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实验室生物安全培训课件第一章什么是实验室生物安全核心定义主要目标实验室生物安全是指采取一系列管理措施和技术手段保护实验人员、周预防实验室工作人员感染,•边环境和社会公众免受生物危害因素的威胁和伤害防止病原体向环境泄漏•保护社区和公众健康安全它涵盖了从病原微生物的储存、操作到废弃物处置的全过程管理是现代•,生物实验室管理的核心内容生物安全的重要性全球事件警示公共卫生威胁国家安全战略近年来全球发生多起严重的实验室生物安全一旦发生病原体泄漏或实验室感染可能引生物安全已上升为国家安全的重要组成部分,,事故包括病原体泄漏、实验人员感染等事发区域性甚至全球性的公共卫生危机对社完善的实验室生物安全管理体系是国家生物,,件造成了人员伤亡和社会恐慌会经济造成巨大损失安全能力建设的基础,安全第一生命至,上生物安全等级简介BSL1-4中等风险BSL-2最低风险适用于对人体可能造成中等危害的病原体BSL-1适用于对健康成年人无已知致病风险的微生物常见病原体如沙门氏菌•基本微生物学操作技术需要生物安全柜••开放式实验台即可操作限制人员进入••标准实验室设施•最高风险BSL-4高风险适用于致命且无有效治疗手段的危险病原体BSL-3适用于可通过气溶胶传播的严重致病病原体埃博拉病毒、马尔堡病毒•结核杆菌、病毒等正压防护服系统•SARS•负压实验室设计•全套个人防护装备•典型生物安全事故回顾年美国炭疽泄漏2004CDC1美国疾病控制与预防中心实验室发生炭疽芽孢杆菌泄漏事故导,致多名工作人员暴露引发社会广泛关注事故原因包括操作规,程不当和安全意识薄弱年美国天花病毒发现22014FDA美国食品药品监督管理局在一个废弃储藏室发现遗忘的天花病毒样本暴露出生物样本管理的重大漏洞促使全球重新审视病原,,年全球实验室安全升级体库存管理制度20193多个国家的高等级生物安全实验室进行了全面的安全评估和升级改造建立了更加严格的准入制度、监控系统和应急预案显著,,提升了生物安全管理水平第二章实验室生物风险识别与评估病原微生物分类与危害细菌病毒危害特点可引起多种感染性疾病部分具有抗药性危害特点传播速度快部分致死率高:,:,结核杆菌通过空气传播埃博拉病毒致死率可达•:•:90%炭疽杆菌可形成芽孢全球大流行•:•SARS-CoV-2:鼠疫耶尔森菌高致病性慢性感染破坏免疫•:•HIV:,真菌寄生虫危害特点对免疫力低下者危害大危害特点生活史复杂诊断困难::,隐球菌可致中枢神经感染疟原虫引发疟疾•:•:曲霉菌引起肺部感染弓形虫影响胎儿发育•:•:组织胞浆菌系统性感染血吸虫慢性危害严重•:•:了解不同病原微生物的特性和危害是进行有效风险评估和防护的基础不同类型的病原体需要采取相应的防护措施和操作规范,实验室生物风险评估流程危险识别风险分析控制措施识别实验室中存在的所有生物危害因素包括病评估暴露途径、感染概率、危害后果等因素确制定针对性的防护措施、操作规程和应急预案,,原体种类、数量、活性状态等定风险等级案例某高校病原微生物实验室风险评估:某医学院微生物实验室开展结核杆菌研究项目前组织了全面的生物安全风险评估风险评估不是一次性工作而是需要定期回顾和更新的,:,动态过程识别风险源确定操作的结核杆菌为级病原体
1.:BSL-3分析暴露途径气溶胶吸入为主要风险
2.:评估现有防护检查负压系统、生物安全柜等设备
3.:制定改进措施增加个人防护装备、优化操作流程
4.:建立应急预案制定暴露后的处置流程
5.:生物安全风险因素设备因素人员因素安全设备老化、维护保养不当、功能失效操作人员经验不足、安全意识淡薄、违反操作规程环境因素实验室布局不合理、通风系统故障、分区不明确材料因素病原体保存不当、样本标识错误、废弃物处理不管理因素规范制度不完善、监督不到位、培训不充分生物安全事故往往是多种风险因素共同作用的结果只有系统识别并有效控制各类风险因素才能真正保障实验室生物安全,看不见的威胁病原微生物虽然肉眼不可见但其危害不容小觑,第三章实验室生物安全防护技术与操作规范个人防护装备详解PPE手套防护服口罩与面罩护目镜选择根据化学品种类选用丁腈、乳选择长袖实验服、一次性隔离衣或选择口罩或全面型呼吸选择防雾型护目镜或面屏:::N95/KN95:胶或手套防护服器使用防止飞溅物进入眼睛使用后PVC:,使用操作前检查完整性及时更换使用完全覆盖常服离开实验区前使用确保密合性定期更换不可重消毒清洁:,,:,:,,脱除后立即洗手脱除专区存放复使用一次性口罩,年新冠疫情中的使用典型案例2020PPE新冠疫情期间全球医疗机构和实验室面临巨大的生物安全挑战中国疾控中心病毒病所在处理大量新冠病毒样本时严格执行级防护标准要求所,,BSL-3,有人员穿戴完整的防护装备包括口罩、护目镜、防护服、双层手套和鞋套通过规范的使用该所在处理数万份样本过程中实现了零感染记录,N95PPE,,为疫情防控提供了重要的技术支撑实验室常用安全设备生物安全柜类型与使用高压灭菌器操作要点BSC级生物安全柜I保护操作者和环境不保护样品适用于低风险操作,,级生物安全柜II同时保护操作者、环境和样品最常用类型分为、、、四个亚型,,A1A2B1B2级生物安全柜III全密闭手套箱设计用于最高风险病原体操作,使用规范检查设备密封性和压力表:
1.正确放置待灭菌物品避免过载操作前开启紫外灯消毒分钟
2.,•30选择合适的灭菌程序通常分钟开启通风系统运行分钟
3.121℃,20•5-10等待压力完全释放后开启缓慢移动手臂避免扰乱气流
4.•,定期进行生物指示剂验证操作完成后消毒台面保持运行分钟
5.•,10实验室环境与布局要求010203清洁区半污染区污染区包括办公室、会议室、更衣室等非实验区域严禁包括准备室、缓冲间等辅助实验区域用于实验准核心实验操作区域所有涉及病原体的操作必须在,,,携带任何实验材料和防护用品进入备和穿戴防护装备此区域内进行通风系统与负压设计原则负压梯度控制空气处理系统清洁区为正压或常压排风需经过滤器过滤••HEPA半污染区为微负压新风与排风比例通常为••3:7污染区为负压换气次数为次小时为次小时••:BSL-26-12/,BSL-312-15/压差应保持在定期检测过滤器效率•10-15Pa•这种压力梯度确保空气从清洁区流向污染区防止病原体外泄,标准操作规程示范SOP病原体样本接收1检查样本包装完整性、标签信息准确性在生物安全柜内开启外包装记录,,样本信息并分配编号样本预处理2在内进行样本分装、稀释或灭活处理使用一次性耗材避免交叉污染BSC,,病原体培养与鉴定3接种培养基置于适宜温度培养定期观察生长情况进行生化鉴定或分子检,,,测样本储存4在冰箱或液氮罐中长期保存建立详细的库存管理系统定期盘点-80℃,,废弃物处置5将固体废物高压灭菌液体废物化学消毒或高温灭活统一收集后由专业机,,构处理关键提示所有操作必须严格遵循任何偏离标准流程的操作都必须经过风险评估和主管审批建立操作记录制度确保每个步骤可追溯:SOP,,实验室管理与安全文化建设5S整顿Seiton整理必需品定位放置标识清晰取用方便用后归位Seiri,,,区分必需品与非必需品清除不需要的物品保持实,,验室简洁清扫Seiso清除垃圾和污垢保持设备和环境清洁及时发现异,,常素养Shitsuke养成良好习惯严格遵守规章制度提升安全意识清洁,,Seiketsu将前制度化、规范化形成长效机制3S,案例分享某研究所推行成效:5S中国科学院某微生物研究所自年全面推行管理经过两年努力取得显著成效实验室物品摆放规范有序设备维护保养及时环境整洁度大幅提升更重要的是全体人20185S,:,,,员的安全意识和责任感明显增强违规操作现象基本杜绝该所连续三年实现安全事故零发生并在国家实验室安全检查中获得优秀评级,,规范操作,杜绝隐患整洁有序的实验环境是安全的重要保障第四章实验室生物安全应急处理与法规标准实验室生物安全事故应急预案123病原体泄漏应急处理职业暴露应急处理实验室感染应急处理立即停止操作撤离无关人员立即脱离污染源移至安全区域隔离可能感染人员限制活动•,•,•,保持泄漏区域封闭开启排风系统皮肤暴露用肥皂水冲洗分钟以上采集样本进行病原学检测•,•:15•穿戴适当防护装备后使用消毒剂处理眼睛暴露用生理盐水或清水冲洗根据病原体特性实施预防性治疗••:•从外围向中心覆盖消毒剂吸收后处理黏膜暴露大量清水冲洗追踪密切接触者必要时医学观察•,•:•,完成后进行环境监测确认无残留立即报告主管进行医学评估对污染区域进行终末消毒•,•,•应急演练的重要性定期组织应急演练是检验预案有效性的关键手段建议每季度至少开展一次桌面演练每半年进行一次实战演练演练应覆盖不同类型的事故场景并在,,演练后及时总结经验完善预案,职业暴露防护与医疗救治暴露后第一时间处理措施抗病毒药物与疫苗接种现场处理分钟0-5立即进行局部清洗消毒这是降低感染风险的黄金时间,报告评估分钟5-30向实验室负责人报告评估暴露风险等级决定是否需要医疗干预,,医学处置分钟小时30-2前往医疗机构由职业病医生评估必要时启动预防性治疗,,跟踪随访周个月2-6根据病原体潜伏期进行定期检测和医学观察预防性用药指征:高风险病原体暴露如、乙肝•HIV实验室废弃物管理与环境保护感染性废物损伤性废物包括培养物、菌种保存液、废弃标本等必须高压灭菌后装入黄色医疗废包括针头、刀片、玻璃器皿等装入专用利器盒不可挤压,,,物袋化学性废物一般废物包括废液、过期试剂等分类收集交由有资质的单位处置不含感染性物质的包装材料等可按照普通生活垃圾处理,,,绿色实验室建设理念现代实验室不仅要确保生物安全还应关注环境保护和可持续发展绿色实验室建设包括减少废弃物产生量、优先使用低毒低害试剂、提高资源利用效率、,:采用节能设备和技术、建立废弃物减量化和资源化利用机制通过这些措施可以在保障安全的同时减少实验室活动对环境的负面影响,,相关法律法规解读《中华人民共和国生物安全法》《实验室生物安全国家和地方配套管理规定GB19489-2008通用要求》施行时间年月日包括:2021415:适用范围各级各类生物安全实验室核心内容《病原微生物实验室生物安全管理条::•主要规定例》建立生物安全风险防控体制:•《人间传染的病原微生物名录》实验室分级标准和基本要求规范生物技术研究开发活动•••《高致病性病原微生物实验活动审批实验室设计、建造和验收规范加强病原微生物实验室管理•••管理办法》个人防护和操作规程要求明确法律责任和处罚措施••各省市实施细则和地方标准实验室管理和人员培训要求•该法是我国生物安全领域的基础性法律为•,形成了国家、部门、地方三级法规标准体实验室生物安全管理提供了法律依据这是我国实验室生物安全管理的核心技术系标准生物安全管理体系建设组织架构与职责分工培训与考核机制培训体系:1岗前培训新员工必须完成生物安全培训并考核合格后方可上岗:定期培训每年至少组织一次全员培训更新知识技能2:,专项培训针对新设备、新技术、新规定开展专项培训:3应急培训定期组织应急演练和案例学习:考核要求4:理论考试覆盖法规、标准、操作规程等5•:实操考核评估防护装备使用、应急处置等实际操作能力机构负责人•:1定期评估每年进行综合能力评估不合格者暂停实验操作•:,生物安全委员会培训记录和考核结果纳入个人档案作为岗位晋升和绩效评价的重要依据2,生物安全管理办公室3实验室负责人4全体实验室工作人员5建立自上而下的管理体系明确各层级职责确保生物安全工作有人抓、有人管,,案例分析某高校实验室违规操作引发感染事件:事件经过年某医科大学一名研究生在微生物实验室操作布鲁氏菌时未在生物安全柜内操2021,作也未佩戴口罩导致气溶胶吸入感染两周后出现发热、乏力等症状就医后确诊,,,为布鲁氏菌病事故原因剖析直接原因:操作人员严重违反操作规程•未使用必要的个人防护装备•生物安全意识极度淡薄•间接原因:改进措施与教训总结实验室日常监督管理不到位•整改措施导师对学生安全教育重视不够:•暂停相关实验室运行全面整改学校生物安全培训流于形式•,•重新组织全员生物安全培训和考核缺乏有效的违规行为惩戒机制••建立实验室准入制度未经培训考核不得进入•,加强日常巡查安装视频监控系统•,建立违规操作通报和问责制度•经验教训任何安全规程都不是摆设侥幸心理往往是事故的根源必须让每位实验:,人员深刻认识到遵守安全规程不仅是对自己负责更是对他人和社会负责,,警钟长鸣,安全无小事时刻保持警惕将安全意识融入每一个操作细节,实验室生物安全未来趋势智能化安全监控系统新型防护材料与技术国际合作与标准统一利用物联网、人工智能等技术实现实研发更轻便、更舒适、防护性能更强加强国际间的生物安全信息共享和技,验室环境参数、设备运行状态、人员的新一代防护装备如纳米材料防护服、术交流推动全球生物安全标准的协调,,行为的实时监测和智能预警通过大智能呼吸器等开发新型消毒灭菌技统一建立跨国实验室网络共同应对,数据分析识别潜在风险提前采取防范术提高处理效率和环保性能降低对环全球性生物安全挑战提升人类应对生,,,,措施从被动应对向主动预防转变境的影响物威胁的整体能力,随着生物技术的快速发展实验室生物安全管理也将不断创新升级我们需要拥抱新技术、新理念持续提升生物安全管理的科学化、智能化和国际化水,,平为生命科学研究提供更加坚实的安全保障,课程总结与学习目标回顾420+100%章节内容关键知识点安全意识系统学习了生物安全概述、风险识别评估、防护技掌握了分级、使用、安全设备操作、应急预树立了安全第
一、预防为主的职业理念认识到生BSL PPE,术规范、应急处理法规四大模块知识案等二十余个核心知识点物安全人人有责核心学习成果知识层面技能层面态度层面理解生物安全基本概念正确使用防护装备增强风险防范意识•••熟悉法律法规要求规范开展实验操作养成安全操作习惯•••掌握操作规范标准有效处置应急事件树立责任担当精神•••生物安全不是一次培训就能完全掌握的需要在日常工作中不断学习、实践和反思希望大家将今天学到的知识真正应用到实际工作中共同维护实验室生物安,,全谢谢聆听!安全守护生命共筑健康防线,1让我们携手努力将生物安全理念落实到每一个实验操作中为科学研究和公共健康保驾,,护航!。
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