生物安全实验室培训课件

生物安全实验室培训课件第一章什么是生物安全？生物安全定义核心重要性生物安全是指防止病原体和毒素意外暴露与释放的一系列原则、技术生物安全的根本目的是保护实验室工作人员免受生物危害，防止病原和实践措施它涵盖了从实验室设计、操作规程到应急处理的全方位体向外部环境扩散，确保公众健康和生态环境安全这是科研工作的安全体系底线和红线生物危害的类型与来源主要生物危害物实验室常见案例病原微生物细菌、真菌等可引发感染历史上曾发生多起实验室生物安全事的微生物故，包括布鲁氏菌感染、炭疽杆菌泄漏等这些案例警示我们，即使是常规操病毒从常见流感病毒到高致病性病毒作，如果忽视安全规范，也可能造成严重后果生物毒素细菌毒素、植物毒素等有毒物质重组基因工程操作中的潜在风险DNA全面防护是生物安全的第一道防线第二章生物安全等级划分根据操作病原体的危险程度和传播途径，国际上将生物安全实验室分为四个等级等级越高，防护要求越严格，实验室设计和运行成本也越高BSL-1基础级，低风险病原体BSL-2中等风险，需生物安全柜BSL-3高风险，严格呼吸防护BSL-4极高风险，最高防护等级与实验室特点BSL-1BSL-212基础级实验室基础防护实验室BSL-1BSL-2风险等级对健康成人危害最小的生物因子风险等级对人体有中等潜在危害的病原体典型病原体非致病性大肠杆菌、枯草芽孢杆菌典型病原体金黄色葡萄球菌、乙肝病毒、流感病毒防护要求标准微生物操作，可在开放台面进行实验，无需生物安全防护要求必须使用二级生物安全柜，操作可能产生气溶胶的实验，柜，实验室可不必与建筑其他部分隔离实验室需有自闭门，配备洗眼器和紧急淋浴设施人员要求接受基础微生物培训即可与实验室特点BSL-3BSL-4防护型实验室BSL-3风险等级可通过呼吸途径传播，能引起严重甚至致命疾病的病原体典型病原体结核分枝杆菌、病毒、鼠疫杆菌、炭疽杆菌SARS防护要求实验室必须与外界完全隔离，采用负压通风系统，空气经过滤HEPA后排放，所有操作必须在生物安全柜内进行，人员需穿戴全身防护服和呼吸防护装备人员要求必须接受严格专业培训，定期健康监测最高防护实验室BSL-4风险等级对人类致命且无有效治疗方法的危险病原体典型病原体埃博拉病毒、马尔堡病毒、拉萨热病毒等出血热病毒防护要求独立建筑或完全隔离区域，采用正压防护服或手套箱操作系统，双重过滤，所有物品需经高压灭菌后才能移出，配备独立的空气、水、电、HEPA废物处理系统实验室人类与最危险病原体较量的BSL-4战场第三章实验室布局与环境控制关键设计要素环境控制要求通风系统实验室应保持适当的换气次数，BSL-2实验室每小时换气6-12次，BSL-3及以上需更高频率01排风必须经HEPA过滤处理空气流向设计压力梯度各区域之间应维持5-10Pa的压差，确保空气从低危险区流向高危险区，防止污染空气逆流从清洁区向污染区单向流动02负压系统确保空气不向外泄漏03隔离区设置清洁区、半污染区、污染区分离04进出通道人员和物品分别通道，防止交叉实验室管理制度生物安全管理体系人员资质与培训建立完善的组织架构，设立生物安全委员会，明确各级责任人职责制定实验人员必须持证上岗，定期接受生物安全培训和考核新员工需完成岗生物安全手册，覆盖从风险评估、操作规程到应急预案的全流程管理文前培训，通过理论和实操考核后方可独立工作每年至少进行一次再培训件和应急演练物品管理规范废弃物处理流程建立病原微生物菌毒种库存管理制度，实行双人双锁管理所有高危病原体的使用需经审批，使用过程全程记录定期盘点库存，确保账物相符典型事故案例分析某高校实验室布鲁氏菌感染事件年，某高校兽医研究所在进行动物布鲁氏菌病疫苗研究时，因实验室管理不善、操作不规范，导致多名师生感染布鲁氏菌病2019事故原因教训总结使用过期消毒剂进行实验动物和废弃物处理任何环节的疏忽都可能酿成严重后果这起事件提醒我们•部分实验人员未接受系统生物安全培训•消毒剂等关键物资必须定期检查，确保在有效期内

1.实验室通风系统存在缺陷，未定期维护检测•培训不能流于形式，必须确保每位人员真正掌握安全操作技能

2.个人防护装备穿戴不规范，未严格执行标准操作流程•设施设备需要建立预防性维护计划

3.缺乏有效的监督检查机制•建立严格的监督检查制度，将生物安全责任落实到人

4.第四章实验操作规范与风险控制标准操作规程（）SOP标准操作规程是实验室生物安全的核心保障每项涉及生物危害的操作都应有详细的书面，经生物安全委员会审核批准后严格执行SOP样品采集样品运输样品处理使用合格的采样工具和容器，做好个人防护，采用认证的三层包装系统，一级密封容在生物安全柜内进行样品处理，最大限度减少UN避免交叉污染现场立即密封标记，记录采样器、二级防漏容器、三级外包装粘贴生物危气溶胶产生使用一次性耗材，避免针刺伤时间、地点和样品信息害标识，填写运输文件，选择有资质的运输公处理过程全程记录，剩余样品妥善保存或销司毁气溶胶防护措施气溶胶是实验室最隐蔽的危险离心、混匀、移液、接种等操作都可能产生气溶胶务必在生物安全柜内操作，使用密封离心管和旋盖，缓慢开启容器，静置后再操作生物安全柜的正确使用二级生物安全柜分类型前窗气流速度，循环，排出A1≥

0.4m/s70%30%型最常用，前窗气流速度，循环A2≥

0.5m/s70%型前窗气流速度，循环，排出B1≥

0.5m/s30%70%型外排，适用于挥发性化学品和放射性物质B2100%操作要点使用前提前分钟开启，检查气流报警和压力显示

1.15物品摆放不得阻挡前后进风格栅

2.手臂缓慢进出前窗操作口，避免扰乱气流

3.操作区域定期用酒精或其他消毒剂擦拭

4.70%每年进行现场检测认证，包括过滤器完整性、风速、气流模式等

5.HEPA个人防护装备（）穿戴规范PPE12防护服选择手套使用根据操作风险选择合适的防护服需穿工作服或隔离衣，选择丁腈或乳胶手套，确认无破损高风险操作建议双层手套手套BSL-2BSL-3需穿连体防护服，需穿正压防护服防护服应完全覆盖日常衣必须覆盖防护服袖口更换手套前后需进行手部消毒注意避免手套BSL-4物和暴露皮肤接触面部和清洁物品34口罩与护目镜穿脱顺序医用外科口罩适用于，或更高级别口罩用于及以上穿戴顺序手部消毒穿防护服戴口罩戴护目镜戴手套脱卸顺BSL-2N95BSL-3→→→→护目镜或面罩用于防止飞溅物接触眼睛和面部戴眼镜的人员应选择序（从最脏到最干净）脱外层手套脱护目镜脱防护服脱口罩→→→可覆盖眼镜的护目镜脱内层手套手部消毒脱卸过程避免接触污染面→→穿脱流程细节决定安全PPE正确的穿脱顺序能够最大限度避免自我污染每个步骤都有其科学依据，切不可图省事而简化流程脱卸环节尤其关键，因为此时防护装备外表面已被污染，稍有不慎就可能接触皮肤或黏膜第五章消毒灭菌与废弃物处理常用消毒剂及其适用范围消毒剂浓度适用范围作用时间乙醇皮肤、工作台面、小型器械表面分钟75%70-80%1-3次氯酸钠地面、墙面、污染物表面，病毒灭活分钟

0.1-

0.5%10-30过氧乙酸空间熏蒸、耐腐蚀物品表面分钟

0.2-

0.5%30-60过氧化氢生物安全柜消毒、小件物品浸泡分钟3-6%30季铵盐类按说明一般物体表面、非关键器械分钟10注意事项消毒剂必须现用现配，定期监测浓度不同消毒剂不可混用使用前清除有机物（如血液、体液）可提高消毒效果氯类消毒剂对金属有腐蚀性，使用后需清水擦拭实验室废弃物分类与处理流程实验室废弃物管理是生物安全的最后一道防线，必须确保所有感染性废物得到彻底灭活，防止病原体通过废弃物途径传播分类收集灭菌处理使用专用容器分类收集黄色袋装感染性废物，利器盒装针头和玻璃，化学固体废物采用℃、分钟高压蒸汽灭菌，或使用化学消毒剂浸泡液体废12130废液单独收集容器标注生物危害标识和日期物加入消毒剂静置后排放灭菌效果需定期进行生物指示剂验证暂存管理交接处置灭菌后的废物暂存于专用区域，与普通垃圾严格分开暂存时间不超过天，与有资质的医疗废物处置单位签订协议，按规定频次转运转运时填写《危2暂存区域保持通风、干燥，有防鼠防虫措施险废物转移联单》，记录废物种类、重量、去向，实现全程可追溯废弃物处理绝不能心存侥幸任何未经灭菌的感染性废物流入环境，都可能引发疫情传播，造成难以估量的社会危害第六章应急处理与事故报告实验室暴露事故应急流程皮肤暴露处理黏膜暴露处理立即行动脱去被污染的防护用品和衣物，用肥皂和流动清水冲洗污染部位15分钟以眼部暴露立即用生理盐水或清水从内眼角向外眼角冲洗至少15分钟不要揉眼睛上立即就医，告知医生暴露物质的种类后续处理用碘伏或75%酒精消毒，观察是否有伤口如有破损，轻轻挤压伤口周口腔暴露立即吐出污染物，用清水反复漱口如已吞咽，立即就医，带上暴露病原围，促使血液流出，再进行消毒包扎体的相关信息医学观察记录暴露时间、病原体类型，就医评估是否需要预防性用药或疫苗接种注意黏膜暴露风险高于完整皮肤，必须高度重视，及时启动医学观察和预防性治疗气溶胶吸入应对针刺伤应对发现情况如发生容器破损、离心管爆裂等导致气溶胶产生的事故，立即停止操作，即刻处理用肥皂水和流动清水冲洗伤口，从近心端向远心端挤压，促使血液流出，屏住呼吸，迅速离开污染区域不可用手直接挤压污染控制关闭生物安全柜或房间，启动紫外灯消毒至少1小时通知其他人员避免进消毒包扎用75%酒精或碘伏消毒，无菌敷料包扎保留致伤器具和相关信息，不要入该区域丢弃医学评估就医说明吸入病原体种类和浓度，评估感染风险，必要时进行预防性治疗后续处理立即报告，2小时内进行血清学基线检测，根据暴露病原体类型决定是否需和定期监测要预防性用药（如HIV、HBV等）实验室火灾及泄漏事故应对火灾应急处置病原体泄漏处置1第一时间报警1隔离污染区发现火情立即按下报警按钮或拨打，同时通知实验室负责人和立即疏散无关人员，封锁泄漏区域，在门口张贴警示标识关闭119安全管理部门通风系统防止污染扩散2灭火器使用2穿戴防护装备小型火灾可用灭火器扑救使用方法提、拔、握、压对准火专业人员穿戴全套防护装备后方可进入处置根据泄漏物特性选焰根部喷射，注意站在上风向电气火灾使用或干粉灭火择合适的防护等级，必要时使用呼吸器CO₂器，禁用水3清理消毒3紧急疏散用吸水材料覆盖泄漏物，倒入消毒剂浸泡分钟以上清理的废30火势无法控制时立即撤离，关闭房门防止火势蔓延疏散时低姿物作为感染性废物处理对污染表面反复消毒，环境采样检测确前行，用湿毛巾捂住口鼻，不要乘坐电梯认无残留事故报告与调查及时准确的事故报告是防止事态扩大、总结经验教训、完善管理制度的重要环节隐瞒或延误报告可能导致严重后果，甚至承担法律责任立即报告小时内24事故发生后，当事人应立即向实验室负责人和生物安全生物安全管理部门向上级主管部门报告，重大事故需向管理部门口头报告，简要说明事故经过、涉及人员和初卫生健康主管部门和疾控中心报告提交书面报告和初步影响步调查结果1234小时内天内27填写《实验室生物安全事故报告表》，详细记录事故时成立事故调查组，开展深入调查，确定事故性质、原因间、地点、原因、涉及病原体类型、暴露人员信息、已和责任制定整改措施和预防方案，向全员通报调查结采取的应急措施等果和经验教训责任追究根据事故严重程度和责任划分，对相关责任人进行处理直接责任人可能面临警告、记过、调离岗位等处分；管理责任人需承担相应管理责任；构成犯罪的，依法追究刑事责任第七章法规与标准解读相关法律法规《中华人民共和国生物安全法》实验室生物安全通用要求GB19489-2008实施时间年月日立法目的维护国家安全，防范和应对生标准性质国家强制性标准适用范围涉及病原微生物操作的各级实2021415物安全风险，保障人民生命健康验室核心要求主要内容实验室建筑与设施的设计和建造要求•建立生物安全风险监测预警体系•不同生物安全等级实验室的技术指标•规范病原微生物实验室生物安全管理•实验室设备配置与性能要求•加强人类遗传资源和生物资源安全管理•个人防护装备标准•防范生物恐怖与生物武器威胁•管理与操作规程要求•明确法律责任和处罚措施•配套标准《生物安全实验室建筑技术规范》规定了GB50346-2011重点条款第四章防范生物恐怖与生物武器威胁规定任何单位和个实验室建筑设计、施工、验收的详细技术要求人不得利用生物技术从事危害国家安全的活动国际生物安全标准美国标准实验室生物安全指导原CDC/NIH WHO则文件名称《微生物和生物医学实验室生物安全》（，第版）BMBL6文件名称《实验室生物安全手册》（第4版，）2020地位国际公认的实验室生物安全权威指南特点面向全球，特别关注资源有限地区的实验室生物安全主要内容主要内容生物安全等级划分标准（至•BSL-1BSL-）4生物安全风险评估方法•各等级实验室的详细设计要求•实验室生物安全管理体系建立•病原体操作的标准实践和特殊实践•运输和转移生物材料的国际规定•常见病原体的风险评估和防护建议•新发传染病的实验室应对•生物安全设备的选择和使用•生物安全培训计划设计•更新频率约每年修订一次，及时纳入10配套资源提供在线培训课程、评估WHO新的科学发现和技术进展工具和国际合作网络，帮助各国提升实验室生物安全能力筑牢生物安全防线守护生命健康责任意识规范操作持续学习生物安全是每位实验人员的神圣责任我们手中操严格遵守操作规程，不走捷径，不心存侥幸每一生物安全知识和技术不断发展，我们需要保持学习作的不仅是科研样品，更关系到自己、同事和公众个标准动作的背后，都是无数经验教训的总结态度，及时更新知识，掌握最新的防护技术和应急的生命安全处置方法让我们共同努力，将生物安全意识内化于心、外化于行，营造安全、规范、高效的实验环境只有守住生物安全底线，科研工作才能行稳致远，为人类健康和社会进步做出应有的贡献安全是一切工作的基础，生物安全无小事让我们携手共建安全实验室，为科学研究保驾护航！。