位能够牢固树立生物安全意识,熟练掌握安全操作技能,在今后的科研和临床工作中,始终把安全放在第一位,为自己、为团队、为社会负责致谢与联系方式诚挚感谢联系我们感谢您参加本次实验室生物安全培训课程!您的认真学习和积极参与是邮箱联系对生物安全工作最大的支持(课程咨询、技术支持)biosafety@example.com生物安全工作需要我们每个人的共同努力如果您在实际工作中遇到任何安全相关的问题,或对本课程有任何意见和建议,欢迎随时与我们联系交流安全管理部门让我们携手共进,为构建安全、规范、高效的实验室环境贡献力量!电话(应急事故报告、现场指导)010-12345678培训中心电话(培训报名、证书查询)010-87654321安全守护,科研无忧让我们共同践行生物安全理念,为科学研究保驾护航,为人类健康贡献力量!。
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