2020年生物安全培训课件PPT

年生物安全培训课件2020第一章生物安全概述什么是生物安全？科学管理体系风险评估与控制全流程防护生物安全是保护人员、环境和公众免受生物通过系统的风险评估和针对性的控制措施，从样本采集、运输、储存到实验操作和废弃危害的综合性科学管理体系，涵盖预防、控有效减少实验人员和环境对病原微生物的暴物处理，每个环节都需要严格遵守生物安全制和应急处理等多个环节露风险规范生物安全的重要性预防实验室感染保障科研顺利进行实验室相关感染（LAI）是生物安全管理良好的生物安全管理不仅保护人员安的首要关注点历史数据显示，缺乏适全，也是科研工作质量的重要保障规当防护的实验操作可能导致严重的职业范的操作流程能够确保实验结果的准确暴露事故通过建立完善的生物安全体性和可重复性，避免因污染或事故导致系，可以将感染风险降至最低的科研中断减少气溶胶传播风险维护实验数据的可靠性••防止针刺伤和皮肤暴露防止样本交叉污染••避免交叉污染确保设备正常运行••保护实验人员健康•生物安全相关法规与标准我国已建立了较为完善的生物安全法规体系，为实验室生物安全管理提供了明确的法律依据和技术标准所有从事病原微生物实验活动的单位和个人都必须严格遵守相关规定国家标准国际标准管理政策《实验室生物安全管理技术规范》CDC《微生物和生物医学实验室生物安全国家和地方生物安全管理政策（）手册》（）GB19489-2008BMBL该标准规定了实验室生物安全的基本要美国疾控中心发布的权威指南，详细描述求、防护设施、操作规程和管理措施，是了各级生物安全实验室的设计、设备、操我国生物安全管理的核心技术规范作规范和管理要求实验室生物安全等级体系生物安全等级（BSL）是根据病原体的危险性和实验操作风险制定的分级管理体系从BSL-1到BSL-4，防护要求逐级提高，确保不同风险等级的病原体在相应的安全条件下进行研究基础级BSL-1适用于对健康成人无致病风险的微生物，如大肠杆菌K-12等教学菌株基本防护级BSL-2适用于中等风险病原体，如金黄色葡萄球菌、流感病毒等常见致病菌高度防护级BSL-3适用于高风险病原体，如结核分枝杆菌、SARS冠状病毒等呼吸道传播病原最高防护级BSL-4第二章生物安全风险评估风险评估是生物安全管理的核心环节通过科学系统地评估病原体特性、传播途径和实验操作方式，我们可以识别潜在危险因素，制定针对性的防护措施，最大限度地降低生物安全风险风险评估的目的与内容危害识别暴露评估控制措施明确生物材料的危害性特征和可能的传播途分析实验操作过程中人员可能面临的暴露风根据风险评估结果制定相应的防护和应急措径，了解病原体的致病机制和感染剂量险，评估不同操作环节的危险等级施，确保实验安全可控风险评估的系统方法有效的风险评估需要综合考虑多个维度的因素首先要充分了解病原体的生物学特性，包括传染性、致病性、传播途径等；其次要分析实验操作的具体过程，识别可能产生气溶胶、飞溅等高风险环节；最后要考虑实验人员的技能水平和防护措施的有效性风险评估应当是一个动态持续的过程，需要定期回顾和更新当引入新的病原体、采用新的实验方法或发生安全事故后，都应及时重新评估风险并调整防护策略风险评估关键因素123病原体致病性传播途径操作方式评估病原体的毒力强度和最低感染剂量识别气溶胶、接触、消化道等传播方式分析离心、喷雾、培养等高风险操作病原体致病性与感染剂量不同病原体的致病性差异巨大例如，结核分枝杆菌仅需10个细菌即可引起感染，而某些肠道病原菌则需要数百万个菌体了解最低感染剂量对于制定适当的防护措施至关重要传播途径的深入分析气溶胶传播最危险的传播方式之一，在离心、振荡、移液等操作中容易产生，微小颗粒可在空气中长时间悬浮并被吸入直接接触传播通过皮肤破损处或粘膜接触感染性材料，针刺伤是最常见的暴露方式间接接触传播通过污染的工作表面、设备或个人物品传播，强调环境消毒的重要性消化道传播因误食或口对口移液导致，可通过规范操作流程完全避免高风险实验操作识别某些实验操作因其特性更容易产生气溶胶或导致暴露高速离心、超声破碎、剧烈振荡、喷雾接种等操作必须在生物安全柜内进行，并采取额外的防护措施风险分级与生物安全等级对应病原微生物根据其对个体和群体的危害程度被分为四个风险组，每个风险组对应相应的生物安全等级实验室这种分级管理确保了高风险病原体在更严格的控制条件下进行研究风险组风险组1→BSL-12→BSL-2对健康成人无致病性或致病性极低的生物因子对人或环境具有中等危害，传播风险有限•大肠杆菌K-12•金黄色葡萄球菌•枯草芽孢杆菌•流感病毒•啤酒酵母•腺病毒风险组风险组3→BSL-34→BSL-4通常引起严重疾病，可通过气溶胶传播引起严重疾病，易传播且无有效治疗•结核分枝杆菌•埃博拉病毒•SARS冠状病毒•马尔堡病毒•布鲁氏菌•拉沙热病毒案例埃博拉病毒属于风险组4病原体，致死率高达50-90%，目前无特效治疗药物，必须在BSL-4实验室进行操作实验人员需穿戴正压防护服，在多重物理屏障保护下进行研究工作第三章生物安全等级与实验室设计实验室的物理设计和工程控制是生物安全防护的基础不同生物安全等级的实验室在建筑布局、通风系统、防护设备等方面有着明确的技术要求，这些硬件设施为安全操作提供了可靠保障至实验室特点BSL-1BSL-40102基础实验室基础防护实验室BSL-1BSL-2基本微生物操作环境，无特殊防护要求，适用于教学和基础研究中等风险操作，配备生物安全柜和个人防护装备，限制人员进入0304高度防护实验室最高防护实验室BSL-3BSL-4高风险病原体研究，实施空气隔离和负压控制，严格出入管理最危险病原体操作，全封闭正压防护服系统，多重安全措施比较项目BSL-2BSL-3BSL-4生物安全柜II级A型或以上II级B型或III级III级安全柜空气压差无要求负压，最小-30Pa负压，最小-50Pa个人防护实验服、手套连体防护服、N95口罩正压防护服进入方式常规门双门互锁气闸室化学淋浴间排风处理可直接排放HEPA过滤后排放双HEPA过滤实验室布局与设施要求空气流向控制进出通道设计BSL-3及以上实验室必须建立定向气流系统，确保空气高等级生物安全实验室采用双门互锁或气闸室设计，确从清洁区流向污染区，最终经HEPA过滤器处理后排保任何时候只有一扇门处于开启状态，防止污染空气外放负压梯度的维持是防止病原微生物逃逸的关键技术泄措施•人员进入更衣→缓冲→气闸→实验区•走廊→缓冲间→实验室，逐级负压•人员离开化学淋浴→脱卸防护服→缓冲•实时监控压差和气流方向•物品传递双扉高压灭菌器•配备应急电源保障通风系统•紧急出口设置应急逃生通道•定期检测HEPA过滤器完整性废弃物处理设施生物安全实验室必须配备现场废弃物处理设施，所有感染性废弃物在离开实验室前必须经过有效的灭菌处理常用方法包括高压蒸汽灭菌、化学消毒和焚烧处理液体废弃物固体废弃物收集后添加消毒剂处理，或通过专用管道送至废水处分类收集于黄色生物危害袋中，双扉高压灭菌后按医理系统疗废物处置锐器废弃物立即置于防穿刺容器，灭菌后特殊处理，严禁挤压和实验室内部结构BSL-3BSL-4高等级生物安全实验室采用盒中盒设计理念，通过多层物理屏障和工程控制措施，实现病原微生物的安全防护图中展示了典型的BSL-3/4实验室布局，包括清洁区、缓冲区、实验区的分隔，以及空气处理系统、传递窗、双扉高压灭菌器等关键设施的配置过滤系统HEPA高效过滤器捕获

99.97%以上的

0.3微米颗粒，确保排出空气不含病原微生物密闭性设计实验室墙体、地面、天花板形成完全密闭的六面体，所有穿墙管道严格密封实时监控系统24小时监测压差、温湿度、气流速度等关键参数，异常时自动报警第四章实验室操作规范标准操作规程（）是实验室生物安全管理的基石通过规范每一个操作细节，可以SOP最大限度地降低人为失误导致的安全风险本章将详细介绍样本处理、个人防护和废弃物管理等核心操作规范标准操作规程（）SOP样本接收与登记样本处理与分装样本储存管理核对样本信息、检查包装完整性、记录接收时在生物安全柜内操作、使用适当的移液工具、分类保存、明确标识、定期检查、建立追溯体间和状态避免产生气溶胶系生物安全柜的正确使用实验室清洁与消毒规范生物安全柜是实验室最重要的防护设备之一，但只有正确使用才能发挥其保日常清洁和定期消毒是防止交叉污染的重要措施护作用每日清洁实验结束后用消毒剂擦拭台面和设备表面操作前准备提前10-15分钟开启安全柜，让气流稳定，用75%酒精消毒工每周消毒地面、墙壁、门把手等接触面的全面消毒作台面每月检查评估消毒效果，必要时调整消毒方案物品摆放清洁物品放左侧，污染物品放右侧，避免交叉污染事故处理发生泄漏后立即消毒，根据污染程度选择方法操作技巧缓慢移动，避免破坏气流，手臂进出时应垂直于前窗开口常用消毒剂包括75%酒精、含氯消毒剂、过氧化氢等，应根据不同病原体和操作后处理继续运行10分钟排除残余气溶胶，清洁消毒，紫外照射表面材质选择合适的消毒剂个人防护装备（）PPE个人防护装备是保护实验人员免受生物危害的最后一道防线正确选择、穿戴和脱卸PPE对于确保人员安全至关重要手套实验服口罩与呼吸器防护眼镜使用一次性乳胶或丁腈手套，高风险操BSL-2使用普通实验服，BSL-3需连体BSL-2佩戴外科口罩，BSL-3使用N95防止飞溅物进入眼睛，与面屏配合使用作时佩戴双层手套，及时更换破损手套防护服，BSL-4需正压防护服或更高级别呼吸器，确保密合性提供全面保护穿戴与脱卸顺序至关重要PPE穿戴顺序洗手→实验服→口罩→护目镜→手套（最外层最容易污染的最后戴）脱卸顺序手套→护目镜→实验服→口罩→洗手（最外层最容易污染的最先脱）脱卸时应避免触碰外表面，将污染面向内翻转BSL-3以上实验室需在化学淋浴间进行消毒后再脱卸防护装备实验室废弃物管理医疗废物分类标准实验室废弃物必须按照《医疗废物管理条例》进行分类收集和处置感染性废物（黄色）带有病原微生物的培养基、标本、器具等损伤性废物（黄色）针头、刀片、破碎玻璃等锐器化学性废物（棕色）有毒化学试剂、消毒剂等普通废物未接触感染性材料的纸张、包装等12第五章职业暴露与应急处理尽管采取了严格的防护措施，职业暴露事故仍然可能发生了解常见暴露类型、掌握应急处理流程、建立完善的应急预案，是将暴露风险降至最低、减少健康损害的关键常见职业暴露类型皮肤刺伤气溶胶吸入眼睛暴露针刺伤是最常见的暴露类型，约占所有暴露在生物安全柜外进行高风险操作、离心管破液体飞溅到眼睛或面部是危险的暴露方式，事故的40%玻璃破碎、金属器械划伤也较裂、移液器漏液等都可能产生气溶胶粘膜对病原体高度敏感为常见样本振荡或混匀时盖子脱落开启冻存管时液氮飞溅••注射器针头意外刺伤•高速离心时离心管破裂移液时压力释放导致喷溅••破碎玻璃器皿割伤•安全柜外操作感染性材料未佩戴护目镜进行高风险操作••手术刀片操作失误•典型案例年某科研机构实验室感染事件2009某研究人员在实验室处理布鲁氏菌样本时，因移液器故障导致菌液喷溅到面部虽然当时进行了冲洗，但因未及时启动预防性治疗，周后BSL-23该研究人员出现发热、乏力等症状，经诊断为布鲁氏菌病教训总结

①任何暴露都应立即报告并就医评估；

②设备使用前应检查状态；

③高风险操作必须佩戴面屏职业暴露应急流程立即现场处理针刺伤/皮肤暴露轻轻挤压伤口促使血液流出，用流动清水或肥皂水冲洗15分钟，75%酒精或碘伏消毒眼睛暴露立即用大量清水或生理盐水冲洗15分钟，冲洗时翻开眼睑确保彻底清洗口腔暴露用清水反复漱口，不要吞咽及时报告评估立即向实验室负责人和生物安全管理部门报告，填写《职业暴露报告表》，详细记录暴露时间、暴露源、暴露部位、暴露量等信息由专业医生进行风险评估，确定是否需要预防性治疗或接种疫苗后续监测支持根据暴露病原体的潜伏期进行健康监测，定期检测相关指标，出现症状及时就医提供心理咨询支持，帮助暴露人员缓解焦虑情绪暴露后预防（）的黄金时间PEP许多病原体的暴露后预防有时效性例如，HIV暴露后预防应在2小时内开始效果最佳，不应超过72小时；狂犬病毒暴露后应立即开始被动免疫和主动免疫因此，暴露后的快速响应至关重要实验室事故应急预案完善的应急预案是将事故损失降至最低的重要保障实验室应针对不同类型的事故制定详细的应急响应流程，并定期组织演练123感染性材料泄漏火灾事故生物安全柜故障小量泄漏（10ml）用吸收纸覆盖，倒上消立即启动火警警报，切断电源和气源，使用适停止操作，保持安全柜运行，不要移动其中的毒剂，静置30分钟后清理当的灭火器灭火，疏散人员到安全区域，关闭材料，通知维护人员检修，经检测合格后方可防火门阻止火势蔓延继续使用大量泄漏（10ml）疏散人员，封闭区域，通知生物安全负责人，由专业人员穿戴全套防护装备进行处理应急物资储备清单应急演练要求•个人防护装备N95口罩、防护服、防护面屏、厚橡胶手套•每年至少进行2次综合应急演练•消毒用品含氯消毒剂、75%酒精、过氧化氢、消毒喷雾器•新员工入职后1个月内参加演练•吸收材料吸收纸、吸收颗粒、生物危害袋•演练内容应涵盖各类可能的事故场景•急救用品急救箱、洗眼器、紧急淋浴装置•演练后进行总结评估，改进应急预案•工具设备扫帚、簸箕、镊子、标识牌•保留演练记录和改进措施文档第六章生物安全管理体系建设生物安全不仅是技术问题，更是系统的管理工程建立健全的生物安全管理体系，明确各级人员职责，完善管理制度和文件记录，持续改进和监督检查，是确保生物安全长效机制的基础机构职责与人员培训生物安全负责人日常管理和监督，审批实验方案，协调应急响应生物安全委员会（）IBC审核生物安全相关事项，制定管理政策，监督实施情况实验室主任落实安全措施，监督人员操作，维护设施设备支持人员清洁消毒维护，废物处理，设备保养研究人员遵守操作规程，参加培训考核，报告安全隐患定期培训与考核机制所有接触病原微生物的人员必须接受生物安全培训并通过考核后方可上岗培训体系应包括岗前培训（必修）在职培训（年度）•生物安全基础知识和法规•新技术、新规范的学习•实验室规章制度和操作规程•典型案例分析和经验交流•个人防护装备使用方法•应急演练和技能培训•应急响应和事故处理•年度考核和继续教育生物安全文件与记录管理完整规范的文件和记录是生物安全管理可追溯性的保障，也是应对检查和事故调查的重要依据实验室操作记录风险评估报告事故记录和整改实验项目登记表包括实验名称、病新项目启动前的生物安全风险评估职业暴露事件详细记录•••原体类型、风险等级、实验时间、操使用新病原体或新技术的专项评估设备故障和泄漏事故报告••作人员年度整体风险评估和改进建议事故原因分析和责任认定••样本接收和处理记录样本来源、数•评估结论和审批意见的归档整改措施实施和效果验证••量、储存位置、处理方式设备使用和维护记录生物安全柜、•高压灭菌器等关键设备的使用和校准记录培养物和菌毒种管理台账接收、传•代、储存、销毁的完整记录记录保存要求生物安全相关记录应至少保存年，涉及高危病原体的记录应永久保存记录应采用防篡改措施，关键数据建议电子化存储并定期备份5持续改进与监督检查内部审计机制实验室应建立自查自纠机制，定期开展生物安全内部审计•每季度进行一次全面自查•检查内容包括制度执行、设施运行、记录完整性•发现问题及时整改并跟踪验证•自查结果报送生物安全委员会月度检查年度评估实验室主任组织，检查日常操作规范、个人防护、废物处理等生物安全委员会开展，包括外部专家评审，形成改进计划1234季度审计外部检查生物安全负责人主持，全面评估管理体系运行情况配合卫生行政部门和认证机构的监督检查和资质评审事故调查与整改措施发生生物安全事故后，应立即启动调查程序事故报告24小时内向上级主管部门报告事故基本情况现场保护保护事故现场，收集相关证据和记录原因分析组织专家组进行根本原因分析，识别管理漏洞典型案例分析通过分析真实的生物安全事故案例，我们可以从中吸取教训，识别管理薄弱环节，完善防范措施以下案例具有典型性和代表性，对各级生物安全实验室都有重要的警示意义年某高校实验室生物安全事故回顾2019事故概况2019年12月，某高校兽医学院实验室发生布鲁氏菌感染事件，导致65名师生血清检测阳性调查发现，实验室在使用布鲁氏菌开展动物实验时，使用了过期的消毒剂对实验动物进行消毒，导致含菌气溶胶通过通风系统扩散到相邻实验室直接原因•使用过期失效的消毒剂进行实验动物消毒处理•未在生物安全柜内进行动物操作，产生大量含菌气溶胶•实验室通风系统设计不合理，气流组织混乱管理原因•实验室未按要求开展风险评估，风险等级判定错误•操作人员培训不到位，生物安全意识淡薄•消毒剂等关键物资管理混乱，未建立有效期管理制度•缺乏有效的监督检查机制，隐患长期存在改进措施防范建议技术改造重新设计实验室通风系统，确保单向气流和负压控制•动物实验必须在符合要求的动物生物安全实验室进行设备升级配备动物专用生物安全柜，所有动物操作必须在柜内进行•所有消毒剂、防护用品等关键物资要建立台账，定期检查有效期制度完善建立消毒剂等关键物资的采购、验收、使用、有效期管理制度•通风系统要定期检测维护，确保气流方向和压差符合要求培训强化全员参加生物安全再培训，考核不合格不得上岗•操作布鲁氏菌等高风险病原体必须在BSL-3实验室或动物BSL-3设施内进行监管加强建立专职生物安全管理岗位，开展常态化监督检查•加强新项目的事前风险评估，不能低估病原体的危险性结语筑牢生物安全防线，守护科研与健康生物安全是一项系统工程，需要全员参与、持之以恒通过本次培训我们深入学习了生物安全的基本知识、管理要求和操作规范希望每位学员都能,将所学知识应用到日常工作中，时刻保持警惕，严格遵守各项规章制度0100%24/7零事故目标全员培训全天候防护我们的目标是实现实验室生物安全零事故确保每一位实验室人员都接受规范培训生物安全防护措施全天候运行保障生物安全无小事，责任重于泰山让我们携手共建安全的科研环境，为人类健康和科学进步贡献力量谢谢感谢您的聆听欢迎提问持续学习安全第一如有任何疑问，欢迎随时提出交流讨论生物安全知识需要不断更新，请关注最新法规和技将生物安全意识融入日常工作的每一个细节术标准让我们共同努力，将学到的生物安全知识转化为实际行动，为构建安全、高效、规范的实验室环境而不懈奋斗！。